枸杞多糖对实验性食管癌大鼠食管癌细胞的生长抑制作用

目的探讨枸杞多糖对实验性食管癌大鼠的食管癌细胞生长的抑制作用及其意义。方法经皮下注射Eca109细胞建立实验性食管癌大鼠动物模型,通过灌胃治疗给药检测枸杞多糖的抗食管癌作用。观察不同浓度枸杞多糖对食管癌生长的抑制作用。结果枸杞多糖经灌胃治疗食管癌大鼠后,对肿瘤生长呈浓度及时间依赖性抑制。与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。肿瘤生长抑制率达64.1%。结论枸杞多糖对实验性食管癌大鼠的食管癌细胞生长有明显的抑制作用。     

核黄素对人食管癌细胞株生长增殖的影响

[目的]采用细胞培养的方法研究核黄素对人食管癌细胞株生长增殖的影响,探讨核黄素营养水平与食管癌的关系。[方法]常规培养人食管癌细胞株Eca109细胞。(1)用不同浓度的核黄素作用于细胞株,MTT比色法测定Eca109细胞的增殖活性,计算细胞增殖率。(2)采用流式细胞仪法测定核黄素作用Eca109细胞后细胞周期的改变。(3)免疫组织化学法测定核黄素对Eca109细胞作用24 h Cyclin D1蛋白表达的影响。(4)HE染色以观察核黄素作用24 h对Eca109细胞的分化影响。[结果](1)不同浓度的核黄素作用于Eca109细胞后,其增殖率未见明显变化。(2)核黄素的加入使Eca109的细胞周期改变,出现G2/M期阻滞,但不促进其凋亡。(3)核黄素处理24 h后,经过免疫组化测定,食管癌细胞Cyclin D1蛋白表达无降低,与阴、阳性对照组相比差异均无统计学意义(P﹥0.05)。(4)HE染色观察各浓度组细胞形态形态无明显改变。[结论]核黄素不会影响食管癌Eca109的增殖,但可能将细胞阻滞在M期。     

山楂原花青素诱导食管癌Eca109细胞凋亡的分子机制研究

目的探讨山楂原花青素诱导食管癌Eca109细胞凋亡的分子机制。方法常规培养食管癌Eca109细胞系并分为二甲基亚砜(DMSO)对照组和不同浓度的山楂原花青素实验组;细胞活性(cell counting kit-8,CCK-8)法检测山楂原花青素对Eca109细胞的抑制率;荧光共振能量转移(FRET)法观察山楂原花青素与细胞表面受体形成的异源二聚体的数量;Western blot法分别检测ERK5磷酸化程度和Bax、caspase-3蛋白表达水平;Annexin V-FITC/PI法检测食管癌细胞凋亡率。结果不同浓度的山楂原花青素培养Eca109细胞72h时,IC50约为275μg/ml,因此选用275μg/ml作为实验剂量;山楂原花青素与细胞表面受体形成的异源二聚体的数量呈时间依赖性,24h数量明显增多(P0.05);ERK5磷酸化程度随着时间的延长逐渐增强(P0.05),于36h和48h活性明显增强(P0.01);Eca109细胞的凋亡率随着时间的推移越来越高,72 h已达48.1%(P0.05);Bax和caspase-3蛋白表达在山楂原花青素的作用下,于48h表达最强(P0.01)。结论山楂原花青素可促进食管癌Eca109细胞的凋亡进程。     

miR-21对食管癌细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响

目的:探讨miR-21对食管癌细胞增殖及凋亡影响与分子机制.方法:将食管癌细胞分成miR-21-NC组、miR-21组、LY294002组、LY294002+miR-21组、对照组5组,检测miR-21表达情况及食管癌细胞系中PI3K、Akt与p-Akt表达情况.结果:食管癌细胞系的miR-21相对表达量明显高于正常食...     

