急性脑血管病患者血清中一氧化氮和一氧化氮合酶含量变化

目的观察脑血管病患者急性期及恢复期血清中一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的含量,以及两者间的关系,以探求NO和NOS在急性脑血管病中的作用。方法应用硝酸盐还原酶法测定NO。NOS测定是根据体内L-精氨酸`经NOS催化下与氧反应生成NO和胍氨酸的原理,用每毫升血清每分钟生成1nmolNO为一个酶活力单位来表示。结果脑血管病患者急性期组血清NO和NOS水平明显水高于恢复期组及对照组,NO与NOS呈正相关;脑梗死恢复期组NO无明显变化,而NOS降低,NO与NOS相关性不显著。结论脑血管病患者急性期血清NO和NOS含量的升高,促进了疾病的发生和发展。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织中NO、NOS变化及雷公藤多甙的影响

目的 观察大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)活性的变化及雷公藤多甙(GTW)对其的影响。方法 用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注动物模型，灌胃法给药，硝酸银还原法测定NO含量。结果 脑缺血再灌注损伤后，大鼠脑组织中NOS活性、NO含量随时间延长而进行性升高，GTW能抑制NOS活性的升高，减少NO的产生。结论 GTW可能对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用。     

铅对大鼠海马和大脑皮质NOS活性的影响

目的 观察实验性铅中毒对大鼠海马和大脑皮质一氧化氮合酶（NOS）性的影响，探讨NOS在铅中毒中枢系统损害中的作用机制。方法 4周龄Wistar雄性大鼠按45mg/kg剂量行醋酸铅灌胃30d；大鼠海马和大脑皮质总NOS和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性测定采用NOS催化L-Arg和氧分子生成NO法。结果 与空白对照纽大鼠比较，染铅组大鼠海马和大脑皮质总NOS活性明显降低，而iNOS活性均升高，差异有显著性（P〈0．01）。结论 铅可以使大鼠海马和大脑皮质总NOS活性降低，iNOS活性升高。     

组织器官及培养细胞一氧化氮合酶活性测定

一氧化氮合酶（NOS）有重要的病理生理功能，组织器官及培养细胎NOS活性测定是其主要研究手段之一。NOS活性测定可分为分分光度法和同位素法，前者依反应原理不同又可分为三种．NOS活性测定的样品制备要使用多种蛋白酶抑制剂，如不使用，则应尽快测定。同位素法规定NOS活性可不制备细胞提取物。     

一氧化碳中毒血浆一氧化氮及其合成酶含量的动态观察

目的 检测一氧化氮（NO）及其合成酶（NOS）在急性一氧化碳（CO）中毒后急性期血浆中的变化，探讨其临床意义。方法 采用检测NO的中间代谢产物亚硝酸盐来反映NO及放射强度测定法测定NOS活性，分别测定CO中毒后急性期血浆NO和NOS变化，并行健康对照。结果 26例急性CO中毒病人血清NO及NOS较对照组明显降低，中毒后第1天开始降低，第3天后开始慢慢恢复，至第10天仍低于正常。结论 NO和NOS参与了CO中毒的病理生理过程，动态观察提示NO可能和CO中毒病情程度有关。     

酶双循环法测定一氧化氮合酶活性实验条件探讨

目的运用W ang法与酶双循环法联合测定血清中一氧化氮合酶(NOS)活性。方法先改良W ang法测定NOS活性的实验条件,再探讨W ang法与酶双循环法偶联的实验条件,比较酶双循环前后检测物性质。结果总NOS(tNOS)测定试剂由20 mmol/L L-精氨酸、25μmol/L还原型辅酶Ⅱ(NADPH H )、50.0μmol/LCaC l2、45.0μmol/L二硫苏糖醇(DTT)、36.0μmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)、1.8μmol/L苯甲磺酰氯(PMSF)、80μmol/L尼克酰胺、1μg/m l钙调蛋白(CalM)和10μg/m l蛋白酶抑制剂Antipain组成。以上试剂添加诱导性NOS(iNOS)抑制剂NW-硝基-D-精氨酸用于测定结构型NOS(cNOS)。对NOS生成的氧化型辅酶Ⅱ(NADP )采用酶双循环产物6-磷酸葡萄糖酸(6PG)脱氢生成的大量NADPH H ,其放大倍数约为70~80倍。结论酶双循环法提高了测定NOS的灵敏度。     

