超滤法结合高效液相色谱法测定藤黄酸在不同种属血浆中的血浆蛋白结合率

目的考察藤黄酸在小鼠、大鼠、家兔和健康人血浆中的血浆蛋白结合率。方法采用超滤法结合高效液相色谱法对藤黄酸与小鼠、大鼠、家兔和健康人血浆的蛋白结合率进行测定。结果藤黄酸在2.65、5.30和10.60 mg·L~(-1)浓度水平与小鼠的蛋白结合率分别为(34.72±2.58)%、(34.09±1.20)%和(33.96±1.25)%,与大鼠的蛋白结合率分别为(34.99±2.35)%、(35.42±2.18)%和(34.75±0.78)%,与家兔的蛋白结合率分别为(33.53±2.20)%、(35.35±1.01)%和(33.83±1.15)%,与健康人血浆的蛋白结合率分别为(34.42±2.28)%、(34.23±1.62)%和(34.62±2.70)%。结论藤黄酸在本实验研究浓度范围内与小鼠、大鼠、家兔和健康人血浆均属于低强度结合,不同种属血浆中各浓度的藤黄酸血浆蛋白结合率无显著差异,且藤黄酸蛋白结合率与药物浓度无明显依赖关系。     

超滤法测定药物血浆蛋白结合率的影响因素

目的:考察超滤法测定药物血浆蛋白结合率的影响因素.方法:采用紫外分光光度法测定在不同条件下用超滤法分离的游离药物浓度.结果:随超滤时间延长结合率略增;而超滤时所受压力增加结合率降低;不同型号的超滤膜对测定结果影响不同.结论:采用超滤法测定血浆蛋白结合率时,选择25＃-82膜,1200r/min,离心60min.作为超滤实验条件为宜.     

超滤法结合高效液相色谱法测定人血浆中伏立康唑蛋白结合率

目的：分别建立超滤法和溶剂萃取法处理样品,结合高效液相色谱（HPLC）法测定人血浆中伏立康唑游离型药物浓度C_u和总血药浓度C_t,并计算蛋白结合率。方法：游离型药物浓度采用Millipore Centrifree超滤装置前处理,以外标法测定;总血药浓度测定采用内标法,经蛋白沉淀、溶剂萃取、复溶后测定。结果：游离型药物浓度和总血药浓度的线性范围分别为0.20~12.64 μg·mL^-1和0.02~10.24 μg·mL^-1;游离型药物浓度和总血药浓度的准确度和精密度均在±15%范围内,ICU患者的伏立康唑血浆蛋白结合率为42.4%。结论：本方法前处理方法便捷,选择性强,准确度高,可用于人血浆中伏立康唑蛋白结合率的测定。     

HPLC-超滤法测定雷公藤红素与家兔、大鼠、人血浆的蛋白结合率

目的:测定雷公藤红素在家兔、大鼠和人血浆中的血浆蛋白结合率。方法:采用高效液相色谱(HPLC)-超滤法分离测定游离药物和血浆蛋白结合药物。以高效液相色谱法测定离体大鼠、家兔和人血浆中雷公藤红素含量,计算血浆蛋白结合率。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.2%甲酸(80∶20,V/V),检测波长为425 nm,流速为1.0 ml/min,进样量为10μl,柱温为40℃。结果:0.52、2.08、8.32 mg/L雷公藤红素在大鼠、家兔和人血浆中的检测质量浓度线性范围均为0.10~16.64 mg/L(r分别为0.999 5、0.999 6、0.999 5);血浆样品精密度试验的RSD均小于15%,在37、25、4℃下1 440 min内稳定性试验的RSD均小于5%。在0.52、2.08、8.32 mg/L质量浓度下雷公藤红素与人血浆的血浆蛋白结合率分别为84.62%、81.24%、83.14%,与大鼠的血浆蛋白结合率分别为79.44%、78.61%、78.15%,与家兔的血浆蛋白结合率分别为67.86%、68.71%、69.23%。结论:雷公藤红素的血浆蛋白结合率与其质量浓度无关;雷公藤红素与人的血浆蛋白结合率较高,其次为大鼠和家兔。     

