猫爪草提取物对猪源大肠杆菌体外抑菌试验研究

为研究信阳道地药材猫爪草对猪源大肠杆菌的抑菌效果,试验采用药敏片法、打孔法和牛津杯法三种不同方法分别测量抑菌圈大小;同时采用微量二倍稀释法测定试验菌株最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。试验结果表明,猫爪草提取物对临床猪源大肠杆菌具有一定抑菌效果。     

猪源益生菌体外抗猪传染性胃肠炎病毒作用的研究

为研究猪源益生菌抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的作用,并分析其可能的抗病毒机制,本研究在体外细胞感染猪睾丸细胞(ST)模型上,采用MTT比色法、TCID50法、间接免疫荧光法以及半定量RT-PCR法评价益生菌抗TGEV的作用.MTT试验中,在3种作用方式(益生菌预处理细胞,再接入病毒;益生菌与病毒同时接入细胞;病毒先感染细胞,再接入益生菌)下,所选益生菌对TGEV感染细胞均有抑制作用:益生菌预处理细胞后,再感染病毒,细胞存活率升高;益生菌与病毒体外相互作用后接入细胞,病毒对细胞的侵害能力下降;病毒感染细胞后再接入益生菌,益生菌抵抗TGEV感染细胞的能力相对较弱.间接免疫荧光试验和半定量RT-PCR试验分别采用益生菌预处理细胞,再接入病毒以及益生菌和病毒体外作用后同时接入细胞两种方式来检测益生菌对TGEV感染细胞的抑制作用,结果与MTT结果一致.实验结果表明所选的3株益生菌及其代谢产物均能够抑制TGEV感染细胞,但菌株间存在差异.不同的作用方式对TGEV感染细胞的抑制作用也有所差异,其中益生菌预处理组的抑制作用最强,病毒感染细胞后再用益生菌进行处理组的抑制作用最弱.     

中药对猪源大肠杆菌O_8体外抑菌试验研究

为了探讨猪源大肠杆菌O8对黄连等10种中药的体外敏感性,采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法对10种中药水提物进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连对大肠杆菌O8呈高度敏感,抑菌圈直径为21.3 mm,其MIC值为7.813mg/mL,抑菌效果最好;黄芩、五倍子呈中度敏感,其MIC值为31.25mg/mL;而苦参不敏感,其MIC值为500mg/mL,抑菌效果差。     

抗菌肽对猪源大肠杆菌和猪链球菌体外抑菌活性研究

<正>1材料和方法1.1材料(1)试验菌株。8株猪大肠杆菌(E.coil)分离自大肠菌感染的猪体,8株猪链球菌株分离自感染的病猪,均来源于河南省内猪场,由河南农业大学牧医工程学院传染病实验室自行分离保存。(2)试剂和药物。抗菌肽和牛肉膏(生化试剂)购自北京奥星生物技术有限公司,批号20070720;蛋白胨(生化试剂)购自北京奥星生物技术有限公司,批号20081102;氯化钠(分析纯)购自天津北方天医化学试剂厂,批号20080924;磷酸氢二钾(分析纯)购自上海恒信化学试剂有限公司,批号20080602。     

