依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注损伤后氧化应激及凋亡的影响

目的:探讨依达拉奉(EDA)能否通过影响氧化应激和细胞凋亡与Wnt/β-catenin信号通路对脑缺血再灌注损伤(CIRI)发挥保护作用.方法:选取雄性SD大鼠75只,随机分5组,分别是:假手术组(sham)、大脑中动脉栓塞组(MCAO)、低剂量EDA治疗组(EDA-L)、中剂量EDA治疗组(EDA-M)和高剂量EDA...     

白花丹参对大鼠脑缺血再灌注致线粒体损伤及细胞凋亡的影响

目的:通过观察白花丹参对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑细胞线粒体超微结构、氧化应激功能及脑细胞凋亡的影响,探讨白花丹参对抗脑缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法:采用大脑中动脉内线栓阻断法(MCAO)造成局灶性脑缺血再灌注模型,将SD大鼠随机分为:假手术组、单纯脑缺血再灌注组、白花丹参组及丁苯酞治疗对照组,按照6.5g/kg BW白花丹参生药及15mg丁苯酞的剂量灌胃给药,每天1次,分别于再灌注后12h、24h及48h取损伤侧大脑,应用电镜观察脑细胞超微结构的改变、比色法检测脑组织线粒体丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化、流式细胞技术检测脑细胞凋亡率的变化。结果:脑缺血再灌注后大鼠脑细胞内出现大量高电子密度中毒颗粒及空泡,线粒体膜崩解、内嵴消失;MDA含量明显增高(P0.05);GSH-Px酶活性显著降低(P0.05);脑细胞大量凋亡。与脑缺血再灌注组比较,白花丹参能够减少细胞内高电子密度中毒颗粒及空泡,增强线粒体膜的稳定性,显著降低MDA含量(P0.05),延缓GSH-Px酶活性的下降并保护其活性(P0.05),显著降低脑细胞凋亡率(再灌注后24h及48h组,P0.05)。结论:白花丹参可减轻大鼠脑缺血再灌注所致线粒体损伤、延缓GSH-Px酶活性下降,抑制细胞凋亡,从而发挥脑保护作用。     

HOE642对心肌缺血再灌注损伤及细胞凋亡的影响

目的:探讨HOE642对缺血再灌注心肌的保护作用,其作用与给药时间的关系及其对缺血再灌注导致的细胞凋亡的影响。方法:以离体大鼠心脏缺血再灌注为模型,随机分成A、B两组,A组分缺血/复灌(I/R)、缺血前给药(HOE-Pr+I/R)、缺血期间给药(HOE-Is+I/R)、复灌期给药(HOE-Re+I/R)组,测定左室发展压、左室舒张末压、心律失常、心率、冠脉流量和心肌酶。B组分对照、I/R和HOE642+I/R组,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:HOE-Pr+I/R组在缺血复灌期间左室发展压明显高于I/R组,左室舒张末压、各时段心律失常评分低于I/R组,冠脉流出液心肌酶的含量也低于I/R组。HOE-Is+I/R组左室舒张末压、心律失常评分、冠脉流出液心肌酶的水平低于I/R组,左室发展压与I/R组比无明显差异。HOE642+I/R组的TUNEL阳性细胞数量显著低于I/R对照组(11.5±5.7vs51.8±15.2)。结论:HOE642对缺血再灌注心肌有保护作用,保护作用与给药时间有关,缺血前给药能充分发挥其心肌保护作用,抑制心肌细胞凋亡可能是其心肌保护作用机制之一。     

甘草酸二铵对大鼠心肌缺血再灌注损伤后细胞凋亡的影响

目的 :观察甘草酸二铵 (DG)对大鼠心肌缺血再灌注 (IR)损伤后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法 :雄性wistar大鼠2 4只 ,随机分为假手术组 ;IR组 ;DG组 ( 2 0mg/kg)。每组 8只。采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的带荧光的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法、westernblot法和免疫组化法检测大鼠心肌缺血 3 0min再灌注 6h心肌凋亡细胞及凋亡相关基因Bcl 2、Bax蛋白表达的变化。结果 :与假手术组比较 ,IR组心肌细胞凋亡指数 (AI)、Bax蛋白的阳性表达明显增加 (P均 <0 .0 1) ;与IR组比较 ,DG治疗后AI和Bax蛋白的阳性表达明显下降 (P <0 .0 1) ,而Bcl 2蛋白的阳性表达明显上调 (P <0 .0 1)。结论 :DG具有保护大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用 ,其作用机制可能与其下调Bax蛋白表达 ,上调Bcl 2蛋白表达抑制心肌细胞凋亡有关     

