不同砷化合物对血管内皮细胞毒性的研究

目的观察不同砷化合物对体外培养的牛主动脉血管内皮细胞(BAEC)的细胞毒性。方法培养的BAEC分别暴露于亚砷酸钠(NaAsO2,iAsⅢ0~50μmol/L)、砷酸钠(Na2HAsO4,iAsⅤ,0~10mmol/L)和甲基亚胂酸(CH3AsO,MMAⅢ,0~2μmol/L)24h,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞生存率;诱导性偶联质谱分光光度(ICP-MS)法测定细胞内总砷(tAs)含量。结果不同剂量范围内的iAsⅢi、AsⅤ和MMAⅢ均能够显著降低BAEC的细胞生存率(P<0.01),且具有剂量-效应关系;iAsⅢi、AsⅤ和MMAⅢ暴露24h的BAEC细胞的50%生存率(IC50)经计算分别为24.1μmol/L、155.9μmol/L和1.7μmol/L,对BAEC的细胞毒性从大到小依次为:MMAⅢ>iAsⅢ>iAsⅤ;相同暴露剂量和时间下,BAEC对MMAⅢ暴露的砷摄取速度明显高于iAsⅢ暴露(P<0.01)。结论无机砷甲基化的活性中间产物MMAⅢ对BAEC的细胞毒性要明显强于无机砷化合物。     

砷化合物致人表皮癌A431细胞的毒性及氧化应激和砷代谢研究

目的探讨不同砷化合物致人表皮癌细胞(A431)的细胞毒性及氧化应激和砷代谢的情况。方法培养的A431细胞分别暴露于0.05～50.0μmol/L一甲基亚胂酸(MMAⅢ),0.05～200.0μmol/L三氧化二砷(As2O3,As3+),0.5～500.0μmol/L砷酸氢二纳(As5+)和二甲基胂酸钠(DMAⅤ)24 h,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞生存率;检测砷化物对丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响;以流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS);以原子荧光分析方法检测细胞内外不同形态砷含量。结果在一定剂量范围的MMAⅢ(≥5.0μmol/L)、As2O(3≥200.0μmol/L)、砷酸氢二钠(0.5,≥200.0μmol/L)和二甲基胂酸钠(500.0μmol/L)能够显著降低A431的细胞生存率(P<0.05,P<0.01),而在低剂量时,四种砷化物能显著促进A431细胞增殖(P<0.05,P<0.01)。与对照组相比,50.0μmol/L MMAⅢ组,50.0、250.0μmol/LAs2O3组,0.5μmol/L砷酸氢二钠组MDA含量均显著升高(P<0.05,P<0.01),而250.0μmol/L砷酸氢二钠和5.0～250.0μmol/L二甲基胂酸钠组MDA含量均显著降低(P<0.05,P<0.01)。与对照组相比,0.5、50.0μmol/L MMAⅢ组,5.0～250.0μmol/L砷酸氢二钠组和0.5～500.0μmol/L二甲基胂酸钠组的SOD活力显著升高(P<0.05,P<0.01)。细胞内活性氧含量依次为0.5μmol/L MMAⅢ>50.0μmol/L As2O3>100.0μmol/L砷酸氢二钠>100.0μmol/L二甲基胂酸钠。低剂量As2O3、砷酸氢二钠组细胞内砷甲基化率高于高剂量组,且As2O3组甲基化率高于砷酸氢二钠。结论在本实验条件下,不同砷化物在低剂量促进A431细胞增殖,高剂量抑制增殖,可能与A431细胞的氧化应激和砷代谢有关。     

