抗衰片对电离辐射损伤后小鼠骨髓造血作用的影响

摘要： 目的 探讨抗衰片对电离辐射损伤后小鼠造血重建的调控影响。方法 9~10 周龄雄性 C57BL/6 小鼠随机分为照射对照组、 低剂量组、 中剂量组和高剂量组, 每组 10 只。后 3 个剂量组分别按 0.75、 1.5、 3.0 g/kg 体质量灌服抗衰片水溶液, 照射对照组给予同体积生理盐水, 1 次/d, 连续给药 11 d。第 4 天对 4 组小鼠进行 6.0 Gy 137 Cs-γ射线单次全身照射。照射后第 8 天, 观察小鼠内源性脾结节 （即脾集落形成单位, CFU-S）、 小鼠骨髓粒-巨噬细胞集落形成单位 （CFU-GM） 和骨髓成纤维细胞集落形成单位 （CFU-F） 的生成情况。同时, 体外扩增的骨髓间充质干细胞（MSC） 与正常供体小鼠的造血干细胞 （HSC） 进行二维共培养 （2D CFU-GM）, 通过 2D CFU-GM 检测辐射损伤后药物作用的 MSC 促进 HSC 的增殖能力。结果 与照射对照组相比, 3 个剂量组的 CFU-GM 数目显著增多, 中剂量组及高剂量组 CFU-S、 CFU-F、 2D CFU-GM 增殖能力显著提高 （均 P＜0.05）。结论 抗衰片可以促进电离辐射损伤后小鼠造血系统重建。     

星虫多糖对亚急性辐射损伤小鼠造血系统的保护作用研究

目的 研究星虫多糖（Sipunculus nudus L. polysaccharide, SNP）对亚急性辐射损伤小鼠造血系统的保护作用。方法 选用雄性BALB/c,采用137Cs γ射线对小鼠进行一次性全身照射（总剂量为4.0 Gy）,建立亚急性辐射损伤模型。照射前连续灌胃给药7天,照射后继续给药14天。用细胞分析仪测定外周血象,流式细胞仪检测骨髓造血干细胞含量与细胞凋亡率。照射后24 h取小鼠股骨进行HE染色观察骨髓病理变化。结果 经137Cs γ射线照射后,与辐照模型组相比,照后第10天,90 mg/kg SNP小鼠外周血象红细胞数量显著提高(P<0.05),SNP三个剂量组血小板数量均显著提高(P<0.05);照后第14天,270 mg/kg SNP组小鼠脾脏指数与30 mg/kg SNP组小鼠睾丸指数显著提高(P<0.05),30 mg/kg SNP组骨髓造血干细胞数量显著提高(P<0.05),SNP各给药组骨髓细胞凋亡率显著下降(P<0.01),骨髓组织中有核细胞数量显著增多。结论 SNP对辐射损伤小鼠的造血系统具有较好的保护效果。     

沙纳唑合并γ射线对在体小鼠骨髓粒系造血祖细胞的影响

目的 :研究沙纳唑直接给药以及合并γ射线照射处理对在体小鼠骨髓粒系造血祖细胞 (CFU -GM )集落形成的影响。方法 :通过对小鼠骨髓CFU -GM培养的检测 ,观察从小鼠尾静脉注射不同剂量沙纳唑对小鼠造血系统的影响 ;并于不同放射剂量照射前30min从小鼠尾静脉注射不同剂量沙纳唑 ,观察沙纳唑合并γ射线照射处理对小鼠造血系统的影响。结果 :静脉注射沙纳唑对在体小鼠骨髓CFU -GM集落形成抑制作用较小 ;沙纳唑合并γ射线照射处理后对小鼠骨髓CFU -GM的抑制作用与单一放射照射处理结果相似。结论 :沙纳唑直接给药对在体小鼠骨髓CFU -GM无明显细胞毒性作用 ,合并放射照射处理对放射照射所致小鼠骨髓CFU -GM的抑制没有明显协同作用。     

