糖尿病犬模型造模前后血液生化指标的比较及治疗分析

Beagle犬1型糖尿病模型的建立对于开展糖尿病大动物模型的治疗研究有重要意义,但药物诱导的犬糖尿病模型如果护理不当,依然存在死亡率高的特点。本研究采用链脲佐菌素和四氧嘧啶联合静脉注射对Beagle犬进行了糖尿病造模,并对造模前后的血液生化和血常规指标进行比较,进行了相应的药物治疗。但采用常规的护肝和胰腺炎治疗方法并未取得治疗效果,多脏器功能的损伤可能是导致犬造模后死亡的重要原因。     

Beagle犬经口给予六神丸急性毒性研究

目的六神丸全方单次给药毒性的再评价;六神丸配方对蟾酥组分的配伍毒性关系研究。方法分为六神丸全方组、六神丸去蟾酥组和蟾酥组。给Beagle犬经口灌胃给予药物,间隔2d提高剂量给药一次。结果在1.8~48.6mg/kg剂量范围内,六神丸去蟾酥组动物均未见明显异常;在5.4mg/kg以上剂量蟾酥配方组动物出现呕吐、稀便、活动减少等症状。在>1.8mg/kg剂量时,六神丸全方组动物出现呕吐、活动减少等症状,一只雌性动物出现进食量减少和体重下降的情况,并且在48.6mg/kg剂量时,一只雄性动物死亡。心电图:六神丸全方组和蟾酥配方组出现剂量依赖性心率减慢、S-T振幅降低和T波倒置等,但在16.2和48.6mg/kg剂量时,去蟾酥配方的Q波振幅增加。血液学:在毒性剂量(16.2和48.6mg/kg)时,出现红细胞数升高、血红蛋白浓度升高、红细胞比容升高、血小板数升高、淋巴细胞比例下降。血清生化学:在毒性剂量(16.2和48.6mg/kg)时,血清丙氨酸氨基转换酶、白蛋白及胆固醇水平均升高。结论六神丸配方对蟾酥组分未见明显减毒影响;Beagle犬灌胃给予六神丸的最大耐受剂量为1.8mg/kg,最小致死剂量为48.6mg/kg。     

安全性评价试验中Beagle犬校正QT间期的计算分析

目的建立分析适合安全性评价试验中Beagle犬心率(Hear rate,HR)的校正QT间期(correct QT,QTc)计算方法。方法171只健康Beagle犬是本实验室7个GLP长期毒性试验所用动物,均购于广州医药工业研究院。本实验采用的HR和QT间期均为给药前测得的Beagle犬基础值。分别采用目前公认的Bazett(QTc=QT/(RR)1/2,Bazett,1920)、Fridericia(QTc=QT/(RR)1/3,Fridericia,1920)、Sagie(QTc=QT 0.154(1-RR),Sagie etal.,1992)、Todt(QTc=QT-0.1(RR-1000),Todt etal.,1992)、Vande Water(QTc=QT-0.087(RR-1000),Van de Water etal.,1989)等5种公式计算QTc。用SPSS作单线性回归,以HR为自变量,QTc为应变量作回归分析。结果用以上5种公式分别计算得到的QTc与HR作回归分析,不同性别间QTc与HR回归参数差异无统计学意义(P>0.05)。除Vande Water公式外(P=0.297),其他公式计算得到的QTc和HR回归参数与0比较,均有显著相关(Bazett、Fridericia和Sagie公式,P<0.001;Todt公式,P=0.024),表明Van de Water公式可能更适合本实验室Beagle犬QT间期的校正。结论根据Beagle犬的基础HR和QT间期值,可以分析获得较适合安全性评价试验中Beagle犬HR的QT间期校正计算公式。     