LC—AFS测定湖南14个地级市大米的4种形态砷

目的：建立液相色谱—原子荧光光谱法(LC-AFS)测定大米中的4中砷形态含量的方法,并以此方法检测湖南省14个地级市的43份大米样品。方法：样品经0.15 mol/L硝酸溶液在90℃热浸提2.5 h,然后离心过滤,流动相选用磷酸氢二钠与磷酸二氢钾混合溶液,试样溶液中各砷形态经Hamilton PRP-X100阴离子交换柱分离,然后经原子荧光检测定量。结果：As(Ⅲ)、DMA、MMA、As(Ⅴ)在5～100μg/L浓度范围内线性良好,相关系数为0.9993～0.9998,检出限为0.003～0.008mg/kg,回收率为85.0%～107.0%。湖南43份大米样品As(Ⅲ)检出率为100%,DMA检出率93.0%,MMA与As(Ⅴ)则均未检出,As(Ⅲ)含量为0.036～0.168 mg/kg, DMA含量为ND～0.040 mg/kg,无机砷总量为0.036～0.168 mg/kg。结论：该方法操作简单,灵敏度高,准确性好,适合大米中4中砷形态检测。从实际样品检测结果来看,湖南各地区大米样品主要含有As(Ⅲ)、DMA两种形态,无机砷含量均未超过国家标准限量,合格率为100%。     

基于秀丽线虫的5种重金属生物毒性评价

目的评估5种重金属对秀丽线虫的生物毒性效应。方法将L1期秀丽线虫暴露于氯化汞(汞浓度为0、2.5、5.0、10、20、40、50μmol/L)、氯化铅(铅浓度为0、50、75、100、125、150、200μmol/L)、氯化镉(镉浓度为0、300、400、500、600、700、1 000μmol/L)、重铬酸钠(铬浓度为0、50、75、100、200、300、400μmol/L)、砷酸钠(砷浓度为0、50、100、200、300、400、600μmol/L)溶液中,加入E.coli OP50悬液10μl,暴露48 h。采用半数致死浓度(LC_(50))比较5种重金属对线虫生物毒性效应。结果 Hg~(2+)、Pb~(2+)、Cr~(6+)、As~(5+)、Cd~(2+)对秀丽线虫的LC_(50)及其95%CI分别为17.83μmol/L(95%CI=16.15～19.52μmol/L)、124.34μmol/L(95%CI=120.72～127.63μmol/L)、231.79μmol/L(95%CI=186.99～276.68μmol/L)、305.83μmol/L(95%CI=226.17～380.88μmol/L)、558.30μmol/L(95%CI=498.99～609.01μmol/L)。采用评估因子法获得Hg~(2+)、Cr~(6+)、As~(5+)、Pb~(2+)、Cd~(2+)的预测无效应浓度(PNEC)分别为3.60、12.06、22.95、25.67、62.50μg/L。结论 5种重金属对线虫的生物毒性效应依次为Hg~(2+)Pb~(2+)Cr~(6+)As~(5+)Cd~(2+)。     

液相色谱-原子荧光联用法测定全血中砷形态化合物

采用液相色谱-原子荧光联用法测定全血中亚砷酸盐(As^Ⅲ)、二甲基砷酸(DMA)、一甲基砷酸(MMA)和砷酸盐(As^Ⅴ)。萃取后的上清液经阴离子交换色谱柱分离，原子荧光检测定量。四种砷形态化合物的线性范围为0～500μg/L,检出限为10.0μg/L,低、中、高三个浓度加标样品平均回收率为78.4%～105.0%,相对标准偏差(RSD)为3.20%～9.12%。本文所建立的全血中四种砷形态化合物的检测方法简单、灵敏、准确，可应用于实际接触人群中砷形态化合物的检测。     

HPLC-ICPMS测定海鱼中六种砷形态方法探讨

采用1%硝酸微波萃取进行提取,梯度洗脱的方式对六种砷形态(As B、As C、AsⅢ、As V、MMA、DMA)进行分离,HPLC-ICPMS(液相色谱-电感耦合等离子体质谱)测定海鱼中六种砷形态。对影响液相分离的各条件进行优化,得出六种砷形态的线性范围为1.0μg~200μg/L,相关系数r=0.999 6~1.000 0,检出限依次为As C:0.21μg/L、As B:0.21μg/L、DMA:0.14μg/L、MMA:0.12μg/L、AsⅢ:0.23μg/L、As V:0.21μg/L。加标回收率为82.2%~97.5%,相对标准偏差为0.8%~8.6%,该方法 12 min内能分离六种砷形态,前处理步骤简单,适用于海鱼中砷形态的测定。     