心肌ONOO- 改变对糖尿病大鼠缺血再灌注损伤及细胞凋亡的影响

 目的： 测定不同周期链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病大鼠心肌超氧亚硝酸根离子(ONOO-)改变及其对缺血/再灌注（I/R）损伤及细胞凋亡的影响。方法： 阻断和开放左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌I/R模型，用TTC染色，测定大鼠心肌I/R后梗死面积；用免疫印迹法定量分析代表心肌凋亡水平的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（caspase-3）的表达；形态测定（morphometric）法测定ONOO-生成的标志性产物硝基酪氨酸（NT）的水平。结果： 在STZ处理后2周糖尿病组(2WKD)心肌梗死面积35.00%±3.00%，明显小于相应周期对照组(2WKC)51.00%±3.30%，P<0.05；STZ 处理后16周糖尿病组(16WKD)，梗死面积61.00%±3.00%大于相应对照组(16WKC)50.00%±2.00%，P<0.05；在缺血再灌注后，caspase-3的表达,在 2WKD+I/R组（A值：481±77）小于2WKC+I/R组（A值：1 033±46），而16WKD+I/R 组（A值：1 206±78）caspase-3的表达高于16WKC+I/R 组（A值：940±72），P<0.05；硝基酪氨酸的水平在 2WKD 组（A值：211±13 ）明显低于2WKC组（A值：409±12），但在16WKD组（A值：506±37）则高于16WKC组（A值：378±46），P<0.05。结论： STZ诱导急、慢性期糖尿病对心肌I/R损伤和细胞凋亡的影响呈现相反的作用，这可能是由于急、慢性期糖尿病心肌相反的ONOO-水平而引起的。     

白细胞数量对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 :有文献报道心肌缺血再灌时 ,白细胞在缺血坏死心肌区的聚积是心肌缺血再灌注损伤的重要原因之一。在我们复习的有限文献范围内 ,尚未发现白细胞数量与缺血再灌注大鼠心功能和心梗范围相关性研究的直接报道。本文以白细胞减少症大鼠为模型求证两者间关系的直接证据。方法 :雄性ＳＤ大鼠 ,体重 2 0 0～ 2 50ｇ,以环磷酰胺腹腔注射 ( 60ｍｇ/ｋｇ体重 )复制白细胞减少症模型。大鼠麻醉后 ,气管插管行人工呼吸 ,左胸 4～ 5肋间开胸。在ＥＣＧ监测下 ,于左冠状动脉起始部下 1～ 2ｍｍ处双活结结扎左冠状动脉下降支复制缺血 ,松开活结行再灌…     

阿魏酸钠对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护

目的探讨阿魏酸钠对大鼠心肌缺血再灌注模型心肌功能的影响。方法选取60只7~8周龄[平均(7.26±0.36)周]SD大鼠,随机平均分为假手术组、心肌再灌注组以及阿魏酸钠组,每组20只;比较灌注后各组大鼠心肌功能指标的变化情况。结果与假手术组比较,再灌注组以及阿魏酸钠组的左室舒张末压(LVESP)、大鼠心室最大压力(±dp/dmax)显著下降,差异具有统计学意义(P0.05);再灌注2 h时LVESP、±dp/dmax的下降程度再灌注组明显高于阿魏酸钠组,差异具有统计学意义(P0.05);各组大鼠的LVEDP与假手术组比较,呈升高趋势,再灌注2 h后,阿魏酸钠组明显低于再灌注组,差异具有统计学意义(P0.05);与假手术组比较,再灌注组与阿魏酸钠组的大鼠凋亡细胞比例明显升高,阿魏酸钠组Fas阳性表达比例明显低于再灌注组,差异均具有统计学意义(P0.05);大鼠血液中LDH以及CK-MB的含量均明显升高,再灌注组明显高于阿魏酸钠组,差异具有统计学意义(P0.05);与假手术组比较,心肌再灌注组和阿魏酸钠组SOD含量明显降低,但阿魏酸钠组的降低程度低于再灌注组,差异具有统计学意义(P0.05);而MDA的含量却上升,但阿魏酸钠组的升高程度低于再灌注组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论阿魏酸钠在一定程度上可以恢复心肌再灌注模型大鼠心肌功能的损伤。     

