益气活血方对肝纤维化大鼠JNK通路的作用研究

目的:研究c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号转导通路在CCl4诱导的肝纤维化大鼠模型中的表达,以阐明益气活血方抑制肝纤维化的分子机制.方法:27只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和益气活血方治疗组.模型组以30％CCl4橄榄油溶液腹腔注射诱导建立肝纤维化模型;益气活血方治疗组在CCl4建模的同时以益气活血方...     

益气活血化瘀方对代偿期肝硬化患者肝纤维化血清标志物的影响

目的探讨益气活血化瘀方对代偿期肝硬化患者肝纤维化血清标志物的影响。方法将代偿期肝硬化患者随机分成2组,中药治疗组予益气活血化瘀中药加常规治疗,对照组仅予常规治疗,疗程均为3个月,观察治疗前后肝纤维化血清标志物、肝功能(ALT、ALB)、凝血酶原时间(PT)、门静脉内径的变化。结果中药治疗组治疗后肝纤维化血清学指标较治疗前均明显降低,其中透明质酸、Ⅲ型前胶原肽下降幅度显著大于对照组;2组治疗后血清ALT、ALB水平及凝血酶原时间均明显改善,且中药治疗组改善情况优于对照组。结论益气活血化瘀方联合常规保肝治疗,能有效降低代偿期肝硬化患者的肝纤维化水平,改善肝功能及凝血功能,疗效优于单纯常规治疗。     

益气活血中药复方对实验性肝纤维化大鼠血液流变学的影响

应用四氯化碳损伤性大鼠肝纤维化模型，通过益气活血中药复方对血液流变学的影响，进而探讨其抗肝纤维化的药物作用机理。结果表明益气活血中药复方可明显降低血液粘度，促进改善血管血流量及肝脏血液供应，改善血液循环，从而发挥其抗肝纤维化的综合作用。     

酒精性肝纤维化大鼠肝星状细胞及肝细胞凋亡和清肝活血方调控机制研究

目的 观察酒精性肝纤维化大鼠肝星状细胞（HSC）、肝细胞凋亡及清肝活血方对不同细胞凋亡的影响。方法 将大鼠分为空白组,模型组,清肝活血低、中、高剂量组,易善复组,清肝活血方低剂量组[4．75g／（kg·d）]、中剂量组[14．25g／（kg·d）]、高剂量组[28．5g／（kg·d）]及易善复组[66．5mg／（kg·d）],分别予相应药物灌胃,空白组和模型组以等量生理盐水代替,给药2周。比色法检测血清ALT、AST、γ-GT,HE、Masson染色观察肝脏炎症和纤维化程度。TUNEL法检测肝细胞凋亡,TUNEL-α-SMA双标记法检测HSC凋亡。结果 清肝活血方能降低大鼠血清ALT、AST、γ-GT水平,减轻炎症及纤维化程度（P〈0．05）;诱导活化的HSC凋亡,减少肝细胞凋亡（P〈0．05）。结论 清肝活血方能有效减轻大鼠肝纤维化程度,并减少酒精引起的肝细胞凋亡,诱导活化的HSC凋亡。     

益气活血方药对大鼠肝星形细胞骨骼系统的影响

目的:研究益气活血方药对肝星形细胞(HSC)骨骼系统的影响。探讨 HSC 骨骼系统与其功能的关系。方法:采用 ABC 免疫组化染色方法结合图像分析对猪血清诱导的不同造模时间的大鼠肝纤维化模型以及益气活血药物预防给药和治疗给药的肝星形细胞 Desmin、神经胶质酸性蛋白(GFAP)和α-平滑肌肌动蛋白(α-Actin)进行研究。结果:构成细胞骨架的主要成分 Desmin、GFAP 和α-Actin 在肝纤维化的发生中均发生变化,其中α-Actin 改变尤为明显。而益气活血药物预防组和治疗组α-SMA 阳性细胞数量明显低于5周纤维化模型组。结论:益气活血方药对 HSC 的骨骼系统可以产生影响。     

益气活血法对慢性肝炎血清肝纤维化指标的影响

目的　探讨益气活血法对慢性肝炎血清肝纤维化指标的影响。方法　用益气活血法治疗慢性肝炎肝纤维化患者 45例 ,并设对照组 40例 ,疗程 3个月。治疗前后分别进行血清肝纤维化指标 (透明质酸、Ⅲ型前胶原及层黏蛋白 )检测。结果　血清肝纤维化指标明显下降 (P <0 .0 1) ,并且低于对照组。结论　益气活血法对慢性肝炎肝纤维化指标有显著影响     