超滤法测定脱氢卡维丁的血浆蛋白结合率

目的:测定脱氢卡维丁的血浆蛋白结合率。方法:采用超滤法和高效液相色谱法对脱氢卡维丁的血浆蛋白结合率进行测定。结果:脱氢卡维丁与牛血清白蛋白、人血浆和大鼠血浆的蛋白结合率分别为(22.91±1.40)%、(54.35±2.95)%及(52.11±2.31)%。结论:脱氢卡维丁与血浆蛋白具有较低强度的结合。     

超滤法测定伏立康唑的结合型药物浓度及血浆蛋白结合率

目的 建立一种测定伏立康唑结合型药物浓度和蛋白结合率的方法.方法 采用超滤法处理血浆样品,采用高效液相色谱法结合固相萃取法测定人血浆中伏立康唑的总药物浓度和结合型药物浓度,计算血浆蛋白结合率.结果 在总血浆药物浓度为0.1～10.0μg·mL-1范围内,伏立康唑血浆蛋白结合率为62.35％ ±5.62％,日内、日间精密...     

阿莫西林对格列美脲血浆蛋白结合率的影响

目的 研究阿莫西林对格列美脲蛋白结合率的影响。方法 采用平衡透析法结合高效液相色谱法，比较未加和加入阿莫西林后格列美脲的血浆蛋白结合率。结果 4种浓度下，单用格列美脲时的血浆蛋白结合率分别为94.2％、92.8％、91．4％、91．0％；与阿莫西林合用时，格列美脲的血浆蛋白结合率依次变为90．9％、89．0％、89．6％、90．0％。结论 与阿莫西林合用后，格列美脲的血浆蛋白结合率下降。     

HPLC测定人血浆中舒尼替尼浓度及其血浆蛋白结合率

目的采用HPLC测定人血浆中舒尼替尼浓度,并结合平衡透析法和超滤法测定舒尼替尼血浆蛋白结合率。方法采用WatersXBridgeTM C18色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-0.02mol·L^-1磷酸二氢钠(70∶30),流速1.0 mL·min^-1,检测波长310 nm。结果舒尼替尼在0.0575~34.5μg·mL^-1内线性关系良好,定量下限为0.0575μg·mL^-1;舒尼替尼在低、中、高3个浓度下平衡透析法测得的血浆蛋白结合率为(84.1±2.1)%,(81.0±1.8)%,(80.6±1.6)%,超滤法蛋白结合率分别为(80.8±1.7)%,(84.2±2.0)%,(82.6±2.2)%,2种方法结果比较接近。结论本方法简单、快速、灵敏,能满足分析要求。舒尼替尼与人血浆蛋白有较高的结合率,且蛋白结合率与浓度无关。     

HPLC法测定蝙蝠葛碱与大鼠和人血浆蛋白的结合率

目的:建立测定蝙蝠葛碱的高效液相色谱(HPLC)法,并研究蝙蝠葛碱与大鼠和人血浆蛋白的结合率。方法:采用平衡透析法,HPLC法测定蝙蝠葛碱的浓度,计算蝙蝠葛碱大鼠及人血浆蛋白结合率。结果:透析外液中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系;大鼠血浆中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系;人血浆中的蝙蝠葛碱检测浓度在0.24～15.10μg.mL-1范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系。蝙蝠葛碱在高、中、低浓度下,其大鼠血浆蛋白结合率分别为(69.63±1.30)%、(68.64±1.10)%、(72.54±0.50)%,人血浆蛋白结合率分别为(82.1±1.00)%、(84.96±0.70)%、(78.79±0.60)%。结论:HPLC法用于蝙蝠葛碱生物样品测定具有简便、灵敏与选择性高的特点;蝙蝠葛碱具有较强的血浆蛋白结合率,且大鼠和人血浆蛋白结合率具有种属差异性,人血浆蛋白结合率高于大鼠血浆蛋白结合率(P<0.05)。     