益血胶囊对辐射损伤小鼠造血功能的影响

目的:研究益血胶囊对辐射损伤小鼠造血功能的影响.方法:对外周血白细胞、血小板及骨髓有核细胞计数,用内源性脾结节形成法、造血祖细胞集落培养法观察益血胶囊对4Gy60Co-γ射线辐照后小鼠的造血功能的影响.结果:益血胶囊对辐射后d7小鼠外周血白细胞、血小板、骨髓有核细胞、骨髓巨核细胞系祖细胞(CFU-MK)、粒单系祖细胞(CFU-GM)均有明显升高作用;使辐射后d14小鼠脾脏指数、脾结节数(CFU-S)明显增加.结论:益血胶囊对小鼠造血功能辐射损伤具有明显治疗作用.     

唐古特大黄多糖组分1对电离辐射损伤小鼠造血系统的影响

目的:探讨唐古特大黄多糖组分1(RTP1)对电离辐射损伤小鼠造血功能的影响。方法:采用雄性6周龄昆明种小鼠,随机分为5组:正常对照组(Normal Control,NC)、辐射对照组(Irradia-tion Control,IC)以及RTP1低剂量组(200mg/kg)、中剂量组(400mg/kg)和高剂量组(800mg/kg),采用灌胃给药方式,连续14d,NC组和IC组则给予等量的生理盐水,第14d除NC组外,各组小鼠均接受6.5Gy/只60Coγ射线照射1次,照射后继续灌胃给药,观察照射后30d小鼠生存情况,并对小鼠骨髓有核细胞数(bonemarrow cell,BMC)、骨髓DNA含量、内源性脾集落形成单位(spleen colony forming unit,CFU-S)及外周血中白细胞(white blood cell,WBC)计数进行检测。结果:与IC组比较,RTP1可提高小鼠30d存活率,并剂量依赖性地升高外周血中WBC计数、骨髓有核细胞数、DNA含量以及脾结节数。结论:RTP1对辐射小鼠的造血系统起到一定保护作用。     

p38抑制剂对辐射损伤小鼠中免疫细胞的作用

目的:探讨利用p38抑制剂SB203580(SB)抑制p38通路对6Gy受照小鼠免疫细胞辐射损伤的作用。方法:取雄性C57BL/6小鼠30只,随机分为对照组、照射组和SB组,每组10只。SB组和照射组小鼠接受以6Gy137Csγ射线的全身照射。SB组小鼠照射24h后腹腔注射SB(15mg/kg),每2d1次,共给药5次,其余2组小鼠腹腔注射对照溶液。小鼠受照10d后处死,取外周血计数,流式细胞仪检测CD4、CD8、B220表达,取骨髓细胞测定ROS水平。结果:照射组外周血白细胞(WBC)、CD8、B220细胞比例较对照组明显下降,骨髓ROS水平升高(P<0.01)。SB组外周血CD8比例较照射组上升,骨髓ROS水平下降(P<0.01)。结论:SB对小鼠6Gy照射后造血免疫损伤有一定的缓解作用,其机制可能与其降低照射后骨髓细胞ROS水平有关。     

流式细胞仪检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率方法的改进

目的观察经γ射线照射后不同时相点小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的变化,进一步完善微核流式细胞仪自动化检测方法。方法 ICR雄性小鼠给予60Coγ射线一次性全身照射,每组4只,剂量分别为1.0、3.0和6.0 Gy,与照射后0.5、2、6和12 h取材;阴性对照组给予假照射;阳性对照组注射环磷酰胺24 h后取材。结果 1.0 Gyγ射线照射后6 h,骨髓f MNPCE显著升高(P<0.01);而3.0 Gy及6.0 Gy照射后6 h,骨髓f MNPCE显著升高(P<0.01);2种方法检测结果显示均有较好的剂量、时间依赖性,并呈显著正相关性(r=0.962,P<0.05)。结论红细胞微核流式细胞仪自动化检测方法快速、简单、灵敏、客观,完全适用于小鼠骨髓红细胞微核率的检测。     

