医务人员乙型丙型肝炎病毒血清标志物的临床分析

<正>病毒性肝炎目前主要以乙型、丙型肝炎危害最为严重,在人群中的分布最为广泛,医务人员作为一个特殊群体,容易受到肝炎病毒感染,为了解其肝炎感染状况,特调查分析如下。     

丙型肝炎病毒血清学检测在临床中的应用

目的评价丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）和核心抗原（HCV-cAg）的酶联免疫检测结果在临床中的应用,选择适合基层医院开展的丙型肝炎病毒感染的血清学诊断方法。方法对来自我院的89例拟诊为丙型肝炎的患者同时进行抗-HCV、HCV-cAg双相检测。结果 89例拟诊为丙型肝炎患者中检出87例阳性,检出率为97.7%,84例抗-HCV阳性,53例两项检测同时阳性,5例抗-HCV阴性患者中,3例HCV-cAg阳性,2例HCV-cAg阴性。结论酶联免疫法联合检测抗HCV和HCV-cAg,简便易行,适合基层医院对丙型肝炎病毒感染的筛查,能减少漏诊,为临床提供可靠依据。     

肝炎病毒标志物检测的临床应用

肝炎病毒标志物检测的临床应用辽宁省临床检验中心（１１００１５）李竹成根据１９８９年日本东京国际肝炎讨论会，病毒性肝炎现分为甲、乙、丙、丁、戊（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ）５型。其病原分别为甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）...     

不同人群丙型肝炎病毒抗体阳性率测定分析

为探讨健康体验人员、献血员、孕妇三者血清中丙型炎病毒抗体的阳性率，采用ＥＬＩＳＡ法检测上述人员血清共４１５份。结果健康体检人员、孕妇、献血员三者的阳性率分别为５．９４％、８．０４％、１０．８９％；健康体检人员与献血员阳性率差异非常显著性，Ｐ〈０．００５。建议临床用血尽可能采用志愿人员的献血。     

广州地区孕妇乙,丙型肝炎病毒标志物的调查

近年来,孕妇携带乙型肝炎病毒的情况及如何评估丙型肝炎病毒对母婴健康的威胁是本文要探索的问题.围绕上述两个问题,我室就1993年以来的资料进行如下分析.1 对象与方法1993年10月～1997年6月我院作产前检查的健康孕妇2274例.平均年龄28岁.怀孕7个月时抽取静脉血检查谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、白蛋白、球蛋白、乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、表面抗体(Anti-HBs)、e抗原(HBeAg)、e抗体(Anti-HBe)、核心抗体(Anti-HBc)、丙型肝炎病毒抗体(Anti-HCV).凡Anti-HCV( )的,再用聚合酶链反应的方法测丙型肝炎病毒RNA(PCR法).     

丙型肝炎病毒基因分型

<正> 自1989年Choo等成功地从一只黑猩猩身上分离出HCV cDNA克隆以来,世界各地不断有新的HCV病毒株被发现。HCV的基因变异从5’UT区开始一直延伸到3’末端,贯穿于整个基因组序列。根据其基因的变异程度,可以将HCV分为数个基因型,各型之内尚可分出数个亚型。型间的基因变异程度可达33％。这种程度的基因变异很可能导致病毒     

丙型肝炎病毒受体研究进展

丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus，HCV)是慢性肝炎的主要病因之一，全世界约有1．7亿人感染了HCV，其中约有80％发展成为慢性肝炎，这其中又有20％转化为肝硬化，最终1％-3％发展为肝细胞癌。但到目前为止仍然没有适当的体外细胞培养病毒复制系统和小动物模型，使HCV致病性的研究更为艰难。多数丙型肝炎之所以难以治愈主要是因为丙型肝炎病毒某些结构区有高度的变异性。丙型肝炎病毒属于黄病毒科，     

丙型肝炎病毒核心抗原检测技术的临床应用

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原检测[酶联免疫吸附试验(ELISA)]法的临床应用价值。方法采用聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法对临床HCV感染者血浆进行HCV-RNA检测,并用ELISA对标本进行HCV抗体和HCV核心抗原的检测。结果87例HCV感染者HCV-RNA的检出率为75%(65/87);HCV抗体的检出率为95%(83/87);HCV核心抗原的检出率为67%(58/87)。另有2例标本HCV抗体阴性,而HCV核心抗原阳性,HCV-RNA也为阳性。结论HCV核心抗原的检测对HCV感染的早期诊断有重要价值。     

丙型肝炎病毒抗原检测

目的 探讨在HCV感染早期,HCV Ab为阴性时用酶联免疫法检测HCV核心抗原的试验方法的可行性.方法 用重组HCV核心抗原,免疫小鼠制备单克隆抗体,对HCV核心抗原进行酶联免疫法检测.结果 HCV核心抗原检测灵敏度高可达5ng/ml,用酶联法对11份HCV Ab阴性,HCV RNA阳性标本检测9份阳性.结论 酶联免疫法检测HCV核心抗原可作为HCV感染早期的抗原检测方法 ,较HCV RNA检测法简便、快速,可以作为核酸检测法的一种简易替代方法.     

