HPLC-荧光法测定肾移植患者血浆中霉酚酸的浓度

目的:建立以高效液相色谱-荧光法测定肾移植患者血浆中霉酚酸浓度的方法。方法:样品用5%硫酸锌的甲醇饱和溶液沉淀蛋白后,取上清液进样20μL进行测定,色谱柱为Zorbax Eclipse XDBC18,流动相为乙腈-甲醇-0.2mol·L-1甘氨酸缓冲液(pH9.0)=18∶2∶80,柱温为25℃,流速为1.0mL·min-1,激发波长(EX)为342nm,发射波长(EM)为425nm。结果:霉酚酸血药浓度在0.5～40mg·L-1范围内线性关系良好,最低定量限为0.5mg·L-1;方法回收率为98.23%～101.00%,萃取回收率为91.56%～94.46%,日内、日间RSD分别为0.64%～3.22%和5.12%～6.10%。结论:本方法灵敏、快速、准确、方便,可用于霉酚酸的血药浓度测定。     

高效液相色谱法测定肾移植患者血浆中霉酚酸浓度

目的:建立霉酚酸(MPA)血浆浓度测定的高效液相色谱法.方法:采用SHIMADZU Shim-pack vp-ODS(4.6mm×1 50mm,5 μm)色谱柱;流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(pH 3.3)(34∶66);柱温为35℃;流速为1.2 mL·min-1;检测波长为250nm.结果:MPA在0.16～20.48 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 5,n=8),最低检测限度为0.16 mg·L-1,方法回收率为98.44%～106.64%,日内、日间RSD分别为0.79%～3.11%和2.34%～8.60%.结论:此法灵敏、快速、准确,特异性好,可用于MPA血药浓度监测.     

高效液相色谱法测定肾移植患者血浆中霉酚酸浓度

目的:建立霉酚酸(MPA)血浆浓度测定的高效液相色谱法。方法:采用SHIMADZUShim-packvp-ODS(4.6mm×200mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-0.05%磷酸(34∶66);柱温:30℃;流速:1.0mL.min-1;检测波长:216nm。结果:MPA在0.25～16mg.L-1范围内线性关系良好(r=0.9999,n=7),最低检测质量浓度为0.25mg.L-1,方法回收率为96.00%,101.00%,104.13%,日内、日间RSD分别为3.4%,1.70%,3.40%和6.4%,2.34%,6.40%。结论:此法灵敏、快速、准确,特异性强,可用于MPA血药浓度监测。     

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中霉酚酸浓度

目的:建立测定人血浆中霉酚酸浓度的液相色谱-串联质谱法。方法:以托吡酯为内标,待测血浆用甲基叔丁基醚萃取后,采用ZORBAX SB-C18色谱柱(50 mm×4.6 mm,5μm),以0.01 mol.L-1醋酸铵溶液-甲醇梯度洗脱以多反应离子监测,扫描模式进行HPLC-MS/MS分析。结果:血浆中无干扰测定的内源性物质;霉酚酸在19.91~14 934 ng.mL-1范围内与内标物峰面积之比线性关系良好,定量下限为19.91 ng.mL-1。提取回收率为77.8%~83.6%。结论:该方法简便、准确、灵敏度高、专属性强,适用于人血浆中霉酚酸的测定。     

HPLC法测定肾移植患者的血浆霉酚酸浓度

目的建立霉酚酸(MPA)血浆浓度测定的反相高效液相色谱法。方法采用Aglient 1100高效液相色谱仪,AglientZORBAX Eclipse XDB C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈∶磷酸三乙胺缓冲液(pH=4.0,40∶60);柱温45℃;流速1 mL.min-1;样品用90%乙腈作蛋白沉淀剂沉淀后,取上清液进样40μL;检测波长218 nm。结果标准曲线的线性范围为0.3~30 mg.L-1,最低检测浓度为0.3 mg.L-1,方法回收率为97.11%~106.67%,日内、日间RSD分别为0.65%~4.02%和0.56%~5.84%。结论本工作建立了一种灵敏、快速、准确、方便的MPA血药浓度测定方法。     

