铁皮石斛类原球茎液体悬浮培养增殖体系构建

以铁皮石斛(Dendrobium officinale)类圆球茎为研究材料,系统地研究了影响其液体悬浮培养增殖的诸多因素,如不同质量浓度的MS基本培养基、NAA、蔗糖、椰乳以及培养基pH值和接种量,旨在构建铁皮石斛类圆球茎液体悬浮培养增殖体系。研究结果表明:在液体悬浮培养条件下,最有利于铁皮石斛类原球茎的生长增殖的培养基为1/2MS基本培养基中添加1.0 mg/L NAA,50 g/L椰乳,蔗糖30 g/L;接种量为40 g/L。     

NAA和KT对铁皮石斛原球茎增殖与分化的影响

为探讨铁皮石斛原球茎再生的理想培养基,以铁皮石斛原球茎为试材,研究了NAA和KT对铁皮石斛原球茎增殖与分化的影响。结果表明：铁皮石斛原球茎增殖较理想的培养基为MS＋KT1.0 mg.L-1＋NAA0.5 mg.L-1。铁皮石斛原球茎分化较理想的培养基为MS＋KT 1.0 mg.L-1＋NAA 0.1 mg.L-1。     

铁皮石斛原球茎的增殖培养研究

为探索最适宜铁皮石斛原球茎增殖的固体培养基配方,以获得高质量的组培苗,为工厂化育苗提供技术支撑,在相同的实验室培养条件下,把同一阶段的原球茎接种于不同激素比的4种培养基中,培养周期为60 d,每隔15 d取样检测1次,对不同生长状况的试验结果进行分析研究.结果表明,在基本培养基1/2 MS中加入浓度为1.0 mg/L的6-BA、0.5 mg/L的NAA和浓度为20%的马铃薯提取液进行固体培养,铁皮石斛原球茎的增殖效果好.     

不同培养条件对铁皮石斛原球茎增殖的影响

[目的]为了找到适合原球茎增殖的培养条件,为工厂化育苗提供技术支撑。[方法]以铁皮石斛茎段诱导出的原球茎为实验材料,研究了不同基本培养基、不同碳源、不同浓度的脱落酸(ABA)和培养方式对其增殖的影响。[结果]在5种培养基中,原球茎增殖倍数均呈上升的趋势,其中改良MS的增殖倍数明显高于其他培养基;在低浓度的条件下,随ABA浓度的增加,原球茎的增殖速度加快,当浓度为0.5 mg/L时,增殖最大;蔗糖为碳源时原球茎增殖的效果比葡萄糖、果糖好;固体培养和液体振荡培养时原球茎增殖倍数最高。[结论]在改良MS中加入30 mg/L蔗糖和0.5 mg/L ABA,进行固体培养或液体振荡培养,铁皮石斛原球茎增殖的效果好。     

浅析铁皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化

铁皮石斛为兰科多年生附生草本植物,但是由于人类的大规模采集,在其需求量急剧增长的情况下,人工的培育变得尤为重要,通过研究铁皮石斛的原球茎增殖的培养基配方,发现1/2MS+28g葡糖糖+1g活性炭+7g琼脂+1.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA最适合于铁皮石斛原球茎的增殖。     

铁皮石斛原球茎增殖培养基配方的优化

[目的]获得铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall.ex Lindl.）原球茎组织培养的最佳培养基配方。[方法]用正交试验筛选出6-BA、NAA、KT最佳的浓度配比,并考察各因素对铁皮石斛原球茎增殖率的影响。[结果]铁皮石斛原球茎增殖的最佳培养基配方为1/2MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT。[结论]该研究为工业化生产铁皮石斛原球茎及其有效成分,推进铁皮石斛工厂化育苗奠定了基础。     

铁皮石斛组织培养研究

为了解决铁皮石斛种苗稀缺的现状,提高种苗繁殖率,以铁皮石斛种子(成熟率80％～90％)、带芽茎段、叶片3种材料作为外植体,进行组织培养研究.结果表明:铁皮石斛最适宜外植体材料是种子,最适宜的类原球茎诱导培养基为1/2MS,最适宜的类原球茎增殖培养基为MS+KT1.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+CM100 mL/L+活性炭0.3 g/L,最适宜类原球茎分化培养基为MS+KT1.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+100 mL/L苹果汁,最适宜生根培养基为MS+IBA1.5 mg/L.     