迷迭香酸对γ射线致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的保护作用

目的研究迷迭香酸对γ射线致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的保护作用。方法以骨髓嗜多染红细胞微核形成率为观测指标,C57BL/6J小鼠经60Coγ射线1～3 Gy照射24 h后观察骨髓嗜多染红细胞微核发生率的变化以选择合适的照射剂量;C57BL/6J小鼠经60Coγ射线2Gy照射后不同时间观察骨髓嗜多染红细胞微核发生率的变化以选择照射后取骨髓的时间;2 Gy照射前经迷迭香酸处理的C57BL/6J小鼠照后24 h观察骨髓嗜多染红细胞微核发生率的变化,以确定迷迭香酸对小鼠微核保护作用的剂量效应与时间效应。结果 2 Gy照射24 h后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率增加比较明显,适合作为小剂量照射条件;照射后24 h或48 h骨髓嗜多染红细胞微核发生率增加比其他时间明显;经迷迭香酸100 mg/kg连续7次处理后的受照射小鼠骨髓细胞中,微核发生率（6.50‰）明显低于单纯照射组（23.65‰）。结论迷迭香酸对γ射线致骨髓嗜多染红细胞微核具有保护作用。     

铁皮枫斗颗粒对放射损伤小鼠造血功能的影响

目的研究铁皮枫斗颗粒(DCWD)对放射损伤小鼠造血功能的影响。方法BALB/c小鼠125只,随机分为正常对照组、单纯照射组及DCWD大、中、小剂量组。采用直线加速器6 mV X射线8.0 Gy或5.0Gy全身单次均匀照射,照前连续灌胃10 d,每天1次,照后继续给药至小鼠死亡或活杀。观察受8.0 Gy照射小鼠的存活情况,检测受5.0 Gy照射小鼠外周血白细胞计数(PWBC)、骨髓有核细胞数(BMC)及脾指数。结果8.0 Gy照射后,受照各组小鼠平均存活时间均在10 d之内,较正常对照组明显缩短(P<0.01),给药组较单纯照射组延长3~4 d(P<0.01);5.0 Gy照射后小鼠PWBC、BMC和脾指数均显著下降,给药组高于单纯照射组(P<0.05),且恢复快,但给药各组之间差异无统计学意义。结论DCWD能明显延长受照小鼠平均存活时间,提高其存活率,显著提高其PWBC、BMC和脾指数;DCWD对放射损伤具有一定的保护作用,其机制可能与促进骨髓造血功能恢复有关。     

SB203580对小鼠造血组织辐射损伤的保护作用

目的观察SB203580对接受γ射线照射的C57BL/6小鼠造血组织损伤的保护作用。方法小鼠随机分为对照(Ctr)组、照射(IR)组及SB203580给药(SB)组,以6.0 Gy 137Csγ射线全身均匀照射SB组和IR组的C57BL/6小鼠。收集并计数外周血红细胞、白细胞和血小板,以及单侧股骨骨髓有核细胞(BMMNC);骨髓细胞半固体培养法检测BMMNC增殖能力。另外收集小鼠BMMNC,同样分组,IR组与SB组细胞进行1 Gy体外照射,照射之后孵育过夜,酶标仪检测细胞内活性氧(ROS)水平。结果 SB组外周血白细胞、血小板的数量分别比IR组高111.8%和157.7%(P<0.05);SB组BMMNC较IR组高135.4%,CFU-GM高188.5%(P<0.05);SB组BMMNC内ROS较IR组低56.2%(P<0.05)。结论 SB203580对照射造成的小鼠造血组织损伤具有一定的保护作用,这种保护作用可能与其降低照射后细胞内ROS水平有关。     