砷及其代谢产物对Foxo3 mRNA和Foxo3 circRNA基因表达的影响

目的探讨砷和一甲基砷酸(MMA)、二甲基砷酸(DMA)对A549细胞的Foxo3 mRNA和Foxo3 circRNA基因表达的影响。方法使用不同计量梯度NaAsO2、DMA、MMA处理A549细胞后用聚合酶链式反应(PCR)法检测Foxo3 mRNA和Foxo3 circRNA的表达。结果 NaAsO2能够抑制Foxo3 mRNA和Foxo3 circRNA的表达,其表达量分别为0.499±0.047、0.470±0.045。DMA、MMA不能影响A549细胞中的Foxo3 mRNA和Foxo3 circRNA的表达,其中DMA处理组的Foxo3mRNA和Foxo3 circRNA的表达量为1.201±0.239、1.115±0.242;MMA处理组的Foxo3 mRNA和Foxo3 circRNA的表达量为1.220±0.182、1.165±0.170。Foxo3 mRNA和Foxo3 circRNA的表达水平在0 (对照组)、10、20、30μmol/L的浓度范围内随着NaAsO2浓度的升高表达水平呈降低特征,和对照组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论砷可以抑制A549细胞中Foxo3 mRNA和Foxo3 circRNA的表达,存在剂量反应关系。而DMA、MMA不能影响A549细胞中的Foxo3 mRNA和Foxo3circRNA的表达。     

食品中砷形态分析方法的研究

目的:针对动物类海产品、藻类样品,建立相应的砷形态分析方法。方法:针对动物性海产品、藻类样品(干样直接粉碎,湿样匀浆后冷冻干燥处理),以水作提取溶剂,70℃,涡漩混合,提取2 h,采用液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱法连用技术进行砷形态分析。结果:在最优实验条件下,仪器的检出限分别为:AsB:4.2μg/L;As(Ⅲ):8.5μg/L;DMA:2.4μg/L;MMA:3.5μg/L;As(Ⅴ):7.5μg/L;在10~100(μg/L)浓度范围中,5种不同砷形态的线性相关系数均大于0.999。采用砷形态混合标准溶液及不同种类样品进行了精密度测定,结果的相对标准偏差(n=6)均小于10%,5种不同砷形态加标回收率在81.7%~119.3%之间,回收率的RSD皆小于10%。结论:本方法切实可行、样品前处理简单、结果稳定性好,适用动物类海产品、海藻类样品中砷形态的分析。     

高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱法同时测定海产品中6种砷形态的研究

目的建立高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱联用(HPLC-ICP-MS)测定海产品中亚砷酸根As(Ⅲ)、砷酸根As(Ⅴ)、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、砷甜菜碱(AsB)和砷胆碱(AsC)6种砷形态的分析方法,了解海产品中砷的形态与含量。方法海产品经0.15mol/L硝酸溶液热提取后,高效液相色谱以色谱柱Dionex Ion Pac AS7(4mm×250mm,5μm)为分离柱,用碳酸铵为流动相进行梯度洗脱分离,用电感耦合等离子体质谱进行定量检测。结果 6种砷形态均达到良好分离,在2.5~150μg/L范围内有良好的线性关系,回收率82.0%~113.0%,相对标准偏差(RSD)5%;海产品中的砷主要以有机砷形式存在,砷甜菜碱含量较高。结论建立的砷形态分析方法简便、准确可靠,符合海产品砷形态检测的要求。     

离子色谱-电感耦合等离子体质谱法测定野生食用菌中6种砷形态

目的建立离子色谱-电感耦合等离子体质谱法(IC-ICP-MS)同时测定野生食用菌中砷甜菜碱(As B)、砷胆碱(As C)、二甲基砷(DMA)、一甲基砷(MMA)、亚砷酸As(Ⅲ)、砷酸As(Ⅴ)6种砷形态的方法。方法野生食用菌中砷形态用1%稀硝酸70℃超声提取1 h,离心后取上清液,残渣重复提取2次后合并上清液混匀,上清液经0.22μm滤膜过滤后通过阴离子色谱柱Dionex Ion Pac~(TM) AS7分离,2 mmol/L和100 mmol/L碳酸铵为流动相梯度洗脱,以电感耦合等离子质谱仪检测75As,外标法定量。结果 6种砷形态在0.5μg/L~50μg/L浓度线性关系良好,相关系数均为0.999 5,6种砷形态检出限为2μg/kg~8μg/kg,3个不同加标水平平均回收率为92.4%~109.1%,相对标准偏差7%。结论该方法具有灵敏度高、准确性好的特点,可用于野生食用菌中砷形态检测分析。     

