喉部肿瘤HPV感染与p53基因变异的研究

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ交杂技术检测了５６例喉癌和３５例喉乳头状瘤组织中ＨＰＶ１６／１８的ＤＮＡ及ｐ５３基因点突变。结果显示２４例喉部肿瘤组织ｐ５３基因点突变，３５例喉癌及２４例喉癌及２４例喉乳太瘤组织中检出了ＨＰＶ、ＤＮＡ。在１３例喉癌组织和３例喉乳头状瘤组织 同时检出Ｐ５３点突变和ＨＰＶ０ＤＮＡ。提示ＨＰＶ感染和Ｐ５３变异与喉部肿瘤发生有关，其内在联系有待深入研究。     

喉癌p53基因突变与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的探讨喉癌细胞ｐ５３基因突变与人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）感染的关系及其临床意义。方法应用星普旋转离心柱Ｂ溶液系统,结合聚合酶反应链多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）及ＤＮＡ序列分析（ＰＣＲ－ＤＮＡＳｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）,对３６例喉癌组织新鲜标本进行ＨＰＶ定型、相对定量及ｐ５３基因第４至第８外显子突变检测。结果３６例喉癌标本中有１３例发生基因点突变或转码突变,其中１０例为ＨＰＶ１６／１８感染者,且与细胞内病毒含量呈正相关。２４例晚期喉癌（临床Ⅲ－Ⅳ期）有颈淋巴结转移者突变检出率明显高于无转移者（Ｐ＜０．０５）。结论喉癌ｐ５３基因突变与ＨＰＶ１６／１８感染有关,晚期喉癌颈淋巴结转移与ｐ５３基因突变有关。     

p53蛋白表达与喉癌颈淋巴结转移关系的研究

ｐ５３蛋白表达与喉癌颈淋巴结转移关系的研究任重王琰关超（第一临床学院耳鼻咽喉科，沈阳１１０００１）关键词基因表达；喉肿瘤；淋巴转移；ｐ５３蛋白质ｐ５３基因是近年发现的肿瘤抑制基因。本研究应用免疫组化法检测声门上型喉癌ｐ５３蛋白的表达，以探讨ｐ５３蛋白...     

抑制人喉癌细胞生长的p53基因反转录病毒重组体的构建

野生型ｐ５３基因在细胞增殖与分化的调控过程中起着重要作用。已有研究表明，人喉癌中存在ｐ５３基因的结构异常或表达异常。本实验根据这一特点，设计出能整合在人喉癌细胞染色体上并适宜表达的野生型ｐ５３基因反转录病毒重组体Ｐｃ５３Ｎ２Ａ。通过体外实验证明，这一重组体能够以基因替代的方式，恢复ｐ５３基因的功能，抑制人喉癌细胞的生长。     

应用原位多聚酶链反应检测喉癌组织中p53基因

采用原位多聚酶链反应技术检测了５例喉癌石蜡组织切片中ｐ５３基因，结果在全部标本中９０％以上的癌细胞检测到ｐ５３基因，平均拷贝数为２．２４±０．２３。表明该技术可用于单拷贝基因研究，并对其改进和应用进行讨论。     

喉癌p53蛋白表达的临床意义

采用ＬＳＡＢ免疫组化法，以抗ｐ５３蛋白单克隆抗体ＤＯ－１检测４４例喉鳞癌ｐ５３蛋白表达情况。结果显示：２５例喉鳞癌中ｐ５３蛋白呈阳性表达，对照组１６例声带息肉全部呈阴性表达，在与临床指标的相关性分析中发现，ｐ５３蛋白表达与喉癌临床分型、分期及淋巴结转移不相关，而与肿瘤分化程度密切相关。结果表明，ｐ５３蛋白表达与喉癌性有关，可作为喉癌诊断和鉴别诊断的辅助依据，并对肿瘤恶性程度的评估及预后判定有一定价     

应用原位多聚酶链反应检测喉癌组织中p53基因

采用原位多聚酶链反应技术检测了５例喉癌石蜡组织切片中ｐ５３基因，结果在全部标本中９０％以上的癌细胞核检测到ｐ５３基因，平均拷贝数为２．２４±０．２３。表明该技术可用于单拷贝基因研究，并对其改进和应用进行讨论。     

