食管癌治疗敏感基因单核苷酸多态性

研究显示食管癌治疗过程中表现的个体差异与遗传多态性有密切关系.已证实顺铂及5氟尿嘧啶(5-FU)代谢相关基因、凋亡及血管生成相关基因单核苷酸多态性与食管癌治疗敏感性密切相关.     

食管癌放疗后局部复发再程放疗的疗效分析

目的 探讨食管癌放疗后局部复发再放疗的疗效。方法 从1989年2月至1995年10月共对53例食管癌放疗后局部复发再放疗。结果 1，3，5a生存率分别为37．7％，7．5％，5．7％。结论 食管癌放疗后局部复发不宜手术的病人，可行再程放疗。     

腔内照射放疗后局部复发的食管癌

1989.4～1991.5,腔内放射治疗局部复发的食管癌28例,单纯腔内放疗21例,腔内加体外照射7例。剂量参考点为放射源轴中心线10mm,腔内放疗剂量700～1000cGy/次,每7～10天一次,总共2～4次。病变基本消失5例(18％),明显缩小13例(46％),改善6例(21％),不变2例(7％),疗后无X片不能评价2例(7％)。疗首无溃疡,疗后出现溃疡3/19(16％),疗前有溃疡,疗后溃疡消失2/9例(22％),溃疡缩小4/9例。疗前后有溃疡,疗后发生穿孔率为22％(2/9)。疗前无溃疡,疗后发生穿孔率为16％(3/19)。单纯腔内放疗的平均生存期6.7±4.2月,腔内加体外照射为8.2±4.2月。     

XRCC3单核苷酸多态性与肺癌放疗近期疗效的相关性研究

一般认为肿瘤细胞DNA损伤修复能力与放射敏感性密切相关。DNA损伤修复过程中许多基因扮演着重要角色，这些基因的单核苷酸多态性（SNP）可改变蛋白质功能，并改变DNA修复能力，从而为通过检测这些基因SNP来预测机体细胞的放射敏感性指明了方向。笔者采用TaqMan—MGB探针技术和等位基因特异适时荧光PCR技术研究XRCC3第241密码子C／TSNP与肺癌放疗疗效的相关性。     

立体定向适形放射治疗食管癌放疗后局部复发的临床观察

食管癌主要治疗方法是手术和放射治疗。食管癌治疗后的局部复发和远处转移率非常高,根治性放疗后多数患者在1～2年内复发,同时伴有放疗后纤维化,手术难度大,再程放疗并发症多,疗效不佳,5年生存率在10％左右。而立体定向适形放疗技术（stereotac tieradiotherapy,SRT）使靶区定位和照射准确,在明显提高肿瘤局部照射剂量的同时有效保护周围正常器官,其有效性已在鼻咽癌、前列腺癌、肝癌、肺癌等被证实。     

局部复发性食管癌放疗的研究进展

食管癌在我国已经是最常见的消化道恶性肿瘤之一,食管癌治疗失败的原因主要是局部复发和未控,并且发现大部分患者在食管癌根治术后1～2年内复发。目前手术治疗、再程放疗、放化疗、靶向治疗等是食管癌治疗的主要手段,本文将对食管癌复发的因素及不同的放疗方式进行综述,进一步为局部复发性食管癌的治疗提供参考。     