金钗石斛类原球茎诱导及增殖的正交试验

通过正交试验,筛选了金钗石斛Dendrobiumnobile类原球茎(protocrom likebodies,PLBs)诱导及增殖适宜的培养基.以1/2MS附加8g·L-1琼脂为基本培养基,诱导以NAA、TDZ(噻二唑苯基脲,thidiazuron)、CPPU[N(2氯4吡啶基)N1苯脲]做三因子四水平试验,增殖则以NAA、BA、蔗糖、pH值做四因子四水平试验,根据L16(45)正交表设计,分别以PLBs诱导率和增质量率为指标,筛选了适宜于PLBs诱导和增殖的培养基.结果显示:1/2MS+30g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂+0.01mg·L-1TDZ+0.005mg·L-1CPPU,pH5.6的培养基适宜于PLBs诱导,1/2MS+20g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂+20g·L-1香蕉汁+1.0mg·L-1NAA+0.2mg·L-1BA,pH5.6的培养基增殖效果较好;诱导率和增质量率分别为46.00%和756.74%.在各因子中,NAA对PLBs诱导率的影响最大,并对PLBs的诱导起抑制作用;蔗糖质量浓度对PLBs增质量率影响最大,且较低的质量浓度更为适宜;筛选出的PLBs诱导和增殖培养基经重复试验,结果相对稳定.     

美花石斛原球茎增殖及分化的研究

将美花石斛原球茎培养于含有不同生长调节物质的SH培养基上,结果发现,不同生长调节物质对美花石斛原球茎分化的不同阶段产生不同的影响.含有香蕉提取物和BAP2.0 mg/L+KT2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L的SH培养基对鲜重增加影响较显著;白萝卜汁对叶片分化有一定的促进作用;含有酵母提取物的SH培养基对增殖芽和不定根分化效果最好;马铃薯、香蕉和椰子汁对生根分化影响较大.建议在美花石斛原球茎不同分化阶段,根据其生长和分化需要,继代培养于相应的培养基上,以获得优质美花石斛组培苗.     

杂交兰原球茎增殖及分化研究

[目的]对杂交兰原球茎的增殖及分化进行研究。[方法]采用L9(34)正交试验设计,研究培养基、6-BAI、BA和AC对杂交兰原球茎增殖的影响;设置几种不同培养基对原球茎的分化进行探讨。[结果]培养基和6-BA对原球茎的增殖影响不大,IBA浓度为0.1 mg/L、AC浓度为1.0 mg/L时,原球茎增殖效果最好;1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L对原球茎的分化效果最好。[结论]在培养基中添加NAA有利于原球茎的分化。     

铁皮石斛圆球茎增殖影响因素的研究

[目的]探讨培养基的不同组成对铁皮石斛圆球茎增殖的效果及影响,为提高其组培种苗的商业化生产效率提供技术参考。[方法]以无菌播种获得的铁皮石斛圆球茎为材料,对影响铁皮石斛圆球茎增殖的几种因素进行了研究。[结果]铁皮石斛圆球茎在1/2MS培养基中增殖效果较好;在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L培养基中加入BA 2.0 mg/L可促进铁皮石斛圆球茎增殖;培养基中加入天然物质有利于铁皮石斛圆球茎的增殖生长,以加入椰子汁100 ml/L为最佳。[结论]铁皮石斛圆球茎在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L＋BA 2.0mg/L＋椰子汁100 ml/L培养基上增殖效果最佳,增殖系数达到4.8。     

金属离子对悬浮培养霍山石斛类原球茎合成活性多糖的影响

采用单因素试验和正交试验,考察了Mg2+、Ca2+、Fe2+、Mn2+和Zn2+5种金属离子对悬浮培养霍山石斛类原球茎合成活性多糖的影响。结果表明:1.5 mmol/L Mg2+4、.5 mmol/L Ca2+0、.1 mmol/L Fe2+0、.5 mmol/L Mn2+和0.06 mmol/L Zn2+的组合最有利于类原球茎多糖的合成,在此组合下多糖产量达最高(5.87 g/L),比优化前提高2.49倍,比标准MS培养基提高31倍,且5种离子对类原球茎合成多糖影响的主次顺序为Mg2+>Ca2+>Mn2+>Fe2+>Zn2+。     

