槲皮素对脑胶质瘤大鼠Akt和CREB表达的影响

目的探讨槲皮素对脑胶质瘤大鼠Akt和CREB表达的影响。方法雌性Wistar大鼠30只,随机分为3组,即假手术组、模型组和槲皮素治疗组,每组10只。建立大鼠C6胶质瘤模型,于接种后17 d处死各组大鼠,采用免疫组织化学法和Western blot法检测肿瘤组织Akt和CREB蛋白表达水平的变化。结果与假手术组相比,模型组大鼠脑组织Akt和CREB的蛋白表达的平均光密度值显著升高,P0.01;与模型组相比,槲皮素治疗组大鼠脑组织Akt和CREB的蛋白表达的平均光密度值显著降低,P0.01。结论槲皮素能够降低脑胶质瘤大鼠Akt和CREB的表达。     

槲皮素对脑胶质瘤大鼠Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨槲皮素对脑胶质瘤大鼠Bcl-2和Bax表达的影响。方法雌性Wistar大鼠30只,随机分为3组,即假手术组、模型组和槲皮素治疗组,每组10只。建立大鼠C6胶质瘤模型,于接种后17d处死各组大鼠,采用免疫组织化学法和Western blot法检测肿瘤组织Bcl-2和Bax蛋白表达水平的变化。结果与假手术组相比,模型组大鼠脑组织Bcl-2蛋白表达的平均光密度值显著升高,而Bax蛋白表达的平均光密度值显著降低(p0.01);与模型组相比,槲皮素治疗组大鼠脑组织Bcl-2的蛋白表达的平均光密度值显著降低,而Bax蛋白表达的平均光密度值显著升高(P0.01)。结论槲皮素能够降低脑胶质瘤大鼠Bcl-2的表达,上调Bax的表达。     

CO_2气腹对胎鼠脑超微结构和Caspase-3表达的影响

目的探讨CO2气腹对胎鼠脑组织结构及脑组织Caspase-3表达的影响。方法选择不同CO2气腹压力,建立孕鼠的CO2气腹模型,于鼠孕17 d的24 h内取胎鼠脑组织分别进行HE染色、免疫组化、电镜制片,观察胎鼠脑组织结构变化和胎鼠脑组织Caspase-3表达。结果透射电镜观察显示随气腹压力的增加,胎鼠脑组织可见细胞轻微可逆性损害。Caspase-3在实验组与对照组间胎鼠脑组织表达无明显变化（P〉0.05）,同时组间Caspase-3的表达也无显著性差异（P〉0.05）。结论 CO2气腹压力升高对胎鼠大脑细胞产生可逆性轻度损伤。     

急性暴露尼古丁对未成年大鼠脑内神经元Caspase-3表达及凋亡的影响

目的研究急性暴露尼古丁（nicotine）对未成年大鼠脑内神经细胞凋亡的影响。方法用免疫组织化学法和Westem blotting法检测急性暴露尼古丁的未成年模型大鼠脑内Caspase-3的表达;用原位末端标记法（TUNEL法）检测凋亡细胞。结果免疫组织化学法检测到大脑皮层、海马齿状回、CA2区和CA3区的Caspase-3表达在实验组明显增高。蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测到大脑皮层和海马Caspase-3原型及活性片段的表达在实验组明显增高。TUNEL法检测到大脑皮层和海马齿状回的阳性细胞在实验组明显增多。结论急性暴露尼古丁激活未成年大鼠脑内大脑皮层和海马内神经细胞Caspase-3,促进大脑皮层和海马齿状回的神经元凋亡。     