PCR-BHEL技术的建立及对血清中丙肝病毒的检测

目的:探讨聚合酶链反应偶联印迹杂交和酶联放大技术(PCR-BHEL)在检测血液传染性病毒中的优越性。方法:采用PCR-BHEL检测129例抗-HCV阳性和45例抗-HCV阴性的血清标本,并将该项技术与逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的检测结果进行比较。结果:PCR-BHEL检测129例抗-HCV阳性标本的HCV RNA检出率为78.29%,45例阴性标本的HCV RNA检出率为6.67%;采用RT-PCR检测的HCV RNA检出率分别为62.02%和2.22%。PCR-BHEL技术对HCVRNA的检出率高于RT-PCR,差别有统计学意义(P<0.001)。结论:PCR-BHEL较RT-PCR技术的灵敏度高,能够有效地提高HCV RNA的检出率,可推广应用于其他传染性病毒的检测。     

Detection of Replicate hepatitix C virus sequence in hepatocellular carcinoma ,

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＲｅｐｌｉｃａｔｅｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓｓｅｑｕｅｎｃｅｉｎｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒｃａｒｃｉｎｏｍａＮｉｕＪｕｎｑｉ，ＪＭｎｎｊａｒｄｉｎｏ，ＸｕＣｈａｎｇＺｈａｎｇＱｉｎｇｑｕａｎ（Ｄｅｐｔ．ｏｆＩｎｆ．Ｄｉｓ，...     

Infectivity and Risk Factors of Hepatitis C Virus Transmission Through Sexual Contact

ＩｎｆｅｃｔｉｖｉｔｙａｎｄＲｉｓｋＦａｃｔｏｒｓｏｆＨｅｐａｔｉｔｉｓＣＶｉｒｕｓＴｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎＴｈｒｏｕｇｈＳｅｘｕａｌＣｏｎｔａｃｔＺｈａｏＸｉ－ｐｉｎｇ（赵西平）；ＹａｎｇＤｏｎｇ－ｌｉａｎｇ（杨东亮）；ＴａｎｇＺｈｅｎｇ－ｙａ（唐...     

温州地区丙型肝炎病毒感染者基因型分布特征及其临床意义分 析简

目的探讨温州地区丙型肝炎病毒感染者基因型分布特征及其临床意义。方法收集2010年1月～2012年12月温州市中心血站自愿献血者244例,其中,HCV感染经ELISA方法证实为HCV抗体阳性者122例,健康者122例,收集同期来温州地区某医院门诊肝病患者122例,所有对象均静脉采血,HCVRNA提取,AMV反转录,并采用巢式PCR扩增对研究对象进行HCV—RNA的检测及基因分型。结果门诊肝病患者1b总阳性率为100．0％,HCV抗体阳性者1b总阳性率为95．9％,健康者lb总阳性率为0．0％,三者比较,差异有统计学意义（x2=10．28,P〈0．05）。122例肝病患者中1b型所占比例最高,且在重度病变及肝硬化患者中占比最高（P〈0．05）,不同肝病程度间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论温州地区HCV的基因型以1b型占优势,由1b型感染所致疾病的病情较为严重。     

HIV和肝炎病毒混合感染的临床分析

目的 :观察HIV和肝炎病毒混合感染的流行病学特点。方法 :对本院 2 48例因并发症而住院治疗的AIDS病人中 10 3例HIV和肝炎病毒混合感染情况进行流行病学分析。结果 :10 3例HIV和肝炎病毒混合感染病例中HIV/HCV混合感染 95例 ,HIV/HBV混合感染 5例 ,HIV/HBV、HCV混合感染 3例 ,各占 3 8 0 0 %、2 0 0 %和 1.2 0 %。输血途径感染 68例 ,单采血浆感染 15例 ,母婴传播途径感染 7例 ,性传播途径感染 5例 ,各占混合感染病例的 71.60 %、15 .80 %、7.45 %和 5 .2 6%。结论 :HIV/HCV混合感染人数和比例远远多于HIV/HBV、HIV与HBV、HCV混合感染人数和比例 ,大多数病人以输血途径和单采血浆途径感染。     