超滤法结合液质联用法测定姜黄素大鼠血浆蛋白结合率

目的建立液相色谱串联质谱（LC-MS）测定方法并检测姜黄素的大鼠血浆蛋白结合率。方法建立LC-MS检测方法,结合超滤法测定姜黄素的血浆蛋白结合率。结果3种浓度（100、300和1000ng·mL^-1）姜黄素与大鼠血浆蛋白结合率分别为（80．3±5．28）％、（75．3±4．45）％和（62．64—1．98）％。结论姜黄素血浆蛋白结合率较高,LC—MS可用于姜黄素血浆蛋白结合率的测定。     

Plasma protein binding of sulphadiazine, sulphamethoxazole and trimethoprim determined by ultrafiltration

The plasma protein binding of trimethoprim, sulphadiazine and sulphamethoxazole was studied at 37 degrees C by ultrafiltration. Plasma samples contained steady state levels of the drugs from ten volunteers from a cross-over comparative pharmacokinetic study on co-trimazine and co-trimoxazole. The three compounds were determined in plasma and ultrafiltrate by HPLC, the recoveries being close to 100% in each case. Freezing of spiked samples had no influence on the binding. Trimethoprim was 48.5-52.2% bound (mean 50.0%); sulphadiazine was 50.9-60.6% bound (mean 56.2%); and sulphamethoxazole was 74.3-80.8% bound (mean 76.9%). The significantly lower protein binding of sulphadiazine compared to sulphamethoxazole means that equivalent non-protein bound plasma levels of the two sulphonamides are achieved from smaller doses of co-trimazine than co-trimoxazole. Use of co-trimazine may thus minimize the risk of adverse reactions.     

超滤法结合UPLC测定抗601合剂中黄芩苷、绿原酸在不同血浆中的蛋白结合率

目的 超滤法结合超高效液相色谱（UPLC）法同时检测抗601合剂中2种指标性成分——黄芩苷、绿原酸体外血浆蛋白结合率。方法 建立UPLC法同时测定牛血清白蛋白（BSA）、大鼠空白血浆和正常人空白血浆超滤液中的黄芩苷、绿原酸含量,进行专属性、精密度、准确度、稳定性、超滤膜回收率等方法学考察;配制黄芩苷质量浓度分别为28.2、141.0、282.0 mg/L,绿原酸质量浓度为6.40、32.0、64.0 mg/L的抗601合剂溶液,分别与BSA溶液、大鼠空白血浆、人空白血浆混匀后,置于37℃水浴温育4 h,于超滤离心管中10 000 r/min离心20 min,取超滤液10 μL注入UPLC分析测定,计算超滤液中黄芩苷和绿原酸浓度及血浆蛋白结合率。结果 建立的UPLC法专属性、精密度、准确度、稳定性、超滤膜回收率均良好,能够满足定量分析测试要求;黄芩苷与BSA、大鼠空白血浆和正常人空白血浆的蛋白结合率分别为（73.70±1.65）%、（82.72±1.64）%、（87.33±1.84）%,绿原酸与3种血浆的蛋白结合率分别为（66.78±1.91）%、（74.18±2.01）%、（78.54±2.97）%,无浓度相关性,两成分与BSA溶液蛋白结合率显著低于与大鼠空白血浆、人空白血浆结合率（P<0.05）。结论 抗601合剂中的黄芩苷、绿原酸与不同种属血浆均有较高的蛋白结合率,在考察范围内无浓度相关性,归类于中速处置类药物,体内消除情况与其血浆蛋白结合率可能密切相关。     

盐酸去氢骆驼蓬碱血浆蛋白结合率的测定

目的:测定盐酸去氢骆驼蓬碱的血浆蛋白结合率.方法:采用超滤法和高效液相色谱法对盐酸去氢骆驼蓬碱的血浆蛋白结合率进行测定.结果:盐酸去氢骆驼蓬碱与小牛血清白蛋白、人血清白蛋白和正常人血浆的蛋白结合率分别为( 74.6 ± 9.8 )%、( 69.1 ± 8.7 )%、( 87.1 ± 5.3 )%.结论:盐酸去氢骆驼蓬碱与血浆蛋白具有中等强度的结合.     

