非小细胞肺癌组织中促红细胞生成素及其受体mRNA的表达及意义

目的 探讨促红细胞生成素（EPO）及其受体（EPO-R）在非小细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及与临床病理参数的关系。方法 采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测31例NSCLC组织、相应的癌旁组织及21例肺良性病变组织中EPO和EPO-R的mRNA水平,并分析其水平与NSCLC临床病理参数的关系。结果 EPO-mRNA和EPO-R mRNA在NSCLC组织中的相对表达量分别为0.79±0.18和0.60±0.13,在癌旁组织中分别为0.23±0.09和0.17±0.09,在肺良性病变组织中分别为0.19±0.11和0.13±0.09。EPO mRNA和EPO-R mRNA 在NSCLC组织中的表达高于癌旁组织和肺良性病变组织,差异有统计学意义（P＜0.05）。EPO mRNA和EPO-R mRNA的表达与NSCLC的临床分期、病理分型及吸烟史均无关（P＞0.05）。结论 NSCLC中EPO／EPO-R mRNA 高表达,提示EPO／EPO-R可能参与肿瘤的发生过程,因此可将其表达水平作为NSCLC的辅助性诊断指标。     

促红细胞生成素治疗晚期非小细胞肺癌化疗所致的贫血

目的: 探讨促红细胞生成素(EPO)对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗所致贫血的疗效。方法:46例晚期NSCLC采用以顺铂为主联合化疗方案所致贫血患者分两组,EPO治疗组26例患者给予皮下注射EPO,剂量为150 ug/kg,3次/周,当血红蛋白(Hh)值>150g/L时,EPO剂量减半;对照组20例不给予EPO治疗,给予口服利血生20 mg/次,3次/d。结果:治疗后4周起EPO治疗组患者血红蛋白(Hb),红细胞压积(HCT)、红细胞总数(RBC)值均明显上升,与治疗前相比差异有显著性(P值<0.001),与对照组相比差异有显著性(P值<0.005)。EPO治疗组总有效率为92.3％,与对照组(66.7％)相比差异有显著性(P<0.05)。结论:EPO对晚期非小细胞肺癌采用以顺铂为主联合化疗方案所致贫血有肯定的疗效。     

CCDC25在非小细胞肺癌细胞中高表达及其促细胞增殖的分子机制

目的:探讨CCDC25蛋白在非小细胞肺癌细胞中的表达及其对非小细胞肺癌增殖的影响.方法:应用GEPIA数据库分析CCDC25在肺癌组织中表达明显高于癌旁组织,结合Western blot检测和免疫荧光,检测其在非小细胞肺癌细胞系中的表达和定位.Western blot检测YAP、p-YAP、LATS1、p-LATS1蛋...     

重组人血管内皮抑制素治疗晚期非小细胞肺癌的效果及对血清促红细胞生成素及其受体表达情况的影响

目的 探讨重组人血管内皮抑制素治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床效果及对血清促红细胞生成素(EPO)及其受体表达情况的影响.方法 采用随机数字表法将122例晚期NSCLC患者随机分为联合组与对照组,各61例.两组患者均采用多西他赛+铂类药物(DP)方案进行化疗,联合组患者在此基础上采用重组人血管内皮抑制素进行治疗...     

非小细胞肺癌的分子靶向治疗进展

目前在全球范围内肺癌已成为发病率和死亡率增长最快、严重危害人类健康和生命的恶性肿瘤之一.在我国肺癌病死率已居肿瘤死亡率首位,其中非小细胞肺癌(NSCLC)约占肺癌的80%以上,且多数患者确诊时已属晚期,因此内科治疗仍是肺癌的主要治疗方法.但近十年来以化疗为主的治疗手段并未使非小细胞肺癌的疗效获得突破性进展.20世纪90年代以来,关于肺癌的分子靶向治疗研究不断深入,其中以表皮生长因子受体和肿瘤血管生成作为靶点的药物为主,部分药物已经在晚期NSCLC治疗中显示出较好的临床疗效.21世纪分子靶向治疗已取得了飞跃的进展,许多新的靶向性治疗研究为NSCLC治疗提供新的治疗途径.本研究将从以表皮生长因子受体为靶点药物,抗肿瘤血管生成药物以及多靶点抗肿瘤药物3个方面就目前非小细胞肺癌靶向治疗的研究进展作一介绍.     