食管癌术后局部复发的立体适形放疗疗效分析

目的评价立体适形放射治疗食管癌术后局部复发灶的近期疗效。方法2000年1月至2002年12月间收治的25例食管癌术后纵隔瘤床区复发或纵隔加吻合口复发病例．采用CT模拟定位技术和立体适形放疗技术，PTV为CTV外放1．0Cm，采用5-7个非共面野照射，用剂量体积直方图和等剂量线优化治疗计划，15MVX线，单次剂量3Gy，每周5次，总剂量60-66Gy，PTV被85％等剂量线所包绕，PTV均匀性为95％-107％。结果近期疗效为CR4例，PR21例，总有效率为100％。1、2年生存率及1年局控率分别为72％、32％、88％。按RTOG标准评价：急性放射性食管炎Ⅰ～Ⅱ级6例(24％)，Ⅲ级1例(4％)，急性放射性肺炎Ⅰ～Ⅱ级8例(32％)，Ⅲ级1例(4％)，骨髓抑制Ⅰ～Ⅱ级4例(16%)，急性心脏损伤Ⅰ～Ⅱ级2例(8％)。结论立体适形放射治疗能有效提高食管癌术后局部复发灶的局部控制率，改善临床症状，延长生存期，是局部剂量升级的有效方法，能提高生存质量，近期疗效满意。     

三维适形放疗联合DF方案化疗治疗局部晚期食管癌临床观察

目的：探讨三维适形放疗联合同步化疗在局部晚期食管癌治疗中的近期有效率、毒副反应及生存率。方法：134例病人纳入本研究。采用三维适形放疗,常规分割,2.0Gy/次,1次/天,5天/周,放疗剂量50-70Gy。化疗为顺铂（DDP）75mg/m2第1天,静滴;氟尿嘧啶（5-FU）500mg/m2第1-4天,静滴,化疗在放疗第1、29天进行,共两个周期。33例放化疗结束后再原方案化疗1个疗程,36例放化疗结束后再原方案化疗2个疗程,64例放化疗结束后无化疗。结果：134例患者近期有效率为73.9％,1、2及3年的生存率分别为80.5％、61.5％和47.0％。同期放化疗后再化疗1、2个疗程及无化疗的中位生存时间分别为41、62和30个月（P＝0.493）。毒副反应主要是放射性食管炎,其次是血液毒性及胃肠道反应,患者均能耐受。结论：对失去了手术机会,评分较好的局部晚期食管癌患者,可考虑给予同期放化疗。毒副反应病人可以耐受。放疗后再化疗2个疗程可能对生存有获益。     

单核苷酸多态性与放射性损伤

对于放射治疗中发生的急性和晚期放射性损伤,目前尚未能建立临床适用的预测放射性损伤模型。各种研究希望通过探寻DNA损伤、修复基因的多态性与放射性损伤之间的关系来了解放射性损伤的分子机制。基因的多态性不但可以改变蛋白的功能,还可能影响到个体正常组织对受损DNA修复的能力。ATM、XRCC1、BRCA1／2、ERCC2、SOD2、DNA ligase Ⅳ和TGF—β1等基因的SNPs与增加放射性损伤可能性相关,这些基因是目前有关放射性损伤研究的活跃领域。未来在放射性损伤相关性的研究中,只能依靠大样本量、严格的对照研究才能获得确实意义的结论。     

MnSOD表达特性与食管癌细胞放射敏感性的关系

目的:研究锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,MnSOD)在一氧化氮(mtric oxide,NO)作用下对食管癌TE-1细胞放射敏感性的影响。方法:采用慢病毒转染法将MnSOD重组质粒转染食管癌TE-1细胞,分别建立中、高水平过量表达MnSOD的稳定转染细胞(TE-1Mm、TE-1Mh)及空载体细胞(TE-1Mn)。进一步采用RT-PCR、Western blot检测转染后TE-1细胞、空载体TE-1Mn细胞、稳定转染细胞TE-1Mm及TE-1Mh中MnSOD mRNA和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色实验评价NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)、放射线及二者联合对以上4组细胞的抑制;流式细胞术(FCM)及Western blot检测各组细胞凋亡、活性氧(reactive oxygen species,ROS)荧光强度及蛋白表达的变化。结果:成功建立了稳定中、高水平过量表达MnSOD的TE-1细胞株TE-1Mm和TE-1Mh;RT-PCR及Western blot证实上述2种细胞中含有不同表达水平的MnSOD。MTT法及FCM显示,TE-1Mm细胞的存活率下降,细胞凋亡率上调,而TE-1Mh细胞的存活率上调,细胞凋亡率下降,相应组间相比差异具有统计学意义(P0.05)。0.5～2mmol/L SNP及2、4、6Gy放射线处理48 h,TE-1Mm细胞生长抑制率明显增加,细胞生长明显减慢,放射增敏比增加,细胞凋亡率上调;TE-1Mh细胞抑制率反而降低,细胞生长加速,放射增敏比降低,细胞凋亡率下降,相应组间相比差异均具有统计学意义(P0.05)。Western blot结果及FCM显示:0.5～2 mmol/L SNP及2、4、6 Gy放射线处理48 h,与TE-1Mm细胞相比,TE-1Mh细胞MnSOD蛋白表达量及细胞内ROS相对降低,相应组间相比差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:中等水平过量表达MnSOD增加食管癌细胞放射敏感性,抑制增殖,诱导凋亡,而高水平过量表达MnSOD则与之相反,为今后通过MnSOD提高放射敏感性来抑制食管癌或通过其抗拒放射来保护正常细胞提供了可能性。     