异甘草素对大鼠脑胶质瘤p53和VEGF表达的影响

目的观察异甘草素对大鼠脑胶质瘤组织p53和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨异甘草素抗胶质瘤作用机制。方法 36只清洁级Wistar雌性大鼠随机分为2组:假手术组(n=12)与模型组(n=24)。建立大鼠C6胶质瘤模型,第8天将模型组再细分为模型组与异甘草素组。异甘草素组腹腔注射异甘草素(500μg·kg-1·d-1),模型组腹腔注射等量生理盐水,连续给药一周后处死大鼠。免疫组织化学方法和Western blot方法检测肿瘤组织p53和VEGF蛋白表达水平的变化。结果免疫组织化学结果和Western blot结果显示,与假手术组相比,模型组与异甘草素组大鼠脑组织p53和VEGF的蛋白表达的平均光密度值显著增加,差异有统计学意义(P0.01)。两两比较,异甘草素组大鼠脑组织p53和VEGF的蛋白表达的平均光密度值显著低于模型组,差异有统计学意义(P0.01)。结论异甘草素能够降低脑胶质瘤大鼠p53和VEGF的表达,这可能是其治疗胶质瘤的作用机制之一。     

Caspase-3和Livin在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的:检测Caspase-3和Livin在人胶质瘤患者(观察组)、正常人(对照组)血清中的表达,以及不同病理分级的相关性。方法:采用双抗体夹心(ABC-ELISA)法检测54例人胶质瘤患者和32例正常人血清中Caspase-3、Livin的表达水平。结果:Caspase-3和Livin在人胶质瘤中的表达均高于正常人,差异有统计学意义(P<0.01),在低级别组与高级别组中的表达无统计学意义(P>0.05),Caspase-3和Livin在人胶质瘤中的表达呈负相关(r=-0.8326,P<0.0001)。结论:Caspase-3、Livin蛋白异常表达在人胶质瘤的发生、发展中起重要作用,且两者存在协同性。     

缓激肽对大鼠脑胶质瘤微血管中NF-κ B活性和表达的影响

目的 研究缓激肽(bradykinin,BK)对脑胶质瘤大鼠肿瘤微血管内皮细胞中转录因子核因子-κ B(nuclearfactor-kappaB,NF-κ B)的活性和表达的影响.方法 雌性Wistar大鼠96只,随机分为6组,即对照组、BK 5min组、BK 10min组、BK 15min组、BK 30min组和BK...     

异甘草素对大鼠脑胶质瘤ICAM-1和VCAM-1表达的影响

目的 观察异甘草素对大鼠脑胶质瘤组织细胞间黏附分子1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的影响,探讨异甘草素抗胶质瘤作用机制。方法 清洁级Wistar雌性大鼠,n=36只,随机分为:假手术组(n=12),C6胶质瘤模型组(n=12)与异甘草素组(n=12)。异甘草素组腹腔注射异甘草素,500μg/kg/d,模型组腹腔注射等量生理盐水,连续给药一周后处死大鼠。免疫组织化学方法和Western blot方法检测肿瘤组织ICAM-1和VCAM=1蛋白表达水平的变化。结果 免疫组织化学和Westem blot结果显示,与假手术组相比,模型组与异甘草素组大鼠脑组织ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达的平均光密度值显著增加(P0.01)。两两比较,异甘草素组大鼠脑组织ICAM-1和VCAM-1的蛋白表达的平均光密度值显著低于模型组(P0.01)。结论 异甘草素抑制胶质瘤的作用可能与降低脑胶质瘤大鼠ICAM-1和VCAM-1的表达相关。     

异甘草素对大鼠脑胶质瘤MCP-1和IL-17表达的影响

目的观察异甘草素对大鼠脑胶质瘤组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白介素-1(IL-17)表达的影响,探讨异甘草素抗胶质瘤作用机制。方法方法清洁级Wistar雌性大鼠,n=36只,随机分为3组:假手术组(n=12),模型组(n=12)与异甘草素组(n=12)。异甘草素组腹腔注射异甘草素(500μg/kg/d),模型组腹腔注射等量生理盐水,连续给药一周后处死大鼠。免疫组织化学和Western blot方法检测肿瘤组织MCP-1和IL-17蛋白表达水平的变化。应用CCK-8试剂盒检测异甘草素对人U87胶质瘤细胞增殖能力的影响。结果与假手术组相比,模型组与异甘草素组大鼠脑组织MCP-1和IL-17的蛋白表达的平均光密度值显著增加(P0.01),而异甘草素组显著低于模型组(P0.01)。与对照组相比,异甘草素显著抑制了人U87胶质瘤细胞增殖。结论异甘草素抑制人U87胶质瘤细胞增殖可能与降低脑胶质瘤大鼠MCP-1和IL-17的表达相关。     