硒蛋氨酸对食管癌细胞株增殖的影响

本研究的目的是观察硒蛋氨酸对体外培养食管癌细胞系(EC9706)生长的影响，以探讨其对食管癌的防治作用。     

金雀异黄酮对结肠癌细胞HT-29增殖及凋亡的影响

目的观察植物雌激素金雀异黄酮(GS)对人结肠癌细胞HT-29增殖及凋亡的影响,并初步探讨其分子生物学作用机制。方法采用MTT比色法和流式细胞术检测GS对HT-29细胞增殖活力和细胞周期分布的影响;CellDeathELISA和流式细胞术从不同方面检测GS对HT-29细胞凋亡的影响;RT-PCR和Western-blot技术检测GS对核增殖抗原PCNA、bcl-2和baxmRNA和蛋白质表达的影响。结果与对照组相比,在15~120μmol/L浓度范围内,GS能够抑制HT-29细胞增殖活力;降低S细胞分布比例,将细胞周期滞留在G2/M期;显著性诱导HT-29细胞凋亡(>30μmol/L,P<0.05),并呈现出良好的剂量-效应关系。检测GS对PCNA、bcl-2和bax表达的影响显示,GS能够抑制PCNA和bcl-2mRNA和蛋白质表达,对bax的表达则表现出促进作用。结论GS通过诱导HT-29细胞凋亡而抑制其增殖活力,这些效应与PCNA、bcl-2和bax的表达变化有关。这些资料可为结肠癌的早期预防提供膳食干预新途径,并为临床新药的开发提供新方案。     

蛇葡萄素对大肠癌细胞株SW480增殖、凋亡的影响

目的研究蛇葡萄素在体外对人大肠癌细胞株SW480增殖及凋亡的影响。方法采用不同浓度的蛇葡萄素处理SW480细胞后,利用MTT法检测细胞活性,TUNEL法检测细胞凋亡,Western-blot检测Bcl-2蛋白水平。结果不同浓度的蛇葡萄素均能抑制SW480的细胞的增殖,低浓度与高、中浓度组对细胞增殖抑制情况有显著性差异(p<0.05),而中、高浓度组间无显著性差异(p>0.05)。低、中、高浓度蛇葡萄素均能有效诱导SW480细胞凋亡,低浓度与高、中浓度组对细胞诱导效果有显著性差异(p<0.05),而中、高浓度组间无显著性差异(p>0.05),Western-blot显示Bcl-xL的表达显著下调(p<0.05);Bax、Bid、Caspase-3、p-Capase-9及Caspase-9的表达显著上调(p<0.05)。结论蛇葡萄素能抑制结肠癌SW480细胞增殖,诱导其凋亡,其对凋亡的诱导作用主要是通过Bcl-2家族蛋白实现的。     

亚硒酸钠对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及hTERT表达的影响

目的探讨亚硒酸钠对人胃癌SGC-7901细胞株生长、凋亡和hTERT表达的作用及相关机制。方法用含不同浓度亚硒酸钠(0、0.5、2.5、5.0、8.0μmol/L)的培养液培养SGC-7901细胞24、48、72、96h,用相差显微镜观察亚硒酸钠对SGC-7901细胞形态的影响;MTT法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞增殖的影响;AnnexinV-FITC/PI双染法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞细胞的凋亡的影响;链霉亲和素-生物素-酶复合物(SABC)免疫细胞化学法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞hTERT蛋白表达的影响。结果 (1)MTT法结果显示:用亚硒酸钠培养SGC-7901细胞株24,48,72,96h后,随浓度增加,吸光度值逐渐降低,24h后当亚硒酸钠浓度大于2.5μmol/L时,与对照组比较其吸光度值均明显降低(P<0.01),48、96h后各浓度亚硒酸钠组与正常对照组比其吸光度值均明显降低(P<0.01)。随浓度的增加,亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长抑制率逐渐增加。(2)流式细胞仪检测结果显示:亚硒酸钠可促进SGC-7901细胞发生细胞凋亡。5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组比正常对照组凋亡率明显升高(P<0.01)。(3)免疫细胞化学法检测结果显示:亚硒酸钠可降低SGC-7901细胞中hTERT蛋白免疫细胞化学染色的平均光密度(MOD),24h时5、8μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),48h时0.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),72h时2.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),96h时实验组与对照组比较MOD均明显降低(P<0.01)。结论亚硒酸钠能抑制SGC-7901细胞生长,诱导其凋亡,其作用机制可能与下调hTERT表达有关。     

