异基因骨髓间充质干细胞移植对小鼠胶原性关节炎CD4＋CD25＋调节性T细胞表达的影响

目的：探讨异基因骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对小鼠胶原性关节炎 CD4＋、CD25＋调节性 T 细胞表达的影响。方法选取40只 C57BL/6（H-2b）小鼠,随机分为正常对照组、Ⅱ型胶原性关节炎（CIA）模型组、MSCs 移植治疗组、甲氨蝶呤治疗阳性对照组,每组10只小鼠。除正常对照组外,其余各组弗氏完全佐剂＋Ⅱ型胶原诱导小鼠建立 CIA 小鼠模型。分离骨髓单个核细胞后,进行 MSCs 细胞分选及鉴定。美国 BD 公司 FAcscal-iburTM 型流式细胞分析仪对小鼠骨髓 MSCs 进行分选和鉴定。 MSCs 移植采用尾静脉注射,所含细胞数为2×106。移植后第42天全部处死动物观察不同分组小鼠的关节症状及肿胀度,采用流式细胞术检测 CD4＋ CD25＋浓度,收集数据并做统计分析。结果 MSCs 移植治疗组小鼠关节的肿胀度,与正常对照组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。 MSCs 移植组 CD4＋ CD25＋调节性 T 细胞的表达,与甲氨蝶呤治疗阳性对照组比较,差异有统计学意义（P＜0．05）;与正常对照组比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 MSCs 移植治疗小鼠 CIA ,能显著改善关节的肿胀度,并明显上调 CD4＋ CD25＋表达,故 MSCs 可作为一种新的替代细胞来源用于类风湿性关节炎的移植治疗。     

静脉输注过氧化氢溶液上调小鼠脾脏和外周血CD4+Fox03+调节性T细胞

背景:现已证实,天然生成的调节性T细胞在维护机体免疫稳态、抑制炎性反应、抗移植排斥、抑制抗肿瘤免疫应答以及防治自身免疫病中都有重要的功能和作用.目的:探讨静脉输注过氧化氢对BALB/c小鼠CD4+CD25+Foxo3+调节性T细胞的影响.方法:取BALB/c小鼠12只,随机分为两组.H2O2处理组小鼠尾静脉注射含有H2O2的PBS;PBS组小鼠静脉注射无菌PBS.分别在注射2周后处死小鼠,采集小鼠外周血、脾脏和胸腺,采用流式细胞仪检测其中CD4+CD25+Foxp3+T细胞比例.结果与结论:H2O2处理组小鼠外周血和脾脏CD4+Foxp3+T细胞比例、CD4+Foxp3+/CD4+细胞比例均高于对照组小鼠(P<0.05).提示静脉注射H2O2能上调小鼠外周血和脾脏内CD4+Foxp3+调节性T细胞的比例.     

MSCs对辐射诱导小鼠胸腺瘤中T细胞CD4/CD8各亚群及各亚群中CD45比例变化的影响

目的观察MSCs对辐射诱导小鼠胸腺瘤中T细胞CD4/CD8各亚群及各亚群中CD45比例变化的影响,探讨MSCs对辐射诱发肿瘤的预防和治疗作用。方法应用Kaplan经典方法制备C57BL/6幼年鼠胸腺瘤模型[1],经小鼠尾静脉输注同系鼠MSCs,6个月后取胸腺组织,将胸腺细胞制成单细胞,标记CD4、CD8、CD45,流式细胞术分析T细胞亚群。结果流式细胞术分析结果显示：照射后CD4-CD8-亚群比例由正常组的（5.11±5.10）%降低到（0.01±0.01）%（P〈0.05）,MSCs治疗（0.61±0.39）%后有所恢复;MSCs治疗组（91.49±4.47）%中CD4＋CD8＋亚群比例与正常组（82.44±6.06）%接近,单纯照射组（99.09±0.49）%显著高于正常组（P〈0.05）;照射后CD4＋CD8-亚群由（7.72±3.37）%下降到（0.87±0.49）%,CD4-CD8＋亚群由（4.74±2.59）%下降到（0.02±0.01）%,MSCs治疗后CD4＋CD8-和CD4-CD8＋都有不同程度上调。正常组、单纯照射组、MSCs治疗组中CD45＋在CD4＋CD8＋中的比例分别为（86.09±2.24）%、（0.16±0.03）%、（97.35±3.23）%,差异有统计学意义（P〈0.05）;单纯照射组CD4-CD8-、CD4-CD8＋和CD4＋CD8-中CD45＋均有不同程度的降低,MSCs治疗组有不同程度升高,且具有统计学意义（P〈0.05）。结论 MSCs可使辐射诱导胸腺瘤模型组小鼠胸腺中T细胞CD4/CD8各亚群及各亚群中CD45比例增高或恢复,提示MSCs具有防治辐射诱发胸腺瘤的作用,并对辐射造成的胸腺损伤具有修复作用。     