SMC005 Beagle犬急性毒性试验

目的观察灌胃给予受试物SMC005(干粉)后Beagle犬的急性毒性反应和死亡情况,考察药物的安全性。方法选用普通级Beagle犬6只,雌性,按体重随机分为2组,每组3只。动物给药前禁食不禁水过夜,按SMC005能够配制的最大浓度(200mg干粉/ml)(溶剂为0.5%CMC-Na水溶液)、Beagle犬一次灌胃最大容积(20ml/kg)给药,2次/d;阴性对照组同时按等容量给予0.5%CMC-Na水溶液。常规饲养15d。期间每天观察有无死亡、精神状态、分泌物、排泄物、一般症状和进食量;给药前和给药后24h、第7、10、15天分别称量犬的体重;给药前和给药后24h、第7、15天分别测定犬的肛温;给药前及给药后1、4、8、24h及第7、15天分别描记犬的Ⅱ导联心电图;给药前及给药后48h及第15天分别进行血液学、血液生化学及凝血指标的检查;在观察期结束后对存活动物进行大体解剖,记录相关情况。结果(1)死亡率及一般症状:Beagle犬以最大给药量给予SMC005溶液后,精神状况良好,毛色光亮,呼吸通畅、均匀,无呕吐、流涎等症状,分泌物、排泄物等均无异常,动物无一死亡。与阴性对照组比较,未见药物对给药组动物体重增长、进食量及体温有异常影响。(2)心电:药物对犬心律、心率和心电各项指标未见明显影响。(3)血液学、血液生化学指标:给药后未见药物对血液学、血液生化学指标有明显影响。给药后48h,给药组与阴性对照组比较,TT偏高,差异有统计学意义(P<0.05),给药后第15天,给药组与阴性对照组比较,所有凝血指标差异无统计学意义。(4)第15天尸检时观察到各动物心、肺、肾、肝、脾、胃肠道等主要脏器均无异常。结论SMC005对Beagle犬的口服最大给药量为8000mg干粉/(kg.d),依人拟临床常用剂量13.33mg干粉/(kg.d)计算,该剂量为人每公斤体重日常用量的600倍。Beagle犬以最大给药量口服SMC005(8000mg干粉/kg.d)未见明显毒性。     

QYL胶囊对Beagle犬的长期毒性试验

目的观察QYL胶囊对Beagle犬反复给药毒性作用,为临床用药提供安全性依据。方法采用Beagle犬以QYL胶囊提取物0.4、0.8和1.6g/kg体重连续灌胃9个月、停药恢复观察1个月的长期毒性试验。结果除给药初期中、高剂量组用药后偶有动物呕吐外,其余动物毛色光泽,行为活动、精神状态及粪便正常,一般状况良好,摄食、体重变化正常。给药前后不同时期各组动物体温、尿液、粪便、骨髓象检查及心电图检查均未见明显异常。除见给药9个月中、高剂量组动物视网膜比对照组红润,给药前后各组动物眼底无异常,这可能与该药活血化淤、致毛细血管扩张、改善微循环作用有关。血液学、血液生化学检查可见各给药组个别指标与对照组比较有显著性差异,但给药前后自身对照比较,显示其变化无明显剂量-反应和时间-反应关系,属正常波动,与受试药物无关。给药末期仅见低剂量组右睾丸系数略高于对照组(P<0.05),可能与该组动物体重增长慢于对照组有关;组织病理学检查显示,末期中、高剂量组各有1雄犬右侧睾丸间质性炎和前列腺间质炎,但脏器湿重及系数无异常,属个体偶发;其余动物未见与给药明显相关的形态学改变。结论QYL胶囊0.4g/kg体重为无毒性反应剂量,其临床拟用剂量的80倍以下为安全剂量范围。     

四磨汤口服液Beagle犬长毒试验研究

目的 观察Beagle犬灌胃四磨汤口服液的长期毒性反应.方法 40只Beagle犬随机分为四磨汤口服液高、中、低3个剂量组和辅料对照组,连续灌胃给药13周、恢复期4周,试验期间进行一般观察、体重、血液学指标、血液生化指标、尿液、组织病理学等检查,并观察停药后各指标的恢复情况.结果 四磨汤口服液高、中、低剂量组没有发现明...     

叶下珠提取物对Beagle犬长期毒性实验研究

目的 研究连续口服给予叶下珠提取物对Beagle犬产生的毒性反应.方法 叶下珠提取物125、250、500mg·kg-1(低、中、高剂量)连续灌胃给药26wk,于给药26wk及停药6wk时取部分犬进行血液学指标、血液生化学指标、尿液指标、病理组织学检查.结果 高剂量组Beagle犬出现食量减少、间歇性呕吐等症状.与空白对照组比较,中、高剂量在给药结束时导致Beagle犬ALT、AST、ALP、T-Bil、BUN、γ-GT等血液生化学指标明显升高(P＜0.05或P＜0.01),停药6wk后,以上指标均恢复正常.给药结束时,高剂量组Beagle犬尿液出现蛋白质和胆红素阳性.病理检查显示,中、高剂量均可导致Beagle犬肝脏和肾脏实质脏器出现可逆性组织病理学改变.结论 长期大剂量口服给予叶下珠提取物,可导致Beagle犬出现肝脏和肾脏功能以及病理组织学可逆性改变.     