高效液相色谱法测定人血浆中霉酚酸的浓度

目的建立用高效液相色谱测定人血浆中霉酚酸浓度的方法。方法采用SUPELCOSIL C18色谱柱（4.6mm×250 mm,5μm） 流动相：乙腈-0.01 mol.L-1磷酸二氢钾（pH=3.0）溶液（40∶60,v/v） 流速：1.0mL.min-1 检测波长：254 nm。结果霉酚酸在0.4~51.2 mg.L-1线性关系良好（r=0.999 3）,最低检测浓度为0.4 mg.L-1,霉酚酸低、中、高浓度检测的日内、日间RSD分别为2.22%、5.15%、4.13%和1.75%、6.75%、3.35%。结论该法具有操作简便可靠、准确、稳定性高等特点,适合应用于霉酚酸的治疗药物监测和药动学研究。     

高效液相色谱-荧光检测法测定人血浆中洛美沙星的浓度

目的：建立用高效液相色谱-荧光检测法（HPLC-FLU）测定人血浆中洛美沙星的浓度。方法血浆样品经甲醇沉淀后,以甲醇-磷酸二氢钾缓冲液（pH：2.8,35：65, v/v）为流动相,流速为1.0 ml/min,色谱柱为BaiAn-C18（4.6×150 mm,5μm）,柱温为25℃,荧光检测波长λex=280 nm,λem=455 nm。结果血浆内源性杂质不干扰待测物测定,洛美沙星在0.10-10.04μg/ml有良好线性关系（r=0.9995）,定量下限为0.10μg/ml,日内、日间精密度（RSD）均小于10%,样品稳定性良好。结论该法灵敏、快速、简便,适合用于洛美沙星的药动学研究。     

高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中阿昔洛韦浓度

目的:测定人血浆中阿昔洛韦的浓度。方法:采用高效液相色谱荧光法检测,色谱柱为ODS-3(DIKMA150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.02mol·L-1高氯酸-甲醇(450∶8),流速为1.0mL·min-1,检测波长为λex=260nm,λem=375nm。结果:阿昔洛韦的提取回收率大于96%,方法回收率为(98.4±3.7)%,日内RSD≤5.7%,日间RSD≤6.6%。结论:本方法准确可靠,可用于阿昔洛韦体内血药浓度测定。     

反相高效液相色谱-荧光法测定血浆中丙泊酚的浓度

目的 :建立反相高效液相色谱 -荧光检测法测定血浆中丙泊酚浓度的方法。方法 :采用ZorbaxEclipseXDB -C18 色谱柱(150mm×4 6mm ,5μm) ,甲醇 -乙腈 -0 005mol/L醋酸钠缓冲液 (pH4 0)=55∶20∶25(V/V)为流动相 ,样品提取分离后用流动相溶解 ,在Ex/Em=276/310nm波长处检测。结果:本法测定的标准曲线在0 015625～8μg/ml浓度范围内线性关系良好(r=0 9998) ,灵敏度为1ng/ml(S/N=3) ,最低检测浓度为10ng/ml,绝对回收率在89 33 %～93 37 %之间 ,方法回收率在97 75 %～103 31 %之间 ,日内、日间变异系数分别为1 38 %～5 02 %、4 45 %～9 056 %。结论 :用本方法检测丙泊酚的血药浓度方便、稳定、灵敏度高 ,可满足临床药动学研究要求     

高效液相色谱-荧光法测定人血浆中西酞普兰含量

目的:建立快速灵敏的高效液相色谱-荧光检测法测定西酞普兰的血药浓度。方法:血浆样品加入内标(右美沙芬)后用乙醚提取,乙醚层经空气流吹干后用流动相定容,以40μL 进样。色谱柱为 Kromasil KR100-5 C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相采用0.05 mol·L~(-1),pH=4.23的磷酸二氢钠缓冲液-乙腈(63:37),流速为0.6 mL·min~(-1),荧光激发波长为240 nm,发射波长300 nm,内标法定量。结果:本法的最低定量浓度为1.3 ng·mL~(-1),在1.3～260 ng·mL~(-1)浓度范围内线性良好,r=0.9999。日内精密度为1.1%～2.3%,日间精密度为1.7%～4.0%,萃取回收率为84.4%～88.3%,准确度为86.2%～95.6%,整个分析过程在15 min 内完成。结论:该法准确、精密度高、重现性好,适用于人血浆中西酞普兰的动力学研究和生物等效性研究。     