扶正化瘀方对DMN肝纤维化模型鼠肝细胞凋亡的影响

探讨扶正化瘀方(主药:丹参、桃仁、蝙蝠蛾青霉菌、绞股蓝、松花粉、五味子)对DMN肝纤维化大鼠肝脏细胞凋亡的影响。Wistar雄性大鼠 60只,随机分造模组及正常对照组。其中 52只隔日腹腔注射 0 .5% DMN造模, 4周后随机分为模型对照组、扶正化瘀方组、秋水仙碱组,各组分别以自来水、3. 69g·100ml-1扶正化瘀方、0 .1%的秋水仙碱按 10ml·kg-1灌胃,每周 6次,共 4周;正常对照组 8只,前 4周腹腔注射生理盐水,后 4周用自来水灌胃。8周时处死动物取材,检测相关指标。结果:扶正化瘀方组大鼠死亡率、腹水发生率较模型组明显降低,肝功能好转;肝组织Hyp含量以及肝组织胶原分期下降,纤维化程度减轻;肝组织α- SMA表达明显降低,HSC凋亡增多,肝细胞凋亡减少,与模型组相比均有显著性差异。结论:促进活化HSC凋亡、抑制肝细胞凋亡是扶正化瘀治疗肝纤维化的机理之一。     

山芝麻对肝纤维化大鼠血清学指标的影响

目的 探讨山芝麻水提物(Helicteres angustifolia)对肝纤维化大鼠血清学指标的影响.方法 采用四氯化碳(CCl4)灌胃诱导大鼠肝纤维化模型,6周末检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)、透明质酸(HA)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的含量.结果 山芝麻各剂量组均可明显提高SOD活性,显著降低肝纤维化大鼠血清MDA、HyP、HA和TIMP-1含量(P<0.01或P<0.01),且随着药物浓度的增加,其作用逐渐增强,呈现量效反应关系.结论 山芝麻具有抗大鼠肝纤维化的作用.     

益气活血解毒方治疗慢性病毒性乙型肝炎肝纤维化的临床研究

目的:探讨慢性病毒性乙型肝炎肝纤维化行自拟益气活血解毒方治疗临床效果,为临床选择治疗方式提供参考。方法:将慢性病毒性乙型肝炎肝纤维化患者,按照数字表法分为对照组与治疗组各40例。对照组采用基础治疗,治疗组在对照组基础上联合益气活血解毒化痰的中药治疗,对比两组患者治疗前后中医证候积分、血清肝纤维化指标、肝功能指标、超声影像学指标。结果:治疗后治疗组LN、HA、Ⅳ-C分别为113.44±16.55μg/L、172.28±23.35μg/L、143.33±18.84μg/L,均明显优于对照组,对比差异有统计学意义(t=7.994,P=0.002;t=14.214,P=0.000;t=10.514,P=0.000);治疗后治疗组Alb、TBil、ALT、AST分别为43.94±5.61g/L、12.28±2.27μmol/L、64.06±8.11U/L、38.14±5.34U/L,均优于对照组,对比差异有统计学意义(t=5.247,P=0.015;t=6.347,P=0.008;t=6.137,P=0.009;t=4.995,P=0.018);治疗后治疗组中医证候积分为5.23±0.67,明显低于对照组,对比差异有统计学意义(t=6.664,P=0.007),治疗组与对照组门静脉直径、脾肿指数治疗前后组内对比差异有统计学意义(P0.05)。结论:益气活血解毒方可有效改善慢性病毒性乙型肝炎肝纤维化患者纤维化进展及临床症状。     

补肾化瘀方对大鼠实验性肝纤维化血清脂质过氧化物及肝纤维化指标的影响

目的：研究补肾化瘀方对大鼠实验性肝纤维化血清脂质过氧化物及肝纤维化指标的影响，探讨其防治肝纤维化的作用机制。方法：建立Wistar大鼠CCL．损伤性肝纤维化模型，随机分为模型组、预防组、治疗组。全部大鼠于第16周末处死。治疗结束时检测血清肝功能指标（ALT、AST、ALB、GLB、A／C）、血清SOD及MDA的含量、肝纤维化指标（HA、LN、PCIII，IV—C）。结果：经补肾化瘀方治疗后，用药组肝功能指标明显改善；血清SOD含量明显增加，MDA含量降低；HA、LN、PCⅢ、IV-C血清水平显著下降；肝细胞变性程度和纤维化程度明显减轻。与模型组比较差异具有显著性。部分指标疗效预防组优于治疗组。结论：补肾化瘀方能有效降低肝内脂质过氧化，保护肝细胞，改善肝脏功能，减轻肝纤维化。     