新辅助化疗对Ⅲ期非小细胞肺癌细胞凋亡和增殖的影响

目的：探讨新辅助化疗对非小细胞肺癌肿瘤细胞凋亡及对肿瘤细胞增殖的影响。方法：选取Ⅲ期非小细胞肺癌患者56例行新辅助化疗后并手术．并选取同期50例直接手术患者作为对照组。两组患者的手术标本．分别采用末端转移酶介导的dUTP切口末端标记法（TUNEL）行细胞凋亡检测，采用免疫组化标记链菌亲和素生物素法（LSAB），检测细胞增殖抗原Ki－67的表达。结果：新辅助化疗组肿瘤细胞凋亡指数（AI）均数为9．34％，对照组肿瘤细胞凋亡指数均数为5．27％．两组比较有显著差异（P〈0，001）。新辅助化疗组肿瘤细胞增殖抗原Ki－67阳性表达率均数为35．68％．对照组Ki－67阳性表达率均数为59.35％，两组比较差异显著（P〈0．001）。新辅助化疗组及对照组中，肿瘤细胞凋亡指数AI与增殖指数Ki-67的阳性表达均成负相关。结论：新辅助化疗能诱导Ⅲ期非小细胞肺癌肿瘤细胞的凋亡．并能抑制其增殖。     

非小细胞肺癌的分子靶向治疗

与传统细胞毒性化疗相比,分子靶向治疗能更特异性作用于肿瘤而毒性反应较轻。新的靶向治疗药物得到发展,并相继在晚期非小细胞肺癌一线、二线治疗中进行临床试验,其中有的药物显示了较好的疗效。本文对近年来关于非小细胞肺癌靶向治疗的临床试验进行回顾。     

miR-1293促进非小细胞肺癌耐药分子机制探讨

目的microRNA与非小细胞肺癌耐药性密切相关,但miR-1293在非小细胞肺癌中的作用机制仍不清楚。本研究探讨miR-1293调控Akt信号通路促进非小细胞肺癌耐药的分子机制。方法培养人肺癌A549与耐药细胞株A549/DDP,RT-qPCR检测miR-1293和抑癌基因RUNX3 mRNA表达,蛋白质印迹检测RUNX3蛋白表达。采用脂质体法将miR-1293抑制物(miR-1293inhibitor)和阴性对照RNA(miR-NC)转染A549/DDP。MTT检测细胞IC50;流式细胞仪检测细胞凋亡;蛋白质印迹检测凋亡相关蛋白Bcl-2和RUNX3;荧光素酶报告基因检测miR-1293能否调控RUNX3;qPCR检测miR-1293和RUNX3的mRNA表达;蛋白质印迹检测MDR1/ABCB1、ABCC1、RUNX3、Akt和p-Akt蛋白表达。结果A549/DDP细胞对DDP的耐药指数为7.23。miR-1293在耐药细胞株A549/DDP的表达(3.89±0.08,W=0.946,P=0.698)与A549组(1.01±0.05,W=0.938,P=0.622)相比升高,差异有统计学意义,t=74.78,P<0.001;而RUNX3 mRNA和RUNX3蛋白在耐药细胞株A549/DDP的表达与A549组相比降低,tmRNA=7.74,t蛋白=20.04,均P<0.001。与miR-NC比较,miR-1293 inhibitor组IC50降低,t=94.49,P<0.001。miR-1293 inhibitor组MDR1/ABCB1、ABCC1蛋白表达低于miR-NC,tMDR1/ABCB1=10.61,tABCC1=39.57,均P<0.001。与miR-NC比较,miR-1293 inhibitor组细胞凋亡增加,t=7.15,P<0.001。促凋亡蛋白RUNX3在miR-1293 inhibitor组表达更高,t=33.63,P<0.001;凋亡抑制蛋白Bcl-2表达更低,t=11.62,P<0.001。荧光素酶报告实验显示,在野生型RUNX33′UTR中,miR-1293 inhibitor的荧光素酶活性(6.24±0.04,W=0.911,P=0.399)高于miR-NC(3.21±0.07,W=0.879,P=0.221),t=92.06,P<0.001;提示RUNX3是miR-1293靶基因。miR-1293 inhibitor组RUNX3蛋白表达高于miR-NC,t=17.75,P<0.001;Akt1、p-Akt低于miR-NC组,tAkt1=67.55,tp-Akt=16.98,均P<0.001。结论在耐药细胞株A549/DDP中miR-1293高表达,抑制细胞凋亡,促进细胞耐药,其机制可能与靶向下调RUNX3,促进Akt信号通路激活有关。     

