肿瘤坏死因子α和血管紧张素Ⅱ对心肌细胞的细胞间粘？…

目的：研究肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）和血管紧张素Ⅱ对心肌细胞的细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）表达的不同影响。方法：运用免疫组化技术和流式细胞仪观察ＴＮＦα和ＡｎｇⅡ对培养的乳鼠心肌细胞ＩＣＡＭ－１表达量的影响。结果Ｌ：ＴＮＦα明显增加心肌细胞ＩＣＡＭ－１表达量,以刺激６ｈ最明显,随时间作用延长表达量减少。ＡｎｇⅡ对培养的心肌细胞ＩＣＡＭ－１表达量无显著作用。结论：ＴＮＦα是调节心肌细胞ＩＣＡＭ     

粘附分子表达和巨噬细胞浸润在缺血皮质和基底节区分布的比较

目的；比较大脑基底节区和皮质区对大脑局部缺血／再灌流损伤反应的敏感性。方法：运用免疫组化和酶组化方法对３６只ＳＤ大鼠局部脑缺血区血管 细胞粘附分子ＶＣＡＭ－１的表达和单核／巨噬细胞的浸润概况进行了比较研究。结果：大脑皮质缺血区血管内皮细胞ＶＣＡＭ－１的表达发生于脑缺血１ｈ表达高峰发生于脑缺血１ｈ／再灌流１６ｈ；而在缺血侧基底节区，其表达高峰则发生在脑缺血１ｈ／再灌流４ｈ。单核／巨噬细胞的浸润，在皮     

小鼠孕早期子宫内膜ICAM-1 mRNA的表达及调节

目的：为探讨细胞间粘附分子－１ｍＲＮＡ（ＩＣＡＭ－１）在孕早期的作用和细胞因子对其表达的影响。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ法测定孕１～８ｄ小鼠子宫内膜ＩＣＡＭ－１的表达；在小鼠孕２～４ｄ分别腹腔注射细胞因子ＬＩＦ、ＩＬ－１β或ＩＬ－１ｒａ，测定并比较各组孕第４天子宫内膜ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ表达水平。结果：ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ孕第１天表达量较低，第２天开始升高，第４天达高峰（Ｐ〈０．０１）。此后缓慢下降。与对照组相比。ＬＩＦ和ＩＬ－１β组ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的表达水平升高（Ｐ〈０．０１）。结论：ＩＣＡＭ－１在着床期表达水平较高，可能参与了着床过程中的胚胎粘附。细胞因子ＬＩＦ和ＩＬ－１可能是子宫内膜表达ＩＣＡＭ－１的潜在促调节因子。     

TPA及细胞因子对U937细胞中IL—1β mRNA表达的影响

本文利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交法，检测了几种细胞因子及ＴＰＡ对人单核细胞白血病传代细胞系Ｕ９３７细胞中ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达的影响。结果显示，ＴＮＦ－α，ＩＬ－６，ＩＦＮ－γ，ＩＬ－２，ＩＬ－３，ＩＬ－８，ＩＬ－９和ＧＭ－ＣＳＦ对ＩＬ－１βＲＮＡ的表达，均有不同程度的刺激作用，尤以ＴＮＦ－α和ＩＬ－６最为明显，ＴＰＡ刺激Ｕ９３７细胞表达ＩＬ－１β ｍＲＮＡ的时间效应显示，１２ｈ表达量较高；９ｈ表达     