人脐血间充质干细胞促进脐血CD34+细胞在NOD/SCID小鼠体内植入的实验研究

目的探讨人脐血间充质干细胞(MSC)联合人脐血CD34+细胞移植,能否促进CD34+细胞在NOD/SCID小鼠体内植入及加速其造血恢复.方法NOD/SCID小鼠于60Co 2.5 Gy照射后24h内由尾静脉输注胎儿脐血CD34+细胞1×105/只(低细胞量移植组)或1×106/只(高细胞量移植组),联合移植组同时输注脐血MSC 1×106/只.动态观察移植后小鼠外周血白细胞、血红蛋白和血小板恢复情况,于移植后第8周用流式细胞术检测存活小鼠骨髓中人CD45+、CD45+CD3+、CD45+CD19+和CD45+CD33+细胞的含量.结果①低细胞量移植时,联合移植组的植入率明显高于单纯移植组,分别为26.02%和16.52%(P＜0.05);高细胞量移植时,联合移植组和单纯移植组的植入率相近,分别为43.71%和39.23%(P＞0.05).②高细胞量联合移植组和单纯移植组的存活率分别为80%和70%;低细胞量联合移植组和单纯移植组的存活率分别为70%和50%.③无论高细胞量还是低细胞量组,联合移植小鼠白细胞、血红蛋白和血小板的恢复明显早于单纯移植组.④移植8周后,小鼠骨髓中人CD45+CD19+、CD45+CD33+细胞含量在低细胞量移植时,联合移植组高于单纯移植组;但在高细胞量移植时,两组之间差异无统计学意义.CD45+CD41a+细胞的含量无论在低细胞量和高细胞量移植时,联合移植组均高于单纯移植组.各组小鼠骨髓中CD45+CD3+细胞的含量均较少,且各组之间差异无统计学意义.结论①低细胞量移植时,人脐血MSC联合移植可提高人脐血CD34+细胞在小鼠体内的植入率.②人脐血MSC与人脐血CD34+细胞联合移植,加速NOD/SCID小鼠各系造血恢复,提高移植小鼠存活率.③MSC联合移植可促进人脐血CD34+细胞在NOD/SCID小鼠体内向粒系、B淋巴系和巨核系定向分化.     

静脉输注过氧化氢溶液上调小鼠脾脏和外周血CD4~＋Foxo3~＋调节性T细胞

背景：现已证实,天然生成的调节性T细胞在维护机体免疫稳态、抑制炎性反应、抗移植排斥、抑制抗肿瘤免疫应答以及防治自身免疫病中都有重要的功能和作用。目的：探讨静脉输注过氧化氢对BALB/c小鼠CD4＋CD25＋Foxo3＋调节性T细胞的影响。方法：取BALB/c小鼠12只,随机分为两组。H2O2处理组小鼠尾静脉注射含有H2O2的PBS;PBS组小鼠静脉注射无菌PBS。分别在注射2周后处死小鼠,采集小鼠外周血、脾脏和胸腺,采用流式细胞仪检测其中CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例。结果与结论：H2O2处理组小鼠外周血和脾脏CD4＋Foxp3＋T细胞比例、CD4＋Foxp3＋/CD4＋细胞比例均高于对照组小鼠（P〈0.05）。提示静脉注射H2O2能上调小鼠外周血和脾脏内CD4＋Foxp3＋调节性T细胞的比例。     

