加味左金丸对大鼠胃癌前病变胃黏膜EGFR、VEGF、C-met、Bcl-2、P53表达的影响

目的:观察加味左金丸对大鼠胃癌前病变胃黏膜EGFR,VEGF,C-met,Bcl-2,P53表达的影响．方法:采用MNNG,0．3 g／L雷尼替丁、56℃ 150 g／L盐水、8．5 g／L脱氧胆酸钠、400 mL／ L乙醇、饥饱失常等多因素造模,存活的43只大鼠随机分为自然恢复组、维甲酸组、加味左金丸高、中、低剂量组,各组大鼠作相应的处理后,免疫组化法检测各组大鼠胃黏膜组织 EGFR,VEGF,C-met,Bcl-2,P53表达水平．结果:加味左金丸高、中组EGFR(25．0％,0 vs 100％,P<0．05,P<0．01),中、低组VEGF(12.5％, 25．0％ vs 100％,均P<0．05)、以及高、中、低组Bcl-2蛋白(12．5％,0,25．0％ vs 100％,P<0．01 或P<0．05)阳性率与自然恢复组比较差异有统计学意义,与维甲酸组比较差异无统计学意义 (P>0．05):加味左金丸各组C—met蛋白阳性率与自然恢复组、维甲酸组比较差异均无统计学意义(P>0．05);各组均未见P53表达．结论:加味左金丸通过下调EGFR,VEGF, Bcl-2蛋白表达而抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡,进而发挥治疗大鼠胃癌前病变的作用．     

加味左金丸对胃癌前病变大鼠胃黏膜组织细胞增殖与凋亡的影响

[目的]探讨加味左金丸对胃癌前病变大鼠胃黏膜组织细胞增殖与凋亡的影响。[方法]将以饮用甲硝基亚硝基胍为主24周制成的胃癌前病变模型大鼠随机分为模型组，维甲酸组，加味左金丸高、中、低剂量组，治疗16周，采用免疫组化SP法，TUNEL法检测胃黏膜组织细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、Bcl-2蛋白及凋亡指数（AD）的表达情况。[结果]加味左金丸能明显下调胃癌前病变组织细胞的PCNA、Bcl-2的表达，上调AI。[结论]抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡可能是该方的作用机制之一。     

根除Hp对增殖细胞核抗原P53蛋白表达的影响

目前认为，幽门螺杆菌（Ｈｐ）并非胃癌直接致癌物，而是通过对胃粘膜的损伤，促进病变发展的条件因素使胃癌危险性增高［１］．我们通过对Ｈｐ感染的胃疾病进行根除治疗，采用ＰＣＲ技术及免疫组化技术观测治疗前后对胃粘膜上皮增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）及Ｐ５３蛋白表达的影响．探讨Ｈｐ可能的致癌机制．１　材料和方法１．１　材料　胃粘膜活检标本２０７例，取自辽宁省庄河市胃癌高发现场，每例取新鲜胃粘膜４块（胃窦及病灶部），其中１块行Ｈｐ＿ＰＣＲ检测，另外３块胃粘膜用中性福尔马林固定，石蜡包埋，制成５μｍ切片，行ＨＥ及…     

γ-干扰素对大鼠血管平滑肌细胞增殖及增殖细胞核抗原表达的影响

为观察γ 干扰素对血管平滑肌细胞增殖的影响及探讨其作用机制 ,培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞 ,以γ 干扰素 (5 0 0ku L)刺激血管平滑肌细胞 2 4h后 ,通过氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法及Western杂交印迹法观察γ 干扰素作用 2 4h对大鼠血管平滑肌细胞DNA合成及增殖细胞核抗原表达的影响。结果发现γ 干扰素明显抑制 10 %胎牛血清刺激血管平滑肌细胞引起的增殖细胞核抗原表达增多及氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷掺入增高 (P <0 .0 1) ,表明γ 干扰素具有较强的抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用。     

