真武定风汤联合MTX治疗类风湿性关节炎的临床观察

目的：观察真武定风汤辅助治疗类风湿性关节炎（RA）活动期的初步疗效。方法：筛选活动期RA患者60例，随机分为治疗组40例，口服真武定风汤、甲氨喋呤（MTX），对照组20例，口服MTX，用量、用法同治疗组，结果：治疗组总有效率97．5％、临床控显率95．0％，分别与对照组总有效率60．0％、临床控显率20．0％比较差异均有显著性（x^2=11．91、32.23、7.67、P＜0.01）。治疗组在减轻关节肿胀、疼痛，改善关节功能，降低免疫学指标方面均优于对照组（P＜0.05或P＜0.01）。结论：真武定风汤具有抗炎镇痛、调节免疫反应的作用。     

类风湿性关节炎的免疫学检测方法进展

类风湿关节炎（RA）是一种以关节滑膜炎为特征,以慢性多发性关节炎为主要临床表现的一种全身免疫性疾病。现对RA免疫学的抗原抗体检测作一综述。     

Ⅱ型胶原对关节炎大鼠免疫功能的影响

目的体外实验研究Ⅱ型胶原（CⅡ）对关节炎大鼠和正常大鼠免疫功能的影响,探讨CⅡ的免疫调节作用。方法建立大鼠胶原型关节炎模型,体外实验研究CⅡ对关节炎大鼠和正常大鼠淋巴细胞增殖反应、自然杀伤细胞（NK细胞）杀伤活性以及淋巴细胞亚群的影响。结果CⅡ在体外实验中表现为低浓度促进而高浓度抑制大鼠淋巴细胞增殖的作用,对NK细胞杀伤活性、淋巴细胞亚群无影响。结论CⅡ对关节炎大鼠有一定的免疫调节作用。     

金雀异黄素对CIA大鼠炎症及细胞因子影响的研究

目的 研究金雀异黄素（Gen）对类风湿关节炎（RA）动物模型CIA大鼠炎症及细胞因子的作用.方法 采用Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型;通过Gen和/或MTX治疗后检测CIA大鼠关节炎指数（AI）评分和后肢容积,摄取大鼠关节X线片;观察大鼠关节病理学改变; Western Blot法检测血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达.结果 CIA大鼠造模成功; Gen治疗组、MTX治疗组及Gen＋MTX治疗组大鼠炎症反应较模型对照组减轻,血清中IL-1β、TNF-α表达明显降低（P〈0.05）, Gen＋MTX治疗组的效果更佳.结论 Gen能够降低CIA大鼠炎症反应,减缓关节炎病情进展,可能是通过抑制IL-1β、TNF-α的表达而发挥抗炎作用.     