NO,NOS的性质及检测方法

HumphreyDavy在1935年研究“笑气”（N2O）时发现了一氧化氮（nitrieoxide，NO）。从此NO一直被视为对生物有毒的简单无机分子，自1992年被CCience杂志评选为该年度明星分子以来，大量NO文章在国内外各有名杂志上争相发表，论述NO在心血管调节、神经调节、免疫调节和性行为调节等方面的重要生物作用。NO合成酸是NO生成的关键因素，其活性强弱直接影响NO的生成量，因此它是研究NO生理功能不可分割的指标。但到目前为止还有很多问题没有搞清。故NO及NOS成为近几年人们研究的热点，NO及NOS测定则是探讨及研究NO及NOS的生物学作…     

酶双循环法测定一氧化氮合酶活性实验条件探讨

目的运用Wang法与酶双循环法联合测定血清中一氧化氮合酶（NOS）活性。方法先改良Wang法测定NOS活性的实验条件，再探讨Wang法与酶双循环法偶联的实验条件，比较酶双循环前后检测物性质。结果总NOS（tNOS）测定试剂由20mmol／L L-精氨酸、25μmol／L还原型辅酶Ⅱ（NADPH＋H^＋）、50．0μmol／LCaCl2、45．0μmol／L二硫苏糖醇（DTT）、36．0μmol／L乙二胺四乙酸（EDTA）、1．8μmol／L苯甲磺酰氯（PMSF）、80μmol／L尼克酰胺、1μg／ml钙调蛋白（CalM）和10μg/ml蛋白酶抑制剂Antipain组成。以上试剂添加诱导性NOS（iNOS）抑制剂N^W-硝基-D-精氨酸用于测定结构型NOS（cNOS）。对NOS生成的氧化型辅酶Ⅱ（NADP^＋）采用酶双循环产物6-磷酸葡萄糖酸（6PG）脱氢生成的大量NADPH＋H^＋，其放大倍数约为70～80倍。结论酶双循环法提高了测定NOS的灵敏度。     

失血性休克再灌注大鼠血液NO、NOS的改变和丹参的作用

目的探讨失血性休克再灌注大鼠血液中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)含量的变化及丹参对其的影响。方法健康SD大鼠30只,随机平分成正常对照组(NC组)、失血性休克再灌注组(HS-R组)和丹参治疗组(SM组)。分别测定三组血清NO、NOS含量。结果与NC组相比较,HS-R组血清NO、NOS含量明显增高(P<0.01)。SM组的血清NO、NOS含量明显低于HS-R组(P<0.01)。结论失血性休克再灌注时NOS大量激活,使NO产生增多,NO介导了失血性休克再灌注损伤,大量释放的NO参与休克再灌注损伤的脂质过氧化反应;丹参通过减少NO的生成,抗脂质过氧化反应而发挥其保护作用。     

同型半胱氨酸影响妊娠晚期孕妇血小板功能的探讨

目的观察同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）对妊娠晚期孕妇的血浆中血小板L—arg/NO系统功能的影响。并探讨Hey对血小板机制的损伤。方法选择妊娠晚期孕妇的血浆32例，采用放射性核素3H—L—arg标记法，分别测定妊娠晚期孕妇（对_照组）及经同型半胱氨酸孵育过（Hcy组）的血小板内L-arg转运、NOS的活性，比色法测定血小板内N0含量。结果经Hey组的血小板L—arg转运为（3．244-0．82）pmol／108ptunfin-1，对照组的血浆中血小板L—arg转运为（5．12±1．75）pmol／108ptumln—1（P〈0．01）；在Aeh刺激下，NOS活性明显提高，但Hey组提高的程度明显低于对照组（P〈0．01）；在Ach刺激下，NO生成及cGMP含量明显提高（P〈0．01），但Hcy组仍明显低于对照组（P〈0．05）。结论同型半胱氨酸影响血小板L—arg的转运，使NOS的活性降低，血小板内NO水平降低，同型半胱氨酸损伤血小板L—arg／NOS／NO系统。     

