B群链球菌显色培养基在孕产妇B群链球菌筛查中的性能评价

目的 评价B群链球菌（group B streptococcus,GBS）显色培养基在孕产妇中筛查GBS的敏感性、特异性和选择性能。方法 收集孕产妇肛门/阴道拭子标本共312例,已知菌株标本9例,分别直接接种或增菌后接种于血平皿和GBS显色培养基,记录鉴定结果。以筛查出的GBS总阳性数为参考,分别比较直接接种和增菌接种时,显色培养基筛查GBS的敏感性和特异性。结果 显色培养基对GBS的检出率、敏感性和特异性优于常规血平皿。标本增菌后接种法孵育24 h得到的阳性率为7.05%（22/312）高于直接接种法（6.41%,20/312）,对GBS筛查的敏感性高于直接接种法（95.65%vs 86.96%）,特异性一致（99.65%）。结论 显色培养基对GBS有良好的检出率,判断方法直观简便,对非目标菌群有良好的抑制作用。     

荧光PCR法在围生期孕妇B族链球菌筛查中的应用及CAMP试验阴性B族链球菌分子特征分析

目的探讨荧光聚合酶链反应(PCR)在围生期孕妇B族链球菌(GBS)筛查中的应用价值及CAMP试验阴性GBS的鉴定分析。方法收集产科门诊孕35~37周孕妇阴道/直肠拭子1 143例,将拭子放入GBS增菌肉汤管增菌,分别用GBS显色平板和荧光PCR法检测GBS。16SrDNA分子鉴定技术对CAMP试验阴性GBS进行种属鉴定,并采用PCR技术检测其cfb基因。结果显色平板检出146份阳性样本,阳性率为12.77%,荧光PCR法检出191份阳性样本,阳性率为16.71%,2种方法的阳性率差异有统计学意义(P<0.01);荧光PCR法与显色平板培养法相比,敏感性为93.15%、特异性为94.48%、符合率为94.31%。146株GBS中有10株为CAMP试验阴性,检出率为6.85%,均为cfb基因缺失株。结论荧光PCR法可有效提高围生期孕妇GBS筛查的阳性率;该地区CAMP试验阴性GBS检出率较高,CAMP试验不宜作为GBS的鉴别试验,因存在缺失cfb基因GBS,GBS分子检测试剂不应选择该段基因设计引物。     

6种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的应用评价

目的 对6种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法进行应用评价.方法 分别采用6种方法检测134株临床分离的金黄色葡萄球菌耐甲氧西林的情况:聚合酶链反应(PCR)检测mecA基因、苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、琼脂稀释法检测苯唑西林最小抑菌浓度、琼脂稀释法检测头孢西丁最小抑菌浓度、显色培养基法.结果 以PCR检测mecA基因为“金标准”,65.7％的金黄色葡萄球菌耐甲氧西林 ;苯唑西林纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的敏感性和特异性分别为95.5％和97.8％ ;头孢西丁纸片扩散法敏感性和特异性分别为97.7％和97.8％;苯唑西林和头孢西丁琼脂稀释法敏感性均为100％,特异性分别为97.8％和91.3％ ;显色培养基法敏感性和特异性分别为98.9％和97.8％.结论 6种检测方法具有较好的一致性.头孢西丁纸片扩散法简便、可靠,可作为临床实验室常规检测MRSA的方法.     

科玛嘉培养基与沙氏培养基分离酵母菌的比较

目的应用科玛嘉显色培养基(Chromagar)对120份妇科门诊病人分泌物标本进行念珠菌的分离培养.与常用的沙氏培养基(Sabourand's Agar)比较.方法用接种环分别将标本接种于两种培养基上,37℃培养,24 h和48 h各观察一次,并记录菌落生长时间、大小及颜色.结果①科玛嘉显色培养基菌落的不同颜色可筛选出不同的念珠菌,如绿色菌落为白色念珠菌、蓝灰色菌落为热带念珠菌、粉红色菌落为克柔氏假丝酵母菌、白色菌落为其它念珠菌;②科玛嘉显色培养基菌落大小明显较沙氏培养基菌落大;③科玛嘉显色培养法具有操作简便、快速等优点.结论新培养基(科玛嘉显色培养基)在分离诊断致病性酵母菌方面优于沙氏培养基.     

门诊患者尿路B群链球菌感染的快速筛查

目的建立一种快速的门诊患者尿路B群链球菌感染的筛查方法,在一个工作日为患者的临床用药提供科学依据。方法采集患者中段尿,一份接种于5%绵羊血平板,5%～10%CO235℃孵育18～24h,分纯后以API20Strep鉴定;一份接种于LIM肉汤,转种链球菌选择性血平板,取可疑菌落鉴定;同时取患者尿标本直接进行革兰染色,若发现革兰染色阳性成链状排列球菌,以50μl标本涂片,使用GBS特异性DNA探针杂交。如两种或两种以上的方法为阳性,判定为真阳性。如3种方法均为阴性判定为真阴性。结果不一致时重取标本以双份选择性血平板的培养结果为准。计算三种方法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值。结果638例门诊患者尿标本中,血平板法检出GBS57例,选择性血平板法检出GBS80例,荧光原位杂交法检出GBS95例。培养法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为35.6%,100%,100%,82.3%;SBA法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为68.4%,100%,100%,93.4%;FISH法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为88.1%,98.8%,93.7%,97.8%。结论FISH法准确、快速,可在短时间内为门诊患者尿路B群链球菌感染提供筛查结果。     