长链非编码RNA HOTTIP 通过调控细胞凋亡水平促进非小细胞肺癌增殖

背景与目的：探索非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)有效的早期诊断及预后标志物具有重要的科学意义和临床价值。长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤中的作用逐渐引起研究者的关注。本研究拟分析lncRNA HOTTIP在NSCLC中的表达情况及对NSCLC细胞增殖水平的影响和机制。方法：采用实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测方法检测54例NSCLC组织及其对应癌旁组织的HOTTIP表达情况,分析NSCLC组织HOTTIP表达与临床病理参数的相关性;MTT方法检测肺癌细胞增殖水平,流式细胞术检测凋亡率的改变;蛋白［质］印迹法(Western blot)检测目的基因的蛋白表达变化。结果：与癌旁组织比较,HOTTIP在肺癌组织中的表达率明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。HOTTIP表达与患者淋巴结转移和TNM分期相关。转染HOTTIP siRNA至A549肺癌细胞后,结果显示,与未转染组和阴性质粒转染组相比,转染siRNA-HOTTIP 的A549细胞HOTTIP 表达明显降低;HOTTIP表达下调后细胞增殖速度减慢,凋亡率增加,凋亡相关蛋白Bax的表达增加,Bcl-2表达减少。结论：HOTTIP是一种新的NSCLC生物标志物,可作为潜在的治疗新靶点。     

miR-124对非小细胞肺癌细胞增殖的影响及其机制

目的 探讨miR-124对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖的影响及其机制.方法 采用CCK8法和克隆形成实验评估miR-124对细胞增殖能力的影响.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测miR-124转染后细胞内PIM3的表达水平.通过双荧光素酶报告系统检测miR-124对PIM3荧光素酶活性的影响,证实miR-124可靶向作用于PIM3的3'UTR区.采用qRT-PCR和Western blot检测si-PIM3转染后细胞内PIM3的表达情况,采用CCK8法和克隆形成实验检测沉默PIM3后对细胞增殖能力的影响.结果 ①miR-124模拟物组的细胞活性(OD值)低于其对照组,差异有统计学意义,且呈时间依赖性;miR-124模拟物组的克隆形成数明显少于其对照组.②miR-124模拟物组的miR-124过表达后,其PIM3表达低于其对照组,差异有统计学意义.③含野生型结合位点(PIM3 3'UTR区完整片段)的miR-124模拟物组的荧光素酶活性低于其对照组,差异有统计学意义;含突变型结合位点(PIM3 3'UTR区突变片段)的两组无明显差异.④si-PIM3组的PIM3被沉默后,其表达水平明显低于其对照组,差异有统计学意义;si-PIM3组的细胞活性(OD值)低于其对照组,差异有统计学意义,且呈时间依赖性;si-PIM3组的克隆形成数明显少于其对照组.结论 miR-124可通过靶向作用于PIM3的3'UTR区下调后者的表达而抑制NSCLC细胞的增殖.     