内毒素诱导大鼠急性肺损伤巨噬细胞炎症蛋白-2的表达及巨噬细胞的作用

目的和方法：采用斑点及原位杂交方法,检测内毒素性急性肺损伤（ ＡＬＩ） 大鼠肺组织巨噬细胞炎症蛋白－ ２（ ＭＩＰ－ ２） ,单核细胞趋化蛋白－ １（ ＭＣＰ－ １） ｍ ＲＮＡ 表达,观察脂多糖（ＬＰＳ） 刺激猪肺血管内巨噬细胞（ＰＩＭ） ＭＩＰ－ ２ｍＲＮＡ 表达,及其培养上清肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα） 、白介素－ ８（ＩＬ－ ８） 含量变化,探讨肺损伤的机制。结果：ＡＬＩ 鼠肺组织ＭＩＰ－ ２ 、ＭＣＰ－ １ ｍ ＲＮＡ 表达显著增加,分别于致伤后３ ｈ 和６ ｈ 达峰值（ Ｐ＜ ０－０１） ;血浆及肺组织匀浆髓过氧化物酶（ ＭＰＯ） 活性亦显著增加,但峰值靠后;肺组织ＭＩＰ－ ２ ｍ ＲＮＡ 表达与血浆及肺匀浆ＭＰＯ 活性呈显著正相关（ Ｐ＜ ０－０５） 。原位杂交显示肺巨噬细胞（ Ｍ） 是ＭＩＰ－ ２ 的主要分泌细胞。ＬＰＳ 刺激的ＰＩＭ 分泌ＴＮＦα早,ＩＬ－ ８ 则晚而长。结论：肺Ｍ通过分泌ＭＩＰ－ ２ 、ＴＮＦα、ＩＬ－ ８ 等在ＡＬＩ 发生、发展中可能起重要作用     

重型病毒性肝炎患者PBMCs中TNF-α、IL-1α和IL-4mRNA表达水平及其意义探讨

本实验应用半定量ＲＴ－ＰＣＲ检测了８例急重肝、１３例亚急重肝和１６例慢重肝患者ＰＢＭＣｓＴＮＦ－α、ＩＬ－１α和ＩＬ－４ｍＲＮＡ的表达水平并对其意义进行了探讨。结果表明，急重肝和亚急重肝患者ＰＢＭＣｓＴＮＦ－α和ＩＬ－１αｍＲＮＡ的表达水平较正常人明显增高，且与内毒素血症和病情轻重相关，而慢重肝仅ＴＮＦ－αｍＲＮＡ略增高，提示ＴＮＦ－α和ＩＬ－１α在急重肝和亚急重肝的发病机理中可能起重要的作用，而在慢重肝的作用可能不是主要的。虽然三型重型肝炎患者ＩＬ－４ｍＲＮＡ的表达水平与正常人比较无显著差异，但急重肝和亚急重肝患者ＩＬ－４ｍＲＮＡ／ＴＮＦ－αｍＲＮＡ和ＩＬ－４ｍＲＮＡ／ＩＬ－１αｍＲＮＡ的比值均明显低于正常人，表明急重肝和亚急重肝患者炎症细胞因子和抗炎症细胞因子调节网络严重失调，ＩＬ－４水平相对低下可能是急重肝和亚急重肝患者ＴＮＦ－α和ＩＬ－１α异常增高的原因之一。     

白细胞介素1,肿瘤坏死因子α和脂多糖对人脐静脉内皮细胞表达 …

目的 观察细胞因子白细胞介素１（ＩＬ－１）β、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）α和脂多糖（ＬＰＳ）是否诱导人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）ｍＲＮＡ及蛋白。方法 选取生长汇合的人脐胸脉内皮细胞,在其培养基中分别加入终浓度为２ｎｇ／ｍｌ的ＩＬ－１β、２０ｎｇ／ｍｌ的ＴＮＦβ和１００ｎｇ／ｍｌ的ＬＰＳ,３７℃共育４ｈ后,按照一步法提取其总ＲＮＡ,用γ－＾２２Ｐ标记的寡核苷酸ｄｏｔ ｂｌｏｔ分析     

α-黑素细胞刺激素体外对星形胶质细胞产生NO和前炎性细胞因子的影响

目的：研究α－黑素细胞刺激素（α－ＭＳＨ）对ＬＰＳ诱导星形胶质细胞产生ＮＯ和前炎性细胞因子的影响。探讨α－ＭＳＨ的抗炎作用机制。方法：分别用ＬＰＳ或α－ＭＳＨ＋ＬＰＳ处理体外培养的大鼠脑星形胶质细胞,用Ｇｒｉｅｓｓ试剂测定ＮＯ,以ＭＴＴ显色法检测ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦ－α,采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＩＦｍＲＮＡ表达。结果：体外培养的星形胶质细胞在ＬＰＳ刺激下产生ＮＯ、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α和表达ＭＩＦｍＲＮＡ表达。结果：体外的星形胶质细胞在ＬＰＳ刺激下产生ＮＯ、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α和表达ＭＩＦｍＲＮＡ显著增高;若同时给予ＬＰＳ和α－ＭＳＨ,可明显降低ＮＯ、ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦ－α的产生以及ＭＩＦｍＲＮＡ表达。结论：Ｒ昧α－ＭＳＨ抑制星形胶质细胞产生ＮＯ和前炎性细胞因子与其抑制中枢神     

