大肠癌中Livin和Survivin的表达及相关性研究

目的探讨Livin和Survivin在大肠癌组织中的表达与临床病理因素间的关系以及两者间的相互关系。方法应用免疫组织化学S-P方法检测Livin和Survivin在65例大肠癌组织中的表达情况。结果 Livin和Survivin蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率分别是72.3%(47/65)、73.8%(48/65),均明显高于大肠正常黏膜组织24%(6/25)、12%(3/25)(P0.05)。Livin和Survivin蛋白表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床Duke's分期有关,与患者年龄、性别及肿瘤分化程度无关。Livin和Survivin蛋白在大肠癌组织的表达呈正相关。两者协同表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况以及临床Duke's分期呈正相关。结论 Livin和Survivin在大肠癌的发生发展中均具有重要作用,同时两者具有协同作用,提示联合检测较单一检测更有意义。     

藏红花素对C6胶质瘤细胞生长及Survivin和Livin表达的影响

目的:研究藏红花素对大鼠C6胶质瘤细胞生长及凋亡蛋白抑制因子Survivin和Livin表达的影响。方法:体外培养C6胶质瘤细胞,加入不同浓度的藏红花素培养液,并于不同时间点进行观测,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法绘制细胞生长曲线,观察C6细胞的生长活性;通过相差显微镜和Hoechst荧光染色法观察C6细胞的形态学变化;采用Western blot法检测Survivin和Livin蛋白的表达水平。结果:C6胶质瘤细胞经藏红花素作用后细胞生长受到明显抑制,用含2、4和8 mg/ml藏红花素的培养液作用48h后各组C6细胞的OD值分别为0.732±0.013、0.421±0.010和0.289±0.017,细胞生长抑制率分别为26.8±0.01%、58.0±0.02%和71.1±0.02%,其中4 mg/ml和8 mg/ml藏红花素实验组细胞生长抑制率与阴性对照组均有显著性差异(P均0.05);相差显微镜和Hoechst荧光染色法观察显示实验组C6细胞出现典型的凋亡形态学改变;Western blot检测显示实验组C6细胞Survivin和Livin蛋白表达明显下调。结论:藏红花素能明显抑制C6胶质瘤细胞的体外生长,其抑制作用与诱导C6细胞发生凋亡和下调凋亡蛋白抑制因子Survivin和Livin的表达有关。     

Livin与恶性肿瘤的关系

livin属于凋亡抑制蛋白基因家族,与恶性肿瘤发生发展关系密切。根据livin基因结构特点,Livin可能参与调控胱蛋白天冬酶信号通路、丝裂原激活蛋白激酶途径,参与Wnt／beta-catenin信号通路。探讨了Livin与恶性黑色素瘤、膀胱癌、肺癌等多种恶性肿瘤的关系,为临床治疗这些疾病提供新的方法和思路。     

Livin蛋白在乳腺癌中的表达及与Bcl-2的关系

目的 探讨凋亡抑制基因Livin和Bel-2蛋白在乳腺癌组织中表达及与临床病理参数的关系。方法应用western blot和免疫组织化学SP法检测90例乳腺癌、30例乳腺良性病变和15例乳腺癌旁组织中Livin和Bcl-2蛋白的表达情况,分析两种蛋白表达的相关性。结果Livin蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率及蛋白表达量明显高于癌旁组织和乳腺良性病变,差异有显著性（P〈0．05）。Livin蛋白在乳腺癌中的阳性表达与肿瘤大小,组织学类型,组织学分级及淋巴结转移无关（P〉0．05）,但随临床分期的增加而升高（P〈0．05）;Livin和Bel-2蛋白在乳腺癌组织中的表达显著相关（P〈0．05）。结论Livin蛋白在乳腺癌组织中表达上调,且与病理分期有关,提示Livin蛋白可通过抑制细胞凋亡促进乳腺癌的发生、发展,Livin与Bel-2蛋白可能在乳腺癌的演进中起着协同作用。     