参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响

目的通过在体实验初步探讨参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的防治作用及相关机制.方法通过结扎左冠状动脉前降支10min,松开丝线复灌15min,来复制大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的模型.结扎的同时经股静脉缓慢推注参麦注射液,观察参麦注射液对再灌注性心律失常的影响,并测定心肌组织匀浆中MDA的含量、SOD的活力、Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性.此外,还通过光镜和电镜来观察参麦注射液对再灌后心肌超微结构的影响.结果(1)模型组大鼠再灌注性心律失常的发生率为88.9%,持续时间为(142.8±73.4)s,参麦注射液可以使再灌注性心律失常的发生率降至33.3%,持续时间缩短至(31.7±20.1)s,两组之间有明显差异(P＜0.05).(2)模型组心肌组织匀浆SOD的活力为(27.287±3.449)×103NU/gprotein,参麦注射液治疗后SOD活力升高至(30.791±1.676)×103NU/gprotein,二者之间有显著差异(P＜0.05);模型组MDA的含量为(0.319±0.0515)μmol/gprotein,参麦注射液治疗组为(0.262±0.0472)μmol/gprotein,MDA的含量明显降低(P＜0.05).(3)模型组Na+,K+-ATP酶的活性为(0.3420±0.0391)mmolPi*g-1protein*h-1,参麦注射液治疗后其活性升高至(0.3950±0.0265)mmolPi*g-1protein*h-1,二者之间有显著差异(P＜0.01);模型组Ca2+-ATP酶的活性为(0.3450±0.0438)mmolPi*g-1protein*h-1,参麦注射液治疗组为(0.4270±0.0624)mmolPi*g-1protein*h-1,其活性明显升高(P＜0.01).(4)正常组和假手术组光镜显示心肌细胞排列整齐,横纹清晰,结构正常,电镜显示肌原纤维清晰,排列整齐,线粒体无肿胀,嵴密集,排列规则.模型组光镜显示心肌细胞排列紊乱,横纹不清晰,胞浆嗜酸性变,有明显的空泡变性,间质严重水肿,毛细血管内有红细胞淤积,电镜显示肌原纤维模糊不清,线粒体肿胀明显,嵴稀疏,排列紊乱.经参麦注射液治疗后,光镜显示心肌细胞排列整齐,横纹清晰,形态接近正常,电镜显示肌原纤维清晰,排列基本整齐,线粒体肿胀减轻,嵴排列也较规则.结论参麦注射液能降低再灌注性心律失常的发生率,提高心肌组织中SOD的活力,降低MDA的含量,提高Na+,K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶的活性,对缺血再灌注损伤引起的心肌超微结构的损伤有明显的保护作用.参麦注射液防治心肌缺血再灌注损伤的机制与增强机体清除氧自由基的能力,减轻脂质过氧化反应,拮抗自由基的毒性作用,维持离子泵的正常转运,减轻钙超载,从而维持了心肌细胞膜和线粒体的正常功能有关.     

参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:观察参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响,并探讨其作用机制。方法:结扎冠状动脉左前降支10min再灌15min复制大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型,描记标准肢体Ⅱ导联心电图,测定心肌组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性及丙二醛(MDA)含量,电镜观察心肌线粒体改变。结果:参麦注射液使再灌注性心律失常的发生率低于模型组、持续时间较短,心肌组织匀浆中SOD、Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性高于模型组,MDA的含量低于模型组,心肌线粒体损伤轻于模型组。结论:参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤有明显的防治作用,其机制与减轻氧自由基及钙超载损伤有关。     

丙泊酚联合贝那普利对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌损伤的保护作用及机制

目的 探究丙泊酚联合贝那普利对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌损伤的保护作用及机制。方法将40只SD大鼠随机分为假手术组（Sham）、心肌缺血再灌注损伤组（MIRI）、丙泊酚组（Propofol）、贝那普利组（Benazepril）和丙泊酚联合贝那普利组（Propofol+Benazepril）,每组8只。HE染色观察大鼠心肌病理损伤;ELISA方法检测大鼠血清心肌损伤标志物cTnl和CK-MB水平;TUNEL方法检测大鼠心肌细胞凋亡水平;ROS荧光探针检测大鼠心肌ROS水平;Western blot检测大鼠心肌凋亡相关蛋白CytC、Caspase-3和Caspase-9蛋白表达水平及FXR和SHP蛋白表达水平;qRT-PCR方法检测大鼠心肌FXR和SHP mRNA表达水平。结果 丙泊酚联合贝那普利改善心肌缺血再灌注大鼠心肌损伤,降低心肌损伤标志物水平,抑制心肌细胞凋亡并降低心肌细胞凋亡相关蛋白表达水平,降低心肌ROS水平并抑制心肌FXR和SHP mRNA和蛋白表达。结论 丙泊酚联合贝那普利降低心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌ROS水平,抑制心肌细胞凋亡,改善心肌损伤,这可能与其抑制FXR/SHP...     