MiRNA-381表达及其与食管鳞癌放疗敏感性的关系

目的:观察人食管鳞癌细胞及组织中miRNA-381的表达变化,探讨其与放射敏感性的关系.方法:采用RT-PCR法测定人食管鳞癌细胞TE-1、TE-10、TE-11及20例符合纳入标准的食管鳞癌组织中miRNA-381的表达.完成放疗后1个月接受影像学复查,分析患者的近期放疗疗效.采用克隆形成实验检测细胞的放疗敏感性.结果:入组患者根据近期疗效分为放疗抵抗组(6例)和放疗敏感组(14例),放疗抵抗组的miRNA-381表达显著低于放疗敏感组(P＜0.05).克隆形成实验结果显示细胞的放疗敏感性为TE-11＞TE-10 ＞TE-1,且有显著统计学差异(P＜0.05).RT-PCR结果显示放疗最敏感的TE-11细胞中miRNA-381表达量最高,而放疗抵抗的TE-1细胞中miRNA-381表达量最低.近期疗效和食管鳞癌组织中miRNA-381相对表达量的相关性分析显示miRNA-381相对表达量与近期疗效呈正相关(r=0.72,P＜0.05).结论:MiRNA-381在放疗敏感的食管鳞癌细胞及临床标本中的表达量显著高于放疗抵抗的细胞及组织.MiRNA-381相对表达量越高的食管鳞癌患者接受根治性放疗后的近期疗效越好.     

B细胞易位基因2在食管鳞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨B细胞易位基因2（BTG2）在食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中的表达及临床意义。方法:分析癌症基因组图谱（TCGA）数据库中BTG2 mRNA在ESCC组织及癌旁组织中的表达,受试者工作特征（ROC）曲线分析BTG2 mRNA表达量在预测ESCC患者疾病状态和放疗敏感性中的诊断价值;免疫组织化学检测我院184例ESCC患者癌组织标本BTG2蛋白表达,其中包括55例行根治性放疗术的ESCC患者,50例正常黏膜组织作为对照。分析BTG2蛋白表达情况与ESCC临床特征的关系。结果:与对照组比较,BTG2 mRNA在ESCC组织中表达下降（5.08±1.06 vs 5.91±1.29,t=2.387,P=0.019）,与放疗敏感组患者比较,BTG2 mRNA在放疗抵抗的ESCC患者癌组织中表达下降（3.82±0.97 vs 5.44±0.73,t=4.935,P＜0.001）,ROC结果显示BTG2 mRNA在鉴别放疗敏感与放疗抵抗患者时特异性为95.65%,敏感性为75%（AUC=0.902,P＜0.001）;免疫组织化学结果显示ESCC组织中BTG2阳性表达（103/184）低于正常黏膜组织（42/50）,差异有统计学意义（χ2=13.10,P＜0.001）;BTG2表达在放疗敏感和放疗抵抗组织中的阳性表达率分别为57.9%（22/38）和23.5%（4/17）,差异有统计学意义（χ2=5.565,P=0.018）;ESCC患者BTG2蛋白表达差异在不同性别、年龄、T分期及M分期中无统计学差异（P＞0.05）,与N分期（χ2=4.134,P=0.042）及临床分期（χ2=5.303,P=0.021）相关;单因素分析结果显示,肿瘤分级（HR=0.500,95%CI:0.317～0.790,P=0.003）、N分期（HR=0.275,95%CI:0.157～0.479,P=0.000）、M分期（HR=0.317,95%CI:0.151～0.665,P=0.002）、临床分期（HR=0.269,95%CI:0.167～0.434,P=0.000）及BTG2表达（HR=1.956,95%CI:1.242～3.079,P=0.003）与ESCC患者总生存（OS）有关;多因素分析结果显示,肿瘤分级（HR=0.613,95%CI:0.381～0.987,P=0.044）、N分期（HR=0.507,95%CI:0.259～0.991,P=0.047）、临床分期（HR=0.504,95%CI:0.278～0.916,P=0.025）及BTG2表达（HR=1.608,95%CI:1.011～2.558,P=0.045）影响ESCC患者的OS。结论:BTG2具有作为预测ESCC进展及放疗敏感性生物标记物的潜在价值,并且是影响ESCC患者总生存率的独立预后因素。     