铁死亡相关基因与结肠癌分型及预后的关系研究

结肠癌是一种常见的发生于结肠部位的消化道恶性肿瘤,它好发于直肠与乙状结肠交界处,恶性程度高,侵袭性强,病情发展快。本研究利用铁死亡相关基因对结肠癌进行分型且对不同分型在生存时间及临床表型方面的差异进行评估,为探索该疾病的发病机制和个性化治疗提供思路。首先,从TCGA-GDC官网下载结肠癌患者的表达数据,通过查找文献检索到60个铁死亡相关基因,筛选有显著差异表达的铁死亡相关基因对结肠癌患者进行无监督聚类分型,同时比较各个分子亚型之间在生存时间和临床特征方面的差异;运用单因素Cox分析法筛选出与预后相关性较高的基因并构建Lasso回归模型,根据回归模型对患者的风险评分将患者分为高风险组和低风险组,比较两组间生存时间的差异并确定风险评分与其他临床特征之间的关联。通过单因素独立预后分析和多因素独立预后分析,筛选出影响结肠癌预后的独立因素。通过无监督聚类将样本分为两种分子亚型,两组间的生存时间差异不显著,不同分子亚型在肿瘤分期这个临床特征间存在一定的差异。使用5个与预后显著相关的基因(FDFT1、HMGCR、CARS1、AKR1C1、ALOX12)构建了Lasso回归模型,根据Lasso回归模型...     

NK细胞中过表达Livin的实验研究

目的:将携带Livin的质粒pIRES2-EGFP-Livin进行扩增,转染自然杀伤细胞(NK)及胃癌细胞株SGC-7901,并检测其在NK及胃癌细胞株SGC-7901中的表达。方法:将携带Livin基因的质粒p IRES2-EGFP-Livin进行扩增,鉴定质粒纯度与浓度;从健康人外周血中获得NK细胞,应用HP转染试剂将质粒pIRES2-EGFP-Livin转染体外培养的NK及胃癌细胞,对比分析NK及胃癌细胞株SGC-7901中基因转染效率及目的基因的表达情况。结果:用无血清培养基在体外成功的扩增大量的NK细胞;质粒提取试剂盒抽提得到大量无内毒素的质粒,质粒DNA基因序列并未发生突变,浓度和纯度较高。胃癌细胞株SGC-7901中观察到明显的质粒pIRES2-EGFP-Livin绿色荧光表达;而NK中未观察到绿色荧光表达。结论:质粒pIRES2-EGFP-Livin能使Lvin蛋白表达于胃癌细胞株SGC-7901中,而在NK中未表达。     

结肠癌组织LncRNA DLEU1、LncRNA NONHSAT017458的表达与临床病理特征与预后的关系

目的：探讨结肠癌组织中长链非编码核糖核酸（LncRNA）淋巴细胞白血病缺失基因1(DLEU1)、LncRNA NONHSAT017458表达与临床病理特征以及预后的关系。方法：选取2020年3月至2022年12月我院收治的136例结肠癌患者,取手术切除的癌组织和癌旁组织（距离癌旁5 cm以上）检测LncRNA DLEU1、LncRNA NONHSAT017458表达。比较不同病理特征结肠癌组织中LncRNA DLEU1、LncRNA NONHSAT017458表达差异,Kaplan-Meier生存曲线分析不同LncRNA DLEU1、LncRNA NONHSAT017458表达结肠癌患者生存率,Log-Rank检验生存率差异,单因素和多因素Cox风险比例回归分析影响结肠癌患者生存的因素。结果：癌组织LncRNA DLEU1、LncRNA NONHSAT017458表达均高于癌旁组织,差异有统计学意义（P<0.05）。肿瘤直径≥4室cm、低分化、T3-4、N1-2的癌组织LncRNA DLEU1、LncRNA NONHSAT017458表达高于肿瘤直径<4 cm、中和高分化、...     