青蒿琥酯对小鼠骨髓造血干/祖细胞分化的抑制与毒性作用

目的:观察青蒿琥酯(artesunate,AS)对小鼠骨髓造血干/祖细胞分化的影响。方法:取小鼠骨髓干细胞进行体外液体或半固体定向培养并加入不同浓度的AS,光镜下计数半固体培养的红系集落形成单位(CFU-E)与红系爆式集落形成单位(BFU-E)数量,流式细胞术检测液体定向培养的细胞凋亡和线粒体膜电位变化,同时进行DNAladder凝胶电泳实验。结果:AS可显著抑制CFU-E与BFU-E集落的生成(P<0.05)并具有一定的量效关系;DNAladder凝胶电泳结果显示0.01～1.30mmol/L的AS可明显诱导细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞晚期凋亡/死亡率具有统计学意义(P<0.05);线粒体膜电位的下降程度也与AS浓度正相关(r=0.546,P=0.018)。结论:AS对小鼠骨髓造血干/祖细胞的增殖和分化具有明显抑制作用,小剂量AS可诱导小鼠骨髓造血干/祖细胞发生凋亡,大剂量可直接引起细胞坏死。     

百里醌对辐射暴露小鼠造血系统的保护作用

目的　探讨百里醌对小鼠造血系统辐射损伤的影响。方法　ICR小鼠,按平均体质量一致原则分为对照组、照射组和百里醌组,每组5只。其中,对照组小鼠不接受照射,其他2组小鼠接受2.0 Gy照射。照射前1 d,对百里醌组小鼠予以灌胃百里醌（10 mg/kg）, 照射后持续3 d,其余2组小鼠灌胃生理盐水。照射7 d后处死小鼠,取外周血和单侧股骨骨髓细胞进行计数,检测骨髓细胞克隆形成能力与活性氧水平。结果　与对照组相比,照射组小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、血细胞比容（HCT）、血小板（PLT）、单侧股骨骨髓细胞数（BMMNC）、骨髓细胞集落形成数量均显著下降,骨髓细胞活性氧水平显著升高（P＜0.05）,百里醌组外周血WBC、RBC、HGB、HCT和PLT计数也出现显著下降（P＜0.05）。与照射组相比,百里醌组小鼠外周血WBC、BMMNC及骨髓细胞集落形成数量显著提高（P＜0.05）,骨髓细胞活性氧水平降低（P＜0.05）。结论　百里醌对造血系统辐射损伤具有保护作用,可通过抑制活性氧提高骨髓细胞增殖功能。     

Glucan-induced hemopoietic and immune stimulation: therapeutic effects in sublethally and lethally irradiated mice

The hemopoietic effects of glucan, a beta 1,3 polyglycan biological response modifier, were assayed in normal and irradiated mice. In normal mice, glucan administration increased the content of bone marrow and splenic transplantable pluripotent hemopoietic stem cells (CFU-s), committed granulocyte-macrophage progenitor cells (GM-CFC), and pure macrophage progenitor cells (M-CFC). In mice partially hemopoietic depleted by exposure to 6.5 Gy of 60Co irradiation glucan increased the number of endogenous pluripotent hemopoietic stem cells (E-CFU). The most pronounced effects were observed when glucan was administered 1 day before irradiation. In addition, the administration of glucan 1 day before lethal (9.0 Gy) irradiation-enhanced survival. The enhanced survival in glucan-treated mice in part appeared to be mediated by an enhanced resistance to the surgence of enteric opportunistic pathogens that occurs following radiation-induced hemopoietic and immune depression.     