雷公藤内酯醇对胶原诱导关节炎大鼠外周血清和关节腔中细胞因子水平的干预

背景：雷公藤具有抗炎、免疫抑制等作用，目前已被用于治疗类风湿关节炎等多种自身免疫性疾病。其化学成分复杂，其中雷公藤内酯醇被公认为是雷公藤中重要的有效成分之一。 目的：建立Ⅱ型胶原诱导的关节炎大鼠模型，观察雷公藤内酯醇对其外周血清和关节腔中白细胞介素6、白细胞介素10以及肿瘤坏死因子α含量的影响。 设计：随机对照动物实验。单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合科。 材料：实验于2004-11／2005—07在武汉同济医院完成。选取清洁级健康雄性Wistar大白鼠50只（购于华中科技大学同济医学院实验动物中心，动物质量合格证号：scxk（鄂）2004—2007）。雷公藤内酯醇（购于福建省医学科学研究所，临时生产无批号），纯度为98．5％以上。 方法：①50只大鼠随机数字表法选10只作为正常对照组，其余建立关节炎模型。沿造模大鼠背部及尾根部分5点皮内注射Ⅱ型胶原乳剂，0．05mL/点，15d后分两点皮内激发注射。正常对照组予以生理盐水同法注射。初次免疫30d后参照关节炎指数评分标准对造模效果进行评估，共20只大鼠评分在6分以上成功造模而用于实验，随机数字表法分为关节炎模型组、雷公藤内酯醇组，10只／组。②将雷公藤内酯醇用体积分数为0．05的丙二醇配制成注射液，其中含雷公藤内酯醇100mg／L，雷公藤内酯醇组按0．04mL／100g后腿肌注给药，每3d用药1次，共30d。正常对照组给予等量生理盐水，关节炎模型组给予等量的体积分数为0.05的丙二醇液。③给药30d后取材，采用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清和膝关节腔液中白细胞介素6，10以及肿瘤坏死因子α的含量。 主要观察指标：雷公藤内酯醇对外周血和关节腔液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6，10含量的影响。 结果：实验选取清洁级雄性Wistar大鼠50只，10只作为正常对照，剩余40只大鼠共20只造模成功而进入结果分析。①关节炎模型组外周血和关节腔内的肿瘤坏死因子α含量最高，经雷公藤内酯醇治疗后均明显下降[（35．09&;#177;8．82），（15．35&;#177;3．56）ng／L；（44．17&;#177;8．94），（22．54&;#177;4．76）ng／L；P均＜0．011，且与正常对照组基本相似（P＞0．05）。②关节炎模型组外周血和关节腔内的白细胞介素6含量最高，经雷公藤内酯醇治疗后均明显下降[（76．58&;#177;6．81），（42．45&;#177;5．72）ng／L；（88．69&;#177;10．56），（48．67&;#177;5．97）ng／L；P均＜0．01]，但未能达到正常对照组水平（P＜0．05）。③关节炎模型组外周血和关节腔内的白细胞介素10含量最低，经雷公藤内酯醇治疗后均明显升高[（17．53&;#177;2．07），（21．23&;#177;2．91）ng／L；（10．59&;#177;2．96），（14．74&;#177;1．85）ng／L；P均＜0．01]，且与正常对照组基本相似（P＞0．05）。 结论：雷公藤内酯醇可能通过对细胞因子含量的调节治疗关节炎。     

三七总皂苷对佐剂性关节炎大鼠的保护作用及机制研究

目的:探讨三七总皂苷(PNS)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的保护作用及可能机制。方法:以弗氏完全佐剂(FCA)制备AA大鼠模型,于造模第12天起,给药组分别灌胃给予相应的受试药物,疗程12d。足容积法测量大鼠继发侧足肿胀度;放免法测定血清白细胞介素IL-1、IL-6、肿瘤坏死因子TNF-α含量;HE染色法检测大鼠关节病理组织学改变;RT-PCR法检测AA大鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)中TNF-αmRNA的表达。结果:PNS(100,200mg.kg-1)能明显抑制AA大鼠继发性足肿胀,改善关节病理损伤程度,降低血清IL-1、IL-6、TNF-α的含量,同时抑制PMΦ中TNF-αmRNA的表达。结论:PNS对AA大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与调节细胞因子的产生有关。     

金丝桃苷对胶原诱导性关节炎小鼠的治疗作用

目的 观察金丝桃苷(hyperoside,Hyp)对胶原诱导性关节炎小鼠(CIA)的治疗作用.方法 将DBA/1小鼠随机分为正常对照组10只,模型组35只,模型组在第0天及第21天分别给予牛Ⅱ型胶原与弗氏完全佐剂的乳化剂,制备CIA模型.第31天正常对照组随机选取8只,模型组进一步随机分组为模型对照组,金丝桃苷25 m...     

巨核细胞的免疫学研究

巨核细胞的免疫学作用鲜被研究,本研究观察巨核细胞的粘附分子和细胞因子表达,以及细胞因子与巨核细胞的相互作用,以了解巨核细胞的免疫学作用。使用流式细胞术,ＥＬＩＳＡ和免疫组化方法,分析粘附分子ＣＤ３６在血小板、骨髓巨核细胞和巨核细胞株（Ｍｅｇ－０１,Ｄａｍｉ,ＣＨＲＦ－２８８－１１和Ｍ－０７ｅ）的表达;使用ＲＴ－ＰＣＲ方法,检测白细胞介素１（ＩＬ－１）至白细胞介素１０（ＩＬ－１０）,ＴＮＦ－α,ＴＮ     

丙酮酸乙酯对大鼠自身免疫性关节炎的治疗作用

目的观察丙酮酸乙酯对自身免疫性关节炎（CIA）大鼠关节炎症、骨质破坏及血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素10（IL-10）表达水平的影响,探讨其治疗类风湿关节炎的可能机制.方法实验大鼠分为正常对照组、CIA模型组和丙酮酸乙酯（EP）治疗组.用关节炎指数评价关节炎肿胀程度、HE染色、检测关节滑膜炎症及骨质破坏、酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清TNF-α、IL-10浓度.结果 EP治疗组关节炎指数明显低于CIA模型组（P〈0.05）,EP治疗组炎性细胞渗出及骨质破坏明显低于CIA模型组（P〈0.05）,EP治疗组血清TNF-α水平较CIA模型组明显降低而IL-10水平明显升高（P〈0.05）.结论丙酮酸乙酯能减轻大鼠关节炎症、骨质破坏,能降低血清TNF-α表达水平、提高IL-10表达水平,表明丙酮酸乙酯有望成为治疗类风湿关节炎（RA）的一种新药.     