Livin和p-p38MAPK在乳腺癌中的表达及意义

目的观察凋亡抑制因子Livin和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)在乳腺癌组织中的表达,探讨其表达的临床意义。方法随机选取70例乳腺癌和对照组的30例癌旁组织蜡块标本,应用免疫组织化学技术检测Livin和p-p38MAPK蛋白的表达及细胞内定位,分析其表达与乳腺癌患者临床病理相关指标之间的关系。收集手术切除的20例新鲜乳腺癌和其相对应的癌旁组织标本,运用免疫印迹(Western blot)技术进一步定量检测Livin和p-p38MAPK蛋白的表达水平。并应用统计学软件Spearman等级相关检验分析Livin和p-p38MAPK蛋白表达的相关性。结果免疫组织化学结果显示,Livin、p-p38MAPK分别在64.3%(45/70)和57.1%(40/70)的乳腺癌组织中阳性表达,其阳性率均显著高于对照组的癌旁组织(P0.05)。并且Livin、p-p38MAPK蛋白表达均与乳腺癌患者的不同TNM分期、有或无腋窝淋巴结转移密切相关(P0.05)。Western blot亦进一步证实,Livin、p-p38MAPK蛋白在乳腺癌中的表达水平亦均高于其相对应的癌旁组织(P0.05)。此外,Livin与p-p38MAPK蛋白表达呈正向相关性(r=0.318,P=0.008)。结论 Livin、p-p38MAPK蛋白的表达在乳腺癌的发展演进过程中可能起着不可忽视的作用,并且两者可能存在一定的调控关系。     

ERCC1蛋白表达与结肠癌FOLFOX方案化疗疗效及预后相关性分析

目的：探讨晚期结肠癌癌组织中核苷酸切除修复交叉互补基因1（excisionrepaircross—complementinggenel,ERCCl）~O表达状况及其与患者临床病理特征、奥沙利铂方案化疗疗效及预后之间的关系。方法：采用免疫组化方法检测晚期结肠癌癌组织中ERCCl蛋白表达状况。结果：晚期结肠癌癌组织中ERCCl表达阳性表达率为45．1％。ERCCl蛋白的表达状况与患者的性别、年龄、肿瘤部位、分化程度及病理类型均无关（P〉0．05）。ERCCl蛋白表达阴性患者奥沙利铂方案化疗有效率为56．O％高于表达阳性患者的34．1％（P。0．037）,并且接受化疗后表达阴性患者中位生存期为19个月高于表达阳性患者的14个月（P=0．016）。结论：ERCCl蛋白表达阴性的晚期结肠癌患者接受奥沙利铂方案化疗有效率较阴性患者高并有生存受益,ERCCl的表达状态可作为晚期结肠癌化疗方案的选择及预后判断的指标。     

p16、survivin、cyclin D1 在膀胱尿路上皮癌中的表达及意义

目的:探讨抑癌基因p16、细胞周期蛋白cyclin D1和凋亡抑制基因survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法:膀胱移行细胞癌组67例,10例正常正常膀胱粘膜作为对照,采用免疫组织化学方法检测p16和cyclin D1、survivin蛋白表达,然后分析上述三种蛋白在膀胱癌组织中的表达情况,以及随着不同临床分期和病理分级表达的变化。结果:所有膀胱癌患者平均年龄58.16岁,其中男性患者38例。免疫组织化学分析表明,p16和cyclin D1、survivin蛋白均表达在细胞的细胞核。膀胱癌组织中P16表达明显低于正常对照组,而cyclin D1和survivin表达明显高于正常对照组。随着临床分期的进展,p16表达明显下降,cyclinD1表达明显上升;而随着膀胱癌病理分级升高,p16表达明显下降,survivin表达上升。此外,膀胱癌组织中,p16与cyclin D1p16之间存在着明确的负相关。结论:p16、cyclin D1、survivin在膀胱移行细胞癌的生物学行为中起重要作用,p16,cyclin D1和survivin与膀胱移行细胞癌的恶性进展有关。     