胃癌发生中增殖细胞核抗原与Bcl-2和P53蛋白表达的意义

胃癌的发病机理仍不清楚。细胞增殖与凋亡的失衡导致细胞的过度积聚是胃癌发生的病理基础。本文通过检测癌前病变和胃癌的细胞增殖指数,以及相关基因bel-2、p53的表达规律,以探讨细胞增殖与Bel-2和P53蛋白在胃癌发生发展中的意义。     

正肝方对黄曲霉毒素B1诱发的大鼠癌前病变肝组织增殖细胞核抗原和甲胎蛋白的影响

目的:观察正肝方对黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发的大鼠癌前病变肝组织增殖细胞核抗原(PCNA)和甲胎蛋白(AFP)的影响.方法:100只Wistar大鼠随机分为4组,模型组、正肝方小剂量预防组、正肝方大剂量预防组各30只,正常组10只.除正常组外,先后用AFB1和2-乙酰氨基芴(2-AAF)对3组大鼠进行造模.造模期间,将不同浓度正肝方水剂(0.6g/ml,0.3g/ml)分别灌喂正肝方预防组大鼠;用无菌蒸馏水灌喂模型组大鼠.8周后处死大鼠,肝组织取材.采用免疫组化染色法检测大鼠肝组织PCNA、AFP水平.结果:模型组大鼠肝组织PCNA、AFP染色标记指数(LI)、阳性单位(PU)值最高,正肝方大剂量组大鼠PCNA和AFP染色的PU值、LI值均较模型组显著降低(P<0.01或P<0.05).结论:大剂量正肝方能有效降低大鼠癌前病变肝组织PCNA和AFP的表达,减轻大鼠癌前病变肝组织的异常增生.     

增殖细胞核抗原和C-erbB-2癌基因蛋白在乙肝病毒感染慢性肝病中表达的意义

对１４６例慢性乙型肝炎，肝硬化和肝细胞癌标本作了免疫染色，观察其ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白及增殖细胞核抗原的表达情况，探讨他们在ＨＢＶ诱发ＨＣＣ过程中的作用意义。结果：（１）在ＨＢＶ感染的慢性肝炎阶段已出现ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｐ＾１８５和ＰＣＮＡ的异常表达；总阳性率分别为８７％和８．１％；（２）由慢性乙肝，肝硬化向肝细胞癌发展过程中，出现了ＰＣＮＡ表达逐渐升高，ｃ－ｅｒｂＢ－２Ｐ＾１８５逐渐下降的趋势     

抗肝衰复方对急性肝衰竭大鼠高迁移率族蛋白-1和增殖细胞核抗原表达的影响

目的:观察抗肝衰复方对急性肝衰竭大鼠肝组织高迁移率族蛋白-1(HMGB1)和增殖细胞核抗原(PCNA)的影响,探讨抗肝衰复方对大鼠急性肝衰竭的作用机制.方法:健康雄性Wistar大鼠110只,随机分为正常组10只、模型组20只、促肝细胞生长素(PHGF)对照组20只、茵陈蒿汤(YCHT)组20只、抗肝衰复方小剂量组20只、抗肝衰复方大剂量组20只.除正常组外其余各组分别给予D-氨基半乳糖(D-GalN)800mg/kg和内毒素脂多糖(LPS)0.1mg/kg的剂量,腹腔注射1次成模.正常组给予等量生理盐水腹腔注射.各组均于造模后2小时用药,按每次1.5mg/100g,每天2次灌胃.模型组和正常组均分别按1.5ml/100g灌服生理盐水,2次/d,连用3天.造模后72小时取材.观察造模后72小时内大鼠病死率.检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)与总胆红素(TBil)含量.HE染色观察肝组织病理变化,蛋白印迹法分析肝组织HMGB1表达,免疫组织化学染色法检测肝组织PCNA蛋白表达.结果:抗肝衰复方大剂量组病死率及血清ALT、AST、TBil含量降低;肝细胞坏死、炎性浸润程度显著改善;HMGB1表达水平明显降低,PCNA表达水平明显升高,与模型组相比P＜0.01或P＜0.05.结论:抗肝衰复方对急性肝衰竭大鼠模型的防护作用,可能与抑制HMGB1的释放,降低内毒素血症,促进肝组织PCNA表达有关.     

