拓扑替康对人卵巢癌顺铂耐药细胞株作用的研究

目的:探讨拓扑替康(TPT)在体外诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP凋亡的作用及其对凋亡相关蛋白表达的影响。方法:应用TPT诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP凋亡,运用MTT法、透射电镜、DNA凝胶电泳检测和观察TPT对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/杀伤效应、凋亡形态、生物特性。采用Westernblot印迹杂交法以检测TPT对凋亡相关蛋白bcl-2和bax表达的影响。结果:TPT可诱导细胞株A2780/DDP凋亡,经TPT作用后A2780/DDP细胞内bax蛋白增加,而bcl-2蛋白不表达,bax/bcl-2比值增加。结论:TPT可诱导人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP凋亡,其机制可能与bax蛋白高表达及bax/bcl-2不表达有关。     

拓扑替康对HL-60细胞凋亡的影响

目的:探讨拓扑替康(TPT)对人髓系白血病细胞株HL-60细胞凋亡的影响.方法:取倍增期的HL-60细胞分组培养,实验组培养液中加入0.15 μmol/L的TPT,空白对照组继续常规培养.分组培养4 h、12 h后分别采用流式细胞仪Annexin V-FITC染色及TUNEL法检测细胞凋亡情况.结果:分组培养4 h后,实验组细胞凋亡率为(28.57±3.16)%,高于空白对照组的(3.12±0.38)%,差异具有统计学意义(t=13.85,P=0.000 2).分组培养12 h后,实验组TUNEL阳性细胞数达38.33%,高于空白对照组的2.67%(χ2=117.08,P<0.05).结论:拓扑替康具有诱导HL-60细胞凋亡的作用.     

拓扑替康体外对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响

目的 探讨拓扑替康(topotecan，TPT)对肝癌细胞增殖和凋亡的生物学效应及机制。方法 采用HE染色、MTT实验、克隆形成试验、流式细胞仪、DNA电泳、透射电镜观察等方法，对TPT在HepG2细胞株的作用进行体外研究。结果 TPT对HepG2细胞产生明显的生长抑制作用，并可诱导HepG2细胞凋亡，与细胞周期被阻滞于S期有关。结论 TPT对肝癌细胞具有显著的体外生长抑制及凋亡诱导作用，提示TPT是治疗肝癌潜在的分子药物。     

拓扑替康对SKOV3细胞Survivin表达的调控

目的 :观察不同浓度拓扑替康 (TPT)对人卵巢癌细胞系SKOV3中Survivin表达的影响。方法 :采用免疫组化和RT PCR方法 ,检测体外不同浓度TPT(0 .2 4 4 μg/L ,3.90 6 μg/L ,6 2 .5 μg/L ,1mg/L ,1 6mg/L ,1 2 8mg/L)作用于SKOV348h后SurvivinmRNA及蛋白的表达。结果 :随TPT浓度的增加 ,SKOV3细胞中SurvivinmRNA及蛋白的表达明显减少 ,呈正性剂量效应关系 (P <0 .0 5 )。结论 :TPT能够抑制卵巢癌细胞SKOV3中SurvivinmRNA和蛋白的表达。     

Survivin反义核酸对拓扑替康诱导SKOV3细胞凋亡的影响

目的 :探讨Survivin反义核酸对拓扑替康 (TPT)诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡的影响。方法 :在光镜下观察Survivin反义核酸与TPT联合应用后SKOV3凋亡的形态学改变 ,通过DNA电泳检测SKOV3细胞凋亡的情况 ;应用MTT法检测SKOV3细胞对TPT的敏感性。结果 :Survivin反义核酸可明显促进TPT诱导的SKOV3凋亡 ,呈现出特征性的DNA梯状带 ;TPT对SKOV3、SKOV3/neo、SKOV3/SVVas细胞的IC50 值分别为 (1 6 0 .0 0± 6 .36 ) μg/L、(1 5 8.0 0±6 .32 ) μg/L、(4 2 .0 0± 2 .31 ) μg/L ,其差异具有统计学意义 (P <0 .0 1 )。 结论 :Survivin反义核酸可明显促进TPT诱导的卵巢癌细胞SKOV3凋亡 ,提高卵巢癌细胞对TPT的敏感性     

