血清半乳糖凝集素3对胰腺癌的诊断价值

目的 运用时间分解免疫荧光(TRFIA)法检测血清半乳糖凝集素3(Galectin-3,Gal-3)水平,并探讨Gal-3对胰腺癌的诊断价值.方法 采用固相双抗体夹心法建立检测血清Gal-3的TRFIA,探讨最佳实验条件.在最适条件下检测胰腺癌、胰腺良性占位、胰腺炎患者及健康对照者血清Gal-3水平,并联合检测血清CEA及CA19-9水平.结果 TRFIA法检测血清Gal-3的线性为0～100μg/L,批内变异系数(CV)≤6.45％,批间CV≤8.68％,平均回收率为106.6％.胰腺癌患者血清Gal-3水平为4.93(0.85～23.80) μg/L,明显高于胰腺良性占位者的2.83(2.17～4.06) μg/L、胰腺炎患者的2.62(0.55 ～9.76) μg/L和健康者的1.88(0.59 ～ 3.94) μg/L(P值均＜0.05).以3.77 μg/L为界,其诊断胰腺癌的敏感性为75.5％,特异性达90.9％.Gal-3与CEA及CA19-9水平均无相关性(r=0.1321,P=0.3761；r =0.0920,P=0.5384),Gal-3联合CEA或CA19-9检测,对胰腺癌的诊断敏感性可提高到92％.结论 TRFIA法检测血清Gal-3具有较好的敏感性和稳定性；Gal-3有望成为新的胰腺癌标记物.     

灵芝提取物通过miR-143-3p对Aβ25～35诱导的神经细胞损伤的影响

目的 探讨灵芝提取物对β淀粉样蛋白(Aβ)_25～35诱导的神经细胞损伤的影响及其可能的作用机制。方法 采用Aβ_25～35诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12建立阿尔茨海默病(AD)细胞模型,不同浓度的灵芝提取物处理PC12细胞,anti-miR-NC、anti-miR-143-3p分别转染至PC12细胞后进行Aβ_25～35处理24 h, miR-NC、miR-143-3p mimics分别转染至PC12细胞后加入10 mg/L灵芝提取物与Aβ_25～35处理24 h;采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术分别检测细胞增殖及凋亡;采用试剂盒检测丙二醛(MDA)的水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性;采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-143-3p表达量。结果 Aβ_25～35作用条件下,灵芝提取物可明显降低细胞凋亡率、MDA水平、miR-143-3p表达量(P<0.05),明显升高细胞活力和SOD、CAT的活性,且呈剂量依赖性(P<0....     

快速末梢血全血果糖胺与静脉血血浆果糖胺检测方法的比较

糖化血红蛋白 Alc(hemoglobin Alc,Hb A1c)及果糖胺(fructosamine)是分别反映糖尿病患者血糖在 2～ 3个月及 2～3周内变化的特异性指标 [1～ 3]。同 Hb A1c相比 ,果糖胺能够反映在短期 2～ 3周内血糖的平均变化 ,因而为临床评估和及时调整降血糖的治疗方案提供了比即刻血糖检测更为客观的依据 [2 ,5 ,6 ]。既往果糖胺的检测需要采取静脉血 ,检测周期长 ,不利于患者在短期内进行多次检测。近年来 ,采用末梢血快速果糖胺检测技术为临床了解血糖变化及调整治疗方案提供了便利。本研究旨在通过与既往静脉血果糖胺检测方法的对比 ,了解采用末…     