石花多糖对辐射损伤小鼠防护作用的研究

目的研究地衣类石花多糖对辐射损伤小鼠造血功能及DNA损伤的防护作用。方法用内源性脾结节形成(CFU-S),骨髓有核细胞计数(BMNC),脾脏指数观察石花多糖50,80 mg/kg腹腔注射对137Csγ射线照射小鼠造血功能的影响;单细胞凝胶电泳(SCGE)技术检测小鼠淋巴细胞照射后的DNA双链断裂,观察给药后小鼠DNA损伤修复情况。结果照射前连续给药3 d,照后第7天受照小鼠的BMNC、CFU-S和脾指数与对照组相比有明显的增高;SCGE中各项指标显示,给药组的DNA损伤的修复明显增加,呈明显的量-效关系。结论石花多糖对辐射损伤小鼠具有良好的辐射防护作用。     

Pesticide induced alterations in marrow physiology and depletion of stem and stromal progenitor population: An experimental model to study the toxic effects of pesticide

Long‐term exposure of agriculturally used organochloride and organophosphate pesticides have been shown to cause long‐lasting hematotoxicity and increased incidence of aplastic anemia in humans. The mechanisms involved in pesticide induced hematotoxicity and the features of toxicity that may play a major role in bone marrow suppression are not known. The aim of the present study was to investigate the hematological consequences of pesticide exposure in swiss albino mice exposed to aqueous mixture of common agriculturally used pesticides for 6 h/day, 5 days/week for 13 weeks. After the end of last exposure, without a recovery period, the strong hematotoxic effect of pesticide was assessed in mice with long‐term bone marrow explant culture (LTBMC‐Ex) system and cell colony forming assays. Bone marrow explant culture from the pesticide exposed group of mice failed to generate a supportive stromal matrix and did not produce adequate number of hematopoietic cells and found to contain largely the adipogenic precursors. The decreased cell colony numbers in the pesticide exposed group indicated defective maturational and functional status of different marrow cell lineages. As a whole, exposure of mice to the mixture of pesticides reduced the total number of bone marrow cells (granulocytes are the major targets of pesticide toxicity), hematopoietic, and non‐hematopoietic progenitor cells and most of the hematological parameters. Replication of primitive stem/progenitor cells in the marrow was decreased following pesticide exposure with G0/G1‐phase arrest of most of the cells. The progenitor cells showed decreased percentage of cells in S/G2/M‐phase. The increased apoptosis profile of the marrow progenitors (Increased CD95 expression) and primitive stem cells (High Annexin‐V positivity on Sca1+ cells) with an elevated intracellular cleaved caspase‐3 level on the Sca1+ bone marrow cells provided the base necessary for explaining the deranged bone marrow microenvironmental structure which was evident from scanning electron micrographs. These results clearly indicate a strong, long lasting toxic effect of pesticides on the bone marrow microenvironment and different microenvironmental components which ultimately leads to the formation of a degenerative disease like aplastic anemia. © 2011 Wiley Periodicals, Inc. Environ Toxicol 29: 84–97, 2014.     

Induction of cell-proliferation hormesis and cell-survival adaptive response in mouse hematopoietic cells by whole-body low-dose radiation.

Hormesis and a cytogenetic adaptive response induced by low-dose radiation (LDR) have been extensively documented. However, few studies have investigated the induction of an adaptive response by LDR for cell survival in vitro. In the present study, we investigated whether LDR could induce hormesis in hematopoietic cells and the adaptive response of these cells to subsequent high-dose radiation-induced cytotoxic effects. Mice were exposed in whole-body to 0 (as control), 0.05, 0.25, 0.50, 0.75, and 1.00 Gy of X-rays. They were killed 12, 24, 48, and 72 h later to observe the stimulating effect of LDR on total bone marrow cells per femur and bone marrow progenitor, colony-forming unit-granulocyte-macrophage (CFU-GM). Exposure to 0.5 Gy of X-rays resulted in significantly stimulating effects on both parameters with a maximum effect at 48 h, showing a cell-proliferation hormesis. In the next experiment, mice were irradiated by 0.5 Gy X-rays as an adaptive exposure (D1), and 6, 12, 24, 48, and 72 h later, they were exposed to 6 Gy X-rays as a challenging exposure (D2). Forty-eight h after D2, cytotoxic effects were analyzed using peripheral blood cells (red blood cells, white blood cells, and platelets) and bone marrow cells (total bone marrow cells of the femur, and bone marrow progenitors such as CFU-GM and erythroid burst-forming unit, BFU-E). An adaptive response to D2-induced cytotoxic effect, named as the cell-survival adaptive response, was found in both peripheral blood cells and bone marrow cells when D1 and D2 exposures were given at intervals of 24-48 h. These results suggested that LDR could induce both cell-proliferation hormesis and cell-survival adaptive response to subsequent high-dose radiation in bone marrow cells. It may be of potential importance, if this phenomenon is confirmed clinically, since it may be applied to reduce the adverse effect of radiotherapy.     