Caspase-3在大鼠中枢神经系统的表达研究

目的研究caspase-3在大鼠中枢神经系统的表达及其意义。方法用western-blot方法对出生1天和3个月SD大鼠的大脑皮质、中脑和小脑组织的caspase-3进行半定量测定。结果出生1天大鼠脑的caspase-3表达较高,出生3个月大鼠脑的caspase-3表达较低。结论caspase-3在中枢神经系统的发育成熟过程中对神经元的凋亡起着关键性作用。     

LY-294002对大鼠急性脊髓损伤后Caspase-3表达的影响

目的研究LY-294002对急性脊髓损伤大鼠Caspase-3表达的变化。方法选取104只成年健康SD大鼠,按Nystrom法建立大鼠脊髓(T8～9)急性压迫损伤模型,按随机数字表法分为假手术组8只、损伤组48只、LY-294002组48只。免疫组化和Western blot方法检测各组大鼠脊髓损伤部位Caspase-3的表达。结果免疫组化结果发现假手术组大鼠脊髓神经细胞中Caspase-3阳性细胞较少;在脊髓损伤后8 h时,Caspase-3阳性细胞数明显增多,3 d达高峰,7 d表达开始减弱。在经LY-294002处理后的各时间点大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3阳性细胞明显少于相同时间点的脊髓损伤组大鼠。Western blot方法发现假手术组大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3的表达量很少,而在脊髓损伤后8h时,Caspase-3蛋白表达量明显增多,3 d达高峰,7 d表达开始减弱,在经LY-294002处理后的各时间点大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3蛋白表达则明显少于相同时间点的脊髓损伤组大鼠,与免疫组化结果一致。结论LY-294002能够下调急性脊髓损伤大鼠Caspase-3蛋白的表达。     

神经节苷脂对急性脊髓损伤大鼠Caspase-3表达的影响

目的研究单唾液酸神经节苷脂(GM1)对急性脊髓损伤大鼠Caspase-3表达的变化。方法选取72只成年健康SD大鼠,按Nystrom法建立大鼠脊髓损伤模型,按随机数字表法分为假手术组、脊髓损伤组和M1组,每组各24只,脊髓损伤组和GM1治疗组依据脊髓损伤后的不同时间点再细分为1、7和14 d三个亚组。伤后第1、7和14天分别用BBB评分和斜板试验观察大鼠运动功能的恢复情况。免疫组化方法和Western blot方法检测三组大鼠脊髓损伤部位Caspase-3的表达。结果术后7和14 d,GM1治疗组BBB评分和斜板试验明显优于脊髓损伤组,差异有统计学意义(P0.05)。免疫组化检测发现假手术组大鼠脊髓仅有少量Caspase-3阳性表达细胞;在脊髓损伤后1 d时,Caspase-3阳性细胞数明显增多,7 d表达开始减弱(P0.05)。与相同时间点的SCI组比较,GM1组大鼠脊髓损伤部位的Caspase-3阳性细胞明显减少(P0.05)。Western blot结果与免疫组化结果一致。结论下调Caspase-3蛋白的表达可能是GM1治疗急性脊髓损伤的机制之一。     