老年食管鳞状细胞癌的放疗疗效及预后因素分析

目的:探讨老年食管鳞状细胞癌的临床特点、放疗疗效及其预后的相关因素。方法:回顾性分析2003年1月至2008年1月在我院接受放射治疗的299例食管鳞状细胞癌患者的临床资料,运用SPSS 16.0软件分析生存率及预后的影响因素（＜65岁为非老年组,≥65岁为老年组）。结果:老年组和非老年组总有效率分别为56.0%、91.3%（P=0.000）。老年组患者的近期疗效与化疗史（P=0.001）和放疗剂量（P=0.005）有关,非老年组的近期疗效与患者的民族有关（P=0.001）。而性别、吸烟史、饮酒史、病变长度、病变部位、临床分期、分化程度、淋巴结转移、KPS评分等临床因素与近期疗效无明显相关性（P均＞0.05）。老年组和非老年组患者的中位生存时间分别为42个月、41个月,经Log-Rank检验,两组患者生存时间的差异无统计学意义（P=0.954）。多因素分析显示放疗剂量≥60Gy的老年食管鳞癌患者预后比放疗剂量＜60Gy的患者好（P=0.023,95%CI:0.432~0.939）,放疗近期疗效达缓解的患者比近期疗效无缓解的患者预后好(P=0.001,95%CI:1.339~2.885);而放疗方式、化疗史、病理分型与预后无相关性（P均＞0.05）。结论:非老年组的放疗近期疗效优于老年组;老年组的近期疗效与化疗史、放疗剂量有关;放疗剂量≥60Gy、近期疗效达缓解的老年食管癌患者预后相对较好。     

Decreased expression of WWOX in the development of esophageal squamous cell carcinoma

The WW domain‐containing oxidoreductase (WWOX) gene, located on chromosome 16q23.3–24.1 in the region recognized as the common fragile site FRA16D is considered to be a tumor suppressor gene involved in various carcinomas. The present study was to investigate the alterations of WWOX expression and its correlation with polymorphism, the level of WWOX loss of heterozygosity (LOH), and methylation status in esophageal squamous cell carcinoma (ESCC). Immunohistochemistry and RT‐PCR methods were used, respectively, to examine the protein and mRNA expression of WWOX in ESCC tissues. PCR‐RFLP, PCR‐SSLP, and MSP approach were used, respectively, to detect polymorphisms of rs3764340, rs2548861, and rs1079635 site, the level of LOH, and WWOX methylation status. Family history of upper gastrointestinal cancer (UGIC) significantly increased the risk of developing ESCC. Protein and mRNA expression of WWOX was reduced in ESCC tumor tissues and was associated with LOH and hypermethylation of the gene. The G allele of rs3764340 significantly elevated the risk of developing ESCC and was associated with TNM stage. LOH at the WWOX loci was observed in 41.4% tumors. The hypermethylation of promoter and exon1 of WWOX was found to be occurred in dysplastic tissues and the methylation frequency of WWOX in ESCC tumor tissues was significantly higher than that in corresponding normal tissues and was associated with UGIC family history. In all, these results indicate that the WWOX gene may play an important role in the development of ESCC especially in individuals with UGIC family history. © 2011 Wiley Periodicals, Inc.     