泌尿生殖道支原体液体显色培养法与固体培养法的比较

目的 以固体培养法为标准,探讨液体显色培养法培养支原体的敏感性、特异性和一致性.方法 采用培养鉴定药敏一体化液体显色培养基和固体A7琼脂培养基平行检测155例泌尿生殖道标本的支原体.结果 液体显色培养法培养的敏感性为96.5%,特异性为79.7%,一致性Kappa=0.7737,U=11.4767,P＜0.001,两种方法 具有好的一致性.男性标本与女性标本比较,敏感性差异无统计学意义(x2=0.1298,P＞0.05),特异性差异有统计学意义(x2=5.4197,P＜0.025).结论 液体显色培养法可用于支原体培养初筛,结合固体培养法可以提高支原体培养的准确性.     

念珠菌显色平板的配制及其临床应用评价

目的：利用酶显色底物配制念珠菌显色平板,并评估其临床应用中的符合率、敏感性与特异性。方法：基础培养基沙保罗琼脂联合酶显色底物（H012、H026、H092）,经过优化实验筛选最适宜配方,制备念珠菌显色平板,对112株临床分离株进行分离鉴定,并与API ID 32C鉴定结果比较。结果：白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和克柔念珠菌在配制的显色平板中分别呈现绿色、紫色、蓝灰色和粉红色,48h鉴定结果与API ID 32C总体符合率98.0%,敏感性与特异性分别达98.0%、99.4%。结论：本实验室配制的念珠菌显色平板灵敏度强、特异性高,更经济合理,能简便快捷地初步鉴别常见念珠菌,符合临床标本检测需求。     

CHROMagar念珠菌显色培养基细菌干扰分析

目的 探讨CHROMagar念珠菌显色培养基上生长的细菌来源、组成、显色变化及生长规律.方法 随机选取标本同时接种于CHROMagar念珠菌显色培养基（以下简称显色培养基）和传统沙保罗培养基上,35℃培养,24,48,72 h各观察并记录杂菌菌落生长时间、大小及颜色,分离、鉴定到种.结果 显色培养基上细菌生长率为16.7%,沙保罗培养基为36.5%;干扰显色培养基的细菌主要为革兰阴性杆菌（91.9%）;部分细菌呈现出非特异性显紫色或深紫色,与光滑假丝酵母菌所显示的颜色相似,须区分.结论 显色培养基对杂菌的抑制作用明显优于传统沙保罗培养基,但仍有待改善.     

孕晚期妇女B族链球菌携带情况及耐药机制研究

目的研究孕晚期妇女B族链球菌（GBS）携带情况及大环内酯类等抗菌药物的耐药表型和耐药机制。方法收集848份孕晚期妇女阴道/肛门拭子样本,采用哥伦比亚血琼脂培养基和GBS显色培养基进行培养。采用纸片扩散法进行GBS红霉素、克林霉素、左氧氟沙星及万古霉素药敏试验。聚合酶链反应（PCR）检测大环内酯类抗菌药物耐药基因ermA、ermB、ermC、ermTR、mefA/E及林可酰胺抗菌药物耐药基因lnuB。结果848份标本共筛查出95株GBS,阳性率11.2%。红霉素、克林霉素和左氧氟沙星耐药率分别为78.9%、82.1%、30.5%,万古霉素全敏感。95株GBS经D环试验检测,69株为结构耐药表型cMLSB,5株为诱导耐药表型iMLSB,1株为红霉素耐药克林霉素敏感M表型,3株为红霉素敏感克林霉素耐药L表型。PCR检测到59株GBS携带ermB基因,29株携带mefA/E基因,19株携带lnuB基因,2株携带ermTR基因,未检测到ermA和ermC基因。48株GBS仅含一种耐药基因,27株GBS含两种及以上耐药基因。结论温州地区孕晚期妇女GBS携带率高,需要对所有孕晚期妇女进行GBS筛查试验;GBS红霉素和克林霉素耐药率高,并且以cMLSB耐药表型为主。大环内酯类耐药基因以ermB为主;lnuB基因携带率高于其他地区。     

非特异性阴道炎分离细菌对支原体培养结果影响

目的了解女性生殖道非特异性炎症常见的几种致病菌对支原体鉴定药敏板的影响。方法实验室从非特异性阴道炎标本中分离的野生菌株采取定量培养方法于支原体鉴定药敏板,24～48h后观察培养基显色情况。结果临床分离的野生菌株使培养基显色的细菌量低于标准菌株,野生菌株之间的显色浓度没有明显差异;野生菌株分解尿素产氨的几率明显高于标准菌株。结论临床实验室进行支原体培养的同时需加做一般细菌培养,并在阳性标本出现后将阳性培养液再培养以排除干扰菌造成的假阳性。