Caspase-3和Bax在放射性脊髓损伤大鼠的表达

目的观察大剂量分割放疗对大鼠脊髓损伤的影响及其凋亡基因的表达。方法6MeV电子线照射,每次照射剂量为5Gy,隔日1次,总照射剂量为40Gy。照射结束后20周,取脊髓组织行HE染色与透射电镜观察脊髓损伤的形态学变化,免疫组化检测凋亡基因caspase-3与bax在脊髓组织中的表达。结果HE染色见受照的脊髓白质内神经纤维排列松散紊乱,部分灰质出现细胞肿胀、破坏、炎细胞浸润,部分神经元尼氏体消失,神经胶质细胞固缩。透射电镜表现为髓鞘的板层结构水肿明显、膨大、粘连,模糊不清,细胞器空泡变性改变,神经胶质细胞有核固缩现象。免疫组化结果显示正常大鼠脊髓神经细胞中很少有凋亡基因caspase-3与bax的表达,放疗组脊髓损伤后caspase-3与bax表达的阳性细胞明显增加(P<0.05)。结论大剂量分割放疗可引起大鼠放射性脊髓损伤,且caspase-3与bax凋亡基因在脊髓损伤中呈过表达。     

槲皮素对脑胶质瘤C6细胞增殖的调控作用

目的观察槲皮素对胶质瘤C6细胞增殖的影响及其对脑胶质瘤大鼠脑组织DR5表达的影响,探讨槲皮素对脑胶质瘤C6细胞增殖的调控作用。方法将体外培养的脑胶质瘤C6细胞按照槲皮素浓度分成25、50、75及100μmo l/L 5个处理组和对照组(二甲亚砜),采用MTT比色法检测槲皮素对胶质瘤C6细胞增殖的影响,Western blotting法检测100μmo l/L处理24h后的细胞和对照组细胞死亡因子受体5(DR5)的蛋白表达。选取雌性Wistar大鼠30只,随机分为3组:假手术组、模型组和槲皮素治疗组,每组10只。建立大鼠C6胶质瘤模型,于接种后17d处死各组大鼠,采用免疫组织化学法和Western bloting法检测肿瘤组织DR5蛋白表达水平的变化。结果槲皮素药物浓度增加或作用时间的延长,均能显著增强对C6细胞的增殖抑制作用。100μmo l/L槲皮素处理24h后,C6细胞DR5表达显著升高,P0.01。在体研究时发现,槲皮素能够上调脑胶质瘤大鼠脑组织DR5蛋白表达的平均光密度值,P0.01。结论槲皮素对C6细胞增殖抑制作用具有浓度、时间依赖性,上调DR5表达可能是其作用机制之一。     

Caspase-9和caspase-3在创伤后应激障碍大鼠海马神经元的表达及意义

目的:探讨caspase-9和caspase-3在创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马神经元中的表达及意义.方法:采用国际认定的无连续单一应激(SPS)方法刺激大鼠建立PTSD大鼠模型,取SPS刺激后1、4、7、14、28 d组和正常对照组.应用免疫组织化学、免疫荧光双标、激光共聚焦显微镜技术和免疫印迹法检测caspase-9和caspase-3蛋白的表达.结果:与正常对照组相比,caspase-9活性于SPS刺激后1 d升高,SPS刺激后7 d再次上调并达到高峰,之后逐渐下降.Caspase-3活性于SPS刺激后7 d达到高峰,之后逐渐下降.结论:caspase-9和caspase-3共同参与了PTSD大鼠海马神经元凋亡的调控.     

益精养血方对帕金森病大鼠多巴胺能神经元Caspase-3表达的影响

目的研究益精养血方对帕金森病(Parkinson's disease,PD)大鼠多巴胺能神经元Caspase-3表达的影响。方法将微量6-羟多巴胺(6-OHDA)立体定向注射于SD大鼠中脑右侧黑质以建立大鼠帕金森病模型,将造模成功的实验动物随机分为模型组、实验(中药)组,每组6只;另纳入6只正常大鼠为正常组。正常组和模型组大鼠生理盐水灌胃,实验组大鼠益精养血方灌胃,各30天。灌胃结束两周后进行行为学检测,免疫组织化学方法观测黑质酪氨酸羟化酶(TH)、Caspase-3的表达。结果实验组大鼠的旋转圈数比治疗前明显减少(P<0.05),实验组损毁侧与健侧黑质TH阳性细胞数量百分比较模型组显著提高(P<0.05),实验组损毁侧黑质Caspase-3表达的OD值比模型组显著降低(P<0.05)。结论益精养血方可使帕金森病大鼠多巴胺能神经元Caspase-3的表达降低,明显抑制神经细胞凋亡。     