骨髓间充质干细胞在CD4+CD25+调节性T细胞减轻大鼠移植物抗宿主反应中的作用

本研究探讨间充质干细胞(MSC)对GVHD的作用及其机制.建立大鼠同种异体骨髓移植模型,同时输入供者的T淋巴细胞诱导出移植物抗宿主反应,联合或不联合移植供体来源的MSC,观察受鼠的GVHD的发生情况;利用双荧光标记抗体标记受鼠脾脏和胸腺单个淋巴细胞,通过流式细胞术分析CD4+CD25+调节性T细胞亚群比例的变化,分析MSC的作用机制.结果显示实验组的GVHD的发生程度减轻,存活率提高,而CD4/CD8比值在GVHD组出现不同程度的减少,CD4+CD25+调节性T细胞在实验组中的脾淋巴细胞和胸腺淋巴细胞的比例分别为31.55±7.58%、93.20±2.69%,在GVHD组中的比例分别为20.90±1.90%、57.17±6.79%,实验组中CD4+CD25+调节性T细胞比例比GVHD组中增多,具有显著性差异.结论MSC能有效抑制HSC移植后致死性GVHD的发生,提高生存率,同时MSC可能通过作用于体内调节性T淋巴细胞而间接发挥了抑制GVHD的作用.     

CD4~＋ CD25~＋细胞和CD8~＋ CD28~-调节性T细胞在原发性肝癌患者外周血中的水平变化

目的研究原发性肝癌（HCC）患者外周血中CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞的表达及意义。方法采用流式细胞仪测定93例HCC患者和24名健康人外周血中的CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞水平。结果 HCC患者外周血中的CD4＋ CD25＋细胞[（14.39±4.58）%]和CD8＋ CD28-调节性T细胞[（24.05±5.64）%]表达均显著高于对照组[（8.37±1.73）%、（15.93±4.84）%,P〈0.05];CD8＋CD28-调节性T细胞与HCC的分期呈正相关（r=0.463,P〈0.001）。结论 CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞在HCC患者外周血中呈高表达,且CD8＋ CD28-调节性T细胞与HCC的病情及预后相关。     

AIHA/Evans综合征CD80、CD86和CD4+CD25+调节性T细胞的研究

目的探讨自身免疫性溶血性贫血(AIHA)/Evans综合征(AIHA同时或相继发生免疫性血小板减少性紫癜)患者外周血淋巴细胞共刺激分子CD80、CD86和CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平,初步探讨共刺激分子CD80、CD86和CD4+CD25+调节性T细胞在AIHA/Evans综合征细胞免疫功能紊乱中的机制及其意义。方法应用流式细胞术检测24例次AIHA/Evans综合征患者治疗前后外周血淋巴细胞CD80、CD86和CD4+CD25+调节性T细胞比例的变化,并与正常对照组相比较。结果 AIHA/Evans综合征患者治疗前后与正常对照组比较CD80比例水平均无明显变化(P>0.05);发作时CD86表达水平高于对照组和治疗缓解组,差异具有统计学意义(P<0.05);CD4+CD25+调节性T细胞表达水平在AIHA/Evans综合征发作患者中表达明显下降,差异具有高度统计学意义(P<0.01)。结论淋巴细胞共刺激因子CD86和CD4+CD25+调节性T细胞异常表达可能参与AIHA/Evans综合征细胞免疫功能紊乱方面的发病机制。     

慢性丙型肝炎患者中CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞的表达及意义

目的：探讨 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞在慢性丙型肝炎（HCV）患者中的表达及其临床意义。方法收集 HCV 患者67例,并根据是否吸毒分为吸毒丙肝组35例和非吸毒丙肝组32例;健康体检人员32例作为对照。采用流式细胞仪检测患者外周血中 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞的表达;应用实时荧光定量 PCR 的方法检测其HCV RNA 含量。结果慢性 HCV 患者中的吸毒感染组与非吸毒感染组的外周血中 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞在 CD4+ T 细胞中所占比率分别为：3.84±1.95%、4.44±1.67%,明显低于对照组6.10±1.65%（ P <0.01）;而吸毒组与非吸毒组慢性 HCV 患者血液 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞的表达值相比差异无统计学意义;HCV 患者抗病毒治疗前血液 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞的表达值明显低于治疗后和正常对照组（ P <0.01）。结论 HCV 患者治疗前患者外周血 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞的表达值较正常对照组明显降低,而在治疗有效后升高,说明CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞参与了 HCV 患者的机体免疫过程,而 CD4+ CD25+ CD127-调节性 T 细胞在外周血中的表达水平可能成为监测 HCV 患者体内细胞免疫状态和机体抗病毒免疫应答的指标。     