细胞因子对心脏微血管内皮细胞与淋巴细胞粘附的影响

目的：观察细胞因子对心脏微血管内皮细胞表面细胞间粘附分子－１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１，ＩＣＡＭ－１）的表达的调控，及对内皮细胞与激活淋巴细胞粘附的影响。方法：体外培养大鼠心脏微血管内皮细胞，以肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α，ＴＮＦ－α）、白细胞介素－６（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ－６）和白细胞介素－１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１β，ＩＬ－１β）诱导。采用免疫组织化学染色法观察内皮细胞表面ＩＣＡＭ－１表达；采用粘附试验和抗ＩＣＡＭ－１或抗ＬＦＡ－１单克隆抗体阻断抑制试验。结果：ＴＮＦ－α、ＩＬ－６和ＩＬ－１β诱导内皮细胞１８～２４ｈ，均可使内皮细胞与淋巴细胞的粘附率显著增加，ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β的诱导还可使内皮细胞表面ＩＣＡＭ－１分子表达明显增强，表现为ＩＣＡＭ－１表达阳性细胞数增多，着色加深。用１０～２０ｍｇ／Ｌ抗ＩＣＡＭ－１或抗ＬＦＡ－１单克隆抗体均可部分抑制内皮细胞与淋巴细胞的粘附。结论：ＴＮＦ－α和ＩＬ－１β可以有效地激活心脏微血管内皮细胞，通过诱导内皮细胞ＩＣＡＭ－１表达增多，促进内皮细胞与淋巴细胞的粘附     

细胞粘附分子—1表达的基因调控和影响因素

人ＩＣＡＭ－１基因长约１５．５ｋｂ，在其上游区有３个增强基因区和１个抑制基因区。目前认为至少有两种机制参与细胞基础ＩＣＡＭ－１表达的调节，其中一个机制似乎与抑制基因失活有关，该机制负责许多细胞表达低基础水平ＩＣＡＭ－１，并且允许细胞在细胞因子的作用下迅速增强表达ＩＣＡＭ－１。另一机制负责ＩＣＡＭ－１基础表达水平高的细胞，此调节模式与一个激活的抑制基因的存在有关。ＩＬ－１，ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－γ等细胞因子与Ｈ２Ｏ２、Ｚｎ２＋、内毒素、部分病毒及其蛋白均对多种细胞ＩＣＡＭ－１基因表达有上调作用。生理浓度视黄酸能增强肿瘤细胞ＩＣＡＭ－１表达，可用于癌症的治疗。针对ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的反义核酸能抑制细胞ＩＣＡＭ－１表达，有可能为器官移植提供一种无毒性的免疫抑制治疗的新方法。     

大鼠脑缺血区IL-1β和TNF α表达的实验研究

炎症和免疫因素与脑缺血的联系，近来倍受观注。本实验旨在探查脑缺血区ＩＬ１β和ＴＮＦα表达的结构和时程，进而探讨其表达与脑缺血性损伤之间的病理联系。采用局灶性脑缺血／再灌模型（缺血１小时／再灌流０小时、２小时、４小时、８小时和１６小时），原位杂交和免疫组织化学染色技术对４０只成年雄性ＳＤ（ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ）大鼠进行了研究。结果显示，脑缺血区ＩＬ１βｍＲＮＡ阳性信号主要存在微血管内皮细胞，在脑缺血周围区的ＩＬ１βｍＲＮＡ信号比中央区更强烈。阳性信号出现于脑缺血１小时（与对照组比较…     