拓扑替康对HL-60细胞增殖的抑制作用

目的：探讨拓扑替康（topotecan，TPT）对人髓系白血病细胞HL-60的增殖抑制作用。方法：采用四甲基偶氮唑盐光吸收法（MTT法）检测不同浓度的TPT（0．05μmol／L、0．10μmol／L、0．15μmol／L、0．20μmol／L及空白对照组）作用HL．60细胞后4h、8h、12h、16h的增殖情况，计算各组细胞的增殖抑制率，并找出TPT作用HL-60细胞的最适时间和最适浓度。倒置显微镜观察细胞生长状念及形态学改变。结果：TPT作用HL-60细胞12h后细胞集落减少，细胞中颗粒及碎片增多。双因素疗蓐分析显示：不同浓度TPT作用不同时间后，对HL-60细胞生长抑制率差异有统计学意义（F时间=312．24，P〈0．05；F性别=1110．35，P〈0．05）。同一时间点不同浓度的TPT对HL-60细胞的抑制作用随浓度的升高而增强，同一浓度TPT在不同时间点对HL-60细胞的抑制作用随时间的延长而增强，其作用的最适时间和最适浓度分别为12h和0．15μmol／L。结论：拓扑替康能抑制HL-60细胞的增殖，且其抑制作用具有时间和浓度依赖性。     

拓扑替康治疗卵巢癌的研究

拓扑替康在卵巢癌治疗中的应用单药治疗:多项研究表明,拓扑替康是复发性卵巢癌理想的二线药物,但其疗效与复发肿瘤对铂类药物的敏感性有关。拓扑替康单药治疗铂类敏感型复发性卵巢癌的反应率较高,为19%~33%。Mcguire等对48例顺铂治疗敏感患者,给予拓扑替康单药治疗,1.5mg/(m2·日),连用5天,每3周重复1次作为1个周期,平均用药6个周期。在46例可评价患者中,对化疗反应的平均持续时间为11.2个月,中位生存期达21.5个月以上,总反应率为33%,明显高于顺铂治疗耐药者。李氏等人对29例复发性卵巢癌患者给予拓扑替康单药治疗,在可评价的21例患者中,总…     

姜黄素促卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP凋亡机制探索

目的研究姜黄素对耐药卵巢癌细胞的促凋亡作用及其可能的机理。方法用MTT法检测不同浓度姜黄素、化疗药物〔顺铂(DDP),紫杉醇〕及姜黄素联合化疗药物(姜黄素+顺铂,姜黄素+紫杉醇)作用于卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP细胞48h后各组的细胞抑制率,并用流式细胞仪检测上述各组细胞的凋亡率。RT-PCR技术检测姜黄素、顺铂、姜黄素+顺铂作用于COC1/DDP细胞48h后各组的磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基(PI3KCA)mRNA的表达。结果不同浓度姜黄素作用COC1/DDP 48h后,细胞的抑制率和凋亡率随着姜黄素浓度的升高相应增高,姜黄素联合化疗药物作用组比单用化疗药物组的细胞抑制率及细胞凋亡率高(P<0.05)。顺铂与姜黄素联合用药与顺铂单独作用相比PI3 KCA mRNA的表达降低(P<0.05)。结论姜黄素能够促进卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP的凋亡,这一作用可能与姜黄素和化疗药物协同诱导该细胞系的凋亡有关,其机制可能为降低PI3 KCA基因的表达。     

化疗药诱导卵巢癌细胞凋亡的初步探讨

目的 观察人体内化疗药诱导卵巢癌细胞凋亡及其规律性。方法 采用末端脱氧核苷酰的转移酶方法,对９例卵巢癌腹水患者行腹腔化疗,观察不同时间腹水中卵巢癌细胞凋亡的动态变化,并应用免疫组化法动态检测腹水中肿瘤细胞增殖及Ｂｃｌ－２,Ｂａｘ基因表达。结果 发现化疗后,肿瘤细胞凋亡多在化疗后４８小时达高峰,与化疗前有显著差异（Ｐ〈０．０５）,至１２０小时,凋亡逐渐下降,部分病例降至治疗前水平,化疗后腹腔内肿瘤细     

顺铂诱导人卵巢癌COC1,COC1／DDP细胞凋亡的研究

目的：探讨顺铂作用于卵巢癌细胞的作用机理。方法：通过电镜,光镜,流式细胞仪等方法观察顺铂诱导人亲代和耐药卵巢癌细胞ＣＯＣ１、ＣＯＣ１／ＤＤＰ凋亡,进行细胞周期分析及计算凋亡率。结果：顺铂引起细胞Ｓ期增多、Ｓ期细胞凋亡,ＣＯＣ１,ＣＯＣ１／ＤＤＰ细胞凋亡率不同,结论：顺铂药理机制之一是诱导细胞凋亡,耐药与凋亡减少有关。     