兴奋性氨基酸递质系统在乐果诱导星形胶质细胞活化中的作用

目的 探讨兴奋性氨基酸递质系统在乐果染毒后皮层星形胶质细胞活化中的作用.方法 新生大鼠皮层神经细胞传代3次后获得纯化的星形胶质细胞,分别加入终浓度为10-6、10-5、10-4mol/[的乐果,并用50和100 μmol/LN-甲基-N-天门冬氨酸(NMDA)受体非竞争性拮抗剂MK801对10-4mol/L乐果染毒组进行干预.染毒后48 h收获细胞,高效液相色谱-荧光检测系统(HPLC-FLD)方法测定细胞内兴奋性氨基酸递质含量,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测NMDA受体NR2B亚基、谷氨酸(Glu)、谷氨酸转运体(GLT-1)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及S100β mRNA表达的变化,免疫荧光染色半定量检测GFAP以及S100β的蛋白表达.结果 各剂量染毒组GLASTmRNA表达下降为对照组的67.8%、68.6%和76.2%,差异有统计学意义(P＜0.05);10-4 mol/L染毒组Glu、Asp含量与对照组相比明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01);与对照组比较,10-4mol/L染毒组GFAP和10-5mol/L染毒组S100βmRNA表达,10-5、10-4mol/L染毒组GFAP蛋白表达,10-4mol/L染毒组S100β蛋白表达明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01),有剂量依赖趋势.对10-4mol/L染毒组给予50和100 μmol/L MK801干预后,GLT-1、GLAST mRNA表达水平较10-4 mol/L染毒组明显上升,差异有统计学意义(P＜0.01),NR2B mRNA表达进一步升高,与未干预前相比,差异无统计学意义(P＞0.05),但均明显高于对照组水平,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);100 μmol/L MK801干预后,Glu的含量升高为10-4mol/L染毒组的1.81倍,差异有统计学意义(P＜0.01);50和100μmol/LMK801干预后,GFAP转录及蛋白水平较未干预前明显下降,差异有统计学意义(P＜0.01),50 μmol/L干预组S100β蛋白表达水平仍然高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 乐果对兴奋性氨基酸递质系统的影响参与了星形胶质细胞的活化;NMDA受体阻断剂MK801有助于控制星形胶质细胞胶质化.

Abstract：

Objective To study the involvement of excitatory amino acid system in astrocytes activation caused by dimethoate. Methods Pure-cultured astrocytes were gained by three passages from primary cultured rat nerve cells, then treated with 10-6,10-5,10-4 mol/L dimethoate for 48 h, 50 μmol/L and 100μmol/L MK801, a NMDA receptor blocker, was used to intervene the effects induced by 10-4 mol/L dimethoate.HPLC-FLD was utilized to measure the concentrations of excitatory amino acid (EAA), RT-PCR was used to detect the expression levels of NR2B, GLT-1, GLAST, GFAP and S100β mRNA, and immunofluresence staining method was applied to measure the expression levels of GFAP and S100β proteins. Results The expression levels of GLAST mRNA in all exposure groups were 67.8% ,68.6% and 76.2% of control level,respectively, which were significantly lower than that of control group (P＜0.05); The concentrations of EAA significantly decreased in 10-4 mol/L dimethoate group, as compared with control group (P＜0.01); the expression levels of GFAP mRNA in 10-4 mol/L dimethoate group, of S100β mRNA in 10-5 mol/L dimethoate group, of GFAP protein in 10-4 mol/L and 10-5 mol/L dimethoate groups and S100β protein in 10-4 mol/L dimethoate group were significantly higher than those in control group (P＜0.01). The expression levels of GLT-1 and GLAST mRNA in 10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μ mol/L MK801 groups increased significantly, as compared with 10-4 mol/L dimethoate group (P＜0.01), the expression levels of NR2B mRNA in 10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μmol/L MK801 groups increased significantly, as compared with control group (P＜0.05 or P＜0.01); the concentration of Glu in 10-4 mol/L dimethoate plus 100 μ mol/L MK801 group increased significantly, as compared with 10-4 mol/L dimethoate group (P＜0.01); the expression levels of GFAP mRNA and protein in10-4 mol/L dimethoate plus 50 μ mol/L or 100 μ mol/L MK801 groups decreased significantly (P＜0.01); S100β protein expression level in 50 μ mol/L MK801 intervention group was significantly higher than thatl in control group (P＜0.01). Conclusion Excitatory amino acid system involved in astrocytes activation caused by dimethoate. MK801 was useful to control astrocytes gliosis.     