p53 Codon 72 polymorphism and the risk of esophageal squamous cell carcinoma

The polymorphisms of the tumor suppressor gene p53 have been extensively investigated in numerous malignant tumors, particularly carcinomas associated with human papillomavirus (HPV) infection. However, the results remain controversial. To address a potential correlation between the p53 genotypes and the risk of esophageal squamous cell carcinoma (ESCC), we investigated the p53 codon 72 polymorphism in 435 patients with ESCC and 550 cancer-free subjects from the same geographical region. p53 Arg/Arg genotype was significantly increased in ESCC cases compared with control subjects (85.7 vs. 49.6%, P < 0.001), resulting in an elevated ESCC risk (OR = 6.48, 95% CI = 4.65-9.03). In addition, among p53 Arg/Arg carriers, HPV infection, smoking, and drinking might further increase the risk of ESCC development.     

锰超氧化物歧化酶基因的多态性与食管癌发生和发展的关系

目的 探讨锰超氧化物歧化酶(MnSOD)基因单核苷酸多态性与食管癌的发生及病变进展的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,分析103例食管癌患者(食管癌组)和195例正常对照人群(对照组)的MnSOD基因启动子区上游第9位点单核苷酸多态性,比较不同基因型与食管癌发病风险以及病变部位、病变长度、最大直径和临床分期之间的关系.结果 在食管癌组中,MnSOD基因启动子区上游第9位点变异基因型(TC+CC)分布的频率为28.2%,明显高于对照组(17.4%;X~2=4.645,P＜0.05);与携带TT基因型者相比,携带C等位基因(TC+CC)的个体患食管癌的风险增加了1.889倍(95%CI为1.052～3.391).食管癌组中,病变长度≤5 cm者,变异基因型分布的频率为16.3%;病变长度＞5 cm者,变异基因型分布的频率为36.7%,差异有统计学意义(X~2=5.147,P＜0.05).MnSOD 9 T→C变异与食管癌的病变长度呈正相关,但与食管癌的病变部位、最大直径以及临床分期之间无明显的相关性.结论 MnSOD 9 T→C变异增加了食管癌的发病风险,其可以作为食管癌遗传易感性的标志物,用于易感个体的预警,并且该基因的多态性可能与食管癌病变的纵向进展相关.     