益气活血利水汤对肝纤维化模型大鼠Necdin-Wnt信号通路的影响

目的:观察益气活血利水汤对肝纤维化模型大鼠necdin-Wnt信号通路的影响,探讨益气活血利水汤抗肝纤维化的作用机制。方法:60只SD大鼠中随机抽取12只为正常组,造模成功的45只大鼠随机分为益气活血利水汤(9.6 g·kg~(-1))组(n=12),益气活血利水汤(14.4 g·kg~(-1))组(n=11),秋水仙碱组(Col组,n=11)和模型组(n=11)。正常组和模型组灌胃(ig)生理盐水,益气活血利水汤组ig益气活血利水汤9.6,14.4 g·kg~(-1)·d~(-1),Col组ig Col 0.1 mg·kg~(-1)·d~(-1)。10周后观察两组的血清透明质酸(hyaluronan acid,HA),层黏蛋白(laminin,LN),Ⅲ型前胶原(typeⅢprocollagen,PCⅢ),Ⅳ型胶原(typeⅣcollagen,CⅣ)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察其病理表现,Masson染色观察胶原蛋白变化,观察各组necdin,β-链蛋白(β-catenin),过氧化物增殖激活受体(PPARγ)蛋白和mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清HA,LN,PCⅢ,CⅣ水平,纤维化分期的标准(Metavir)评分,胶原纤维含量,necdin,β-catenin蛋白及mRNA表达显著升高(P0.01);与模型组比较,Col组HA,LN,PCⅢ,CⅣ水平,METAVIR评分,胶原纤维含量,necdin,β-catenin蛋白及mRNA表达显著降低(P0.01);与Col组比较,益气活血利水汤(9.6 g·kg~(-1))组HA,LN,PCⅢ,CⅣ水平,METAVIR评分,胶原纤维含量,necdin,β-catenin蛋白及mRNA表达显著降低(P0.01);与益气活血利水汤(9.6 g·kg~(-1))组比较,益气活血利水汤(14.4 g·kg~(-1))组HA,LN,PCⅢ,CⅣ水平,Metavir评分,胶原纤维含量,necdin,β-catenin蛋白及mRNA表达显著降低(P0.01)。与正常组比较,模型组PPARγ蛋白及mRNA表达显著降低(P0.01);与模型组比较,Col组PPARγ蛋白及mRNA表达显著升高(P0.01);与益气活血利水汤(9.6 g·kg~(-1))组比较,益气活血利水汤(14.4 g·kg~(-1))组PPARγ蛋白及mRNA表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论:益气活血利水汤可抑制necdin-Wnt/β-catenin通路的活性,解除Wnt/β-catenin对PPARγ的抑制,具有抗肝纤维化的效果。     

益气活血方对糖尿病大鼠p38MAPK通路的影响

目的:观察益气活血方对糖尿病大鼠基于p38丝裂原活化的蛋白激酶(p38MAPK)信号通路对血管内皮功能受损的综合调节作用机制。方法:采用高脂高糖饮食和应用链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病模型,将大鼠随机分成7组,分别为正常组,模型组,丹蛭降糖胶囊高、中、低剂量组(1.08,0.72,0.54 g·kg-1·d-1),盐酸吡格列酮胶囊组(10 mg·kg-1·d-1),丹蛭降糖胶囊+盐酸吡格列酮胶囊结合组(1.08 g·kg-1·d-1+10 mg·kg-1·d-1)。大鼠造模成功后分别按相应剂量药物ig给予,每日1次,连续8周,后腹主动脉采集血液样本和腹主动脉进行相关检测,蛋白质免疫印迹(Western blot)法测定p38MAPK,上游MAPK激酶3/6(mitogen activated protein kinase kinasse3/6,MKK3/6),下游核转录因子c AMP反应元件结合蛋白1(c AMP response element-bingding protein,CREB1)以及其丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)信号蛋白在内皮细胞的蛋白表达量;实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)方法测定单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),血管内皮细胞抵抗素在血管内皮中的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组p38MAPK,MKK3/6,CREB1蛋白及MCP-1,血管内皮细胞抵抗素mRNA表达水平明显升高(P0.01),MKP-1蛋白表达水平明显降低(P0.01);各给药组p38MAPK,MKK3/6,CREB1蛋白及MCP-1,血管内皮细胞抵抗素mRNA表达水平均明显降低,MKP-1蛋白表达水平均明显升高,与模型组大鼠比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:益气活血方通过调节糖尿病大鼠血管p38MAPK信号通路蛋白表达水平,从而达到降低血管内皮功能损伤的作用。     

鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化大鼠肝组织HGF表达的影响

目的:观察鳖甲煎丸对免疫性肝纤维化模型大鼠肝组织肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,分析鳖甲煎丸抗肝纤维化的治疗作用并探讨其作用机制.方法:雄性Wistar大鼠90只,随机分为6组:正常对照组、模型组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、鳖甲煎预防组、鳖甲煎治疗组,采用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型.各组于10周后随机取8只大鼠断头处死,取血清,检测血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C);取肝组织,免疫组化染色,用图像分析法检测HGF.结果:各预防组、治疗组血清HA,LN,PCⅢ,Ⅳ-C含量均明显降低(P＜0.01或P＜0.05),但以鳖甲煎预防组、治疗组降低最为明显;各预防组、治疗组大鼠肝脏组织HGF均有表达(P＜0.01或P＜0.05),鳖甲煎预防组、治疗组比秋水仙碱组的表达更为明显.结论:鳖甲煎丸能够抑制肝脏纤维化病理改变,增加HGF的表达,具有明显的抗肝纤维化作用.     

补肾益气活血方对胎儿生长受限孕鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响

目的观察补肾益气活血方对胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)孕鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响,探讨该方治疗FGR的机制。方法采用被动吸烟法建立大鼠FGR模型,将32只孕鼠随机分为正常组、模型组、中药组(采用补肾益气活血方治疗)、西药组(采用精氨酸治疗)。运用HE染色观察各组胎盘的组织学变化,TUNNEL法检测胎盘滋养细胞的凋亡及RT-PCR、免疫组化检测胎盘滋养细胞Bcl-2、Bax的表达。结果模型组胎盘绒毛出现血液淤积及缺血,中药可明显改善FGR胎盘绒毛的微循环,而西药组则部分改善。正常组、模型组、中药组、西药组的绒毛两层合体细胞凋亡指数中位数依次为45%、75%、57%、70%,正常组和中药组的凋亡指数均低于模型组(P0.01),西药组与模型组比较差异无统计学意义。各组胎盘Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达比较,差异均无统计学意义。结论补肾益气活血方可改善FGR胎盘微循环,防止FGR胎盘滋养细胞的过度凋亡,但其并非通过经典的Bax/Bcl-2凋亡途径起作用,其作用途径仍待探讨。     

益气活血方对气虚血瘀证大鼠血管内皮功能的影响

目的:探讨气虚血瘀证大鼠血管内皮细胞功能变化及益气活血方(YQHXF)对其的影响。方法:实验分为空白组,气虚血瘀组,YQHXF高、低剂量组(5. 54,2. 77 g·kg-1)。采用水环境小平台站立长期无规律、不完全的睡眠剥夺法,每天剥夺16 h,持续6周,制造大鼠神劳加体劳的双重消耗建立大鼠气虚血瘀证候模型,自第5周开始灌胃给药,连续给药2周至实验结束。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血浆中内皮素-1(ET-1),血管性血友病因子(v WF),血管细胞黏附分子-1(VCAM-1),细胞间黏附分子(ICAM-1),P选择素,白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)水平。结果:与空白组比较,气虚血瘀组大鼠呈现毛发粗糙晦暗,体质量、脉搏幅度显著降低(P 0. 01),舌面R,G,B值显著降低(P 0. 01),全血黏度高、中切值,血浆黏度均显著增高(P 0. 01),ET-1,v WF,VCAM-1,ICAM-1,P选择素,IL-6,TNF-α等血管内皮功能相关指标明显升高(P 0. 05,P 0. 01);与气虚血瘀组比较,YQHXF高、低剂量可显著升高气虚血瘀证大鼠脉搏幅度及舌面R,G,B值(P 0. 01),明显降低全血黏度高、中、低切值及血浆黏度(P 0. 05,P 0. 01),同时明显降低大鼠ET-1,IL-6,VCAM-1,P选择素水平(P 0. 05,P 0. 01)。结论:睡眠剥夺法可诱导大鼠气虚血瘀证形成,并可导致血管内皮功能失调。YQHXF具有保护血管内皮的功能,通过调节血管内皮活性物质分泌、减少细胞黏附、抑制炎症等途径改善气虚血瘀证大鼠气虚及血瘀症状。     