骨髓间充质干细胞和骨髓单个核干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的对比研究

目的观察髓间充质干细胞（MSCs）和骨髓单个核干细胞（BMMNCs）移植对急性心肌梗死后大鼠左心功能的影响及存活情况,比较两种干细胞移植的优劣性。方法雌性Lewis大鼠45只按随机抽签法分3组：对照组、MSCs组、BMMNCs组。结扎前降支制备心肌梗死模型,MSCs组和BMMNCs组均注射等数量（2×10^6）雄性MSCs和BMMNCs,对照组注射等体积的培养基。4周后超声检测左心功能、左心室前壁厚度,免疫原位杂交检测雄性鉴别基因sry片段的表达。结果MSCs组和BMMNCs组与对照组相比：左心室射血分数分别增加22．57％、24．09％（P=0．000）,MSCs组和BMMNCs组之间比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;左心室前壁厚度增加（2．6±0．5）mm和（2．5±0．3）mm对（1．8±0．4）mm（P=0．000）;免疫原位杂交显示MSCs组与BMMNCs组sry表达阳性,对照组阴性。阳性细胞的数量相比较,BMMNCs组高于MSCs组（66．50±6．59比46．67±4．64,P=0．000）。结论MSCs和BMMNCs移植均能改善大鼠急性心肌梗死后左心功能,减轻左心室重构;移植4周后在受体心肌内存活干细胞数量BMMNCs优于MSCs。     

137Cs γ射线辐照机辐照悬浮红细胞后的质量变化研究

目的 探讨国产137Cs γ射线血液辐照机辐照对悬浮红细胞中淋巴细胞增殖能力的影响,以及辐照后悬浮红细胞在保存期间质量的变化.方法 将悬浮红细胞分为未辐照组及辐照组,辐照组使用国产137Cs γ射线血液辐照机进行照射,照射剂量为25 Gy.分离辐照前后悬浮红细胞中的淋巴细胞进行培养,观察辐照前后淋巴细胞增殖率的变化;检...     

白细胞介素12对急性放射病小鼠造血系统的影响

目的研究重组鼠白细胞介素12（rmIL-12）对急性放射病小鼠造血系统的影响。方法 42只BALB/c小鼠均给予6.0 Gy 60Coγ射线全身照射,随机分为照射对照组、5和20μg/kg的rmIL-12治疗组,治疗组分别于照后1 h及此后每3 d一次分别腹腔注射5和20μg/（kg.d）的rmIL-12,共5次,每日2次观察小鼠一般情况,3 d检测1次外周血细胞,分别于照射后14和28 d制备股骨病理切片观察组织形态学改变,收集骨髓细胞进行集落培养。结果 rmIL-12治疗组小鼠一般情况较对照组改善。5和20μg/kg rmIL-12治疗组小鼠外周血中血小板（PLT）数开始恢复时间较对照组均明显提前（分别为11 d和14 d）,且PLT最低值均高于对照组（分别为15.9%vs 8.1%,15.1%vs 8.1%,P﹤0.05）,28 d时rmIL-12 5和20μg/kg治疗组小鼠外周血PLT均升至照前值的85%,对照组为60%（P﹤0.05）。照射后14和28 d骨髓有核细胞集落培养结果提示rmIL-12治疗组CFU-GEMM均明显高于对照组（P﹤0.05）。结论 rmIL-12可明显促进急性放射病小鼠造血功能恢复。