MiR-195-5p对食管鳞癌细胞放射敏感性的影响及作用机制研究

目的：探讨miR-195-5p对食管鳞癌细胞放射敏感性的影响及作用机制。方法：采用4和8 Gy X射线照射KYSE510和KYSE150细胞,以未照射细胞为对照。采用CCK-8法检测细胞生长情况,qPCR检测细胞内miR-195-5p及survivin mRNA的表达水平,Western blot检测细胞内survivin蛋白的表达水平。KYSE510细胞分为转染miR-195-5p类似物组、转染miR-195-5p拮抗物组和相应的对照组,并采用X射线照射后,Incucyte实时动态活细胞监测和EdU掺入实验测定细胞增殖情况,克隆形成实验和流式细胞术分别测定细胞克隆形成率和凋亡率,双荧光素酶报告基因实验验证各组KYSE150细胞的荧光素酶活性。结果：经X射线照射后的KESE510和KYSE150细胞生长均受到明显抑制,与未照射组相比,照射组细胞miR-195-5p表达降低,survivin蛋白表达升高（P<0.05或0.01）。转染miR-195-5p类似物组的KESE510细胞在接受X射线照射后的存活率较阴性对照组降低,EdU阳性率和克隆存活率降低,凋亡率显著升高,细胞中survivin mRNA和蛋白表达较阴性对照组均降低（P<0.05或0.01）;转染miR-195-5p拮抗物组KESE510细胞的EdU阳性率和克隆存活率较阴性对照组升高,细胞中survivin mRNA和蛋白表达均升高（P<0.01）。在KYSE150细胞中过表达miR-195-5p能够抑制BIRC5 3' UTR报告基因的荧光素酶活性（P<0.05）。结论：MiR-195-5p可能通过靶向抑制survivin基因的表达增强食管鳞癌细胞的放射敏感性。     

NEDD4在食管鳞癌中的表达及作用研究

目的：检测神经前体细胞表达发育下调蛋白4（neural precursor cell expressed developmentally down-regulated protein 4,NEDD4）在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义,并探讨其过表达对食管鳞癌细胞恶性表型的影响。方法：应用组织芯片-免疫组织化学染色技术,检测131例食管鳞癌及配对癌旁正常食管上皮组织中NEDD4蛋白的表达情况,并分析其表达水平与临床病理指标的相关性;同时,使用TCGA和GTEx数据库中的mRNA表达数据,分析食管鳞癌组织中NEDD4 mRNA的表达变化。然后,在NEDD4表达水平较高的食管鳞癌细胞系中用特异性siRNA敲降NEDD4的表达,采用CCK8法检测细胞增殖活力的变化。结果：免疫组化染色结果显示,NEDD4在40%（53/131）的食管鳞癌组织中高水平表达,而在癌旁正常食管上皮组织中不表达或低水平表达。NEDD4蛋白的表达水平与食管鳞癌的浸润深度、病理学分期呈正相关（均为P < 0.05）。同时,TCGA及GTEx数据库分析结果显示,NEDD4 mRNA表达水平在食管鳞癌组织中明显升高（P < 0.01）。细胞增殖活力检测结果显示,在KYSE30和KYSE150细胞中,转染NEDD4 siRNA的实验组细胞的增殖活力均显著低于对照组细胞（均为P < 0.01）。结论：NEDD4在食管鳞癌组织中表达上调,其高表达可增强食管鳞癌细胞的增殖活力,提示NEDD4过表达可能在食管鳞癌的发生发展过程中发挥促癌作用。     

调强放疗同步紫杉醇方案化疗治疗食管鳞癌近期疗效观察

目的:观察调强放疗同步紫杉醇+顺铂方案化疗治疗食管鳞癌的近期疗效及治疗相关不良反应。方法:我院2010年6月-2013年7月收治的70例初治食管鳞癌患者,分为放化疗组36例和单放组34例。单放组:放疗剂量为DT （60-66）Gy/（30-32）f;放化疗组:放疗开始给予紫杉醇135mg/m2,第1天,顺铂25mg/m2,第1-3天,21天为一个周期,共两个周期。放疗结束后3个月复查食管钡餐片及CT进行疗效评价。结果:放化疗组共36例食管鳞癌患者,治疗结束后3个月总有效率（response rate,RR)=(CP+PR）为91.7%,其中完全缓解率(complete response,CR)为55.6%、部分缓解率（partial response,PR）为36.1%、无缓解率（non-response,NR）为8.3%,总有效率高于单放组（73.5%）,且差异有统计学意义（P＜0.05）。放化疗组1、2级不良反应发生率高于单放组,有统计学意义（P＜0.05）,而3级以上不良反应及1、2级放射性肺炎两组无差异（P＞0.05）。结论:调强放疗联合紫杉醇+顺铂方案同步化疗治疗食管鳞癌近期疗效好,不良反应患者可耐受。