静脉注射三乙醇胺对Beagle犬的病理性损伤作用

目的 观察静脉注射三乙醇胺后Beagle犬的组织病理学改变及其可逆性。方法 Beagle犬12只,分为对照组和150 mg/kg剂量组,连续给药30 d和恢复4周后,分别进行大体解剖和组织病理学检查。结果 连续给药30 d,Beagle犬出现肝细胞变性、坏死,及肝窦扩张,网状纤维蛋白样物质沉积;肾脏髓质和皮髓交界处肾小管上皮细胞变性;脾脏、淋巴结和肠黏膜相关淋巴组织内淋巴滤泡数量增多,生发中心增大,脾小体帽区局灶性坏死,其中雌性动物肝脏、脾脏病变程度较雄性严重。经过4周恢复,肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结、肠黏膜相关淋巴组织病变恢复不明显。结论 静脉注射一定剂量的三乙醇胺,可能对肝脏、肾脏、脾脏、淋巴结以及肠黏膜相关淋巴组织有一定的损伤作用。     

RP-HPLC法测定Beagle犬血浆中四环素

目的:建立测定Beagle犬血浆中四环素的RP-HPLC分析方法。方法:Beagle犬血浆样品经0.01 mol·L-1草酸酸化、乙腈沉淀蛋白处理后,采用Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相为乙腈-0.01 mol·L-1草酸溶液(15∶85),流速为0.8 mL·min-1,检测波长为350 nm,内标为土霉素。结果:测定血浆中四环素的线性范围为0.2～10μg·mL-1;日内与日间精密度均小于14.5%,准确度(RE)在$5.3%以内。结论:本方法简便、灵敏、准确,适用于Beagle犬血浆中四环素的分析测定。     

碘化油Beagle犬肝动脉注射的安全性研究

目的研究碘化油Beagle犬肝动脉注射的安全性.方法Beagle犬肝动脉内单次注射碘化油 0.38、0.75 和 1.50 ml*kg-1剂量,观察给药后 1 mon 内动物一般症状、血液学、血液生化学、心电图、眼科、尿常规的改变及重要组织器官病理学变化.结果碘化油对肝、脾、肺、肾等多个脏器有毒性反应,中毒剂量小于 0.38 ml*kg-1,.5 ml*kg-1剂量可导致动物在 24 h 内死亡.结论碘化油肝动脉内栓塞可导致多个重要脏器(肝、脾、肺、肾)的毒性反应.     

Analysis of acamprosate in beagle dog plasma by LC-MS-MS

A rapid, sensitive, and specific analytical method was developed and validated to quantify acamprosate calcium in beagle dog plasma. The method employs a single plasma protein precipitation, and the analytes are separated by chromatography on an Acquity UPLC HSS T3 column and analyzed by mass spectrometry in the multiple reaction monitoring (MRM) mode. The method has a chromatographic run time of 1.25 min and a linear calibration curve over the range 200-10000 ng/mL (r(2)>0.9994). The intra-day and inter-day accuracy and precision were within 10.0% for the analyte. Acamprosate was stable during all sample storage, preparation, and analytical periods. This method was employed in a pharmacokinetic study of an acamprosate 333 mg enteric-coated tablet in 8 male beagle dogs that received single 666 mg doses (333 mg x 2 tablets). The proposed method enables identification and quantification in pharmacokinetic studies of acamprosate in beagle dog plasma.     

SD大鼠1型糖尿病动物模型的建立

目的探讨制作理想糖尿病动物模型的方法。方法采用空腹腹腔一次性注射65 mg/kg链脲佐菌素的方法,建立SD大鼠1型糖尿病模型。结果造模1周后测血糖均高于16.7 mmol/L。持续观察8周,血糖值始终在建模初期高血糖水平上波动,未见到复转,并出现典型的"三多一少"症状,胰腺符合糖尿病成模动物胰腺病理变化。结论采用空腹腹腔一次性注射65 mg/kg链脲佐菌素的方法复制出1型糖尿病模型,具有造模方法简便、用药量小、药物毒性较低、胰岛B细胞损害特异性高等优点,可应用于糖尿病及其并发症研究的各个领域。     