颅脑损伤开颅手术患者颅内压变化与CD8+CD28-调节性T细胞的关系

目的 探讨颅脑损伤开颅手术患者颅内压变化与CD8+CD28-调节性T细胞（Treg）的关系。 方法 以56例颅脑损伤开颅手术患者作为观察组（A组）,以38例急性大面积脑梗死进行开颅去骨瓣减压的患者作为阳性对照（B组）,并以40例健康志愿者作为阴性对照（C组）;比较以上3组外周血及脑脊液内CD8+CD28-Treg及其细胞因子白介素10（IL-10）及转化生长因子β1（TGF-β1）的百分含量,并监测A组在不同时间点颅内压、CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1的变化,并分析其相关性。 结果 A组术前CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1均不同程度低于B及C组（P<0.05）,但B组与C组差异无统计学意义（P>0.05）。随着病情的推演,A组患者颅内压逐渐降至正常,而外周血及脑脊液内CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1均逐渐回升。相关性分析显示颅内压与CD8+CD28-Treg、IL-10及TGF-β1均呈显著负相关。 结论 CD8+CD28-Treg及其细胞因子降低是颅脑损伤的重要免疫学现象,且与颅内压升高存在密切关系。       

高压氧对外周血CD34+细胞计数的影响

目的探讨高压氧对外周血CD34+细胞绝对计数的影响。 方法观察8例长期接受高压氧治疗的神经系统损伤患者以及16例因神经系统损伤而接受高压氧治疗的患者，在高压氧治疗前、后外周血CD34+细胞绝对计数的变化情况。 结果16例神经系统损伤患者经过7次高压氧治疗，外周血CD34+细胞绝对计数由治疗前的（2.05±1.05）×106/L升至（5.10±4.86）×106/L，提高了2.49倍；而经过20次高压氧治疗，患者外周血CD34+细胞绝对计数达到（3.41±3.56）×106/L，提高了1.66倍。8例长期接受高压氧治疗的患者外周血CD34+细胞绝对计数与16例神经系统损伤患者未接受高压氧治疗前相比，差异无统计学意义。 结论多次高压氧治疗可动员外周造血干细胞，使CD34+细胞绝对计数升高；长期高压氧暴露不会使外周血CD34+细胞绝对计数保持在较高水平。     

成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者血糖变化对CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响

目的观察成人隐匿性自身免疫性糖尿病(LADA)患者不同血糖水平对CD4+CD25+调节性T细胞以及白细胞介素(IL-10)的影响。方法病程5年以内的LADA患者104例,根据患者糖化血红蛋白(Hb A1C)水平以及个人意愿分为四段胰岛素强化治疗组A组、B组和预混胰岛素治疗C、D组;于治疗前及治疗2w和4w后分别检测空腹血糖(FBG)、Hb A1C及空腹C肽;以流式细胞技术测定外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量;以双抗体夹心ELISA法检测IL-10水平。结果治疗前A、C组患者CD4+CD25+调节性T细胞以及IL-10略高于B、D组患者,但差异无统计学意义(P>0.05);胰岛素强化治疗2w后、四组患者胰岛细胞功能较治疗前好转、CD4+CD25+调节性T细胞及IL-10较治疗前升高,顺序依次为A>B>C>D;实验进行至第4w,A、B组患者胰岛细胞功能持续得到改进、CD4+CD25+调节性T细胞及IL-10进行性上升。结论 LADA患者经过胰岛素强化治疗后血糖达标可使其胰岛细胞功能较治疗前恢复;CD4+CD25+调节性T细胞以及其IL-10升高。     

类风湿关节炎继发肺间质病变患者激素冲击治疗前后 CD8+CD28-T 细胞的变化及意义

目的探讨类风湿关节炎（RA）继发肺间质病变（ILD）患者激素冲击治疗前后CD8+CD28-T细胞的变化与意义 方法共入选23例RA-ILD患者（A组）,选取同期就诊的RA患者25例（B组）、非RA致ILD患者25例（C组）、25例健康人（D组）作为对照。对以上具有甲泼尼龙冲击适应症的A组患者进行治疗,治疗前后采用流式细胞术检测上述4组外周血CD8+CD28-T细胞及其细胞因子白介素10（IL-10）和转化生长因子β1（TGF-β1）的百分含量变化。 结果与D组比较,A、B及C三组的CD8+CD28-T细胞、IL-10及TGF-β1均明显升高,含量由高至低均表现为A>C>B>D,且四组间任意两组上述三项指标均有统计学差异（P<0.05）。治疗后A组患者CD8+CD28-T细胞、IL-10及TGF-β1均较治疗前明显降（P<0.05）。 结论CD8+CD28-T细胞在类风湿关节炎继发肺间质病变发病过程可能起到重要作用,而甲泼尼龙可显著抑制该细胞活性,有望作为结缔组织病致肺间质病变的病情观察及疗效评价指标。      