2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的建立测定2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率的方法。方法采用平衡透析法对2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率进行HPLC测定。结果高、中、低3个浓度(2、4、8 mg.L-1)的2-甲氧基雌二醇血浆蛋白结合率分别为(85.2±3.4)%、(82.1±5.3)%、(83.0±5.2)%。结论该方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能满足生物样品分析要求。2-甲氧基雌二醇大鼠血浆蛋白结合率不具有浓度依赖性,使其临床用药具备较好的安全性。     

高效液相色谱法测定间尼索地平不同对映体在血浆中的蛋白结合率

目的:建立间尼索地平不同对映体在大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白中蛋白结合率的测定方法,并计算不同种属血浆蛋白的相关参数。方法:采用平衡透析法测定蛋白结合率,用高效液相色谱法测定血浆中药物总浓度及游离药物浓度。结果:R-与S-间尼索地平的血浆蛋白结合率分别为:大鼠血浆为(97.4±8.2)%、(93.0±13.4)%;人血浆为(90.8±10.5)%、(89.2±9.9)%;牛血清白蛋白为(95.3±8.7)%、(91.0±5.7)%。最低定量下限为0.01ng。结论:在体外间尼索地平不同对映体与大鼠血浆、人血浆和牛血清白蛋白结合率很高,R-间尼索地平的结合率及蛋白结合药物的表观最大能力βp均较S-间尼索地平高。随着药物血浆浓度升高,R-间尼索地平结合率下降,S-间尼索地平结合率升高,均有一定的浓度依赖性。     

白藜芦醇衍生物RT-B与大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的建立测定白藜芦醇衍生物RT—B与大鼠血浆蛋白结合率的方法。方法采用平衡透析法对RT-B与大鼠血浆蛋白结合率进行HPLC测定。结果低、中、高3种浓度下,RT-B的血浆蛋白结合率分别为(79.2±s 0.7)%,(80.1±0.9)%和(80.2±0.9)%。结论本方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能满足分析要求。RT-B与大鼠血浆蛋白的结合率较高。     

用HPLC法测定人血浆中野黄芩苷的蛋白质结合率

目的：建立人血浆中野黄芩苷的检测方法,测定野黄芩苷的蛋白质结合率。方法：用HPLC法测定血浆和透析液中野黄芩苷的浓度,用平衡透析法测定血浆蛋白质结合率,蛋白质结合率按B%=[（ct-cf）/ct]×100%计算。结果：正常人血浆中野黄芩苷浓度在0.05、0.5、5μg/L时的蛋白质结合率分别为（79.9±1.71）%（、82.0±1.02）%和（68.9±1.21）%。结论：野黄芩苷在0.05和0.5μg/L时,属于高度结合,但随着浓度升高,蛋白质结合率降低。     

氯化两面针碱人血浆蛋白结合率的测定

目的建立测定人血浆中氯化两面针碱的高效液相色谱法,并研究氯化两面针碱与人血浆蛋白的结合情况。方法离子对试剂萃取技术对样品进行预处理,乙腈-0.15%磷酸(36:64,V:V,用三乙胺调pH值至3.5)为流动相,C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm)为固定相,紫外检测波长271nm,以氯霉素为内标,采用平衡透析法对氯化两面针碱的人血浆蛋白结合率进行测定。结果氯化两面针碱与内标完全分离,样品中其他成份无干扰,在0.03188～2.040mg·L~(-1)范围内线性关系良好,低、中、高3种不同质量浓度的方法回收率>95%,日内、日间精密度均符合方法学要求。低、中、高3种药物浓度的血浆蛋白结合率分别为68.9%、67.4%、67.9%。结论方法简便、快速,结果准确、可靠,能满足生物样品分析要求。氯化两面针碱具有中等强度的蛋白结合率,蛋白结合率与透析液的药物浓度无关。