百草枯诱导PC12细胞损害和miR-133b表达的变化

目的 探讨百草枯(PQ)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞毒性作用和对miR-133b表达的影响.方法 以50、100、300 μmol/L PQ分别处理PC12细胞24 h,用噻唑蓝(MTT)法检测PC12细胞毒性;以100、300 μmol/LPQ分别处理PC12细胞24 h,用Annexin V-FITC/P...     

Occurrence,speciation analysis and health risk assessment of arsenic in Chinese mitten crabs (Eriocheir sinensis) collected from China

Arsenic (As) is a major hazardous element in natural environments, and arsenic pollution is becoming an issue of concern worldwide. The more toxic inorganic arsenic, such as trivalent arsenite As(Ⅲ) and pentavalent arsenate As(Ⅴ), which normally can transform to organic arsenic compounds, such as arsenobetaine (AsB), arsenocholine (AsC), monomethyl arsenic acid (MMA), dimethyl arsenic acid (DMA), trimethyl arsenic acid (TMA), arsenosugars and arsenolipids. In this study, a total of 2130 individuals of Chinese mitten crabs were collected from seven locations and mixed to 71 samples. Total arsenic and six major species (AsC, AsB, DMA, MMA, As (Ⅲ), and As (Ⅴ)) were determined by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS) and high-performance liquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometry (HPLC-ICP-MS), respectively. The target hazard quotient (THQ) was utilized to evaluate the human health risk. The total arsenic concentration and totals for the six arsenic forms are 0.25–1.66 mg/kg and 0.05–1.19 mg/kg wet mass, respectively. Except for HH and LH, the six arsenic species concentrations accounted for more than 50.0 % of the total arsenic. The less toxic AsB is the most predominant in crabs, comprising 50.0 %–90.0 % of the sum of six types of arsenic. The more toxic inorganic arsenic only range from 0.01 to 0.21 mg/kg wet mass, much less than the limit content of 0.50 mg/kg inorganic As in crustacea. The THQ values of inorganic arsenic through the consumption of Chinese mitten crabs are estimated, and the values are all less than 1, indicating that intaking Chinese mitten crabs collected from China will not cause an appreciable hazard risk to human health.     

邻苯二甲酸单乙基己基酯抑制人卵巢黄素化颗粒细胞激素合成机制的研究

目的：研究邻苯二甲酸单乙基己基酯[Mono-（2-ethylhexyl）phthalate,MEHP]抑制人卵巢黄素化颗粒细胞激素合成的机制。方法：选取在北京大学人民医院行体外受精-胚胎移植的患者6例,分别收集卵泡液,提取颗粒细胞进行原代体外培养72 h后,分别加入MEHP 25,300,500 μmol/L,并于之后48 h通过实时聚合酶链反应（real-time PCR）检测胆固醇侧链裂解酶（CYP11A1）、过氧化物酶体激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor,PPAR-γ）、芳香化酶基因（CYP19A1）、3β-羟基类固醇脱氢酶（3β-HSD）的表达。结果：MEHP为300及500 μmol/L时CYP19A1的表达均明显降低（P＜0.05）;500 μmol/L的MEHP可使CYP11A1表达明显降低（P＜0.05）;当MEHP为500 μmol/L时3β-HSD的表达明显降低（P＜0.05）;当MEHP达到300,500 μmol/L时,PPAR-γ的表达明显增加（P＜0.05）。结论：MEHP不仅能降低雌激素合成关键酶CYP19A1的合成,也抑制了孕激素合成关键酶CYP11A1及3β-HSD的合成。此外,MEHP能促进PPAR-γ的生成。     