MiRNA-25在非小细胞肺癌吉非替尼耐药细胞中的表达及其作用机制

目的 探讨miRNA-25在非小细胞肺癌(NSCLC)吉非替尼耐药细胞中的表达及其作用机制.方法 采用RT-PCR法检测miRNA-25在NSCLC吉非替尼耐药细胞PC9/G及亲本细胞PC9中的表达;采用体外转染法将miRNA-25模拟物或抑制物分别转染PC9和PC9/G细胞,采用CCK8实验检测转染前后细胞对吉非替尼敏感性的变化;并用Westem blot检测转染前后细胞中Bim的表达变化.采用双荧光素酶报告基因验证miRNA-25是否作用于Bim基因的3'-UTR区预测靶位.结果 miRNA-25在PC9/G细胞中的表达水平是PC9细胞的(7.15±1.26)倍(P＜0.01).PC9细胞转染miRNA-25模拟物后,吉非替尼对PC9细胞增殖的抑制率较转染前明显下降(P＜0.01),细胞内Bim表达水平较转染前明显下降(P＜0.05).PC9/G细胞在转染miRNA-25抑制物后,吉非替尼对PC9/G细胞增殖的抑制率与转染前比较明显增加(P＜0.01),细胞内Bim表达水平较转染前明显增高(P＜0.05).经双荧光素酶报告基因验证Bim是miRNA-25的靶基因.结论 miRNA-25在NSCLC耐药细胞PC9/G中异常高表达,下调其表达可部分逆转细胞耐药性,miRNA-25可能通过作用于Bim参与NSCLC细胞吉非替尼耐药的发生和发展.     

miR-424对非小细胞肺癌A549细胞生长和侵袭的影响及分子机制

背景与目的已有的研究表明miR-424可抑制肾癌细胞增殖,抑制宫颈鳞癌细胞的迁移和侵袭能力,而其对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）细胞的影响目前尚无系统研究。本研究探讨miR-424对NSCLC A549细胞生长和侵袭迁移能力的影响并进一步研讨其分子机制。方法应用CCK8检测过表达及抑制miR-424的表达对A549细胞增殖的影响。应用Transwell检测过表达及抑制miR-424的表达对A549细胞侵袭能力的影响。应用Western blot检测过表达及抑制miR-424的表达对A549细胞中MMP9和MMP2蛋白水平的影响。构建E2F63’UTR区的荧光素酶报告载体,验证miR-424对E2F6的靶向作用。采用Western blot检测过表达及抑制miR-424的表达后,A549细胞中E2F6的表达。结果过表达miR-424后,A549的生长和侵袭能力显著降低。过表达miR-424后,A549细胞的MMP-2和MMP-9表达下降。荧光素酶活性检测表明miR-424能够抑制E2F6的荧光素酶活性。过表达miR-424后,细胞内E2F6的表达降低。结论 miR-424能够通过调控E2F6而抑制A549的生长和侵袭能力。     

血管内皮钙黏蛋白对非小细胞肺癌侵袭转移的影响及其作用机制

目的 探讨非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC）组织中血管内皮钙黏蛋白（vascular endothelial cadherin, VE-cadherin）的表达和其对细胞侵袭迁移能力的影响及作用机制。方法 采用免疫组织化学、RT-PCR法检测VE-cadherin在人NSCLC组织和癌旁组织中的表达;Westernblot法检测VE-cadherin在NSCLC细胞株中的表达;Transwell实验检测VE-cadherin对NCI-H460细胞侵袭迁移能力的影响;免疫荧光检测VE-cadherin与P120ctn在NCI-H460细胞上的定位;免疫共沉淀检测VE-cadherin与P120ctn的连接情况。结果 VE-cadherin在肺癌组织中表达水平较癌旁组织上调,其表达与NSCLC有无吸烟史、有无淋巴结转移有关（P<0.05）。VE-cadherin在PG、NCI-H460、 A549细胞株表达水平不同,干扰VE-cadherin表达后,NCI-H460细胞侵袭迁移能力下调,低氧可诱导VEcadherin在NCI-H460细胞表达增强,VE-cadherin与P120ctn存在结构上的连接。结论 VE-cadherin可能通过缺氧信号活化及P120ctn介导参与NSCLC侵袭、转移。     