非小细胞肺癌中Livin和JNK1的表达及相关性研究

目的探讨在非小细胞肺癌（non small cell lung cancer,NSCLC）中的Livin、JNKI蛋白的表达及相关性。方法采用免疫组织化学（二步法）检测187例NSCLC肺癌组织Livin、JNK1[包括总JN1蛋白（t-JNK1）,磷酸化JNK1（p-JNK1）]蛋白的表达情况,采用Spearman等级相关分析探讨其相关性。结果Livin主要在胞浆中定位表达,在肺癌中的表达阳性率明显高于肺良性病变对照组;在鳞癌中表达阳性率明显高于腺癌和其他癌类（P〈0．05）。其在肺癌表达的积分明显高于良性对照组（P〈0．05）,其在鳞癌中表达的积分明显高于腺癌及其他癌类组织。t-JNK1、p-JNK1在肺癌细胞上及在假复层纤毛柱状上皮均可见表达,主要在胞浆中定位表达,t—JNKl未见核内定位表达,而p-JNKl偶见核内定位表达。t—JNK1在肺癌组表达阳性率明显低于对照组（P〈0．05）,t-JNKl在肺癌中表达的积分低于对照组;而p-JNK1在肺癌组表达阳性率明显高于对照组（P〈0．05）。p-JNK1在肺癌中表达的积分高于对照组,但两者无统计学意义（P〉0．05）。Livin与t-JNK1呈现显著的负相关,Livin与p-JNK1呈现显著的正相关。结论Livin在肺癌中高表达,其在鳞癌中表达高于腺癌和其他类型癌。t-JNK1在肺癌中低表达,而p-JNK1在肺癌中高表达。Livin与p-JNK1表达正相关,推测Livin可促JNK1蛋白磷酸化。     

涎腺腺样囊性癌组织中COX-2, Survivin及livin的表达及临床意义

目的:探究涎腺腺样囊性癌(SACC)组织中COX-2、Survivin及livin的表达及临床意义。方法:收集2013年1月~2016年11月我院肿瘤外科收治的63例SACC患者癌变病理组织标本与30例SACC患者癌旁正常组织标本为研究对象;应用免疫组化法(SP法)检测COX-2、Survivin及livin蛋白在SACC组织和正常组织中的表达情况,分析SACC组织COX-2、Survivin及livin的表达与临床病理特征的关系,采用Spearman秩相关分析COX-2、Survivin及livin之间的关系。结果:Survivin、livin及COX-2在SACC组织中的阳性率依次为66.67%(42/63)、57.14%(36/63)及73.02%(46/63),其阳性主要表达于肿瘤细胞胞浆或胞膜上,而正常组织细胞中未发现阳性表达;Survivin、livin及COX-2在不同性别、年龄、肿瘤部位的阳性率无统计学差异(P0.05);实体型、淋巴转移、中低分化及III+IV期患者Survivin、livin及COX-2的阳性率高于筛孔型+管状型、淋巴未转移、高分化、I+II期患者,差异均有统计学意义(P0.05);Spearman秩相关显示,Survivin与COX-2呈正相关(r=0.632,P0.05);livin与COX-2呈正相关(r=0.453,P0.05);Survivin与livin无相关(r=0.143,P0.05)。结论:Survivin、livin及COX-2在SACC患者中呈高表达,可能对SACC的发生、发展具有促进作用;Survivin、livin及COX-2可作为临床早期筛查SACC并预测疾病转归的指标。     

Survivin和COX-2的表达及与胰腺癌预后的关系

目的:评价Survivin和COX-2在胰腺癌中的表达与预后的关系.方法:采用免疫组化二步法检测63例手术切除的原发性胰腺癌组织及11例癌旁非肿瘤胰腺组织中Survivin和COX-2的表达情况.应用spearman相关分析Survivin与COX-2表达的相关性.用Kaplan-Meier法分析生存曲线,多变量Cox比例风险回归模型筛选影响患者生存的独立预后因素.结果:Survivin、COX-2蛋白在胰腺腺癌中的表达呈正相关(r=0.613,P=0.000).Survivin阻性表达患者中位生存时间(9个月)明显小于阴性表达者中位生存时间(21个月),P=0.000; COX-2阳性表达患者中位生存时间(10个月)也明显小于阴性表达者生存时间(大于36个月),P=0.000; Survivin阴性/COX-2阴性组患者(9例)中位生存时间(大于36个月)及1年累计生存率为88.9％,均明显高于单一阳性表达或均阳性表达组.多因素分析(Cox模型)显示分化程度(P=0.002)、临床分期(P=0.000)及Survivin过表达(P=0.005)为影响胰腺癌预后的独立因素.结论:Survivin、COX-2蛋白在胰腺癌组织中表达上调且呈正相关,二者在胰腺癌的发生发展中可能具有协同作用,有望作为靶点用于胰腺癌的靶向治疗.患者的分化程度、临床分期及Survivin的表达水平是胰腺癌患者手术后生存的独立危险因素.     