喉癌p53蛋白表达的临床意义

采用ＬＳＡＢ免疫组化法，以抗ｐ５３蛋白单克隆抗体ＤＯ－１检测４４例喉鳞癌ｐ５３蛋白表达情况。结果显示：２５例（５６．９％）喉鳞癌中ｐ５３蛋白呈阳性表达，对照组１６例声带息肉全部呈阴性表达。在与临床指标的相关性分析中发现，ｐ５３蛋白表达与喉癌临床分型、分期及淋巴结转移不相关，而与肿瘤分化程度密切相关（Ｐ＜０．０１）。结果表明：ｐ５３蛋白表达与喉癌的发生有关，可作为喉癌诊断和鉴别诊断的辅助依据，并对肿瘤恶性程度的评估及预后判定有一定价值。     

喉癌p53蛋白表达研究

应用抗ｐ５３蛋白革克隆抗体及ＬＳＡＢ免疫织化染色法检测喉癌及声带息肉ｐ５３蛋白的表达。结果显示：２５／４４（５６．９％）喉癌组织呈阳性反应，１６例声带息肉全部呈阴性反应。ｐ５３蛋白表达与喉癌分型、分期及淋巴结转移不相关，而与肿瘤分化程度密切相关（Ｐ＜０．０１）。有吸烟史者ｐ５３蛋白阳性反应数明显高于无吸烟史者（Ｐ＜０．０５）。结果表明：肿瘤抑制基因ｐ５３突变在喉癌发生中可能是一种比较常见的基因改变，与喉癌恶性程度相关，吸烟可能诱发ｐ５３突变。     

喉鳞癌组织p53表达与细胞增殖活性的关系

为探讨喉上皮癌前病变及癌组织ｐ５３蛋白的表达与细胞增殖活性的关系,应用免疫组化对１１例喉上皮单纯性增生（ＳＨＥ）、３２例非典型性增生（ＡＨＥ）及４２例喉鳞癌（ＬＳＣＣ）进行研究。结果显示：３１．２５％及５２．３８％的ＡＨＥ及ＬＳＣＣ ｐ５３蛋白阳性表达;ｐ５３蛋白阳性的ＡＨＥ及ＬＳＣＣ,其细胞增殖活性均较阴性者高（Ｐ〈０．０５）。结果表明：ｐ５３基因的突变以及由此导致的细胞异常增殖与喉癌的发生有密     

抑癌基因WAF1在喉癌组织中的表达及意义

目的：探讨喉癌组织中抑癌基因（ＷＡＦ１）的表达及其意义。方法：采用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交法。结果：正常喉粘膜组织中有不同程度的ＷＡＦ１基因蛋白ｐ２１的表达。６４例中有４７例Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交出条带,阳性表达率为７３．４％。喉癌组织中ｐ２１也有表达,６４例中有３３例,表达率为５１．５％。喉癌ｐ２１阳性表达的３３例患者中１４例ｐ５３表达阴性,但ｐ２１无表达的３１例患者中仍有１３例患者ｐ５３表达阳性     

人喉癌中p53基因表达和人乳头状瘤病毒感染的初步研究

应用免疫组织化学和多聚酶链反应技术检测４２例喉和喉咽鳞癌，２５例癌旁组织ｐ５３蛋白的表达和１３例癌组织人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６／１８型ＤＮＡ。结果显示：５４．８％的癌组织和２０％的癌旁组织中ｐ５３蛋白呈阳性表达，２３．１％的高分化声带癌中检测到编码ＨＰＶ１６型Ｅ６蛋白的ＤＮＡ，表明ｐ５３蛋白的过度表达和人乳头状瘤病毒感染与喉癌的发生有关，二者起协同作用。     

人喉癌中p53基因表达和人乳头状瘤病毒感染的初步研究

应用免疫组织化学和多聚酶链反应技术检测４２例喉和喉咽鳞癌，２５例癌旁组织ｐ５３蛋白的表达和１３例癌组织人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６／１８型ＤＮＡ，结果显示：５４．８％的癌组织和２０％的癌旁组织中ｐ５３蛋白呈阳性表达，２３．１％的高分化声带癌中检测的编码ＨＰＶ１６型Ｅ６蛋白的ＤＮＡ，表明ｐ５３蛋白的过度表达和人乳头状瘤病毒感染与喉癌的发生有关，二者起协同作用。     