术前CD8+CD28-T细胞含量在预测肾癌患者术后复发中的作用

目的探索术前CD8+CD28-调节性T细胞（Treg）含量在预测肾细胞癌（RCC）患者术后复发的效能。方法术前检测33例接受肾癌根治术的RCC患者外周血CD8+CD28-Treg含量,术后进行为期60个月的随访,观察CD8+CD28-Treg与复发的关系,并与术前中性粒/淋巴细胞比值（NLR）进行对照。结果共有9例患者出现复发,占27.27%,平均复发时间均数为术后24个月;复发患者的CD8+CD28-Treg及NLR数值均大于非复发组（P=0.034、0.041）。受试者工作曲线分析显示CD8+CD28-Treg及NLR均与RCC存在显著相关性,曲线下面积分别为0.819及0.703（P=0.004及0.021）,且当CD8+CD28-Treg为8.21%时,其预测复发的敏感度为92.6%,特异度为90.5%,显著高于NLR。结论术前CD8+CD28-Treg在预测RCC患者术后复发具有较理想的准确度,对于术前该细胞百分含量高于8.21%的患者需在术后2年内加强随访。      

阿奇霉素对支气管肺炎患儿CD8+CD28-抑制性抑制性T细胞的影响

目的探索阿奇霉素对支气管肺炎患儿CD8+CD28-抑制性T细胞的影响。方法收集66例支气管肺炎患儿作为观察对象,以同龄急性上呼吸道感染及健康儿童各66例作为对照,采集外周血运用流式细胞术检测以上3组CD8+CD28-抑制性T细胞及其细胞因子转化生长因子β1（TGF-β1）及白介素10（IL-10）的含量,并检测降钙素原(PCT)及MP免疫球蛋白M（MP-IgM）含量;将支气管肺炎患儿分为A组及B组各33例,分别使用阿奇霉素及红霉素进行治疗,比较两药对上述5项指标的差异,并分析其相关性。结果支气管肺炎患儿CD8+CD28-T细胞、TGF-β1、IL-10显著低于急性上感患儿及健康儿童组（P < 0.05）,而PCT及MP-IgM显著高于另外两组（P < 0.05）。治疗后A组CD8+CD28-T细胞、TGF-β1、IL-10均显著高于B组（P < 0.05）,且PCT及MP-IgM显著低于B组（P < 0.05）。相关性分析结果提示CD8+CD28-T细胞、TGF-β1、IL-10三者均与PCT及MP-IgM呈显著负相关性,其中CD8+CD28-T细胞及TGF-β1与MP-IgM的相关性最强。结论CD8+CD28-T细胞、TGF-β1及IL-10降低是MP阳性支气管肺炎患儿的重要免疫学特征,且与感染指标呈显著相关性;阿奇霉素对提高CD8+CD28-T细胞含量及下调感染指标的效果均优于红霉素。      

外周血中CD4~+CD25~+与CD8~+CD28~-调节性T细胞与Graves病的关系研究

目的分析Graves病(GD)患者外周血中CD4+CD25+和CD8+CD28-调节性T(Tr)细胞的变化。方法选择该院内分泌科门诊或住院部43例GD患者为研究对象,其中内分泌科门诊确诊的19例GD患者为试验初发组。接受治疗且甲状腺功能恢复正常的24例GD患者为治疗缓解组;选择同期健康体检者20例为健康对照组。采用流式细胞术检测3组外周血中CD4+CD25+和CD8+CD28-Tr细胞水平。结果试验初发组外周血CD4+CD25+Tr细胞水平为(4.56±4.14)%,明显低于健康对照组的(8.84±4.45)%,差异有统计学意义(P0.05),CD8+CD28-Tr细胞水平为(14.95±5.38)%,与健康对照组的(10.65±6.37)%比较,差异无统计学意义(P0.05)。治疗缓解组外周血中CD4+CD25+Tr细胞水平为(6.99±6.35)%,与健康对照组比较,差异无统计学意义(P0.05),但其CD8+CD28-Tr细胞水平为(20.48±6.07)%,高于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CD4+CD25+Tr细胞水平可能与GD发病有关,CD8+CD28-Tr细胞可能与GD病程发展有关。     