缺血预适应对青年与老年大鼠缺血/再灌注心肌氧化应激及线粒体功能的影响

目的:探讨缺血预适应(ischemic preconditioning,IPC)对青年与老年大鼠缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,IR)心肌损伤的影响。方法:雄性3月龄(青年)与20月龄(老年)Wistar大鼠,应用离体心脏灌流方法复制心肌IR与IPC模型。实验分为青年缺血/再灌注(YIR)组、青年缺血预适应(YPC)组、老年缺血再灌注(OIR)组与老年缺血预适应(OPC)组。透射电镜观察心肌及心肌线粒体超微结构变化;TTC染色测定心肌梗死面积;比色法测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;酶联免疫吸附法测定心肌组织硝基化与羰基化蛋白质含量,TUNEL方法检测心肌细胞凋亡;氧电极法测定线粒体呼吸功能及钙诱导的线粒体渗透性转运孔开放情况。结果:与YIR组比较,YPC组心肌梗死面积明显减少,冠脉流出液中LDH活性降低,心肌组织的SOD活性增加,MDA含量降低,心肌硝基化与羰基化蛋白含量降低。电镜下可见YPC组心肌及分离的心肌线粒体膜结构完整、基质致密。YIR组心肌线粒体呼吸控制率与Ⅲ态耗氧量及P/O比值均明显增加,质子漏出减少,钙诱导的线粒体肿胀明显减轻,心肌细胞凋亡率下降。而与OIR组比较,OPC组上述指标均无显著统计学差异。与YPC组比较,OPC组心肌超微结构损伤明显增加,心肌氧化应激水平增加,线粒体呼吸功能下降,心肌细胞凋亡与坏死增多。结论:缺血预适应能够保护青年大鼠心肌缺血/再灌注损伤;而老年大鼠心脏对预适应刺激减敏,导致缺血预适应心肌保护作用钝化,这可能与老龄IPC心脏氧化应激水平增加导致线粒体损伤、细胞凋亡有关。     

益心口服液对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞内钙离子的影响

目的 :观察益心口服液对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞内钙离子的影响。方法 :( 1 )采用大鼠左冠状动脉前降支结扎、放松制造急性心肌缺血再灌注模型。动物分成正常组、假手术组、模型组、预处理组、益心口服液组、消心痛组 (各 1 0只 )。 ( 2 )心肌细胞内Ｃａ2 测定 :离体心脏挂于Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ上 ,用无钙的Ｋ -Ｈ液恒压灌流 5ｍｉｎ( 6～ 8ｍＬ/ｍｉｎ) ,然后用含 50 μｍｏｌ/ＬＣａＣｌ2 、0 1 %Ⅱ型胶原酶的Ｋ -Ｈ液恒压灌流 30ｍｉｎ ,取下心脏 ,剪去心房和大血管组织 ,用含 0 1 %Ⅱ型胶原酶、50 μｍｏｌ/ＬＣａＣｌ2 、1 …     

西洋参茎叶总皂苷对缺血/再灌注大鼠心肌线粒体膜电位及细胞凋亡的影响

 目的：研究西洋参茎叶总皂苷 (PQS) 对大鼠缺血/再灌注 (I/R) 损伤后心肌细胞凋亡的影响,并从线粒体膜电位 (ΔΨm) 及线粒体凋亡通路探讨其可能的机制。方法：健康雄性SD大鼠90只,随机分为假手术(sham)组、模型(I/R)组、PQS (200 mg·kg-1·d-1, 灌胃6周)+I/R组、环孢霉素A (CsA;10 mg·kg-1,再灌前10 min腹腔注射)组、CsA+I/R组和PQS+CsA+I/R组,各组n=15。除sham组和CsA组大鼠开胸后冠状动脉左前降支（LAD）下穿线不结扎外,其余各组大鼠常规麻醉后,结扎LAD 30 min,再灌注120 min复制I/R模型。生化分析仪测血清乳酸脱氢酶（LDH）含量,氯化三苯基四氮唑（TTC）和伊文思蓝双染法测心梗面积,原位缺口末端标记法（TUNEL）检测各组大鼠心肌细胞凋亡情况,Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白的表达。采用JC-1作为荧光探针,用激光共聚焦显微镜和荧光酶标仪测定ΔΨm水平。结果：与sham组比较,I/R组血清LDH活性、心梗面积和心肌细胞凋亡率均显著升高（P<0.05）;与I/R组相比,PQS+I/R组、CsA+I/R组和PQS+CsA+I/R组血清LDH活性、心梗面积和心肌细胞凋亡率均显著降低（P<0.05）。Western blotting结果显示,与sham组相比,I/R组心肌Bcl-2蛋白表达量降低,Bax、胞浆cytochrome C和cleaved caspase-3升高（均P<0.05）;与I/R组相比,PQS+I/R组、CsA+I/R组和PQS+CsA+I/R组心肌Bcl-2蛋白表达量升高,Bax、胞浆cytochrome C及心肌cleaved caspase-3蛋白表达量均降低（P<0.05）。激光共聚焦显微镜观察结果示,I/R组线粒体JC-1染色后红色荧光强度减弱,荧光酶标仪测相对荧光单位（RFU） 较sham组降低（P<0.05）;PQS+I/R组、CsA+I/R组和PQS+CsA+I/R组RFU均较I/R组升高（P<0.05）。结论：PQS显著降低大鼠I/R后心肌细胞损伤,减少细胞凋亡,其机制与维持再灌注期ΔΨm稳定、抑制线粒体凋亡通路的激活有关。     