成年大鼠星形细胞经LPS、前炎症因子和免疫调节因子刺激后β-趋化因子的分泌

目的研究在中枢神经系统（ＣＮＳ）的炎症性疾病中,作为构成血脑屏障结构的组成部分之一,可引起白细胞浸润的星形细胞分泌趋化因子的影响因素。方法通过星形细胞体外培养,经不同细胞因子刺激,用原位杂交检测成年大鼠星形细胞β－家系趋化因子的ｍＲＮＡ表达。结果ＩＦＮ－γ可引起ＭＣＰ－１,ＲＡＮＴＥＳ,ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达;ＴＮＦ－α可引起ＲＡＮＴＥＳ和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达;ＬＰＳ可引起ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达。ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０下调由ＬＰＳ引起的ＭＣＰ－１和ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１βｍＲＮＡ表达。ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０可抑制由ＴＮＦ－α引起的ＭＣＰ－１和ＲＡＮＴＥＳ的ｍＲＮＡ表达。ＩＬ－１０还可下调由ＴＮＦ－α引起的ＭＩＰ－１βｍＲＮＡ表达。结论成年大鼠体外试验中的星形细胞可由ＬＰＳ和前炎症因子刺激,产生β－家系趋化因子ｍＲＮＡ的表达。而调节因子如ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０可抑制由ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α和ＬＰＳ引起的β－家系趋化因子的ｍＲＮＡ表达。     

重型病毒性肝炎患者PBMCs中TNF—α,IL—1α和IL—4…

本实验应用半定量ＲＴ－ＰＣＲ检测了８例急重肝，１３例亚急重肝和１６例慢重肝患者ＰＢＭＣｓＴＮＦ－α，ＩＬ－１α和ＩＬ－４ｍＲＮＡ的表达水平对其意义进行了探讨。结果表明，急重肝和亚急重肝患者ＰＢＭＣｓＴＮＦ－α和ＩＬ－αｍＲＮＡ的表达水平较正常人明显增高，且与内毒素血症和病情轻重相关，而慢重肝仅ＴＮＦ－αｍＲＮＡ略增高，提示ＴＮＦ－α和ＩＬ－１α在急重肝和亚急重肝的发病机理中可能起重要的作用，而在慢     

细胞因子移植排斥反应

急性器官移植排斥反应时，多种细胞因子血清水平呈现升高现象，但需要与感染及ＣＭＶ等因素引起的细胞因子变化鉴别。移植物局部以ＩＬ－１，ＴＮＦ及Ｍ－ＣＳＦ升高为明显，ＩＬ－２，ＩＬ－３，ＩＬ－４，ＩＬ－６，Ｇ－ＣＳＦ或ＧＭ－ＣＳＦ未见升高。实体器官排斥时ＩＬ－４ｍＲＮＡ，ＩＬ－２ｍＲＮＡ及ＩＬ－５ｍＲＮＡ表达可升高。而炎性因子ＩＬ－１βｍＲＮＡ，ＩＬ－６ｍＲＮＡ及ＴＮＦａｍＲＮＡ表达不升高。某些细胞因子     

LPS和几种促炎细胞因子促进人血管平滑肌细胞iNOS mRNA的表达

ＬＰＳ、ｒｈｌＬ－１β、ｒｈＩＬ－６、ｒｈＴｈＦ－ａ和ｒｈＩＦＮ－γ单独或两两组合加于培养的人血管平滑肌细胞（ｈＶＳＭＣ）,测定了ｈＶＳＭＣＮＯＳ活性,ｃＧＭＰ含量,ｉＮＯＳｍＲＮＡ表达丰度和培养液中ＮＯ２浓度。ＬＰＳ和细胞因子都能诱导ｈＶＳＭＣ表达ｉＮＯＳ　ｍＲＮＡ,升高ｈＶＳＭＣ　ＮＯＳ活性、ｃＧＭＰ含量和培养液中ＮＯ２浓度;ＴＮＦ－ａ是受试细胞因子中唯一能与另外三种细胞因子分别组合都显示出协同效应的细胞因子;ＬＰＳ和其余三种细胞因子间的两两组合都没有显示出协同效应;本研究结果表明：ＬＰＳ、ｒｈＴＮＦ－α、ｒｈＩＬ－１β、ｒｈＩＬ－６、ｔｈＴｈＦ－α、ｔｈＩＦＮ－γ都能诱导ｈＶＳＭＣ合成ＮＯ;ＴＮＦ－α可能是诱导ｈＶＳＭＣｉＮＯＳ表达的致炎细胞因子中最为重要的。     