miRNA-21靶向作用于maspin及其对胆管癌细胞增殖、凋亡的影响

目的通过抑制miRNA-21的表达观察对胆管癌细胞株增殖、凋亡的影响,并探讨miRNA-21可能调控的靶基因。方法以人胆管癌细胞RBE细胞为研究对象,根据处理方法不同,细胞分为四组：正常细胞组、脂质体组（仅予脂质体）、阴性对照组（转染相关阴性对照试剂）、miRNA-21抑制组（转染miRNA-21抑制剂）。应用MTT方法检测细胞增殖活性的变化,应用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化,通过荧光定量PCR技术及蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测RBE细胞中maspin基因表达的改变。结果 miRNA-21在经转染miRNA-21抑制剂后在RBE细胞中的表达得到有效抑制,荧光定量PCR结果显示与正常细胞相比,其表达下降了0.02倍。MTT结果显示RBE细胞在抑制miRNA-21表达后增殖活性明显受到抑制（P〈0.05）,流式细胞仪结果显示各组细胞凋亡率分别为2.29%、2.43%、2.89%、19.35%,miRNA-21的表达降低后,RBE细胞的凋亡率明显增高（P〈0.05）,并且荧光定量PCR及western blot结果显示maspin mRNA及其蛋白的表达明显上调（P〈0.05）。结论通过抑制miRNA-21的表达可抑制RBE细胞的增殖,促进RBE细胞的凋亡,miRNA-21可通过靶向抑制maspin的表达发挥生物学作用。     

苹果提取物对食管癌细胞增殖、凋亡及相关蛋白表达的影响

目的通过苹果提取物对食管癌EC9706细胞的增殖、凋亡及相关蛋白表达的影响。方法加入受试物前,将EC9706细胞接种于1640培养液中,实验设溶剂对照组及苹果提取物7个剂量组,应用MTT、流式细胞术和扫描电镜技术,观察苹果提取物对食管癌EC9706细胞增殖、细胞周期各时相DNA分布以及凋亡的影响;采用免疫组织化学技术,检测Bax及Bcl-2蛋白表达情况。结果各剂量组苹果提取物对食管癌EC9706细胞分别处理72h和96h后,均抑制了食管癌EC9706细胞的增殖,使细胞停滞于G2/M期,并伴随着对凋亡的诱导和Bax、Bcl-2蛋白表达的改变。经统计学分析差异具有显著意义。结论苹果提取物可阻止细胞DNA合成,降低S期百分率,减少分裂期细胞从而抑制EC9706增殖,并通过调节Bax和Bcl-2蛋白的表达诱导细胞凋亡。     

大豆苷原对体外培养人胃癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:了解二羟异黄酮对胃癌细胞有无促增殖与诱导凋亡作用。方法:以不同浓度的二羟异黄酮处理人胃癌细胞系MGC-803细胞。然后分别用MTT法测定细胞增殖情况、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳测定细胞周期和细胞凋亡等。结果:MTT 结果显示:二羟异黄酮对胃癌细胞具有促进和抑制增殖的双相作用-在低浓度(0.1-1 μmol/L)时促进细胞生长,在较高浓度(10-100 μmol/L)时对细胞生长则有抑制作用。流式细胞术结果显示:癌细胞群阻滞在G1期,没有明显凋亡峰的出现;凝胶电泳也末检测到明显的DNA阶梯状条带。结论:二羟异黄酮对体外培养的胃癌细胞的生长有双相作用,较高浓度可抑制胃癌细胞的生长并使细胞阻滞在G1期,而无诱导细胞凋亡的作用。     

黑加仑提取物抗疲劳作用的动物实验研究

目的研究黑加仑提取物抗疲劳作用。方法将SPF级昆明种小鼠按体重随机分成黑加仑提取物高、中、低剂量组、黑加仑原汁组和溶剂对照组。每日灌胃1次,连续30d后,分别测定小鼠负重游泳时间、肝糖原含量、血清尿素氮含量。结果黑加仑提取物各剂量组能延长小鼠负重游泳时间、增加肝糖原含量、减少血清尿素氮含量。与黑加仑原汁组比较,黑加仑提取物高、中、低剂量组负重游泳时间均延长,肝糖原含量均升高,高、中剂量组血清尿素氮含量均降低。结论黑加仑提取物具有一定的抗疲劳作用,且优于黑加仑原汁组。     