JNK信号通路在二甲基肿酸所致人胚肺成纤维细胞DNA损伤与凋亡中的作用

[目的]探讨c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路在二甲基胂酸（DMA）所致人胚肺成纤维（HELF）细胞DNA损伤与凋亡中的作用。[方法]以0、2．5、5、10和20μmol／LDMA处理HELF细胞48h后，检测HELF细胞生长、DNA损伤、细胞凋亡、JNK磷酸化水平；并用20μmol／LJNK抑制剂SP600125预处理30min后，再用DMA处理HELF细胞48h，观察上述指标变化情况。[结果]10和20μmol／LDMA对HELF细胞生长产生明显抑制作用（P〈0．05）；2．5、5、10和20μmol／LDMA引起HELF细胞γ-H2AX表达水平明显增强（P〈0．05），并具有一定剂量-效应关系（经直线相关分析，r=-0．982，P〈0．05）；5、10和20μmol／LDMA引起HELF细胞断裂，caspase3表达水平明显增强（P〈0．05），呈一定剂量-效应关系（经直线相关分析，r=0．945，P〈0．05）；5、10和20μmol／LDMA处理HELF细胞48h后，JNK磷酸化的表达水平明显增加（P〈0．05），呈现一定剂量-效应关系（经直线相关分析，r=0．988，P〈0．05）；JNK抑制剂SP600125能明显降低10、20μmol／LDMA的生长抑制作用（P〈0．05）；JNK抑制剂SP600125可明显阻滞DMA所致HELF细胞对DNA损伤和诱导的凋亡作用（P〈0．05）。[结论]DMA可引起HELF细胞DNA损伤和凋亡；在此过程中JNK信号通路激活起到正调控作用。     

秀丽线虫中铝暴露导致的多重毒害在世代间具有可转移特性

目的 研究铝暴露可能导致的多重毒性是否在世代间具有可传递特性.方法 利用模式生物秀丽线虫对于铝(2.5、75、200 μmol/L)暴露导致的寿命、发育、生殖、运动行为、行为可塑性等多种毒性及其在世代间的可传递性进行了研究.每个参数进行4组平行试验分析,寿命、发育、生殖与运动行为的分析每组20条线虫,行为可塑性的分析每组100条线虫.实验结果 都用SPSS 13.0软件进行分析.结果 数据显示,铝暴露能导致线虫出现多种表型和行为缺陷.与0 μmol/L浓度处理[平均存活天数,24 d;体长(1.30±0.05)mm;后代数目(278士20)个;世代时间(64.0±1.2)h;身体弯曲频率(45.8±3.0)次;头部摆动频率(109.33±7.30)次;行为可塑性(3±4)%]相比,低浓度铝(2.5 μmol/L)暴露即可导致平均存活天数(20 d)、体长[(1.12±0.02)mm;t=14.55,P＜0.01]、后代数目[(145±23)个;t=30.62,P＜0.01]、运动行为[身体弯曲频率(29.8±3.0)次;t=20.31,P＜0.01.头部摆动频率(95.8±6.2)次;t=16.43,P＜0.01]等严重缺陷,而高浓度的铝暴露还可以导致世代时间[75μmol/L,(67.0±1.7)h;t=8.92,P＜0.01.200 μmol/L,(70.7±1.5)h;t=15.13,P＜0.01]与行为可塑性[75 p,μmol/L,(16.5±3.0)%;t=27.11,P＜0.05.200 μmol/L,(23.5±4.0)%;t=16.43,P＜0.01]等的严重缺陷.而且,大部分高浓度铝暴露导致的缺陷可以从暴露当代传递到后代,使后代仍然呈现出严重表型与行为缺陷.在这些后代中,各表型与行为缺陷只能得到有限的恢复(如体长、后代数目与运动行为),或没有明显的恢复(如高浓度铝暴露引起的寿命缺陷).尤其是,铝引起的世代时间缺陷在子代中会变得更为严重.结论 在秀丽线虫中,铝暴露导致的针对表型与行为的多重毒害在很大程度上可以从当代动物传递到后代个体中.     