益气活血解毒方对球囊损伤后大鼠颈动脉早期血管重构和炎性因子的影响

目的:观察益气活血解毒方对血管损伤后血管重构指标及炎性因子的干预作用。方法:采用球囊导管损伤大鼠左侧颈总动脉模型,动物随机分为假手术组、模型组、他汀组和益气活血解毒组。用药后7天行HE染色,观察血管壁各层面积和管腔内径,放免法检测血清单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、C反应蛋白(CRP)以及转化生长因子-β(TGF-β)的浓度。结果:与假手术组比,模型组内膜轻度增生(P<0.01),外膜明显增厚,面积变大(P<0.05),MCP-1、CRP、TGF-β含量显著升高(P<0.01);与模型组比,益气活血解毒方明显减少内膜面积(P<0.05),降低CRP、TGF-β的含量(P<0.01);阿托伐他汀显著降低TGF-β的含量(P<0.05)。结论:球囊损伤大鼠颈总动脉早期,外膜增生明显,内膜有轻度增生,但管腔内径无显著变化,血管重构主要表现为正性重构,并伴随MCP-1、CRP、TGF-β含量的显著上升。益气活血解毒方抑制新生内膜生成,可能与降低CRP、TGF-β的含量有关。     

扶正活血不同组方对肝纤维化大鼠相关血清指标及肝组织羟脯氨酸的影响

目的 观察扶正活血不同组方对肝纤维化大鼠相关血清指标及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量的影响.方法 采用CCL加橄榄油复制肝纤维化大鼠,以扶正活血不同配伍组方(活血健脾益气方、活血滋养肝肾方、活血温补脾肾方)灌胃给药,检测肝纤维化大鼠相关血清指标及肝组织Hyp)含量.结果 与模型对照组比较,各扶正活血方对血清指标层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PⅢP)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)均有明显作用(P<0.01,P<0.05),其中活血健脾益气方、活血滋养肝肾方作用较强;活血健脾益气方、活血滋养肝肾方能明显降低Hyp含量(P<0.05).结论 扶正活血不同组方能改善肝纤维化大鼠相关血清指标,对肝组织Hyp含量也有不同程度的改善作用.     

二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化中医方证研究

目的：探讨二甲基亚硝胺（DMN）大鼠肝纤维化的中医方证。方法：腹腔注射法制备DMN大鼠肝纤维化模型，分别采用5首不同功效的经典方治疗两周，观察各组大鼠肝组织病理学、羟脯氨酸（Hyp）含量及肝功能变化。结果：造模4周后大鼠形成典型小结节性肝硬化，6周后模型组大鼠肝组织损伤较4周时有所缓解。与6周模型组相比，茵陈蒿汤组大鼠肝组织病理变化、Hyp含量及肝功能均显著改善（P〈0．05或P〈0．01）；黄芪汤组大鼠肝组织病理变化、Hyp古量亦显著改善（P〈0．05或P〈0．01）。结论：茵陈蒿汤、黄芪汤能够有效逆转DMN大鼠肝纤维化，成型期DMN肝纤维化大鼠的主要中医方证为湿热、瘀热内蕴兼气虚。     

温阳益气活血方对遗传性视网膜色素变性小鼠感光细胞凋亡的影响及机制研究

目的 观察中药温阳益气活血方对遗传性视网膜色素变性小鼠视网膜感光细胞凋亡的影响,并探寻其分子机制。方法 将RDS（retinal degeneration slow）小鼠随机分为模型组和中药组,并设C57BL/6J小鼠为正常对照组,每组4雌2雄。中药组自雌雄合笼之日起开始给予温阳益气活血方（10 mg/g）灌胃,仔鼠出生后母鼠给予中药水煎液代替日常饮水,仔鼠出生7天开始给予中药水煎剂小剂量灌胃,出生21天按成年鼠剂量灌胃。模型组和正常组同时给予生理盐水灌胃。3组均于仔鼠出生后18、28、48天时采用视网膜电图（electroretinogram,ERG）检测视网膜功能,进行HE染色并计算外核层感光细胞层数,TUNEL法检测感光细胞凋亡率,免疫组织化学染色法计算视紫红质（Rhodopsin）及碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）表达。结果 与模型组比较,仔鼠出生后18天时,中药组最大混合反应ERG（Max-ERG） a、b波振幅及bFGF表达明显升高（P<0.05, P<0.01）;28、48天时,中药组Max-ERG a、b波振幅明显升高,外核层感光细胞层数明显增加,视网膜感光细胞凋亡率明显降低,Rhodopsin及bFGF表达明显升高,差异均有统计学意义（P<0.05, P<0.01）。结论 温阳益气活血方可以有效抑制RDS小鼠感光细胞的凋亡,其机制可能与上调bFGF的表达有关。