HPLC法测定肾移植患者血浆中霉酚酸的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定霉酚酸血药浓度的方法,并研究其在中国肾移植患者体内的多剂量药动学特征。方法:血浆采用乙腈蛋白沉淀后进样。其中,色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-10mmol·L-1KH2PO4(5∶6),流速为1.1mL·min-1,检测波长为254nm,柱温为40℃。此方法应用于测定12例肾移植患者的多剂量药动学。结果:色谱中霉酚酸与内标分离良好,血浆中的内源性杂质无干扰。霉酚酸检测浓度在0.38~59.00μg·mL-1范围内线性关系良好,最低检测限为0.38μg·mL-1;回收率为89.32%~97.63%,日内、日间RSD均<8.00%。药动学结果显示患者服用霉酚酸酯后,霉酚酸的药动学个体差异较大,与文献报道基本一致。结论:本方法结果准确,操作简便,适合于霉酚酸的药动学研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中麦考酚酸的浓度

目的:建立人血浆中麦考酚酸(MPA)含量的高效液相色谱法(HPLC法),并用该方法对肾移植患者血浆中的浓度进行测定。方法:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%三氟乙酸(40∶60),流速为1.0 mL.min-1,柱温为35℃,紫外检测波长为215 nm,血样用乙腈沉淀蛋白法进行处理。结果:麦考酚酸浓度在0.20～49.96μg.mL-1(r=0.999 6)范围内线性关系良好,最小检测浓度为0.20μg.mL-1,平均回收率均>90%,提取回收率>100%,批间和批内RSD<15%。结论:本方法准确、简便、重现性好,可用于麦考酚酸的血药浓度监测及药动学研究。     

HPLC法同时测定人血浆中霉酚酸与霉酚酸葡糖苷酸的浓度

目的:建立以高效液相色谱法同时测定人血浆中霉酚酸(MPA)与霉酚酸葡糖苷酸(MPAG)浓度的方法。方法:色谱柱为LunaC18,流动相为(20mmol·L-1磷酸二氢钾+40mmol·L-1四丁基溴化铵(pH5·5))-乙腈=73:27,流速为1·6mL·min-1,MPA与MPAG采用二极管阵列检测器和荧光检测器串联检测,MPAG检测波长为250nm,MPA荧光检测波长为316nm(激发波长)、430nm(发射波长),柱温为38℃,其中血样加乙腈沉淀蛋白后进样10μL。结果:MPA、MPAG检测浓度分别在0·2～20(r=0·9993)、1～100(r=0·9999)μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,最低检测限分别为0·05、0·1μg·mL-1;平均回收率分别为95·54%、100·22%;MPA日内、日间RSD均<6%,MPAG日内、日间RSD均<4%。结论:本方法快捷、简便、灵敏,可用于测定人血浆中MPA与MPAG的浓度。     

RP—HPLC法测定肾移植病人血浆中霉酚酸浓度及其应用

目的:建立反相高效液相色谱法测定血浆中霉酚酸浓度的方法。方法:采用美国Waters高效液相色谱仪,Symmetry C18(150mm×3.9mm,5μm)色谱柱,乙腈-0,05％磷酸(34:66)为流动相,流速1.0 mL·min-1,萘普生作内标。样品在酸性条件下用氯仿漩涡混合萃取浓集后手动进样,在254 nm波长下检测,按内标法定量。结果:标准曲线在0.1-40 mg·L-1范围内有良好线性,最低检测浓度为0.1 mg·L-1,方法回收率为98.3％-100.4％,萃取回收率为88.1％-92.4％,日内测定RSD为0.98％-1.5％,日间测定RSD为1.0％-4.4％。结论:本方法可用于肾移植患者霉酚酸的血药浓度测定和药动学研究。     

有限采样法监测肾移植受者血浆麦考酚酸浓度

目的：研究肾移植患者麦考酚酸体内药动学过程,并建立有限采样法估算AUC0-12的模型。方法：建立HPLC法测定人血浆中麦考酚酸的方法。考察9例肾移植患者服用麦考酚酸酯500mg,bid,达稳态后测定服药前和服药后0．5,1,1．5,2,3,4,6,8,10,12h的麦考酚酸浓度,用DAS1．0软件拟合药动学过程,并用SPSS软件采用多元线性回归分别拟合单个或2—4个采血点拟舍有限采样法估算麦考酚酸AUC0-12的回归方程及相关系数。结果：采用本文建立的方法对多点血药浓度进行测定,主要药动学参数为Cmax（24．31±17．79）μg·ml^-1,tmax（0．56±0．17）h,AUC0-12（30．82±11．63）μg·h·ml^-1。有限采样法拟合AUC0-12,其中0．5,1．5,6h和0．5,1,6h3点拟合的回归方程与实测AUC（1-12的相关性较好,其复相关系数分别为0．9807和0．9724,两者平均预测误差分别为（0．21±6．06）％、（-11．19—8．78）％和（0．64±7．63）％、（-12．53-13．37）％。结论：麦考酚酸药动学个体差异较大。本文拟合的3点预测麦考酚酸AUCo。简化计算公式能较好地反映其药一时曲线下面积,适合应用于环孢素与麦考酚酸酯合用的中国肾移植受者的治疗药物监测     