缓激肽对脑胶质瘤大鼠紧密连接影响的形态学观察

目的研究缓激肽(BK)对脑胶质瘤大鼠血肿瘤屏障紧密连接的影响。方法采用伊文氏兰(EB)法检测缓激肽作用后血肿瘤屏障(BTB)通透性的变化;应用透射电镜(TEM)观察BK作用后内皮细胞间紧密连接的变化,同时应用硝酸镧[La(NO3)3]和辣根过氧化物酶(HRP)作示踪剂,检测缓激肽作用后,小分子和大分子示踪剂通过紧密连接的情况。结果缓激肽可使血肿瘤屏障对伊文氏兰的通透性增加,在15min时达到高峰,以后逐渐下降。透射电镜显示缓激肽作用15min时,肿瘤组织毛细血管内皮细胞间紧密连接的完整性明显破坏,缝隙指数显著增加,同时可见硝酸镧和辣根过氧化物酶在紧密连接处沉积。结论缓激肽能够通过开放紧密连接选择性增加血肿瘤屏障的通透性。     

化疗对大鼠脑胶质瘤自由基清除作用的影响

目的:通过观察联合化疗对胶质瘤细胞的作用,分析肿瘤细胞和脑皮质的MDA含量及SOD活性,阐述自由基在联合化疗中对胶质瘤的抑制作用。方法: 利用体外C₆胶质瘤细胞培养,测定化疗前后C₆细胞上清中MDA含量和SOD活性的变化。测定化疗前后,瘤鼠脑皮质中MDA含量及SOD活性的变化。 结果: 化疗可使C₆胶质瘤细胞上清各组MDA含量均降低,其中以3种药物联合组(B+V+N)MDA含量降低最为显著;另外,SOD活性也降低,2种药物联合组(B+N,V+N)和3种药物联合组(B+V+N)均低于对照组。化疗使肿瘤鼠脑皮质各组MDA含量均降低;脑皮质各组SOD活性均升高,以B+V+D+N+A₂组最明显。联合化疗加压组(B+V+D+N+A₂)抑瘤率高于联合化疗不加压组(B+V+D+N)。联合化疗组肿瘤鼠生存期长于单独化疗组(B+N)。 结论: 化疗的抑瘤作用机制可通过抑制脂质过氧化反应,清除自由基来实现。     

癫痫大鼠海马神经元Fas、FasL和Caspase-3的表达

目的观察Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马神经元中的表达,探讨Fas、FasL和Caspase-3表达与癫痫的关系,为癫痫的生物治疗提供实验依据。方法通过腹腔注射戊四氮建立癫痫大鼠模型,用免疫组织化学方法和图像分析技术检测Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马神经元中的表达。结果 Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马神经元中的表达水平和阳性细胞数量与正常对照组相比均明显增多(<0.05)。结论 Fas、FasL和Caspase-3在癫痫大鼠海马过表达。     

Caspase-3在出生后大鼠海马中的表达

目的 探讨Wistar大鼠海马生后发育过程中,活化的Caspase-3与凋亡之间的关系. 方法 应用免疫荧光方法观测活化的Caspase-3和赫斯特荧光染料33342(Hoechst 33342)在生后不同时期大鼠海马CA1、CA3区和齿状回(DG)中的表达情况. 结果 在CA1区,活化的Caspase-3的表达在生后7d(P7)达到高峰;在CA3区,P2达到高峰,然后逐渐减弱.在DG,P7后又有所增强,到P14达到高峰,并在所观测的其余时段维持此水平.观测的3个区的凋亡细胞数目都在P7达到高峰,然后逐渐减少. 结论 在大鼠海马生后发育过程中,活化的Caspase-3的表达存在特定的时空格局.活化的Caspase-3在CA1区与CA3区有丝分裂后期细胞和DG神经前体细胞中的作用和机制不同.