丁酸钠对大肠癌HT-29细胞凋亡以及钙离子浓度的影响

目的研究丁酸钠(sodium butyrate,NaB)诱导大肠癌细胞HT-29凋亡的机制。方法 Hoechst 33342染色、Annexin V+PI和免疫印迹法检测NaB诱导大肠癌HT-29细胞的凋亡作用;激光共聚焦显微镜检测内质网(endoplasmic reticulum,ER)和细胞质中游离Ca2+浓度。结果 NaB可诱导大肠癌HT-29细胞凋亡,且具有剂量和时间反应关系;NaB浓度为2.5mmol/L,作用24h时凋亡标志分子(poly ADP-ribose polymerase,PARP)出现明显的切割片段;NaB可降低ER中游离Ca2+浓度以及升高细胞质内游离Ca2+浓度。结论 NaB可通过调节ER和细胞质中Ca2+浓度而诱导大肠癌HT-29细胞凋亡。     

海兔素对人乳腺癌细胞增殖及血管内皮生长因子表达的影响

目的观察海兔素(aplysin)对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达的抑制作用,以及对二甲基苯蒽(DMBA)诱导乳腺癌大鼠肿瘤组织中VEGF表达的抑制作用。方法用MTT法和ELISA法分别检测海兔素对MCF-7细胞增殖及VEGF表达的影响。用免疫组织化学法检测海兔素对DMBA诱导的大鼠乳腺癌组织中VEGF的影响。结果海兔素体外对MCF-7细胞有明显的增殖抑制作用,并伴随VEGF表达水平下降。体内可有效抑制大鼠乳腺癌组织中VEGF的表达,且与海兔素浓度有关。结论海兔素体外对MCF-7细胞具有明显的细胞毒作用并能抑制其VEGF的表达,体内可有效抑制乳腺癌组织中VEGF的表达。     

萝卜硫烷对乳腺癌细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响及作用机制研究

目的:研究萝卜硫烷(sulforaphane,SUL)对不同类型乳腺癌细胞增殖和细胞周期细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法、流式细胞术和Western印迹法,研究不同浓度受试物对F3Ⅱ、MCF-7、MDA-MB-231和ZR-75-1细胞增殖抑制、细胞周期阻滞、F3Ⅱ细胞凋亡和p34cdc2及Cdc25C表达的影响。结果:(1)SUL对所选的四个细胞系均有很强的增殖抑制作用,其中雌激素正响应型(ERP)细胞对SUL的敏感性明显强于雌激素负响应型(ERN)细胞和扩散性较强的F3Ⅱ细胞;(2)SUL对F3Ⅱ细胞和两种ERP细胞均呈现G2/M期阻滞作用,而对ERN细胞周期则无影响;(3)SUL阻滞F3Ⅱ细胞从G2期向M期转化的作用机制是提高Cdc2的磷酸化水平,降低Cdc25C磷酸化酶的表达,从而抑制细胞周期素B1-Cdc2复合物激酶的去磷酸化作用;(4)在实验条件下,SUL不引起F3Ⅱ细胞凋亡。结论:SUL对四个乳腺癌细胞系细胞增殖抑制活性和细胞周期影响存在明显的差异,不引起F3Ⅱ细胞凋亡。对F3Ⅱ细胞周期G2/M阻滞作用的机制是提高Cdc2的磷酸化水平,降低Cdc25C磷酸化酶的表达。     

天然红心蛋中类胡萝卜素提纯物对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨天然红心蛋中类胡萝卜素提纯物(carotenoidsextractsfromnaturalredyolk,CENRY)对人肝癌细胞QGY-7703细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用体外培养,细胞增殖实验,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞形态及钙离子浓度变化,采用流式细胞术检测细胞周期等。结果:CENRY1.0、0.5、0.25μmol/L三个剂量能显著抑制人肝癌QGY-7703细胞增殖,细胞凋亡指数随剂量增加及时间延长而上升;CENRY对QGY-7703细胞存在G2/M期阻滞作用;处理组细胞内Ca2+浓度极显著地升高。结论:CENRY能抑制QGY-7703增殖、诱导凋亡。     