糖皮质激素对哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和TLR4表达的影响

目的探讨糖皮质激素对哮喘小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞（regulatory T cells,Tr）及Toll样受体4（TLR4）表达的影响。方法将雌性BALB/c小鼠30只按随机数字表法分成正常对照组（NS）、哮喘组（OVA）和哮喘糖皮质激素治疗组（OVA/GC）制备动物模型,每组10只。取小鼠左肺组织作病理切片观察炎症改变;同时应用流式细胞检测技术检测各组小鼠脾单个核细胞CD4＋CD25＋Tr占CD4＋T细胞的百分率及CD4＋CD25＋Tr上的TLR4平均荧光强度。结果哮喘小鼠脾单个核细胞CD4＋CD25＋Tr百分率明显降低（P〈0.01）,但该细胞上表达的TLR4平均荧光强度值与正常对照组差异无统计学意义（P〉0.05）;经糖皮质激素治疗后哮喘小鼠CD4＋CD25＋Tr百分率和该细胞上表达的TLR4平均荧光强度均明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论糖皮质激素可促进哮喘小鼠CD4＋CD25＋Tr数量的增加及TLR4的表达,可能是治疗哮喘的免疫学机制之一。     

哮喘患儿CD8+CD28+、CD8+CD28-T淋巴细胞检测及其临床意义

目的通过对哮喘患儿CD4、CD8和CD28的联合检测,探讨哮喘患儿淋巴细胞免疫功能状态及其临床意义.方法采用流式细胞术检测哮喘患儿外周血的总T细胞(CD3+)、辅助/诱导T淋巴细胞(CD4+)、抑制/细胞毒T淋巴细胞(CD8+)、细胞毒T细胞(CD8+CD28+)、抑制T细胞(CD8+CD28-).结果哮喘患儿组与对照组比较;CD3+、CD4+、CD8+CD28-细胞均低于对照组(P＜0.01,P＜0.05),CD8+CD28+细胞增高(P＜0.05),CD4+/CD8+比值、CD8+与对照组比较均无显著性差异(P＞0.05).结论哮喘患儿存在T淋巴细胞亚群免疫功能紊乱,而CD8+CD28+、CD8+CD28-T细胞失衡可能是导致机体免疫功能紊乱的主要因素.     

荷Hsp60sp的树突状细胞疫苗对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的控制作用和机制

目的:探讨荷Hsp60sp的树突状细胞疫苗(DC/sp)对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病的控制作用及其机制。方法:用MOG35-55肽段免疫C57/BL6小鼠,建立EAE动物模型后,用DC/sp免疫EAE小鼠,对照组注射PBS,每天观察小鼠临床症状;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中的细胞因子含量,3H掺入法检测MOG35-55特异性淋巴细胞增殖,流式细胞仪检测中枢神经系统中Th1和Th17细胞数量。结果:荷Hsp60sp的树突状细胞疫苗能显著减轻EAE发病,而抗CD8抗体可阻断DC/sp的这种作用;DC/sp免疫减少了EAE小鼠血清中IFN-γ(558 pg/mL降至187 pg/mL)(P     

1型糖尿病与脾脏CD4+CD25+调节性T细胞及相关基因Foxp3表达的关系

目的研究链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导糖尿病小鼠发病中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Tr)及相关基因Foxp3表达的变化,从而探讨CD4+CD25+Tr在自身免疫耐受中的作用.方法实验选用健康昆明小鼠60只,将60只小鼠随机分对照组(n=20)和模型组(n=40).模型组给与腹腔注射6 g/L STZ溶液,60 mg/(kg·d),连续5 d;对照组给予枸橼酸钠缓冲液0.2 mL/d腹腔注射,连续5 d.流式细胞仪检测脾脏CD4+和CD4+CD25+Tr细胞数量的变化,RT-PCR检测脾小鼠脾脏细胞中CD4+CD25+Tr细胞相关基因Foxp3 mRNA的表达.结果模型组血糖和抗胰岛素抗体水平明显高于对照组(t=0.023,P<0.05;t=0.018,P<0.05);模型组小鼠脾脏CD4+T细胞数量[(29.69±4.77)%]明显高于对照组[(19.60±11.42)%](f=0.014,P<0.05),模型组CD4+CD25+Tr/CD4+T比值低于对照组;Foxp3 mRNA水平模型组的表达普遍高于对照组.结论CD4+CD25+Tr细胞的相对降低,引起外周耐受状态的打破;在STZ破坏胰岛细胞,自身抗原存在的同时,导致了自身免疫糖尿病的发生.