甲氨蝶呤对大鼠输卵管雌孕激素受体的影响

目的观察不同剂量甲氨蝶呤（MTX）对假孕SD大鼠输卵管雌孕激素受体的损伤,探讨MTX治疗后对后续妊娠的潜在影响,为临床使用甲氨蝶呤保守治疗异位妊娠提供理性的合理选择。方法40只SD雌性大鼠,致假孕状态后再MTX腹腔注射,随机分为1m/kg组、2mg／kg组、5m/kg组及对照组（腹腔注射生理盐水）,10d后处死各组大鼠,取双侧输卵管壶腹部组织,进行雌、孕激素受体的免疫组化染色。结果ER阳性表达率在不同剂量组的差异具均有统计学意义（P〈0．05）,表现为随着MTX剂量的增加,ER阳性表达下降。PR在MTX处理各组输卵管黏膜上皮中的表达与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MTX可损伤输卵管雌激素受体,且损伤效应存在一定的量-效关系,提示临床中使用MTX保守治疗异位妊娠时,应减少剂量,否则可能会造成后续的再次异位妊娠或继发不孕。     

沙利度胺及氨甲蝶呤抗CIA大鼠滑膜血管新生及其作用机制的研究

目的研究沙利度胺、氨甲蝶呤对大鼠Ⅱ型胶原诱导型关节炎血管新生的影响及相关的机制。方法建立类风湿性关节炎大鼠模型.自造模次日治疗组分别给予沙利度胺、甲氨蝶呤和沙利度胺联合甲氨蝶呤治疗,在第6周取膝关节应用免疫组化检测其滑膜的微血管密度(MVD),取血清进行Western Blot检测大鼠体内血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-1、2、3、9的表达并计算相对含量。结果①免疫组织化学染色显示沙利度胺、氨甲蝶呤和沙利度胺联合氨甲蝶呤治疗模型大鼠可使关节滑膜中新生血管数量明显减少.微血管密度(MVD)明显降低(P<0.05).以沙利度胺联合氨甲蝶呤组作用最强。②沙利度胺、氨甲蝶呤和沙利度胺联合氨甲蝶呤可抑制VEGF、MMP-1、2、3、9表达(P均<0.05)。结论沙利度胺和氨甲蝶呤可能通过抑制VEGF,MMP-1、2、3、9的表达而发挥抗滑膜血管新生的作用,且两者有协同作用。     

甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎患者的护理

介绍了甲氨蝶呤(MTX)治疗类风湿关节炎的护理措施(包括心理护理、饮食护理、运动干预、MTX用药期间的观察和注意事项).医护人员应熟悉其药物作用机理、正确的用药方法 及注意事项,并对患者进行正确的护理干预的护理措施,从而保证MTX的治疗效果.     

通痹灵对于胶原诱导型关节炎大鼠关节炎及骨质破坏的影响

目的研究通痹灵对于胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠关节炎以及骨质破坏的影响。方法采用CIA大鼠动物模型,容积法测量足肿胀度,血小板计数,整体X线片分析骨质破坏情况。结果通痹灵高剂量明显减轻CIA大鼠的关节炎所致的足肿胀和降低血小板总数(P<0.05),通痹灵高剂量和甲氨喋呤高剂量可抑制CIA大鼠骨质破坏(P<0.05)。结论通痹灵可通过降低CIA大鼠血小板总数,减轻关节的炎症,并且具有抑制骨质破坏的作用。     

Levofloxacin treatment in patients with rheumatoid arthritis receiving methotrexate