大黄素对鼠脑爆震伤一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

目的:观察鼠颅脑爆震伤后脑组织中一氧化氮(NO)浓度和一氧化氮合酶(NOS)活性的变化及大黄素对伤后NO浓度和NOS活性的影响.方法:模拟鼠颅脑爆炸伤模型,大黄素组腹腔注射大黄素(10 mg/kg),伤后2、4、12、24 h测定脑组织NO浓度和NOS活性.结果:伤后各组动物脑组织NO含量和NOS活性均显著升高,与正常对照组差异显著;大黄素组各时相NO含量和NOS活性均明显低于模型组;大黄素组NO含量和NOS活性动态变化呈显著正相关.结论:大黄素可降低颅脑爆炸伤大鼠脑组织中NO浓度和NOS活性,对大鼠颅脑爆炸伤有保护作用.     

一氧化氮与肝硬化

生物体内的一氧化氮(NO)是由机体多种细胞合成,可作用于多种组织器官,引起多种病理、生理效应,是一种新型的细胞内信使和神经递质,亦是强烈的血管舒张因子。近年研究发现,NO与肝脏疾病存在一定关系。随着对NO研究的不断深入,NO在肝硬化的病理机制中所起的作用被揭示。 1 肝硬化时NO在肝脏的诱导合成 NO是在一氧化氮合成酶(NOS)催化L-精氨酸(L-arg)转变成胍氨酸时合成的。NOS广泛存在于多种细胞中,它有两种类型:一种为结构型NOS(CNOS),其活性依赖于钙/钙调节蛋白(Ca~(2+)/CaM),存在于脑、周围神经、血管内皮等处;另一种为诱导型NOS(iNOS),它不依赖于Ca~(2+)/CaM,在内毒素或细胞因子的诱导下活化,产生大量NO,参与各种病理生理过程。两种酶均可被L-arg的类似物,如N-硝基-L-精氨酸(NNA),N-甲酰-     

丹参酮ⅡA对鼠脑缺血再灌注损伤一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的 探讨丹参酮ⅡA(Tan ⅡA)对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织及血清中一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的影响.方法 40只Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、Tan Ⅱ A低剂量治疗组和TanⅡA高剂量治疗组,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型.Tan Ⅱ A高、低剂量治疗组于术前连续灌胃给予高、低剂量Tan Ⅱ A 3 d,每天1次.各组于脑缺血90 min再灌注24 h进行HE染色观察病理形态学变化,检测脑组织和血清中NO含量和NOS、iNOS活性.结果 Tan Ⅱ A高、低剂量治疗组脑组织缺血损伤病理学改变轻于缺血再灌注组,Tan ⅡA高剂量治疗组缺血改变轻于低剂量治疗组.与假手术组比较,缺血再灌注组脑组织和血清中NO含量和NOS、iNOS活性明显升高;与缺血再灌注组比较,Tan Ⅱ A高、低剂量治疗组脑组织和血清中NO含量和NOS、iNOS活性均降低,高、低剂量组之间有显著性差异(P《0.05).结论 Tan Ⅱ A可减轻神经元损伤程度,对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能与可降低NOS、iNOS活性,减少NO含量有关.     

NO和NOS对缺血性脑中风神经元保护作用的实验研究

目的：研究NO和NOS对缺血性脑中风神经元的保护作用。方法：采用栓线法制作大鼠局灶性脑缺血损伤模型（MCAO）。120只wistar大鼠随机分成6组：空白组，假损伤组，模型组，中药高剂量组，中药低剂量组，西药对照组，每组20只。均连续灌胃7天后，实施手术。结果：与模型组比较，空白组和假损伤组大鼠大脑皮层组织NO含量和NOS活性明显低于模型组（P〈0．01），而空白组与假损伤组比较（P〉0．05）。说明栓线法制备MCAO模型对NO含量无影响。中药低剂量组与模型组比较（P〈0．01），对照组与模型组比较（P〈0.05），对照组与中药高剂量组比较（P〉0．05）。说明加减地黄饮子低剂量能降低脑缺血大鼠大脑皮层组织的NOS活性，使NO生成和释放减少，作用强于西药对照和中药高剂量。结论：加减地黄饮子可降低局灶性脑缺血大鼠脑组织NOS活性，减少NO的生成和释放。其脑保护作用机制可能与减轻NO介导的神经毒性作用有关。     