拓扑替康对鼻咽癌放射增敏的体外实验研究

目的 应用克隆形成方法，研究拓扑替康(Topotecan)对人鼻咽癌高分化细胞系(CNE-I)的放射增敏作用。方法 实验分为单纯照射组及照射加药组。采用台盼蓝染色计数法及克隆形成方法，求出拓扑替康的半数致死量(ID50)。照射加药组在照射后给予拓扑替康0．5μg／ml，作用4h。应用克隆形成方法，观察单纯照射和照射加Topotecan对CNE-I细胞的杀伤作用。计算细胞存活率，用单击多靶数学模型进行曲线拟合作图。结果 CNE-I细胞单纯照射组D0值为1．5164Gy，Dq值为0．6686Gy，N值为1.5542，SF2为66％；照射加Topotecan组D0值为1．2666Gy，Dq值为0.1223Gy，N值为1．1014，SF2为49％；放射增敏比SERm为1．20，SERDq为5．47，SERSF2为1．35。结论 研究结果显示，Topotecan对CNE-I细胞具有较强的放射增敏作用，细胞水平的研究表明其放射增敏的机制是减弱了CNE-I细胞放射后亚致死性损伤与潜在致死性损伤修复能力，并且Topotecan在低浓度时有作用。本研究为临床的鼻咽癌放疗和Topotecan的联合应用提供了实验依据。     

周剂量拓扑替康治疗晚期卵巢癌25例分析

目的观察周剂量拓扑替康治疗晚期卵巢癌的疗效和安全性。方法晚期卵巢癌癌患者25例，治疗方案为：拓扑替康3mg／m^2，第1、8、15天给药，4周为1个周期，共6个周期，根据患者的毒性反应调整剂量及疗程，至少治疗2周期评价疗效。结果CR2例，PR15例，NC4例，PD4例。拓扑替康的总有效率为68％（17／25）。主要毒副反应为血液学毒性，血液学毒性主要为白细胞减少，多为Ⅰ～Ⅱ度，共7例，占28％；Ⅲ度1例，占4％；Ⅳ度0例，占0％。血红蛋白下降2例（8%），血小板下降3例（12%，均为Ⅰ～Ⅱ度。非血液学毒性较轻微。无化疗相关性死亡。结论周剂量拓扑替康治疗晚期卵巢癌疗效好，毒副反应轻。     

周剂量拓扑替康治疗晚期卵巢癌25例分析

目的观察周剂量拓扑替康治疗晚期卵巢癌的疗效和安全性。方法晚期卵巢癌癌患者25例，治疗方案为：拓扑替康3mg／m^2，第1、8、15天给药，4周为1个周期，共6个周期，根据患者的毒性反应调整剂量及疗程，至少治疗2周期评价疗效。结果CR2例，PR15例，NC4例，PD4例。拓扑替康的总有效率为68％（17／25）。主要毒副反应为血液学毒性，血液学毒性主要为白细胞减少，多为Ⅰ～Ⅱ度，共7例，占28％；Ⅲ度1例，占4％；Ⅳ度0例，占0％。血红蛋白下降2例（8%），血小板下降3例（12%，均为Ⅰ～Ⅱ度。非血液学毒性较轻微。无化疗相关性死亡。结论周剂量拓扑替康治疗晚期卵巢癌疗效好，毒副反应轻。     

拓扑替康单药治疗顺铂耐药复发卵巢癌30例临床观察

卵巢上皮癌在女性恶性肿瘤中病死率最高,肿瘤细胞减灭术后结合以铂类为基础联合化疗是目前卵巢癌的标准治疗方案。卵巢癌对化疗相对敏感,一线化疗的临床缓解率可达80%以上。然而,绝大多数肿瘤会最终复发,需要进行二线化疗。我院于2003～2006年应用拓扑替康作为二线方案     

顺铂及拓扑替康对卵巢癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 :了解顺铂 (DDP)、拓扑替康 (TPT)单独及联合应用对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法 :裸鼠右侧背部皮下接种人卵巢癌SKOV3细胞 ,2 1d后分 4组治疗 ,每组 6只动物。对照组 ,腹腔注射无菌生理盐水 ;DDP组 ,腹腔注射DDP 3mg·kg-1 ;TPT组 ,腹腔注射TPT 5mg·kg-1 ;DDP +TPT组 ,腹腔注射DDP 3mg·kg-1 ,6h后腹腔注射TPT 5mg·kg-1 ;上述药物均每 4d注射 1次 ,共注射 4次 ,于实验第 39d处死裸鼠。治疗期间观察并记录各组裸鼠皮下移植瘤的生长情况 ,计算肿瘤体积、肿瘤生长抑制率 ,绘制肿瘤生长曲线。结果 :各治疗组治疗后肿瘤体积和抑瘤率与对照组相比差异均具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。与DDP及TPT组比较 ,DDP +TPT联合用药组肿瘤体积明显减小 (P <0 .0 0 1 ) ,抑瘤率明显增高 (P <0 .0 0 1 )。结论 :DDP与TPT联合用药比 2药单独应用抑制肿瘤生长的作用更强 ,二者具有协同抗癌作用     

