东北红豆杉细胞培养生产紫杉醇的调控研究Ⅱ——交互作用对东北红豆杉细胞培养生产紫杉醇的影响分析

交互作用可能发生在两种相同或不同类型物质之间 ,其影响可能是促进也可能是滞后 ,研究交互作用可以更为深入地了解两种物质之间发生的具体影响 .考察了乙酸钠×丙酮酸钠、SA×CCC、乙酸钠×SA、乙酸钠×CCC、赤霉酸×CCC共 5种交互作用 ,较为全面地反映了典型交互作用中二物质之间的相互影响 .经进一步研究发现当两两物质之间达到某一定浓度的时候 ,必然会出现相互抑制的作用 .     

东北红豆杉繁殖技术研究进展

本文综述了国内外有关抗癌植物－－东北红豆杉繁殖技术的研究进展。     

聚乙二醇对东北红豆杉培养细胞的

在改良的B     

东北红豆杉的化学成分和药理作用研究进展

本文综述了东北红豆杉(Taxus cuspidata)在化学成分和药理学方面的研究进展,着重强调了近年来紫杉烷类化合物的化学研究和生理活性。     

聚乙二醇对东北红豆杉培养细胞的生长及紫杉醇生产的影响

在改良的B5培养基中加入不同浓度的聚乙二醇对东北红豆杉培养细胞进行摇瓶培养,通过不同时期取样并测定细胞鲜,干重及用HPLC测定紫杉醇的含量,发现聚乙二醇对东北红豆杉培养细胞的生长及紫杉醇生产均有明显的促进作用,聚乙二醇为10g/L时,对细胞生长最为有利,细胞培养16d可达到最大生物量,其平均鲜重为28．73g/瓶,增重3．8倍,平均干重为2．14g/瓶,增重3．1倍,聚乙二醇为20g/L,对紫杉醇的生产最有利;细胞培养25d时,培养基中紫杉醇的含量达到最高水平,其含量为2350ug/L,是不加聚乙二醇的11倍。     

东北红豆杉可再生部位紫杉醇含量时空动态变化规律

利用ODS-C18反相高效液相色谱体系研究了东北红豆杉(Taxus cuspidata)叶、茎、果肉及种子中紫杉醇含量的时空动态变化。结果表明,东北红豆杉的4个部位均有紫杉醇存在,但存在的时间和部位具有较大差异。紫杉醇的含量最大值为0.043mg.g-1(FW)出现在10月份种子中,最小值0.001mg.g-1(FW)出现在11月份果肉中。叶与茎中紫杉醇的含量变化较为一致,叶和茎中紫杉醇含量在7月份达到最高,分别为0.032mg.g-1(FW)和0.029mg.g-1(FW),在8月份降至最低,分别为0.011mg.g-1(FW)和0.010mg.g-1(FW)。在新叶萌发期,老茎叶比新茎叶中紫杉醇的含量高约2.5倍。     

东北红豆杉可再生部位紫杉醇含量时空动态变化规律

利用ODS-C18反相高效液相色谱体系研究了东北红豆杉(Taxus cuspidata)叶、茎、果肉及种子中紫杉醇含量的时空动态变化。结果表明, 东北红豆杉的4个部位均有紫杉醇存在, 但存在的时间和部位具有较大差异。紫杉醇的含量最大值为0.043 mg.g-1 (FW)出现在10月份种子中, 最小值0.001 mg.g-1 (FW)出现在11月份果肉中。叶与茎中紫杉醇的含量变化较为一致, 叶和茎中紫杉醇含量在7月份达到最高, 分别为0.032 mg.g-1 (FW)和0.029 mg.g-1 (FW), 在8月份降至最低, 分别为0.011 mg.g-1 (FW)和0.010 mg.g-1 (FW)。在新叶萌发期, 老茎叶比新茎叶中紫杉醇的含量高约2.5倍。     

红豆杉植物资源的开发利用

近年来,从天然植物中寻找和提取毒性低疗效高的抗癌活性成份以制成抗癌新药,已经成为科学研究的热点之一。紫杉醇就是从红豆杉植物中开发出来的一种广谱的、活性很强的抗癌新药。由于红豆杉植物野生资源十分有限,而紫杉醇的需求量日益增长,资源和需求的矛盾十分突出。为了保护红豆杉植物资源,使其得到合理的开发利用,人们进行了大量的研究工作。本文就目前通过各种途径开发利用红豆杉植物资源获取紫杉醇的研究进展,作一综述。     

培养基成分对东北红豆杉细胞生长和紫杉醇产量的影响

在东北红豆杉（taxus cuspidate)细胞培养物的基本培养基中加入30mg.L^-12.4-D,可以提高细胞培养物的生长量,其相对最高生长量可以达到85．999mgFW/gFW.d;培养基中加入活性炭粉末1g.L^-1,可以克服植物细胞生长过程中的褐化问题;适当种类及含量的生长调节剂的加入：6－BA0．5mg.L^-1＋KTmg.L^-1,可以使植物细胞合成和积累相对较多的紫杉醇（Taxol).     

Two new taxanes from the needles and branches bark of Taxus cuspidata

Two new taxanes were isolated from the MeOH extract of the needles and branches bark of the Japanese yew, Taxus cuspidata. The structures were established as (2alpha,5alpha,7beta,9alpha,10beta,13alpha)-5,10,13,20-tetraacetoxytax-11-ene-2,7,9-triol (1) and (2alpha,5alpha,9alpha,10beta)-2,9,10-triacetoxy-5-[(beta-D-glucopyranosyl)oxy]-3,11-cyclotax-11-en-13-one (2) on the basis of in-depth 1D- and 2D-NMR analyses. Compound 2 is the first example of a transannular taxane glycoside isolated from a natural source.     