表达载脂蛋白E-增强型绿色荧光蛋白的细胞系支持感染性丙型肝炎病毒的组装

目的 探讨表达载脂蛋白E-增强型绿色荧光蛋白(apolipoprotein E-enhanced green fluorescence protein,apoE-EGFP)的细胞系是否支持感染性丙型肝炎病毒(HCV)颗粒的组装.方法 利用shRNA基因沉默技术建立apoE稳定下调的Huh7.5.1细胞系,然后通过基因工程技术在该细胞系中建立稳定表达apoE-EGFP融合蛋白的细胞系.将HCV RNA转染进入野生型细胞(Huh7.5.1细胞)、对照组sh-NT细胞(转导非靶向野生型细胞基因的shRNA质粒的细胞)、apoE下调的Huh7.5.1细胞(sh-apoE细胞)以及表达apoE-EGFP融合蛋白的sh-apoE细胞(apoE-EGFP细胞)中,收集病毒液;通过半数组织培养感染剂量(TCID50)方法检测释放到Huh7.5.1、sh-NT、sh-apoE和apoE EGFP细胞培养上清液中的HCV的滴度.利用免疫荧光技术检测apoE与HCV的结构蛋白E2的相互作用,利用蛋白质印迹法检测用具有特异亲和性FLAG-gel纯化的HCV颗粒表面的apoE-EGFP的表达.结果 apoE-EGFP融合蛋白在apoE-EGFP细胞系中高效表达;apoE-EGFP细胞来源的HCV的感染性与Huh7.5.1、sh-NT细胞相比差异无统计意义;在apoE-EGFP细胞系中,apoE-EGFP融合蛋白与HCV结构蛋白E2存在共定位,并且可以在HCV颗粒表面上检测到apoE-EGFP融合蛋白.结论 apoE-EGFP融合蛋白是HCV颗粒的组分,apoE-EGFP细胞系支持感染性HCV颗粒的组装.     

丙型肝炎病毒P7蛋白体外原核表达状况的研究

目的:扩增丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)P7蛋白基因,克隆到多个原核表达系统,观察P7蛋白在体外表达的情况,获取具有生物学活性的HCV P7重组蛋白.方法:设计扩增全长HCVP7基因片段的特异引物,以H/FL质粒DNA(含HCV 1acDNA全长序列)为模板,通过PCR扩增全长HCVP7基因...     

丙型肝炎病毒1b型5′端5223 bp半基因组扩增

目的:扩增丙型肝炎病毒(HCV) 1b型5′端5223 bp半基因组. 方法:取5份HCV 1b血清标本,采用3种RNA提取方法,比较几种逆转录酶及逆转录条件,选取不同Taq酶进行长链RT-Nested PCR反应体系及循环条件的筛选和优化,利用最佳的模板提取方法及优化的RT-PCR反应条件扩增出5′端长度为5223 bp(5223 bp)半基因组. 结果:Trizol法可以获得完整的RNA模板,适合长链的扩增;应用ReverTra Ace-a-TM酶和SuperScriptTMⅡ,反应条件为42℃ 10 min后,42℃ 2 min,48℃ 2 min,30个循环,然后75℃,10 min;可获得完整的cDNA模板;TaKaLa LA TaqTM和Platinum Taq DNA polymerase High Fidelity采用两种扩增条件:①94℃变性2 min,94℃ 30 s,62℃ 30 s,72℃ 4.5 min,扩增30个循环;②94℃变性2 min,94℃ 15 s,68℃ 5 min,扩增5个循环,然后94℃ 15 s,68℃ 5 min(每个循环延长10 s), 扩增20个循环,最后72℃延伸10 min,均可获得HCV 1b型5′端5223 bp半基因组的阳性结果,TaKaLa LA TaqTM扩增效果最好;PCR产物经核苷酸序列测定证实为HCV 1b型. 结论:通过各种条件的优化,成功地实现了5′端半基因组的扩增,为下一步全长质粒及复制子的构建打下了基础.     

实施核酸检测后献血者丙型肝炎病毒检测模式的探讨

目的 探讨献血者血液筛查中实施核酸检测(NAT)后去掉一次抗-HCV酶联免疫吸附试验(ELISA)检测后抗-HCV漏检的风险.方法 从献血者血样中留取常规抗-HCV ELISA双试剂(国产金伟凯或万泰及进口Ortho)2次筛查中任一试剂筛查不合格的献血者血样,进行NAT检测及重组免疫印迹(RIBA)抗体确证试验,并对ELISA单试剂不合格、NAT阴性但RIBA确证阳性或可疑标本进行追踪研究分析自然转归.分析去掉一次抗-HCV ELISA检测后抗-HCV漏检的风险性.结果 213970人份献血者血样中常规血清学双试剂检测HCV不合格953份(0.445％).该953份不合格标本中,有9份为国产试剂筛查合格NAT阴性但RIBA试验确证阳性,有10份为进口试剂筛查合格NAT阴性但RIBA确证阳性.如果去掉该进口ELISA,采用该国产ELISA试剂和NAT,那么将有4.20/10万(9/213970)的抗-HCV确证阳性血液会被漏检;如果去掉该国产ELISA,采用该进口ELISA试剂和核酸检测,将有4.66例/10万(10/213970)的抗-HCV确证阳性血液会被漏检;进口试剂和国产试剂漏检抗-HCV确证阳性血液的风险差异无统计学意义(P＞0.05).而另一方面,我中心自开展NAT研究及常规NAT检测以来(2007-2013年,约92万人次),尚未从“2次ELISA筛查”合格的血液中检出确证的HCV RNA单独阳性血液,因此“进口ELISA+NAT”或“国产ELISA+NAT”分别比“2次ELISA筛查”少检出4.66/10万及4.20/10万抗-HCV RIBA确证阳性的血液.结论 就献血者血液HCV筛查策略而言,实施NAT检测后,去掉两次ELISA检测中的一次ELISA检测需慎重.