胆囊癌组织中增殖细胞核抗原和癌基因蛋白的表达及相关性研究

为探索胆囊癌中PCNA和c -erbB - 2表达及其分化、浸润及转移的关系和临床意义。应用HE和免疫组化 (S -P)方法对 98例胆囊癌进行组织学分型、分级、浸润和转移的观察 ,对其中 85例进行PCNA和c -erbB - 2免疫标记。女性 5 7例 ,男性 4 1例。组织学以腺癌为主 6 3例 (占 6 4 3% ) ,免疫组化标记 85例 ,高分化 38例 ,中分化2 7例 ,低分化 2 0例。PCNA阳性表达率为 88 2 % ,其中高表达率在三种分化中分别为 2 9 9%、5 1 9%和 5 5 % ,各组织学分级之间的差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;c-erbB - 2阳性率为 36 5 % ,与组织学分级有关 (P <0 0 5 ) ;PCNA高表达的胆囊癌 ,其c-erbB - 2阳性率显著高于低表达者 (P <0 0 5 ) ,PCNA的表达与胆囊癌的组织学分级和转移有关 ;c-erbB - 2的阳性表达与胆囊癌增殖活性、组织学分级和浸润深度有关 ,提示c -erbB - 2阳性表达预后不良     

葛根素对血管平滑肌细胞增殖及增殖细胞核抗原和凋亡抑制蛋白表达的影响

目的:通过观察葛根素对培养的脐动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和凋亡抑制蛋白(Survivin)表达的影响,探讨葛根素抑制平滑肌细胞增殖的机制。方法:分离培养人脐动脉平滑肌细胞,加入不同浓度葛根素与细胞孵育,采用免疫组化法检测血管平滑肌细胞的PCNA表达;提取RNA,采用Rt-PCR检测Survivin表达水平,并经核苷酸序列分析验证,灰度扫描测定Survivin/GAPDH(s/G)比率。结果:葛根素抑制血管平滑肌细胞的PCNA表达(P=0.0000);葛根素组Survivin/磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)(s/G)比率较对照组低。结论:葛根素具有抑制血管平滑肌细胞增殖的作用。     

盐酸小檗碱抗大鼠胃癌前病变及其作用机制

[目的]探讨盐酸小檗碱对实验性大鼠胃癌前病变的影响及与细胞凋亡和P53、Bcl-2蛋白、mRNA表达水平的关系.[方法]采用N-甲基-N-亚硝基胍饮水法建立大鼠胃癌前病变模型,用盐酸小檗碱预防和大、中、小3种剂量干预治疗,观察大鼠的一般情况,以光镜观察胃癌前病变的发生率,并运用末端DNA标记法检测凋亡率(AI),免疫组化法检测细胞中P53和Bcl-2蛋白表达,逆转录多聚酶链式反应检测P53和Bcl-2的mRNA水平.[结果]经盐酸小檗碱干预大鼠,其癌前病变的发生率明显降低,与模型组比较P＜0.05,AI显著提高,3种剂量组与模型组比较均P＜0.05,并伴有Bcl-2、突变型P53基因蛋白表达水平降低,野生型P53基因mRNA水平升高,Bcl-2基因mRNA水平下调,其中以大剂量组尤为显著,与模型组比较P＜0.01.[结论]盐酸小檗碱能预防和治疗实验性大鼠胃癌前病变,其机制与提高细胞凋亡率和调控基因表达有关.     