麦胚黄酮类提取物诱导乳腺癌细胞株凋亡的作用

目的　检测麦胚黄酮类提取物对人体乳腺髓样癌细胞株 BCap- 37凋亡的诱导作用 ,探讨其分子学机制。方法　用流式细胞仪检测麦胚黄酮类提取物对人体乳腺髓样癌细胞株BCap- 37细胞凋亡的诱导作用及对 bcl- 2基因蛋白表达的抑制作用。用光学显微镜观察凋亡细胞的形态学特征。结果　 1 .麦胚黄酮类提取物主要阻断乳腺癌细胞由 G2 - M向 S期转变 ,并能诱导细胞发生凋亡 ,呈现剂量 -效应关系 ( P<0 .0 0 0 1 )。 2 .麦胚黄酮类提取物亦能明显抑制人体乳腺癌细胞株 BCap- 37中 bcl- 2基因的蛋白表达 ,其表达率与麦胚黄酮类提取物浓度成负相关 ( P<0 .0 1 )。3.显微镜下观察 ,可见乳腺癌细胞出现凋亡特征性形态学改变 :细胞体积缩小、胞浆浓缩、胞核固缩、染色质靠核膜凝集成不同形态 ,如马蹄型、月牙型、肾型 ,形成凋亡小体。结论　麦胚黄酮类提取物具有诱导人体乳腺髓样癌细胞株 BCap- 37凋亡的作用 ,bcl- 2蛋白表达水平的降低可能是促进细胞凋亡的重要条件     

茶氨酸体外对人胃癌细胞MGC803增殖的作用及与阿霉素的联合作用

目的研究茶氨酸(theanine)对人胃腺癌细胞株MGC803增殖的影响及其与阿霉素(doxorubicin,DOX)的联合作用。方法采用MTT法结合形态学观察,研究茶氨酸单独或与DOX联合作用对MGC803增殖活性的影响;采用荧光分光光度法检测茶氨酸对MGC803细胞内DOX药物浓度的影响,探讨茶氨酸对DOX化疗敏感性的影响。结果2.0、4.0μmol/L茶氨酸单独作用于MGC803后其吸光度值与空白对照组相比有统计学差异(P0.01);茶氨酸与DOX联合作用后对MGC803增殖的抑制率明显提高,并观察到典型的凋亡细胞形态学特征;DOX联合茶氨酸作用后,使MGC803细胞内DOX浓度升高1.35倍。结论茶氨酸可能有直接抑制MGC803细胞增殖的作用,并使肿瘤细胞内DOX滞留,提高了肿瘤细胞对DOX的化疗敏感性。     

亚硒酸钠抑制人胃癌BGC823细胞的作用及其机制探讨

目的观察亚硒酸钠对体外培养的人胃癌BGC823细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法用不同浓度(0、4.0、8.0、10.0μmol/L)的亚硒酸钠处理BGC823细胞24h后,采用四甲基偶氮噻唑蓝比色法(MTT法)检测亚硒酸钠对细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪PI染色检测细胞周期,AnnexinV/PI双染法定量检测BGC823细胞凋亡率,FAS蛋白染色流式细胞仪定量检测各实验组细胞间FAS蛋白表达,荧光显微镜观察DAPI染色细胞形态。结果亚硒酸钠可明显抑制BGC823胃癌细胞的增殖,呈剂量依赖性;亚硒酸钠可阻滞细胞于S期和增加BGC823胃癌细胞凋亡率并随剂量增大作用增强;DAPI染色观察到亚硒酸钠给药组出现细胞核浓缩、边缘化以及凋亡小体等细胞凋亡的形态特征;亚硒酸钠可呈剂量依赖地增强FAS蛋白表达。结论亚硒酸钠可显著抑制人BGC823胃癌细胞的增殖,使细胞阻滞于S期,并可诱导细胞凋亡,其机制可能与上调FAS蛋白有关。