单一中草药以及复方中草药体外抑菌效果研究

试验旨在探究单一中草药、多种中草药组方对猪肠道大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用,筛选效果较好的单一中草药以及中草药组方。试验选用黄芪、何首乌、黄连、金银花、大黄、白头翁、五倍子、葛根等八种中草药的提取液,采用双层琼脂扩散法和微量二倍稀释法,测定其对3种育肥猪常见的有害肠道菌株抑菌圈的大小和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:(1)猪大肠杆菌对黄连、金银花和五倍子呈高度敏感,抑菌圈直径分别为24.54、20.13、20.13 mm,其MIC值分别为31.25、125、125 mg/ml。(2)金黄色葡萄球菌对黄芪、黄连和大黄呈低度敏感,抑菌圈直径分别为14.07、12.57、14.4 mm,其MIC值分别为250、125、125 mg/ml。(3)沙门氏菌对黄芪呈低度敏感,MIC值为250 mg/ml,黄连和大黄对沙门氏菌呈中度敏感,MIC值均为62.5 mg/ml。(4)黄芪和何首乌提取液混合试验,以黄芪0.75 mg/ml,何首乌0.25 mg/ml组合效果最好,对大肠杆菌呈中度敏感,抑菌圈直径为16.1 mm;对金黄色葡萄球菌呈低度敏感,抑菌圈直径为11 mm;对沙门氏菌呈不敏感,抑菌圈直径为9.8 mm。(5)黄芪、黄连和大黄三种提取液混合试验,以黄芪0.25 mg/ml,黄连0.5 mg/ml,大黄0.25 mg/ml组合效果最好,对大肠杆菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.4 mm;对金黄色葡萄球菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.2 mm;对沙门氏菌呈低度敏感,抑菌圈直径为12.9 mm。综上所述,单一添加黄芪、黄连和大黄三种中草药对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌体外抑菌效果较好。以黄芪,黄连和大黄三种中草药复配的组方对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌体外抑菌效果最好。     

中草药与抗生素联用对猪源沙门氏杆菌的体外抑菌效果观察

为了评价常用抗菌药物和中草药以及联合作用后对猪源沙门氏杆菌的体外抑菌效果,试验采用醇提法提取中药有效成分,用试管二倍稀释法分别测定6种抗生素和7种中草药对猪源沙门氏杆菌的最小抑菌浓度(MIC),用棋盘法测定各药物联合作用的抑菌效果。结果表明:阿米卡星对沙门氏杆菌的抑菌效果最强(MIC为4μg/mL),其次为诺氟沙星与链霉素(MIC为128μg/mL)。在中草药中,乌梅的抑菌效果最强(MIC为31.25 mg/mL),其次为连翘(MIC为62.5 mg/mL)。联合药敏试验结果表明,头孢噻肟分别与阿米卡星、诺氟沙星联合,阿米卡星与氟苯尼考联合,乌梅与艾叶联合均表现为协同作用;阿米卡星分别与诺氟沙星、乌梅、连翘联合,乌梅分别与诺氟沙星、氟苯尼考联合均表现为相加作用;其他药物组合均表现为无关或颉颃作用。说明可通过联合用药减少用药剂量达到治疗疾病的目的。     

百里香酚和植酸对猪源致病菌的抑菌效果研究

研究旨在探究百里香酚和植酸对猪源大肠杆菌和沙门氏菌的抑制效果,为进一步改善猪舍环境和猪肠道功能研究提供参考。试验采用牛津杯法、二倍稀释法和平板涂布法,分别测定百里香酚和植酸对两种猪源致病菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）的影响。结果表明：猪源大肠杆菌和沙门氏菌对50 mg/mL百里香酚表现为高度敏感,对17.5%植酸表现为极度敏感。百里香酚对猪源大肠杆菌MIC和MBC分别为1.56 mg/mL和3.12 mg/mL,对猪源沙门氏菌MIC和MBC均为1.56 mg/mL;植酸对猪源沙门氏菌的抑制效果强于猪源大肠杆菌,对猪源大肠杆菌MIC和MBC均为4.37%,对猪源沙门氏菌MIC和MBC均为2.18%。说明百里香酚和植酸对猪源大肠杆菌和沙门氏菌具有较好的抑菌效果,在抑菌活性物质筛选中具备较好的应用前景。     

单味中草药对猪源沙门氏杆菌的体外抑菌试验

为了分析20种单味中草药对猪源沙门氏杆菌的体外抑菌效果,为进一步研发防治猪源沙门氏杆菌复方中草药制剂提供基础,试验利用水提法提取20种单味中草药有效成分,并调整中草药药液浓度为1 g/mL,利用牛津杯法测定20种单味中草药体外抑菌圈直径,并对有抑菌效果的中药用试管二倍稀释法-平板法测定最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:猪源沙门氏杆菌对诃子、苦参、黄连、白头翁、沙棘、酱败草、锦灯笼等7种药物高度敏感,对连翘、金银花、五味子、五倍子、乌梅等5种药物中度敏感,对其他药物不敏感。     