陕西省安康市2012年碘缺乏病监测结果分析

目的了解陕西省安康市碘缺乏病防治现状,为防治碘缺乏病提供科学依据。方法 2012年按照《陕西省碘缺乏病监测方案》,盐样采用直接滴定法测定(GB/T 13025.7-1999)。抽查8～10岁学生进行甲状腺检查,诊断标准采用(WS276-2007)进行。10县(区)分农村、城镇两层次进行学龄儿童尿碘测定,采用砷铈催化分光光度法(WS/T107-2006)。随机抽取小学5年级学生30名进行健康问卷调查,抽取学校所在地家庭主妇15名进行健康教育问卷调查和家中食用盐半定量检测。结果共检测居民盐样3 000份。盐碘中位数为29.74 mg/kg,碘盐覆盖率为100.00%(3 000/3 000),合格碘盐食用率为96.63%(2 989/3 000)。触诊法共调查2 100名儿童甲状腺,甲状腺肿大57人,甲状腺肿大率2.71%(57/2 100)。共测定1 200名儿童尿样,尿碘中位数为235.00μg/L,尿碘范围82.10～478.40μg/L。对360名学生和180名家庭主妇进行了健康教育问卷调查,学生及家庭主妇碘缺乏病防治知识知晓率分别为66.76%(721/1 080)、67.22%(363/540),家中食用盐测定,合格碘盐食用率为100.00%(180/180)。结论安康市已达到消除碘缺乏病目标,在实行新的食用碘盐含量标准后,需要继续加强碘缺乏病监测和健康教育工作,对巩固碘缺乏病防治效果有积极意义。     

LncRNA ZBTB20-AS1靶向miR-132-3p/MAPT轴影响阿尔茨海默病的发生发展

目的探讨长链非编码(Lnc)RNA锌指蛋白ZBTB20反义RNA1(ZBTB20-AS1)靶向miR-132-3p/微管相关蛋白tau(MAPT)轴对阿尔茨海默病(AD)发生发展的影响。方法采用Aβ_(25～35)(20μmol/L)处理SK-N-SH细胞构建AD细胞模型。将si-con、si-ZBTB20-AS1、miR-con、miR-132-3p mimics、si-MAPT分别转染SK-N-SH细胞,经Aβ_(25～35)处理后,反转录及荧光定量PCR(RT-qPCR)检测ZBTB20-AS1和miR-132-3p的表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测MAPT、细胞周期蛋白(Cyclin)D1和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved-caspase)-3的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证ZBTB20-AS1和miR-132-3p、miR-132-3p和MAPT的靶向关系。结果 AD细胞模型中ZBTB20-AS1和miR-132-3p的表达水平显著升高,MAPT的表达水平显著降低。沉默ZBTB20-AS1、过表达miR-132-3p或沉默MAPT均可促进SK-N-SH细胞增殖,抑制Aβ_(25～35)诱导的细胞凋亡。miR-132-3p是ZBTB20-AS1的靶基因,ZBTB20-AS1可靶向负性调控miR-132-3p表达。MAPT是miR-132-3p的靶基因,miR-132-3p可靶向调控MAPT表达。抑制miR-132-3p表达或过表达MAPT均可逆转沉默ZBTB20-AS1对Aβ_(25～35)诱导的SK-N-SH细胞增殖和凋亡的影响。结论沉默ZBTB20-AS1通过调控miR-132-3p/MAPT轴可促进SK-N-SH细胞增殖,抑制Aβ_(25～35)诱导的SK-N-SH细胞凋亡。     

FcRL3基因与安徽籍汉族类风湿关节炎的相关性研究

目的 探讨Fc受体样基因3(FeRL3)部分单核苷酸多态性(SNP)在安徽籍汉族类风湿关节炎(RA)发病中的作用.方法 选取RA患者140例,健康对照组187名.用Mass-ArrayTM SNP检测仪对FcRL3基因上的SNP位点:FeRL3-1(rs0158440)、FcRL3-2(rs2225828)、FcRL3-3(rs7528684)、FcRL3-4(rs11284799)、FeRL3-5(rs945635)、FcRL3-6(rs3761959)、FcRL3-7(rs2210913)、FcRL3-8(rs2282284)、FcRL3-9(rs2282283)SNP进行检测.单倍型构建采用PHASE v 2.1软件完成.结果 在RA组中FcRL3-3(rs7528684)-169C等位基因的频率为43.80%,显著高于对照组33.33%.差异有统计学意义(X~2=7.348,P=0.007,OR=1.558,CI:1.130～2.150).单倍型FcRL3-1～9 CCCGGGGAA、CTCGCAAAC、CCTACAAAA、CCTGCGGAA、CTCGCGAAC差异有统计学意义,其中RA组中FcRL3-1～9 CCCGCAGGAA、CTCGCAAAC单倍型频率明显高于对照组,FcRL3-1～9 CCTACAAAA、CCTGCGGAA、CTCGCGAAC单倍型频率明显低于对照组.结论 FcRL3基因可能与安徽籍汉族RA的易感性相关.     