幽门螺杆菌感染与老年胃癌及癌前病变PCNA、Bcl-2、p16蛋白表达的关系

目的　探讨幽门螺杆菌 ( Hp)感染老年胃癌及癌前病变患者增殖细胞核抗原 ( PCNA)、p1 6和关键性凋亡调节基因 Bcl- 2蛋白的表达。方法　免疫组化方法测定 PCNA、Bcl- 2、p1 6蛋白表达。快速尿素酶法和 HE染色检测 Hp感染。结果　从浅表性胃炎到胃癌 PCNA指数呈递增趋势 ,各组间均有显著性差异 ( P<0 .0 5)。浅表性胃炎和萎缩性胃炎组中 Hp阳性患者与 Hp阴性者的 PCNAL I相比有显著性差异 ( P<0 .0 5)。Hp阳性组肠上皮化生、异型增生组织中 Bcl- 2的阳性表达率显著高于 Hp阴性组 ( P<0 .0 5)。 p1 6在慢性胃炎中阳性表达率显著高于胃癌、肠上皮化生和异型增生 ( P<0 .0 5)。 Hp阳性萎缩性胃炎组织的 p1 6阳性表达率低于 Hp阴性组 ( P<0 .0 5)。结论　在老年胃癌发生的早期即存在 p1 6基因表达低下 ,PCNA、Bcl- 2蛋白表达增加     

阻癌胃泰对胃癌前病变Bcl-2及P53 基因蛋白的影响

[目的]探讨胃癌前病变(PLGC)Bcl-2、P53基因蛋白的表达及阻癌胃泰的治疗机制.[方法]N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍溶液加胃黏膜机械损伤诱发Wistar大鼠PLGC状态.用阻癌胃泰与维酶素预防和治疗,观察对病变黏膜组织中P53、Bcl-2基因蛋白水平的影响.[结果]中药组能明显阻断化学致癌物对黏膜的炎症损伤,改善PLGC组织黏膜不典型增生程度;同时中药组治疗后Bcl-2、P53基因蛋白阳性指数亦明显低于病理对照组(P＜0.05).[结论]益气化瘀为主的阻癌胃泰通过改善PLGC大鼠气虚血瘀的病理基础,降低病变组织增殖水平,诱导细胞正常凋亡,从而对PLGC细胞的增殖有良好的阻断作用.     

Bax and Bcl-2 protein expression in gastric precancerous lesions: immunohistochemical study

BACKGROUND AND AIMS: Bcl-2 protein prolongs cell survival in the face of classical apoptotic stimuli, and is considered to be a suppressor of apoptosis. Bax plays a key role in apoptosis by accelerating cell death after an apoptotic stimulus. The aim of our study was to determine the roles of the Bax proapoptotic gene and the Bcl-2 antiapoptotic gene in the carcinogenesis of gastric cancer. METHODS: One hundred and forty-five gastric biopsy specimens of chronic gastritis, atrophic gastritis, intestinal metaplasia and gastric dysplasia were studied. Using immunohistochemical methods, Bax and Bcl-2 protein expression was observed. RESULTS: Bax was expressed in epithelial cells in all cases of chronic gastritis. Bax was not detected in 26% of specimens of atrophic gastritis. As intestinal metaplasia develops, Bax is further suppressed. In biopsy samples with dysplasia, Bax expression was demonstrated only in 12% of biopsy samples. Although Bcl-2 protein was not detected in chronic gastritis, aberrant expression was found in gastric epithelial intestinal metaplasia and dysplasia. CONCLUSIONS: The suppression of Bax and overexpression of Bcl-2 protein is an early event in gastric tumorigenesis, before gastric dysplastic changes occur.     