叔丁基对苯二酚对百草枯神经细胞毒性和氧化应激的拮抗作用

目的 研究叔丁基对苯二酚(tBHQ)预处理对百草枯(PQ)致大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞毒性和氧化应激的拮抗作用.方法 将PC12细胞分为溶剂对照组及100、300 μmol PQ处理组.用终浓度为40 μmol/LtBHQ预处理PC12细胞4 h再分别用终浓度0、100、300 μmol/L PQ处理细胞24或48 h,用噻唑蓝(MTT)法检测细胞毒性,用Annexin V-FITC/PI法流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡,用硫代巴比妥酸法测定细胞丙二醛(MDA)含量.结果 用40μmol/LtBHQ预处理后再用100、300μ,mol/L PQ处理PC12细胞24 h细胞存活率分别较100、300 μmol/L PQ组增高,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);用40μmol/LtBHQ预处理后再用100μmol/LPQ处理PC12细胞48 h细胞存活率较100μmol/LPQ处理组细胞存活率增高,差异有统计学意义(P＜0.01);用40μmol/LtBHQ预处理后再用100、300μmol/PQ处理PC12细胞24 h后,细胞凋亡率分别较100、300 μmol/L PQ下降,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);用40μmol/LtBHQ预处理后再用100、300μmol/LPQ处理PC12细胞24 h后,MDA含量分别较100、300 μmol/L PQ组下降,MDA含量分别为相应对照组的0.61、0.57倍,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 tBHQ预处理可削弱PQ致PC12细胞的细胞毒性、细胞凋亡以及氧化应激作用.

Abstract：

Objective To investigate the protective effects of the tert-butylhydroquinone (tBHQ)pretreatment on neurotoxicity and oxidative stress induced by paraquat (PQ) in PC12 cells. Methods Cytoyoxicity of PC12 cells was measured by MTT assay, following the PC12 cells treatment with different concentrations of 100, 300 μmol/L PQ for 24 h and 48 h. PC12 cells were pretreated with or without 40 μmol/L tBHQ for 4 h, PC 12 cells were exposed to PQ at the doses of 0, 100, 300 μmol/L for 24 h and 48 h, respectively.The viability of PC 12 cells was measured by MTT assay, the apoptosis rates of PC 12 cells were detected by flow cytometry (FCM) and the malondialdehyde (MDA) levels of PC 12 cells were examine by thiobarbituric acid (TBA) method. Results When the exposure doses of PQ were 100 and 300 μmol/L for 24 h, the viability of PC 12 cells pretreated with tBHQ was significantly higher than that of PC 12 cells only exposed to PQ (P＜0.05 or P＜0.01). When the exposure dose of PQ was 100μmol/L for 48 h, the viability of PC12 cells pretreated with tBHQ was significantly higher than that of PC12 cells only exposed to PQ (P＜0.01). When the exposure doses of PQ were 100 and 300 μmol/L for 24 h, the apoptosis rates and MDA levels of PC12 cells pretreated with tBHQ were significantly lower than those of PC12 cells only exposed to PQ (P＜0.05 or P＜0.01). Conclusions tBHQ preteatment can reduce the cytotoxicity, apoptosis and oxidative stress induced by PQ in PC12 cells.     

α亚麻酸对体外成熟人卵母细胞线粒体DNA拷贝数的影响

目的：探讨α亚麻酸（ALA）对人未成熟卵母细胞体外成熟的影响及对卵母细胞线粒体DNA拷贝数的影响。方法：收集2014年10月—2015年10月因男方因素行胞浆内单精子注射（ICSI）的273例患者的未成熟卵母细胞441枚,其中MⅠ期179枚,GⅤ期262枚。将MⅠ期和GⅤ期卵母细胞按相同的构成比随机分为5组,分别放入含不同浓度[0（对照组）,10 μmol/L,50 μmol/L,100 μmol/L,200 μmol/L]ALA的培养液中,培养24 h后观察卵母细胞的成熟情况,实时荧光定量聚合酶链反应（real-time PCR）测定各组卵母细胞的线粒体DNA（mtDNA）拷贝数。结果：①各组未成熟卵母细胞体外成熟培养（IVM）后总成熟率以ALA 50 μmol/L组（70.1%）最高,明显高于对照组（42.1%）及ALA 200 μmol/L组（34.1%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;②5组GⅤ期卵母细胞成熟率以ALA 50 μmol/L组（64.4%）最高,明显高于对照组（28.9%）及ALA 200 μmol/L组（18.2%）,差异有统计学意义（P＜0.05）;③ALA 50 μmol/L组成熟卵母细胞mtDNA拷贝数（3.64×107±1.85×106）大于对照组（3.42×106±1.95×105）,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：50 μmol/L ALA在体外实验中可增加卵母细胞mtDNA拷贝数,有促进人未成熟卵母细胞体外成熟的作用。     