TNF-〆、IL-6和IL-8与慢性肝病的关系

为研究肿瘤坏死因子 -α( TNF-α)、白细胞介素 - 6( IL - 6)和白细胞介素 - 8( IL - 8)与慢性肝病的关系 ,分别用 RIA和 EL ISA法检测 94例慢性肝病患者血清 TNF-α和 IL - 8含量 ,同时用免疫组化 ABC法观察其中 2 5例患者 (慢迁肝 3例 ,慢活肝 5例 ,肝硬变 17例 )肝组织内 TNF-α,IL - 8和 IL - 6的表达和分布。结果显示 :慢活肝和肝硬变患者血清及肝组织内上述细胞因子水平均明显增加 ( P<0 .0 5～0 .0 1) ,且分别与血清中胆红素水平和肝组织炎症活动指数密切相关 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1)。提示这些细胞因子可能相互影响 ,并在慢性肝脏炎症损伤、修复和纤维化形成中起重要作用     

1,25-(OH)_2D_3通过Ca~(2+)/CaM信号调控内皮细胞自噬抑制动脉粥样硬化钙化

目的探讨1,25二羟基维生素D_3(1,25-(OH)_2D_3)是否通过信号调控人脐静脉内皮细胞(HUVEC)自噬抑制细胞钙化及小鼠动脉粥样硬化斑块内钙化。方法 (1)将体外培养的HUVEC高脂刺激自噬后予1,25-(OH)_2D_3干预后,通过荧光显微镜、透射电镜、蛋白免疫印记(Western blot)检测细胞自噬水平;利用慢病毒过表达或者沉默钙调蛋白(CaM),运用Western blot、茜素红染色法、钙检测试剂盒检测细胞钙化指标骨形态发生蛋白2(BMP-2)、碱性磷酸酶(ALP)。(2)取6～8周龄Apo E-/-雄性小鼠高脂饲养形成动脉粥样硬化模型,1,25-(OH)_2D_3灌胃后尾静脉注射CaM过表达或者沉默慢病毒,Western blot检测组织自噬及钙化水平指标;扫描电镜观察主动脉斑块自噬小体及钙沉积; HE及Von Kossa染色法分别检测小鼠主动脉粥样硬化及钙化程度。结果体外实验显示,1,25-(OH)_2D_3处理后细胞自噬增强,Ca~(2+_与CaM上调;与对照组相比,CaM过表达组自噬增强,细胞钙化减轻,ApoE-/-小鼠斑块内钙化明显被抑制; CaM沉默组细胞自噬流不通畅,细胞钙沉积增加; Apo E-/-小鼠斑块内钙化明显增加(P0.01)。结论 1,25-(OH)_2D_3通过Ca2+/CaM信号调控HUVEC自噬抑制细胞钙化及小鼠动脉粥样硬化斑块钙化。     

淀粉样蛋白联合L-型谷氨酸诱导类阿尔茨海默病模型

目的采用淀粉样蛋白联合L-型谷氨酸诱导建立类阿尔茨海默病(AD)大鼠模型。方法将β-淀粉样蛋白25～35(Aβ25～35)注射到大鼠双侧CA3区,或联合L-谷氨酸(Glu)分别注射到大鼠双侧CA3区、侧脑室制备类AD模型,用Morris水迷宫和免疫组化方法分别检测大鼠学习记忆力和胆碱乙酰转移酶(ChAT)及NMDAR1脑内表达。结果 Aβ联合Glu诱导的类AD模型大鼠学习记忆力明显降低,与假手术组和单纯Aβ注射组相比,均有统计学差异(P<0.01或P<0.05),同时海马CA3区及顶叶皮质内ChAT及NMDR1表达也降低明显(P<0.01)。结论采用淀粉样蛋白联合L-型谷氨酸诱导建立类AD动物模型比单纯Aβ注射效果好,能模拟出AD学习记忆力减退和相关的主要病理学变化。     