应用组织芯片技术研究Survivin基因蛋白在前列腺肿瘤组织中的表达及其意义

目的:应用组织芯片技术分析Survivin基因蛋白在人类前列腺癌组织、前列腺正常组织及前列腺良性痛变组织中的表达情况.方法:采用兔抗人survivin单克隆抗体的免疫组织化学ABC法,研究Survivin在不同前列腺组织的表达,并分析Survivin在不同前列腺组织中的表达差异.结果:免疫组化结果显示,前列腺癌组织与前列腺良性病变组织及正常前列腺组织中Survivin的表达相比呈显著性差异(P<0.05).结论:Survivin在前列腺癌组织中呈高表达,提示其可能对前列腺癌的发生或发展有重要作用.     

Survivin的表达和功能研究

目的 探讨Survivin基因在各种组织中的表达及其功能研究。结论 利用RT-PCR方法确认了Survivin在多种胚胎和肿瘤组织中的表达;利用分子克隆方法构建表达了重组Survivin蛋白,体外检测到该重组蛋白与RhSmac具有良好的结合活性;经脂质体转染重组Survivin蛋白的L929细胞与对照相比具有更好的存活率。     

凋亡抑制因子Survivin的克隆、高效表达与纯化

Survivin蛋白抑制细胞的凋亡并参与调控细胞的分裂,在绝大多数肿瘤细胞中均有过量表达。本实验以人肝癌细胞系MHCC-97L总RNA为模板,应用RT-PCR的方法得到survivin cDNA,并构建了重组原核表达载体pET-21b(+)-survivin,导入BL21（DE3）菌株进行表达,表达产物以包涵体形式存在,表达量超过总蛋白的60%。Western blot结果表明表达产物与抗人survivin抗体发生特异性反应,经凝胶过滤层析后纯度达到95%以上,为进一步研究靶向Survivin的诊断试剂与抑制剂奠定了基础。     

Girdin 表达与非小细胞肺癌侵袭转移及预后的关系

目的:探讨肌动蛋白结合蛋白Girdin与非小细胞肺癌(Non small cell lung cancer,NSCLC)侵袭转移的关系及其对预后的影响。方法:应用免疫组织化学法检测167例非小细胞肺癌患者的病理组织标本中Girdin蛋白和MMP-9的表达。结果:在167例组织标本中Girdin蛋白高表达率为38.9%,其表达水平与患者分期、淋巴结转移、远处转移及生存状况密切相关,差异有统计学意义(P0.05),而与患者性别、年龄、吸烟指数、评分、病理类型及分化程度均无关(P均0.05)。Girdin蛋白的高表达往往伴有MMP-9的高表达,两者显著相关,且差异有统计学意义(P0.05)。Kaplan-Meier单因素生存分析显示Girdin高表达为非小细胞肺癌患者预后的不良因素(P0.05)。COX多因素回归分析显示Girdin的表达水平和分期是判断预后的独立指标(P0.05)。结论:Girdin蛋白在非小细胞肺癌的侵袭和转移中可能发挥着重要的作用,在判断非小细胞肺癌患者预后方面具有一定的价值。     

Survivin、Dnmt 和CD44 在胃溃疡及胃癌中表达的差异

胃溃疡(Gastric Ulcer GU)和胃癌(Gastrio Cancer Gc)均是我国乃至全世界人群中的常见病、多发病。近年来,虽然胃溃疡的发病率开始呈下降趋势,但仍属消化系统疾病中最常见的疾病之一,目前已被认为是癌前病变之一。据统计,5%左右的胃溃疡可发生癌变,甚至有统计最高达29.4%的胃癌来自胃溃疡[1]。在世界范围内恶性肿瘤中,胃癌位居第4,病死率位居第2,在我国则居第1位。胃癌发生的分子机制研究表明多基因变异是细胞发生癌变的内因[2]。各种癌基因、抑癌基因和错配修复基因、细胞信号传导通路的异常、细胞周期调控改变及相关产物均对胃癌的发生发展产生影响。如Survivin、DNA甲基化和CD44等均是近年来在胃癌组织中发现的并成为研究热点的基因。通过对Survivin、Dnmt和CD44三种基因在胃溃疡及胃癌中表达的差异的了解,有助于加深对胃癌发生、发展及转移机制的认识,更好的为临床应用中胃溃疡及胃癌的治疗提供理论依据和找到更好的治疗方法。