液相色谱-原子荧光联用测定作业场所空气中的无机砷

  目的  建立液相色谱-原子荧光光谱法测量作业场所空气中亚砷酸盐As（III）与砷酸盐As（Ⅴ）含量的方法。
  方法  样品经0.15 mol/L硝酸90℃浸提1 h后,以15 mmol/L磷酸氢二铵为流动相,CNWSep AX（250 mm×4.0 mm×10 μm）（LAEQ-4025G7）色谱柱分离,分析检测空气样品中As（Ⅲ）与As（Ⅴ）。
  结果  As（Ⅲ）与As（Ⅴ）在0~100 μg/L时,As（Ⅲ）与As（Ⅴ）线性相关系数（r）:0.999 9和0.999 8,检出限为0.14 μg/L和0.38 μg/L;洗脱效率:As（Ⅲ）为96.77%~98.66%,As（Ⅴ）为95.27%~98.39%;加标回收率:As（Ⅲ）为90.67%~95.60%,As（Ⅴ）为91.82%~95.84%;相对标准偏差（n=6）:As（Ⅲ）为0.47%~1.44%,As（Ⅴ）为0.48%~1.34%。
  结论  该前处理方法能有效避免无机砷形态的转化,对两种无机砷形态分离效果好,且灵敏度和准确度较高,适用于作业场所中无机砷的测定。
     

DNA聚合酶β对苯并[a]芘致细胞遗传毒性及基因组遗传不稳定性的影响

目的 研究DNA聚合酶β(polβ)表达水平对苯并[a]芘(BaP)致细胞遗传毒性及基因组遗传不稳定性的影响,为BaP的致癌分子机制提供实验依据.方法 采用3种具有相同遗传背景的小鼠胚胎成纤维细胞[polβ野生型(polβ+/+)、polβ缺陷型(polβ-/-)和polβ高表达型(polβoe)]作为模型,检测BaP对细胞的氧化损伤作用,细胞遗传毒性和基因组遗传不稳定性.结果 随着BaP浓度的增加,3种细胞的存活率和克隆形成能力均下降.5.00和20.00 μmol/L BaP染毒时,polβ-/-细胞产生的ROS荧光强度均大于polβ+/+和polβoe细胞,差异均有统计学意义(P＜0.05).在5.00和20.00μmol/L时,polβ-/-卢细胞SOD活力为(76.56±2.84)和(62.78±4.28) U/mg pro,低于对照组[(84.85±3.59) U/mg pro]和polβ+/+细胞[(85.21 ±3.20)和(76.90±3.38) U/mg pro],20.00 μmol/L BaP染毒组polβoe细胞SOD活力[(82.59±4.64) U/mg pro]低于对照组[(88.58±6.77) U/mg pro]但高于相同浓度染毒的polβ +/+细胞,差异均有统计学意义(P＜0.05).1.25、5.00和20.00 μmol/L BaP染毒组的polβ-/-细胞的微核形成率明显高于polβ +/+细胞,5.00和20.00 μmol/LBaP染毒组的polβ oe细胞的微核形成率明显低于pol β+/+细胞,差异均有统计学意义(P＜0.05).5.00和20.00 μmol/L BaP染毒组polβ-/-细胞的HPRT基因突变频率为26.16×10-6和37.51×10-6,polβ oe细胞为27.68×10-6和38.63×10-6,均明显高于polβ +/+细胞(19.76×10-6和24.78×10-6),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 Polβ在保护细胞免受BaP造成的细胞毒性和遗传毒性方面具有积极的作用,其正常表达对于维持细胞基因组遗传稳定性具有重要的意义.