大黄素对肾脏系膜细胞增殖细胞核抗原的影响

本文应用体外细胞培养和免疫组化技术,以增殖细胞核抗原(PCNA/cyclin)为标志抗原,观察了大黄素对肾小球系膜细胞周期调控的影响,发现大黄素能明显抑制系膜细胞向S期的转化。我们以往的工作已证实大黄素能抑制肾小球系膜细胞c-myc原癌基因mRNA的表达,并可能通过阻抑系膜细胞由G_1期向S期转化,进而抑制系膜细胞增殖。本项研究通过观察大黄素对细胞周期S期标志抗原(PCNA/cyclin)的影响,进一步证实了上述理论。     

Effect of Helicobacter pylori infection on Bax protein expression in patients with gastric precancerous lesions

AIM: To investigate the effect of Helicobacter pylori (H pylori) infection on Bax protein expression, and explore the role of H pylori in gastric carcinogenesis. METHODS: H pylori was assessed by rapid urease test and Warthin-Starry method, and expression of Bax protein was examined immunohistochemically in 72 patients with pre-malignant lesions. RESULTS: Bax protein was differently expressed in intestinal metaplasia and gastric dysplasia, and showed 63.99% positivity. The positivity of Bax protein expression in Hpylori-positive gastric precancerous lesions (72.3%) was significantly higher than that in H pylori-negative gastric precancerous lesions (48.0%, X~2=4.191, P<0.05). H pylori infection was well correlated with the expression of Bax protein in gastric precancerous lesions (r=0.978, P<0.01). After eradication of H pylori, the positivity of Bax protein expression significantly decreased in H pylort-positive gastric precancerous lesions (X~2=5.506, P<0.05). In the persisting H pylori-infected patients, the positivity of Bax protein expression was not changed. CONCLUSION: H pylori infection may be involved in the upregulation of Bax gene, which might be one of the mechanisms of H pylori infection-induced gastric epithelial cell apoptosis. H pylori might act as a tumor promoter in the genesis of gastric carcinoma and eradication of H pylori could inhibit gastric carcinogenesis.     

胃癌组织中Bcl-2、Bax的表达及其与细胞凋亡的关系

目的观察Bcl-2及Bax在胃癌组织中的表达变化及其与细胞凋亡的关系。方法选择70例慢性胃炎、49例肠上皮化生、64例异型增生及81例胃癌手术切除标本，用免疫组化法检测其Bcl-2和Bax蛋白，用TUNEL技术检测凋亡细胞。结果Bcl-2、Bax在重度异型增生中阳性表达率最高，在肠化生与异型增生中的阳性表达率较慢性胃炎和胃癌高。从慢性胃炎到肠化生，再到异型增生的演变过程中，细胞凋亡指数逐渐增高，至中度异型增生时达最高峰，随后开始下降，至胃癌时最低。Bcl-2、Bax蛋白表达与胃癌细胞凋亡指数呈负相关（r分别为-0．760、-0.844，P均〈0．01）。结论Bal-2的表达可能是胃癌发生过程中的早期行为。Bax对Bcl-2的抑凋亡功能有对抗作用。     

黄参膏对胃癌癌前病变细胞凋亡及BCL-2蛋白表达的影响

目的:探讨黄参膏对胃癌癌前病变细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法:将46例胃癌癌前病变患者随机分为2组,治疗组28例,口服黄参膏60ml/天,对照组18例,口服维酶素片2.4g/天,疗程2月,治疗前后检测细胞凋亡指数和Bcl-2蛋白的表达。采用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,采用免疫组化检测Bcl—2蛋白的表达。结果:黄参膏组服药前后细胞凋亡指数分别为19.8±9.6％和32.8±16.2％,服药后细胞凋亡指数显著高于服药前(P<0.05)。Bcl-2蛋白阳性率治疗前后分别为53.6％和28.6％,治疗前后比较具有显著性差异(P<0.05)。而对照组细胞凋亡指数和Bel-2蛋白阳性率在服药前后比较均无显著性差异(P>0.05)。结论:黄参膏可诱导胃癌癌前病变细胞凋亡。