急性一氧化碳中毒大鼠小脑组织一氧化氮及一氧化氮合酶活性的变化

目的 :研究急性一氧化碳 (CO)中毒大鼠小脑组织中一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)活性的变化 ,以探讨NO、NOS与急性CO中毒脑损伤的关系。方法 :实验用Wistar大鼠 2 6只 ,随机分为两组 :正常对照组 (C组 ) ,CO染毒组 (CO组 )。采用改良的Griess法、分光光度法分别测定小脑组织中NO、NOS活性。结果 :CO中毒后小脑组织中NO明显增高 (P <0 0 5 ) ,NOS活性明显降低 (P <0 0 1)。结论 :急性CO中毒脑组织损伤与小脑组织中NOS活性受抑制、NO含量增高有关。     

NO生理病理及临床应用研究进展

1 NO生理 NO是一种重要的信使分子,半衰期短(几秒)、易扩散、小分子气体;(Lcit—为胍氨酸,NOS为NO合成酶,CaM为钙调蛋白),在体内是这样生成的:     

吡格列酮活化的PPAR-γ对Th1/Th2细胞失衡影响机制的研究

目的 探讨吡格列酮活化的PPAR-γ对Jurkat T细胞NO/NOS表达的影响,分析其与调节Th1/Th2细胞失衡之间具体的作用机制.方法 RT-PCR检测PPAR-γ mRNA的表达,硝酸还原酶法测量NO含量,按照一氧化氮合酶测定试剂盒说明书对NOS活性进行检测.结果 在Jurkat系T细胞内,PPAR-γ活化剂能够以时间依赖的形式增加NO生成,PPAR-γ活化剂能够以相同的方式增加NOS活性.结论 PPAR-γ激动剂吡格列酮可通过NO/NOS途径来发挥相应的生物学功能.     

复发性口疮患者血清NO及NOS的检测意义

目的：探讨血清一氧化氧（NO），一氧化氮合酶（NOS）在复发性口疮（RAU）发作期和缓解期的变化及临床意义。方法：选取243例RAU患者，采用化学比色法测定不同发病阶段的血清NO、NOS浓度。结果：复发性口疮患者发作期NO、NOS水平明显升高（P〈0．01）缓解期NO、NOS水平呈下降趋势（P〈0．05）。结论：复发性口疮发生发展的不同阶段NO、NOS呈动态变化，过多的NO含量及NOS活性增加与发病密切相关。     

肝硬化门脉高压大鼠组织中一氧化氮合酶分布及其活性研究

目的 探讨一氧化氮（NO）与门脉高压症的关系。方法 采用四氯化碳（CCl4）复制肝硬化模型成功后，用NADPA黄递酶组织化学染色方法观察一氧化氮合酶（NOS）在肝组织、腹主动脉中的分布，并比较其活性。结果 NADPH黄递酶组织化学染色法证实NOS主要分布于细胞、肝血管内皮、腹主动脉内皮及血管平滑肌细胞中，实验组总体NOS活性高于血管平滑肌细胞中，实验组总体NOS活性高于对照组。结论 NO参与门脉高压及其高动力循环状态的发生。     

千斤拔对高脂血症大鼠一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的观察千斤拔总黄酮对实验性高脂血症大鼠血脂、一氧化氮及一氧化氮合酶的影响。方法建立高脂血症大鼠模型,千斤拔总黄酮连续灌胃4周,测定血清中TC、TG、HDL-c、LDL-c、NO含量及NOS活性。结果千斤拔总黄酮能明显降低TC、TG、LDL-c含量,NO含量增加,NOS活性升高。结论千斤拔总黄酮能调节高脂血症大鼠血脂代谢,纠正NO代谢紊乱。