miR-338-3p通过减轻炎症反应和神经细胞凋亡保护急性脑梗死脑损伤

目的 探讨miR-338-3p对急性脑梗死脑组织损伤的影响及其机制。方法 将48只SD大鼠分为假手术组、模型组、miR-NC组和miR-338-3p组,后3组采用线栓法构建急性脑梗死模型,miR-NC组和miR-338-3p组采用侧脑室注射激动剂阴性对照和miR-338-3p激动剂;术后48 h根据Zea-Longa评分标准评估大鼠神经功能,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法检测大鼠脑梗死体积,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测大鼠脑组织神经细胞凋亡,含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-3水平测定试剂盒检测脑组织神经细胞Caspase-3活性,Western印迹检测脑组织中B细胞淋巴瘤(Bcl)-2和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平,实时荧光定量-聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠脑组织中miR-338-3p表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠脑组织中炎症因子血管细胞间黏附分子(VCAM)-1和细胞间黏附分子(ICAM)-1表达。结果 与假手术组比较,模型组神经功能评分、脑梗死体积和脑组织神经细胞凋亡率、Caspase-3水平、Bax蛋白表达...     

β_3肾上腺素受体调节肝细胞核因子活性促进肝细胞载脂蛋白A-Ⅰ基因的转录

目的探讨β_3肾上腺素受体(β_3-AR)对肝细胞载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)基因转录的调控作用。方法不同浓度(10-5～10-10 mol/L)β_3-AR激动剂(BRL37344)和拮抗剂(SR59230A)分别孵育HepG2细胞,CCK8检测细胞活性。将HepG2细胞分为对照组、激动剂组(10-6 mol/L的BRL37344)和拮抗剂组(10-7 mol/L的SR59230A),孵育6h;RT-qPCR检测apoA-ⅠmRNA表达;ELISA检测细胞外基质apoA-Ⅰ分泌水平;染色质免疫共沉淀联合RT-PCR检测肝细胞核因子(HNF)-4和HNF-3及早期生长反应蛋白1(EGR-1)。结果 HepG2细胞在10-6～10-8 mol/L的BRL37344和SR59230A区间内生长增殖良好,孵育6h和24h时细胞呈现较高活性。与对照组比较,激动剂组肝细胞apoA-ⅠmRNA和细胞外基质apoA-Ⅰ分泌水平上调[2.9±0.5 vs 1.0±0.2,(590.1±54.6)μg/ml vs(395.5±23.4)μg/ml,P0.01],且HNF-4和HNF-3结合活性显著升高(90.4±13.4 vs 17.2±1.2,78.3±20.6 vs 19.7±2.5,P0.01)。3组肝细胞EGR-1结合活性比较,无统计学差异(P0.05)。结论激活β_3-AR使肝细胞HNF-4和HNF-3活性增高,可能是β_3-AR上调肝脏apoA-Ⅰ转录水平的分子机制之一。     

慢性阻塞性肺疾病患者血清和诱导痰中α-防御素1-3水平的变化及意义

目的 测定COPD急性加重期(AECOPD)和稳定期患者血清和诱导痰中?-防御素1-3(HNP1-3)水平,以探讨HNP1-3在COPD发病机制中的作用.方法 2006年10月至2007年9月收集30例AECOPD患者(AECOPD组),21例COPD稳定期患者(COPD稳定期组)及22例健康受试者(健康对照组)的血清和诱导痰,分别进行痰细胞计数和分类,用ELISA法检测血清和诱导痰中HNP1-3和白细胞介素-8(IL-8)水平,并分析HNP1-3水平与中性粒细胞、IL-8、气流阻塞之间的相关性.应用SPSS 11.5软件进行统计学分析,多组数据间比较采用单因素方差分析或卡方检验,采用Pearson或Spearman相关分析进行相关性检验.结果 AECOPD组诱导痰HNP1-3的中位数(四分位间距)[9 652(4 272～12 576)ng/L]明显高于健康对照组[4 194(700～10 505)ng/L]和COPD稳定期组[7 011(6 658～7 319)ng/L],AECOPD组、COPD稳定期组和健康对照组血清HNP1-3的中位数(四分位间距)分别为51(39～173)ng/L、135(113～241)ns/L和130(13?60)ng/L,3组比较差异无统计学意义(x2=5.75,P＞0.05).诱导痰中HNP1-3水平与IL-8、中性粒细胞数及比例呈正相关(r值为0.29～0.53,P均＜0.01),与FEV1占预计值％、FEV1/FVC和PaO2呈负相关(r值为-0.33～-0.44,P均＜0.01).结论 HNP1-3参与COPD的炎症过程.此过程与中性粒细胞和IL-8等炎性因子有关.痰中HNP1-3水平可以作为COPD严重程度的指标.     