喉癌p53基因突变与人乳头状瘤病毒感染的关系

探讨喉癌细胞Ｐ５３基因突变与人乳头状瘤病毒感染的关系及其临床意义。方法应用星普旋转离心柱Ｂ溶液系统,结合聚合酶反应链多态性分析及ＤＮＡ序列分析,对３６例喉癌组织新鲜标本进行ＨＰＶ定型,相对定量及Ｐ５３基因第４于第８外显子突变检测。结果３６例喉癌标本中有１３例发生基因点突变或转码突变,其中１０例为ＨＰＶ１６／１８感染者,且与细胞内病毒含量呈正相关。２４例晚期喉癌有颈淋巴结转移者突变检出率明显高于无转     

p16与Rb基因在喉癌中的表达及其临床意义

目的：探讨抑癌基因ｐ１６和Ｒｂ在喉肿瘤中的表达及其相互关系。方法：用免疫组织化学方法观察４０例喉鳞状细胞癌ｐ１６和Ｒｂ基因的表达。结果：喉癌标本中ｐ１６和Ｒｂ阳性表达率分别为４２．５％和５７．５％,其中７例肿瘤组织（１７．５％）ｐ１６和Ｒｂ基因均阳性表达,未见同一肿瘤组织中两者均缺失。在喉癌的临床类型、分期及组织分化程度方面ｐ１６和Ｒｂ基因的阳性表达率差异有显著性（Ｐ〈０．０５）。结论：ｐ１６和Ｒ     

喉乳头状瘤p53过度表达及与HPV的关系

为探讨成人型喉乳头状瘤ｐ５３基因表达和ＨＰＶ １６／１８感染之间的关系,利用免疫组化及原位杂交技术,对３２例成人喉乳头状瘤标本进行了ｐ５３和ＨＰＶ检测。结果显示：ｐ５３和ＨＰＶ１６／１的阳性表达率分别为５３．１％和６２．５％。在随访中先后有４例发生了恶变。     

胃癌中p53基因杂合性丢失的研究

目的：了解ｐ５３基因杂合性丢失与胃癌发生、发展的关系。方法：应用位于１７ｐ１３区域的ｐ５３ｃＤＮＡ探针和ｐＹＮＺ２２ＶＮＴＲ探针，对胃癌及癌旁正常组织基因组ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交。结果：在２２例胃癌中，１２例正常组织被检出有杂合性，其中６例标本癌组织发生了杂合性丢失，检出率为５０％。结论：ｐ５３基因杂合性丢失是胃癌发生过程中一种常发事件     

人成骨肉瘤及骨纤维结构不良组织p53,p16及Rb表达的意义

目的：探讨人成骨肉瘤组织、成骨肉瘤细胞系（ＯＳ－９９０１）及骨纤维结构不良组织中突变型ｐ５３,ｐ１６及Ｒb基因的表达及意义。方法：采用免疫组织化学ＡＢＣ方法对６ ０例成骨肉瘤标本、一株成骨肉瘤细胞系及１４例骨纤维结构不良组织中ｐ５３,ｐ１６及Ｒb基因的表达进行检测。结果：ｐ５３,ｐ１６及Ｒｂ基因的表达进行检测。结果：ｐ５ ３,ｐ１６及Ｐb基因在上述两各组织中均一阳性率各异。在６０例骨肉瘤标本中的阳性表     

p53蛋白在喉癌中表达及其临床意义的研究

目的探讨ｐ５３蛋白在喉癌中的表达特征及其临床意义。方法采用抗ｐ５３蛋白的单克隆抗体，通过ＬＳＡＢ免疫组化技术，对７１例喉癌进行了研究。结果全组病例中喉癌组织ｐ５３蛋白阳性率为６４．８％（４６／７１），而声带小结表达率仅５．０％（１／２０），两者比较差异显著（Ｐ＜０．０５）。研究还发现，ｐ５３蛋白表达与喉癌，淋巴结转移有显著的相关性。结论采用免疫组化技术检测ｐ５３蛋白的异常表达，可作为临床选择治疗方案以及判断预后的有效手段之一。     

p^53cDNA突变和突变型p^53蛋白表达与大肠癌预后的关系

目的 探讨ｐ＾５３基因ｃＤＮＡ突变和突变型ｐ＾５３基因蛋白表达与大肠腺癌预后的关系。方法 ＲＴ－ＳＳＣＰ检测大肠腺癌组织ｐ＾５３基因ｃＤＮＡ突变，ＰＡｂ２４０单抗免疫组化检测腺癌组织突变型ｐ＾５３基因蛋白表达，比较两者与大肠腺癌预后的关系。结果 １００例大肠腺癌中，ｐ＾５３基因ｃＤＮＡ突变５１例（５１％），突变型ｐ５３基因蛋白高表达７６例（７６％），两者同步阳性４９例：ｐ＾５３基因ｃＤＮＡ突变与突