黄连等中草药组方对猪大肠杆菌体外抑菌效果研究

大肠杆菌是革兰氏阴性菌，大小0.5×1~3μm。周生鞭毛，能运动，无芽孢。大量存在于环境中、为人和动物肠道中的常居菌，分为共生菌株和致病性菌株。宿主健康状态下一般多不致病，当菌群失衡受到致病性菌株感染或者寄主的免疫力下降则有可能会引发腹泻、胆囊炎、腹膜炎等疾病甚至死亡。由于抗生素的滥用使很多致病菌的耐药性越来越强，严重威胁人和动物的健康，加大防治难度。在解决抗生素类耐药问题中，中草药作为抗生素药物的替代药已成为研究的热点。部分中草药具有抗菌消炎、止痛止吐、补血补气等功效，并有研究证实多种中草药对多种家畜、家禽以及水产动物致病菌具有良好的抑菌效果。但对中草药组方的抗菌药物研究较少，本试验选取的黄连、黄柏、白头翁等中草药是自然界常见的植物，含有抑菌成分，且具有靶位多、广谱性、不易产生耐药性等优点。因此，本试验通过水煎法获得的中草药提取物研究其对大肠杆菌的体外抑菌效果。     

单味中草药提取物对猪源沙门氏菌的抑菌效果

本试验旨在探讨黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药对猪源沙门氏菌的抑菌效果。试验制备黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药提取物后,采用牛津杯法测定五种中草药提取物对猪霍乱沙门氏菌的抑菌作用,并采用梯度稀释法测定其最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC),观察其对沙门氏菌的体外抑制作用。结果表明,空白对照组无抑菌圈,阳性对照组抑菌圈直径为(20.13±1.47)mm;与对照组相比,苦参、黄芪组抑菌作用差异显著(P>0.05),敏感程度均为高敏;黄连、黄柏、甘草组的差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),敏感程度为高敏或中低敏;黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药的MIC浓度分别为20g/L、10g/L、80g/L、20g/L、160g/L。试验显示,黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药均可一定程度地抑制猪源沙门氏菌,苦参抑制作用最强,与抗生素效果一致,其次分别为黄芪、黄连、黄柏、甘草。     

比较益生菌和中药组合对鸡源大肠杆菌抑菌效果分析

试验比较多种益生菌和中药组合对鸡源大肠杆菌的抑菌效果,并对其抑菌机理进行分析.结果 表明:益生菌中,枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌对鸡源大肠杆菌具有明显的抑菌活性,但地衣芽孢杆菌没有效果.中药组合中,黄连和茯苓、赤芍、金银花、鱼腥草、桂枝分别配伍时抑菌效果明显,但中药组合的抑菌效果明显低于益生菌.进一步研究益生菌中的抑菌成分...     

猪源乳酸杆菌的分离鉴定及体外抑菌试验

为了获得用于研制微生态制剂的乳酸杆菌菌株,从健康仔猪小肠中利用MRS固体培养基分离得到一株革兰氏阳性杆菌,通过培养特性、染色特征、菌落形态以及生化鉴定结果,初步判定该菌株为乳酸杆菌,再结合16S rDNA分子鉴定进一步确定该菌株为乳酸杆菌。牛津杯法体外抑菌试验结果显示,该菌对致病性大肠杆菌的抑菌效果较好,可以作为微生态制剂的保存菌种。     

益生菌对温度、pH及抗生素耐受性的研究

试验旨在研究益生菌对不同梯度的温度、pH及饲料中抗生素的耐受性,为益生菌及抗生素的实际应用提供理论依据。结果表明,枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌不能耐受超过90℃高温,可耐受pH 3.0~10.0的环境;啤酒酵母不能耐受60℃及超过60℃高温,耐受pH 3.0~10.0的环境;干酪乳杆菌不耐受50℃及超过50℃高温,在pH 3.0~10.0条件下对其表现出刺激生长的作用;乳酸链球菌能够耐受60℃,其存活率为96%,且能够耐pH 3.0的酸性环境,不耐受pH≥4.0的环境。饲料中添加300~400 mg/kg的硫酸黏杆菌素对枯草芽孢杆菌产生抑制作用;15~30 mg/kg的那拉霉素对枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、干酪乳杆菌和乳酸链球菌产生抑制作用;30~40 mg/kg维吉尼亚霉素对干酪乳杆菌产生抑制作用;啤酒酵母能够耐受饲料中添加的抗生素。     

裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌的体外抑菌效果

为研究裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌体外抑菌试验,采用牛津杯法和肉汤二倍稀释法测定裸花紫珠提取物抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC).结果表明,裸花紫珠提取物对大肠杆菌属于中度敏感,平均抑菌圈直径为16 mm,最小抑菌浓度(MIC)为32.0 mg/mL.试验结果表明,裸花紫珠提取物对鸡源大肠杆菌具有良好的抑菌效果,为下一...     

猪源益生菌对育肥猪生长性能影响

<正>随着我国生活水平提高,人们越来越重视畜产品质量,获取品质优良且安全的畜产品已成为共同的目标,因此,寻找出提高畜产品质量安全的饲料添加剂成为研究热点。在畜禽饲养过程中,长期应用抗菌药物可引起二重感染、耐药菌产生、动物机体免疫力下降以及药物残留等诸多问题,所以益生菌制剂等替     

猪源大肠杆菌分离鉴定及金英汤对其体外抑菌试验

为了评价金英汤对临床分离的1株猪源大肠杆菌的体外抑菌作用,对分离菌进行形态学、生理生化、16S r DNA鉴定及致病性观察,并采用试管法和平板法测定金英汤的体外抑菌试验。结果:分离获得1株致病性大肠杆菌,金英汤对其最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)分别为31.25 mg/m L和62.5 mg/m L。结果提示,该猪场有致病性大肠杆菌的存在,应该对该场进行彻底消毒,金英汤对大肠杆菌分离株具有抑制作用,可为临床预防和治疗仔猪腹泻大肠杆菌病提供理论依据。     

苗药白接骨醇提物对耐药性猪源大肠杆菌体外抑菌效果观察

采用管碟法、微量稀释法和琼脂平板计数法,测定抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),分析临床分离的大肠杆菌菌株的耐药性,并观察苗药白接骨醇提物对标准大肠杆菌菌株和临床分离的具有耐药性的猪源大肠杆菌菌株的抑菌效果。结果显示,临床分离的大肠杆菌菌株对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、头孢曲松、环丙沙星均无抑菌圈产生,表现多重耐药。而白接骨醇提物对两株细菌的抑菌圈直径分别达到33.20±0.82 mm和33.78±0.38 mm;MIC均为0.78 mg/m L;MBC均为1.56 mg/m L。苗药白接骨醇提物对具有耐药性的猪源大肠杆菌在体外有较好的抑菌效果。     

益生菌大肠杆菌Nissle 1917抗逆性能、猪肠上皮细胞黏附率及抑菌效果研究

本试验旨在研究益生菌大肠杆菌Nissle 1917(Ec N)抗逆性能、猪肠上皮细胞黏附率及抑菌效果。采用体外法对Ec N进行生长曲线绘制和耐酸、耐胆盐、耐热性能的测定;以猪肠上皮细胞IPEC-J2细胞为体外细胞模型,考察了Ec N对该细胞的黏附率以及对致病菌大肠杆菌K88的黏附抑制率;同时通过蛋白质印迹法检测了Ec N对IPEC-J2细胞β-防御素-2和Toll样受体4的水平的影响。结果表明:1)Ec N对高酸、高胆盐和高温环境具有一定耐受能力。2)Ec N对IPEC-J2细胞的黏附作用以对数期最佳,黏附率达33.96%,显著高于迟缓期、稳定期和衰亡期(P0.05)。3)Ec N对致病菌大肠杆菌K88具有良好的抑制效果,黏附抑制率达87.84%。4)Ec N还能上调IPEC-J2细胞β-防御素-2和Toll样受体4水平。结果提示,益生菌Ec N具有较好的抗逆性能,能够良好地黏附猪肠上皮细胞,对致病菌大肠杆菌K88具有良好的抑制作用。