铁皮石斛茎段丛生芽的增殖培养研究

[目的]研究铁皮石斛茎段丛生芽的最适增殖培养方式。[方法]以铁皮石斛茎段为外植体,研究不同基本培养基、植物生长调节剂种类和浓度、有机添加物及培养时间对铁皮石斛丛生芽增殖的影响。[结果]MS培养基优于1/2MS、B5和N6;香蕉对丛生芽的分化有明显的促进作用;培养60 d时丛生芽的增殖倍数最高,生长势好。[结论]丛生芽的最佳增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L+香蕉100 g/L+活性炭0.5 g/L,培养时间以60 d为宜。     

磷限制培养中霍山石斛类原球茎增殖和多糖合成的动力学研究

[目的]研究在不同起始磷浓度中,霍山石斛类原球茎增殖、主要营养物质消耗和多糖积累的动力学特性。[方法]以霍山石斛类原球茎为试材,将类原球茎分别接种于含有不同磷浓度的改良MS液体培养基中进行悬浮培养,30d后收获称重,测定类原球茎的多糖含量和培养基中总糖和磷酸根离子含量,并建立原球茎增殖和多糖合成模型。[结果]类原球茎在不合磷的培养基中生长受抑制,生物量、细胞生长速率随磷酸盐浓度的增大而增大;不同磷浓度下,多糖产率随类原球茎的生长而增加;随着磷浓度的增大,胞外各种营养成分的吸收利用速率提高。细胞的比生长速率与磷浓度的关系符合Monod方程,最大比生长速率为0．032d^-1。[结论]磷是霍山石斛原球茎增殖的限制性元素,类原球茎的生长与多糖的合成呈正相关。     

铁皮石斛原球茎悬浮培养及其多糖积累的研究

将利用铁皮石斛种子诱导的原球茎在液体条件下培养,研究植物激素和有机添加物对原球茎增殖以及多糖积累的影响。结果表明,在N6液体培养基中附加1.0mg/L NAA+1.0mg/LKT+5%香蕉汁提取物+5%土豆汁提取物,最有利于铁皮石斛原球茎增殖和多糖积累,培养30d时,原球茎鲜质量达到122.9g/L,多糖含量在25d时达到24.2%。结果提示,利用液体培养规模化生产铁皮石斛原球茎是可行的,是铁皮石斛大田传统栽培方式的重要替代途径。     

铁皮石斛高效设施栽培技术研究

[目的]实现铁皮石斛的高效设施栽培。[方法]以铁皮石斛无菌试管苗为试材,当苗高5cm左右时,分别移栽到3种不同的栽培基质中,筛选出铁皮石斛的最适生长基质;以其最适生长基质为栽培基质,设置清水(CK)和营养液浇灌2个处理,研究营养液浇灌对铁皮石斛生长的影响。[结果]所设置的3种栽培基质都适合铁皮石斛生长,其中,以石灰岩碎石滤水层5 cm+锯末(杂木粗糙的锯末)8cm+活苔藓2 cm为基质时,铁皮石斛长势最好、产量最高;适当浓度的营养液浇灌可较大幅度地提高铁皮石斛的产量。[结论]该研究为铁皮石斛的高效设施栽培提供了参考。     

铁皮石斛组培快繁技术的研究

为了建立铁皮石斛快速繁殖体系,以其茎段为材料,研究了不同培养基组分、激素浓度对铁皮石斛增殖和生根的影响。结果表明:铁皮石斛在初代培养中用酒精消毒30s后再用0.1%升汞杀菌6min最为适宜;最适培养基为MS基本培养基;在MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.5mg·L-1 NAA中铁皮石斛的增殖效果最佳,在MS培养基中添加3.0mg·L-1 IBA生根效果最好,生根率可达100%;试管苗移栽的最佳基质为苔藓,单独使用成活率可达90.6%。