东北红豆杉细胞两液相培养中紫杉醇释放行为研究

在东北红豆杉细胞悬浮培养中,分别研究了稀土化合物(硫酸铈铵)、有机溶剂(油酸和邻苯二甲酸二丁脂)和稀土化合物与有机溶剂的协同作用对紫杉醇释放的影响。在此基础上深入研究了在东北红豆杉细胞两液相培养中,紫杉醇释放率随不同的有机溶剂(烷烃、有机酸、醇和脂)、有机溶剂的体积分数、有机溶剂的加入时间和有机溶剂相毒性的变化规律。结果表明分别加入稀土化合物和有机溶剂都明显促进紫杉醇的释放,特别是有机溶剂更显著促进紫杉醇的释放。但在东北红豆杉细胞两液相培养中,稀土化合物加入不能进一步促进紫杉醇的释放。因此两液相培养中有机溶剂本身就是很好的产物释放剂。紫杉醇的释放率由对照组的40%提高到75%以上。     

紫外辐射对东北红豆杉鲜叶中紫杉醇及三尖杉宁碱含量的影响

分别采用254、365 nm两种波长的紫外光对东北红豆杉鲜叶进行辐射,研究了波长、辐射时间以及样品处理方式对东北红豆杉鲜叶中紫杉醇及三尖杉宁碱含量变化的影响。结果表明,东北红豆杉鲜叶经匀浆处理后接受紫外辐射,两种波长的紫外光都可以使紫杉醇及三尖杉宁碱的含量增加,但不同波长对紫杉醇及三尖杉宁碱含量提高的趋势却不相同。365 nm的紫外光辐射2 h时使紫杉醇和三尖杉宁碱含量均提高到了最大值,两种物质含量分别提高了44.6%和53.0%,而254 nm的紫外光在辐射8 h时才达到最大值,两种物质含量分别提高了39.2%和24.3%。可以选取365 nm的紫外光对东北红豆杉鲜叶水匀浆体系进行辐射,快速高效地提高鲜叶内紫杉醇和三尖杉宁碱的含量。     

东北红豆杉愈伤组织细胞分裂及染色体稳定性

研究了继代 4年的东北红豆杉愈伤组织细胞分裂过程 ,并对其染色体数目的稳定性进行了讨论及染色体核型进行了分析。取转接 3～ 4d的东北红豆杉愈伤组织细胞 ,制作染色体压片 ,可观察到细胞有丝分裂前、中、后、末期的染色体形态 ;未观察到无丝分裂过程。继代 4年的愈伤组织细胞的染色体倍性十分稳定 ,体细胞染色体数目及核型 2n =2 4,这一结果与实生根压片所得结果一致     

A New Taxane with an Opened Oxetane Ring from the Needles of Taxus cuspidata

A new taxoid metabolite was isolated from the MeOH extract of Taxus cuspidata needles. The structure was established as (2α,5α,7β,9α,10β,13α)‐10,13,20‐tris(acetyloxy)‐1,4,5,7,9‐pentahydroxytax‐11‐en‐2‐yl benzoate ( 1 ) on the basis of spectral analyses including ¹H‐ and ¹³C‐NMR, HMQC, HMBC, and NOESY, and confirmed by HR‐FAB‐MS.     

濒危植物野生东北红豆杉群落特征及保护策略

以长白山自然保护区野生东北红豆杉种群为研究对象,在野生东北红豆杉的主要分布区设置4块标准地(50 m×50 m),运用群落生态学方法统计野生东北红豆杉的树木特征(树高、胸径、冠幅等),立地条件,林分状况等,分析野生东北红豆杉在分布地区的群落物种多样性特征。所调查的4个样地共有木本植物32种,隶属17科24属,草本植物53种,隶属于23科41属。不同样地的Simpson指数和Shannon指数变化一致,样地C4的均匀度Pielou指数为草本层>灌木层>乔木层,其余的样地均为灌木层>乔木层>草本层。Margalef丰富度指数显示,除了样地C4的草本层物种丰富度最大之外,其余3个样地都是乔木层物种丰富度指数最大。在4个样地中,野生东北红豆杉的重要值偏低,在群落中不占优势。野生东北红豆杉所在的群落主要以红松、长白鱼鳞云杉、紫椴等针阔叶树种组成的混交林。根据这种现象,提出了野生东北红豆杉的保护策略,为野生东北红豆杉资源的保护、繁育和利用提供了合理建议和有效途径。     

远紫外辐射诱导紫杉产生的活性氧

为了解活性氧和自由基在介导远紫外辐射对植物伤害上的作用 ,在实验室内用远紫外线源对紫杉 (TaxuscuspidataSieb .etZucc .)苗进行了 4周的辐射处理。每周取样 ,对针叶的有机自由基及离体叶绿体的O-·2 和1O2 分别进行了电子自旋共振 (ESR)检测 ,以了解它们各自的相对重要性。结果表明针叶的有机自由基水平最能说明远紫外辐射剂量的积累效应。其次是叶绿体产生的O-·2 。叶绿体产生的1O2 也随辐照时间的增加而略有增加 ,但由于本底数值过高 ,它在介导远紫外辐射引起的伤害上可能不如O-·2 重要