心肌缺血后处理减轻大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及超微结构损伤

缺血预处理(ischemic preconditioning)是减轻缺血/再灌注损伤最有效的方法.Zhao等[1]最近提出的缺血后处理,即心肌缺血后再灌注前反复短暂开通及再闭冠脉,与缺血预处理一样可降低心肌梗死范围及心肌酶释放,但其对心肌细胞凋亡及超微结构的影响国内、外报道较少,尚未见同时从亚细胞水平及细胞凋亡改变评价的报道.     

丙泊酚对大鼠肾缺血/再灌注损伤细胞凋亡信号通路的影响

目的探讨丙泊酚对大鼠肾缺血/再灌注损伤细胞凋亡通路的影响及可能的作用机制。方法建立大鼠肾缺血/再灌注损伤模型,将动物分为对照(Con)组、缺血再灌注(IR)组、缺血再灌注 丙泊酚(IR P)组。观察损伤肾的形态学改变,用免疫组织化学观察细胞凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、caspase3和细胞色素C(cytochrome C)的表达情况。结果光镜可观察到肾缺血/再灌注引起的肾损害,损害程度依次为近曲小管、远曲小管、集合管、肾小球;免疫组化图像分析观察到IR组与Con组相比,BAX、caspase3,细胞色素C表达增加,BCL-2表达未见明显变化;IR P组与IR组比较,前者BAX、caspase3和细胞色素C表达下降,BCL-2表达增高(P<0·05)。结论丙泊酚对肾缺血/再灌注损伤引起的细胞凋亡可能具有保护作用,可能机制是抑制促凋亡蛋白BAX、caspase3和细胞色素C的表达,对BCL-2的表达无影响,与细胞凋亡的线粒体通路途径有关。     

丹参素对大鼠心肌缺血/再灌注致线粒体变化的影响

离体大鼠心Langendorft灌流模型,随机分四组,分别为对照组(有氧灌注40分钟);缺血组(停止灌注40分钟);再灌注组(停止灌流40分钟后有氧灌注20分钟);丹参素组(预先用含有4×10~(-6)g/ml丹参素的灌流液灌注后进行缺血/再灌注)。每组6只大鼠。     

高脂血症对心肌缺血再灌注损伤的影响

高脂血症是诱导缺血性心脏疾病发生发展的主要危险因素之一,除诱导动脉粥样硬化外,高脂血症还能直接导致心肌中氧化应激、炎症、凋亡增加及线粒体功能障碍等负面影响。高脂血症会丧失缺血预适应和后适应心肌保护作用,至少包括一氧化氮合酶功能减低,再灌注挽救激酶信号通路钝化,线粒体KATP开放通道和MPTP调节受损以及凋亡通路激活等参与其中的调节。     

山莨菪碱对沙鼠脑再灌注损伤的影响

山莨菪碱广泛用于抗中毒性休克和其它疾病的治疗。本文用蒙古沙土鼠复制脑缺血再灌注损伤模型,观察山莨菪碱时脑再灌注损伤的超微结构改变和自由基水平变化的影响。     

线粒体通透性转换孔与心肌缺血再灌注损伤

<正>线粒体通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)是位于线粒体内、外膜之间的非特异性孔道,是由多种线粒体蛋白构成的复合体。目前,国内外研究已经证实,MPTP开放所引起的线粒体通透性变化在细胞凋亡过程中发挥了重要作用[1]。随着研究的深入,人们发现缺血、缺氧、氧化应激等刺激因素都可能引起MPTP开放,使线粒体通透性发生改