蛇床子素对病毒性心肌炎小鼠炎症反应的抑制作用研究

目的 探究蛇床子素对柯萨奇B3病毒(CVB3)诱导的病毒性心肌炎(VMC)小鼠炎症反应的抑制作用。方法 选择SPF级雄性BALB/c小鼠30只,随机分为蛇床子素治疗组(观察组)、模型组及对照组,各10只。向观察组、模型组小鼠腹腔注射CVB3病毒稀释液0.2 mL构建VMC动物模型。观察组小鼠给予50 mg·kg^-1·d^-1蛇床子素腹腔注射治疗。7 d后处死所有小鼠,留取血清和心脏标本。采用荧光定量PCR法检测心肌组织内CVB3相对表达量以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA表达水平。采用酶联免疫吸附测定法检测血清中炎症因子TNF-α和IL-1β水平。采用Western blot法检测心肌组织内TNF-α和IL-1β蛋白表达水平以及蛋白激酶B(Akt)和核因子-κB(NF-κB)蛋白磷酸化水平。结果 模型组小鼠心肌组织内CVB3 m RNA相对表达量、IL-1β和TNF-α m RNA表达水平高于对照组,观察组上述指标低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组小鼠血清中的IL-1β、TNF...     

外周血PNPLA3rs738409基因多态性与非酒精性脂肪性肝病遗传易感性研究

目的 分析patatin样磷脂酶结构域蛋白3(PNPLA3)rs738409基因多态性与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)遗传易感性的关系.方法 2017年11月～2019年11月我院诊治的162例NAFLD患者和同期体检的100例健康人,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性检测外周血PNPLA3 rs738409位...     

益母草碱对Aβ1～42所致老年痴呆大鼠大脑保护作用及机制

目的 探究益母草碱(LEO)对β淀粉样蛋白(Aβ)_1～42致痴呆大鼠脑保护作用及机制。方法 将80只SPF级SD大鼠随机分为Sham组、Model组、LEO组和尼莫地平(NMDP)组,通过在大脑海马CA1区注射Aβ_1～42构建阿尔茨海默病(AD)模型,造模结束后,LEO组腹腔内注射LEO 50 mg/kg, NMDP组腹腔注射NMDP 50 mg/kg,注射剂量10 ml, Sham组、Model组给予等量生理盐水,连续给药14 d。采用跳台实验评估空间学习记忆功能,采用激光散斑成像检测大脑皮质血流灌注量变化、HE染色观察脑组织内神经元损伤程度、酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光法检测脑组织中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α表达水平、核转录因子(NF)-κB的核移位,p-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、p-内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和NF-κB蛋白的表达水平通过Western印迹检测。结果 Model组学习记忆功能低于Sham组,大脑皮层血流灌注量少于Sham组,脑组织内细胞凋亡率及IL-1β、IL...     

油酰乙醇胺对糖尿病大鼠脑内炎性因子及神经相关因子表达的影响

目的探讨油酰乙醇胺(OEA)对糖尿病小鼠脑内炎性和神经营养因子的影响。方法采用高脂高糖加STZ链脲佐菌素(STZ)诱导T2DM小鼠模型,OEA[15、30、60 mg/(kg·d)]连续腹腔注射给药6周,通过Real time-PCR及Western blot检测海马内白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、突触成长相关蛋白-43(GAP-43)、突触素(SYN)、BDNF和NT-3的mRNA和蛋白表达水平。结果糖尿病模型小鼠海马内炎症因子IL-6、IL-1β和TNFα的表达水平下降,并显著上调海马内GAP-43、SYN、BDNF和NT3 mRNA表达水平。结论OEA具有降低糖尿病后海马内炎症,增加海马内突触相关因子和神经营养因子的作用,从而发挥神经保护作用。     