HPLC-MS测定Beagle犬血浆中非洛地平的浓度

目的探讨测定Beagle犬血浆内微量非洛地平浓度的方法。方法采用反相高效液相色谱-质谱联用法检测。以尼莫地平为内标,Cosmosil ODS(150 mm×2.0 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-0.1%醋酸铵水溶液(85∶15),柱温40℃,流速0.2 m.lm in-1。结果非洛地平的线性范围为0.5~200.0 ng.m l-1(r2=0.9992),最低定量限为0.5 n.gm l-1,批内、批间RSD均小于15%,提取回收率大于90%。结论所建方法方便、快速,灵敏度高,精密度和重复性好,测定准确,适用于Beagle犬血浆中微量非洛地平的测定及生物利用度试验。     

静脉注射三乙醇胺对Beagle犬的病理性损伤作用

目的观察静脉注射三乙醇胺后Beagle犬的组织病理学改变及其可逆性。方法 Beagle犬12只,分为对照组和150mg/kg剂量组,连续给药30d和恢复4周后,分别进行大体解剖和组织病理学检查。结果连续给药30d,Beagle犬出现肝细胞变性、坏死,及肝窦扩张,网状纤维蛋白样物质沉积;肾脏髓质和皮髓交界处肾小管上皮细胞变性;脾脏、淋巴结和肠黏膜相关淋巴组织内淋巴滤泡数量增多,生发中心增大,脾小体帽区局灶性坏死,其中雌性动物肝脏、脾脏病变程度较雄性严重。经过4周恢复,肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结、肠黏膜相关淋巴组织病变恢复不明显。结论静脉注射一定剂量的三乙醇胺,可能对肝脏、肾脏、脾脏、淋巴结以及肠黏膜相关淋巴组织有一定的损伤作用。     

高效液相色谱测定比格犬血浆中的头孢唑啉与头孢曲松的浓度

目的：建立HPLC在多项测定参数相同的基础上,分别测定比格犬血浆中头孢唑啉、头孢曲松浓度的方法。方法色谱柱：头孢唑啉为ES industries Epic C18（4．6 mm ×150 mm,5μm）,头孢曲松为Phenomenex Gemini C18（4．6 mm ×150 mm,5μm ）,流动相：头孢唑啉为甲醇－0．05 mol? L－1乙酸铵缓冲液（ pH＝4．3）＝30∶70;头孢曲松为乙腈－0．05 mol? L－1 KH2 PO4缓冲液（ pH＝6．0）＝6∶94,流速均为1．0 mL? min－1,进样量均为40μL。结果头孢唑啉标准曲线回归方程为 y ＝－1．25×104 x ＋8479．37（ r ＝0．9974）,头孢曲松为y＝1．25×104 x ＋2．72×104（ r ＝0．9976）。头孢唑啉线性范围为2～300μg? mL－1,头孢曲松为2～200μg? mL－1;日内、日间精密度相对标准偏差均≤10％,提取回收率均≥85．78％。结论本法灵敏、准确、快速,可用于比格犬血浆头孢唑啉、头孢曲松浓度的测定和药物其他方面研究。     

Sumatriptan contracts large coronary arteries of beagle dogs through 5-HT1-like receptors

Summary The effects of 5-hydroxytryptamine (5-HT), 5-carboxamidotryptamine (5-CT), methysergide and sumatriptan were studied on endothelium-denuded rings of beagle dog large coronary arteries. Submicromolar concentrations of the compounds contracted the rings with the order of potency 5-CT > 5-HT >sumatriptan = methysergide. Concentrations greater than 2 M of both 5-HT and 5-CT, and 60 mol/l methysergide also caused concentration-dependent relaxation. Sumatriptan did not cause relaxation. Peak intrinsic activities relative to the plateau contraction to sumatriptan (1.00), were 5-CT 0.47, 5-HT 0.87 and methysergide 0.51. Ketanserin 1 mol/l affected neither contractile responses nor relaxant responses to 5-CT, methysergide and sumatriptan and only caused marginal blockade of the contractile effects of 5-HT. Methiothepin 200 nM shifted the concentration-contractile response curves by around 2 log units, as expected from its affinity for 5-HT₁-like receptors.The rank order of contractile potency of the agonists, the antagonism by methiothepin and the resistance to blockade by ketanserin are consistent with a nearly exclusive involvement of 5-HT₁-like receptors. Isolated large coronary arteries from beagle dogs may be a suitable model for the study of human coronary artery 5-HT₁-like receptors that are involved in the spasm observed with 5-HT and sumatriptan. Correspondence to A. J. Kaumann at the above address