TNFα、IL-1β及IL-6对心脏微血管内皮细胞与中性粒细胞粘附的影响

目的和方法：应用心脏微血管内皮细胞体外培养模型，研究不同浓度的ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６对微血管内皮与中性粒细胞粘附的调节。结果：５×１０４Ｕ／Ｌ的ＴＮＦα和ＩＬ－１β可明显增加内皮细胞与中性粒细胞的粘附（诱导内皮６ｈ），并分别于１０５Ｕ／Ｌ、２×１０５Ｕ／Ｌ浓度时使中性粒细胞粘附数达高峰，但不同浓度的ＩＬ－６均未使粘附增加，免疫组化ＡＢＣ法证实了同样的结果。进一步用抗ＩＣＡＭ－１和抗ＬＦＡ－１单克隆抗体阻断实验表明，两种抗体在５ｍｇ／Ｌ浓度下可显著阻断中性粒细胞与内皮细胞间的粘附。结论：心脏微血管内皮细胞与中性粒细胞的粘附主要通过粘附分子ＩＣＡＭ－１／ＬＦＡ－１介导。     

促炎症细胞因子刺激人类关节骨膜Ｂ型细胞表达粘附分子

目的：透析相关性淀粉样变（ＤＲＡ）病人关节滑膜组织粘附分子表达增强,并与局部炎与细胞浸润密切相关。旨在探讨ＤＲＡ时秀导滑膜细胞分子表达上调的机制,方法：分离正常人关节滑膜Ｂ型细胞,与晚期糖基化终产物修饰的β微球蛋白（ＡＧＥ－β２m）、天然β２m、肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）,白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）在体外共同培养,用荧光单克隆抗体染色,流式细胞仪检测定量分析滑膜Ｂ型细胞表面细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）,血管细胞间粘附分子－１（ＶＣＡＭ－１）、Ｅ－选择素（Ｅ－selectin)的表达,结果：正常关节滑膜Ｂ型细胞表达ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１,但不表达Ｅ－selectin.IL-1β、ＴＮＦ－α能以时间和剂量依赖的方式上调滑膜Ｂ型细胞ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１的表达,但无诱导Ｅ－selectin表达的作用。ＡＧＥ－β２m 和β２m对Ｂ型细胞粘附分子的表达无直接影响,结论：ＤＲＡ时关节组织存在的促炎症细胞因子可能上调滑膜细胞粘附分子的表达,从而促使局部的单核细胞浸润。     

B7-1分子诱导体外抗肝癌免疫反应

目的：了解Ｂ７分子在体外抗肝癌免疫中的作用。方法：健康人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）与ＨｅｐＧ２／ｈＢ７－１，ＨｅｐＧ２／ｎｅｏ及亲代ＨｅｐＧ２瘤苗混合培养（ＭＬＴＣ），检测淋巴细胞活化增殖能力，淋巴细胞ＨＬＡ－Ｉ类抗原的表达，培养上清ＩＦＮ－γ水平，ＴＮＦ活性及ＬＡＫ，ＣＴＬ细胞活性。结果：ＨｅｐＧ２／ｈＢ７－１瘤苗促淋巴细胞增殖最高达１４．６倍，明显高于ＨｅｐＧ２／ｎｅｏ和ＨｅｐＧ２瘤苗的作用     

秋水仙碱对LPS诱导巨噬细胞TNF—α基因表达的抑制作用

细胞微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ，Ｃｏｌ．，１０μｍｏｌ／Ｌ）可抑制ＬＰＳ激活的小鼠巨噬细胞株ＰＵ５－１．８产生ＴＮＦ－α及减少其基因表达，而Ｃｏｌ．衍生物β－Ｌｕｍｉｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ对微管无作用，对ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ积累亦无影响，其它微管聚合抑制剂长春新碱、长春花碱等则有类似Ｃｏｌ．的抑制作用。用ｒｕｎ ｏｎ核转录试验和ｍＲＮＡ半寿期检测证实Ｃｏｌ．ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ积累     

抗TNF-α人-鼠嵌合抗体的构建及表达

目的：构建和表达抗ＴＮＦ－α人－鼠嵌合抗体。方法：将抗ＴＮＦ－α鼠单抗Ｚ８的轻、重链可变区基因插入到含有人ｋ链和ＩｇＧ１重链恒定区基因的真核细胞表达载体中,分别构建轻、重链分开表达和共同表达的人－鼠嵌合抗体真核表达载体转染真核细胞,通过ＥＬＩＳＡ,ＲＴ－ＰＣＲ、免疫印迹检测ＴＮＦ－α的活性。用Ｌ９２９细胞检测嵌合抗体体外中和ＴＮＦ－α的活性。结果：ＥＬＩＳＡ鉴定结果表明该嵌合抗体与ＴＮＦ－α特异性