HPLC法测定人血浆中霉酚酸的浓度及药动学研究

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中霉酚酸浓度的方法,并对其在人体内的药动学参数进行研究。方法:霉酚酸血浆样品经甲醇沉淀后直接进样测定,其中色谱柱为Symmetry Shield C18,流动相为乙腈-水-三乙胺(40∶60∶0.3),流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,测定波长为218nm,进样量为20μL。结果:霉酚酸检测浓度在0.2~50mg·L-1范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.9996),定量下限为0.2mg·L-1;平均方法回收率为101.94%,平均提取回收率为87.06%;日内、日间RSD均<6%。另,人体药动学研究表明,霉酚酸在体内存在肠肝循环导致双峰出现,人体过程符合单室开放模型。结论:本方法简便、灵敏、专一、准确、精密,可用于霉酚酸的药动学研究。     

Bayesian反馈法估算肾移植患者环孢素A的血药浓度

目的:应用Bayesian反馈法估算肾移植患者环孢素A的血药浓度,制定、优化个体化给药方案。方法:用荧光偏振免疫分析法测定肾移植患者环孢素A的血药浓度。以实测血药浓度作为反馈,用Bayesian反馈法拟合估算肾移植患者环孢素A的血药浓度,并与实测值进行比较。结果:实测血药浓度值与估算血药浓度值之间无显著性差异(P>0.05)。结论:利用Bayesian反馈法估算肾移植患者环孢素A的血药浓度与实测血药浓度相近,可用于预测血药浓度及优化个体化给药方案。     

存活7年以上肾移植患者环孢素A血药浓度监测资料分析

目的:为临床安全、合理应用环孢素A(CsA)提供参考。方法:采用荧光偏振免疫法测定91例存活7年以上肾移植患者2291例/次的CsA血药浓度,分析术后时间、性别、年龄等因素与CsA血药浓度的关系。结果:CsA血药浓度随术后时间的延长而逐渐下降,且个体差异大;男性、女性2组CsA血药浓度差异无统计学意义(P>0.05);与中、青年组比较,老年组患者的血药浓度在同一时间段内差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:监测CsA血药浓度,可防止免疫过度、不足和药物毒性,从而提高移植肾的长期存活率。     

霉酚酸在肾移植患者中有限采样法监测方案的探讨

目的：研究临床应用的霉酚酸（MPA）类药物霉酚酸酯（MMF）和霉酚酸钠肠溶片（EC-MPS）在肾移植患者中的药代动力学特征,确定两者浓度曲线下面积的有限采样监测方案。方法：76例患者均接受MPA、他克莫司、激素的三联免疫抑制方案。其中33例接受MMF治疗,43例接受EC-MPS治疗。采用EMIT法测定服药前及服药后0.5、1、1.5、2、4、6、8、10、12 h的血浆MPA浓度,梯形法计算MPA的AUC0-12h,多元线性回归分析用于计算简化 AUC 拟合方程,以SPSS 21软件进行临床资料的统计分析。结果：MMF组和EC-MPS组个体间C0、Cmax、Tmax变异度大,且两组的Cmax、Tmax有显著性差异。多元线性回归分析得出4点估算 AUCMMF=1.133+6.643C0+1.130C1+1.540C2+2.689C4,r2 = 0.947;4点估算 AUCEC-MPS=-1.360+2.164C2+2.315C4+2.569C6+4.324C8,r2 = 0.944。结论：MMF和 EC-MPS 药代动力学参数个体差异大,研究确定的有限采样监测方案适用于临床肾移植患者配伍他克莫司时AUC的监测。但考虑到影响MPA暴露量和药效的因素众多且不易控制,因此考察应继续加大样本量,探索准确的临床监测指标,从而为临床精准使用MPA提供新策略。