白血病抑制因子对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭的影响及其机制

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）中白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor, LIF）对细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制。方法 采用荧光定量PCR和Western blot检测LIF在人NSCLC组织和癌旁组织中的表达;应用重组LIF因子处理非小细胞肺癌细胞系A549和Z793, MTT技术检测重组LIF因子对细胞增殖的影响; Transwell实验检测重组LIF因子对细胞侵袭的影响;Western blot检测重组LIF因子对肿瘤细胞中AKT/mTOR信号通路的影响。结果 LIF在肺癌组织中的表达水平较正常癌旁组织显著上调（P=0.0078）。重组LIF处理A549和Z793细胞后,肿瘤细胞增殖较对照组明显增加（P<0.01）;肿瘤细胞的侵袭能力较对照组明显增强（P<0.01）;AKT蛋白的磷酸化水平明显增加,且其下游底物mTOR的表达显著上调。结论 LIF在非小细胞肺癌中表达上调,并通过激活AKT/mTOR信号通路促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。     

白细胞介素35对非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的影响

摘 要：［目的］ 评价沉默白细胞介素35（interleukin 35,IL-35）对非小细胞肺癌细胞增殖及凋亡的影响。［方法］ 运用短发卡RNA（short hairpin RNA ,shRNA）干扰技术下调IL-35的表达,将转染shRNA的肺癌细胞分为shNC组和shIL35组,采用CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞光密度（optical density,OD）值和凋亡率;实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blot 实验分别检测Cyclin D1、Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平。［结果］ 利用shRNA下调A549、H1975细胞中IL-35的表达后,与shNC组相比,shIL35组OD值降低（t=8.452、8.064,P均<0.05）,细胞凋亡率增加（t=5.745、4.334,P均<0.05）;Cyclin D1、Bcl-2 mRNA和蛋白水平均表达下调（t=4.866、2.806、4.224、7.683,P均<0.05）。［结论］ 非小细胞肺癌细胞中IL-35的表达,可通过下调Cyclin D1、Bcl-2基因表达水平来抑制肺癌细胞增殖、促进其凋亡,为临床肺癌治疗提供新思路。     

非小细胞肺癌组织中circ_0006692的表达及其对肺癌细胞增殖转移的调控机制

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中circ 0006692的表达与临床病理特征的关系及机制.方法 收集50对NSCLC和癌旁组织,qRT-PCR法检测癌和癌旁组织中circ 0006692的表达,并分析其与临床病理特征之间的关系.构建过表达、敲低的circ 0006692的A549肺癌细胞株,MTS、克隆形成实验、...     

BIM在非小细胞肺癌治疗中的作用及意义

B细胞淋巴瘤-2促细胞凋亡(B-cell lymphoma 2 interacting mediator of cell death,BIM)基因作为抑癌基因,在调控细胞凋亡中起重要作用.在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中,BIM表达水平的下调或功能缺陷会降低酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)及化疗药物的疗效并影响术后患者的预后.本文将对BIM的结构、功能以及BIM在NSCLC治疗中的作用及意义进行介绍.     

miR-7-5p通过调控POLE4对非小细胞肺癌细胞增殖侵袭的影响及作用机制

目的 检测miR-7-5p、POLE4在非小细胞肺癌中的表达水平及对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 qRT-PCR检测NSCLC组织、癌旁组织、肿瘤细胞、人正常支气管上皮细胞中miR-7-5p和POLE4 mRNA相对表达水平;荧光素酶报告基因分析非小细胞肺癌细胞中miR-7-5p与POLE4的靶向关系;将si-NC、si-POLE4转染至SPC-A-1细胞中设为si-NC组和si-POLE4组,同时设置对照组;MTT法、划痕实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭。结果 miR-7-5p在非小细胞肺癌组织和细胞中的表达水平降低、POLE4表达水平升高;miR-7-5p可靶向结合POLE4;si-POLE4组培养72 h,细胞OD值显著低于对照组和si-NC组（P<0.05）。si-POLE4组培养48 h细胞的迁移率和穿膜细胞数低于对照组和si-NC组（P<0.05）。结论 miR-7-5p可能通过靶向结合POLE4,抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。