Tim-3通过胆固醇酯水解酶影响巨噬细胞泡沫化过程的机制

目的观察Tim-3是否通过调节巨噬细胞内胆固醇脂水解酶(CEH)的表达干扰泡沫化细胞的形成,进而影响动脉粥样硬化的发生发展。方法 Western印迹检测CEH蛋白的表达;液体闪烁计数测定THP-1巨噬细胞内胆固醇流出情况;HPLC检测胞内脂质含量;油红O染色显示胞内脂滴情况;ELISA检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、MIF、白细胞介素(IL)-10的分泌情况。结果 Ad-Tim-3组细胞中CEH的表达被明显抑制,胞内胆固醇流出减少,胞内总胆固醇(TC)、胆固醇酯(CE)及游离胆固醇(FC)的含量明显增加,TNF-α和MIF分泌增多,IL-10的分泌减少;Ad-CEH组和Ad-Tim-3+Ad-CEH组细胞中CEH的表达水平被明显增强,胞内胆固醇流出增加,胞内TC、CE及FC的含量明显减少,TNF-α和MIF分泌减少,IL-10分泌增多。结论 Tim-3可以通过增强巨噬细胞内CEH的活性抑制巨噬细胞向泡沫细胞的转化。     

脑益康对AD大鼠脑组织炎症损伤的保护作用

目的 探讨脑益康对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习、记忆能力和脑内炎性反应的影响.方法 采用β-淀粉样蛋白1～40(Aβ1～40)右侧海马注射制备AD模型大鼠,脑益康灌胃给药28 d后,采用Y-型迷宫刺激器检测大鼠学习、记忆能力,免疫组织化学方法检测大鼠海马肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测皮层白细胞介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的蛋白水平.结果 脑益康能改善模型大鼠学习记忆能力,显著降低AD大鼠脑组织的IL-1β、IL-6、TNF-α的含量(P＜0.01),增加TGF-β1的表达(P＜0.01).结论 脑益康对AD模型大鼠学习记忆能力有改善作用,通过降低AD大鼠脑组织的IL-1β、IL-6、TNF-α的含量,增加TGF-β1的表达,有效抑制海马神经元炎性反应.     

甘肃省平凉市实现消除碘缺乏病阶段目标评估报告

甘肃省平凉市是碘缺乏病的重病区,1984年全市7县(区)已达到“基本控制”病区的标准。为全面评估2000年以来实现消除碘缺乏病阶段目标进展现状,2003年9月对所辖7县(区)进行了考核评估。1对象与方法1.1调查对象:在平凉市七县(区)内按经济条件好、中、差,每县随机抽取3个乡,每个乡抽取2所小学,每所小学随机抽取42名8～10岁学生作为调查对象。1.2评估内容和方法1.2.1病情:对8～10岁学生进行甲状腺触诊检查,确定甲状腺肿大率。1.2.2尿碘:每个点随机采集8～10岁学生一次性尿样20份,采用酸消化砷铈接触法检测尿碘。1.2.3盐碘:每个点随机采集8～10岁…     

质粒表达型小分子干扰RNA对人肾小管上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1抑制作用的研究

目的研究质粒表达型小分子干扰RNA(siRNA)对人肾小管上皮细胞(HKC)单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的抑制作用。方法2002年2～7月对同济大学附属东方医院针对人MCP-1 mRNA67、116、142位点设计并合成的3对MCP-1siRNA序列,构建MCP-1特异性siRNA真核表达载体pRNAT-MCP-1-Ⅰ、pRNAT-MCP-1-Ⅱ、pRNAT-MCP-1-Ⅲ,以脂质体法转染至HKC,转染24h后分别采用实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot技术检测HKC内MCP-1 mRNA、蛋白表达。结果siRNA表达载体的转染效率为60%,与正常对照组相比,3组不同质粒表达型siRNAMCP-1 mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01)。结论siRNA能高效抑制HKC的MCP-1基因表达,提示siRNA在防治肾间质纤维化中具有潜在作用。