BACKGROUND: Sulfasalazine and tetracyclines are effective against rheumatoid arthritis (RA). Levofloxacin, the bacteriologically active isomer of ofloxacin, is used in the treatment of infections caused by periodontopathic bacteria and facultative anaerobic bacteria. The aim of this study is to evaluate the clinical efficacy, safety, and tolerability of levofloxacin in patients with rheumatoid arthritis. METHODS: In a 6-month, double-blind trial, we randomly assigned 76 patients with persistently active rheumatoid arthritis despite at least 6 months of methotrexate therapy at a stable dose of 15 to 25 mg per week to receive either levofloxacin (500 mg) or placebo orally once daily while continuing to receive methotrexate. The change from baseline to six months in the swollen-joint count and tender-joint count was the primary measure of efficacy. Secondary endpoints included pain, quality of life, duration of morning stiffness, erythrocyte sedimentation rate, C-reactive protein level, and physician's and patient's global assessments. The data were also analyzed to determine the number of patients meeting American College of Rheumatology criteria for 20, 50, and 70% improvement. RESULTS: The levofloxacin plus methotrexate was associated with the greatest reduction in the number of swollen or tender joints (P < 0.001). The levofloxacin plus methotrexate group also had significant improvement in many of the secondary outcome measures (P < 0.001). Levofloxacin was well tolerated. There were no dose-limiting toxic effects. CONCLUSION: In patients with active rheumatoid arthritis who received methotrexate, treatment with levofloxacin significantly improved the signs and symptoms of rheumatoid arthritis.     

Psoriatic arthritis: combined treatment with prospidin and methotrexate

AIM: To compare clinical efficacy of methotrexate monotherapy and methotrexate combination with prospidin in patients with psoriatic arthritis (PA). MATERIAL AND METHODS: Sixty three patients (42 females and 21 males) with documented PA, generalized articular syndrome of the second-third degree of activity were divided into two groups. Patients of group 1 (n = 30) received combined therapy (i.v. prospidin 200-300 mg/week + i.m. methotrexate 10 mg/week). Maintenance consisted of prospidin in a dose 100-200 mg/week i.m., methotrexate dose was the same. Patients of group 2 (n = 33) were given methotrexate monotherapy in a dose 10 mg/ week i.m. RESULTS: In the first three months of the study and in maintenance therapy, combined treatment was more effective. By ACR criteria, 50-70% response was achieved after 12 months of treatment in 44 and 27.3% patients of groups 1 and 2, respectively. The number of side effects and drug-related withdrawals was 23.3 and 36.4%, 10 and 15.1% in groups 1 and 2, respectively. CONCLUSION: Combination of methotrexate with prospidin produced an earlier and more potent positive clinical effect than methotrexate alone in PA patients.     

HPLC determination of erythrocyte methotrexate polyglutamates after low-dose methotrexate therapy in patients with rheumatoid arthritis

BACKGROUND: Methotrexate (MTX) may produce antiarthritic effects through polyglutamation to methotrexate polyglutamates (MTXPGs), a process that covalently attaches sequential gamma-linked glutamic residues to MTX. We sought to develop an innovative HPLC method for the quantification of these metabolites in erythrocytes. METHODS: Two alternative approaches were developed. In the first approach, MTXPGs from 50 micro L of packed erythrocytes were converted to MTX in the presence of plasma gamma-glutamyl hydrolase and mercaptoethanol at 37 degrees C. In the second approach, MTXPG species (up to the hepta order of glutamation) from 100 micro L packed erythrocytes were directly quantified in a single run. In both methods, the MTXPGs were extracted from the biological matrix by a simple perchloric acid deproteinization step with direct injection of the extract into the HPLC. The chromatography used a C(18) reversed-phase column, an ammonium acetate/acetonitrile buffer, and postcolumn photo-oxidation of MTXPGs to fluorescent analytes. RESULTS: Intra- and interday imprecision (CVs) were <10% at low and high concentrations of analytes for both methods. The limit of quantification was 5 nmol/L. In 70 patients with rheumatoid arthritis receiving weekly low-dose MTX, the mean (SD) total MTXPG concentration measured after conversion of MTXPGs to MTX was similar to the total MTXPG concentration calculated from the sum of individual MTXPG species [117 (56) vs 120 (59) nmol/L; r = 0.97; slope = 1.0]. The triglutamate predominated over all other MTXPG species (36% of total), the pentaglutamate was the highest order of glutamation detected, and a stability study revealed no change in the polyglutamation pattern in erythrocytes 48 h after phlebotomy when the specimen was stored at 2-8 degrees C. CONCLUSION: The proposed method for quantification of erythrocyte MTXPGs is rapid, sensitive, and accurate and can be applied to the routine monitoring of MTX therapy.