周剂量拓扑替康治疗晚期卵巢癌25例分析

目的观察周剂量拓扑替康治疗晚期卵巢癌的疗效和安全性。方法晚期卵巢癌癌患者25例,治疗方案为:拓扑替康3mg/m2,第1、8、15天给药,4周为1个周期,共6个周期,根据患者的毒性反应调整剂量及疗程,至少治疗2周期评价疗效。结果CR2例,PR15例,NC4例,PD4例。拓扑替康的总有效率为68%(17/25)。主要毒副反应为血液学毒性,血液学毒性主要为白细胞减少,多为Ⅰ~Ⅱ度,共7例,占28%;Ⅲ度1例,占4%;Ⅳ度0例,占0%。血红蛋白下降2例(8%),血小板下降3例(12%),均为Ⅰ~Ⅱ度。非血液学毒性较轻微。无化疗相关性死亡。结论周剂量拓扑替康治疗晚期卵巢癌疗效好,毒副反应轻。     

聚焦超声诱导卵巢癌细胞株COC1凋亡及其机制的初步研究

目的:研究低频脉冲聚焦超声波对人卵巢癌细胞株COC1的抗肿瘤作用,并探讨其诱导细胞凋亡的分子机制.方法:以低频脉冲聚焦超声(超声频率0.8MHz,声强83.6W/cm2,脉肿持续时间:5μs)辐照卵巢癌COC1细胞10s,然后采用MTT法观察超声对COC1细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪(FCM)、TUNEL法、荧光染色和光、电镜检测细胞凋亡;应用FCM免疫荧光技术观察Bcl-2、bax基因蛋白表达的变化.结果:超声可明显抑制存活卯巢癌COC1细胞的增殖,辐照后12h、24h、36h、48h,COC1细胞MTT光吸收值与对照组相比显著降低;FCM检测超声辐照后6h的COC1细胞凋亡率达(23.57±4.62)%;Bcl-2蛋白的荧光指数(FI)降低,而bax蛋白FI升高.同时TUNEL法观察到棕褐色着染的凋亡细胞;荧光显微镜和电镜下观察到凋亡小体形成等典型的形态学改变.结论:低频脉冲聚焦超声辐照对人卵巢癌细胞株COC1具有细胞毒作用,其机制为诱导辐照后存活的人卵巢癌细胞株COC1凋亡,bcl-2和bax蛋白可能参与了COC1细胞凋亡过程.     

伊立替康和拓扑替康二线治疗小细胞肺癌的临床效果比较

目的:比较单药伊立替康(CPT-11)和拓扑替康(TPT)二线治疗小细胞肺癌的效果不良反应。方法:46例复发性小细胞肺癌患者分CPT-11组(24例)和TPT组(22例)进行治疗,CPT-11组以300 mg/m2第一天静脉注射,TPT组以1.5 mg/m2第1⁵天经脉注射,以3周为1个周期,均化疗25天经脉注射,以3周为1个周期,均化疗2⁶个周期,比较两组的近期效果、远期效果和不良反应情况。结果:CPT-11和TPT有效率分别为33.3%和27.2%,两组有效率比较差异无统计学意义(P>0.05);两组进展时间(mTTP)分别为(11.3±5.94)周和(12.4±6.23)周,生存时间分别为(25.3±6.11)周和(24.3±5.77)周,两组进展时间和生存时间比较差异无统计学意义(P>0.05);两组的不良反应分析发现CPT-11组延迟性腹泻发生率显著性高于TPT组(P<0.05),其他不良反应两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:单药CPT-11和TPT二线治疗小细胞肺癌疗效相似,不良反应相当,且均为患者耐受。     

伊立替康与拓扑替康单药治疗老年小细胞肺癌临床分析

目的:探讨伊立替康(CPT-11)和拓扑替康(TPT)治疗老年小细胞肺癌的疗效及不良反应是否有差别。方法:回顾性分析156例经病理确诊的老年小细胞肺癌,其中CPT-11组88人,TPT组68人;比较两组的疗效及反应。结果:两组之间在近期疗效和远期疗效上均无统计学差异(P>0.05);TPT组白细胞减少高于CPT-11组,差异有统计学意义(P<0.05);而在延迟性腹泻中,CPT-11组高于TPT组,差异有统计学意义(P<0.05);在贫血、血小板减少、恶心呕吐及肝功能异常中,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CPT-11组及TPT组化疗的近期、远期疗效相似,血液毒性反应中,CPT-11组优于TPT组;肠道反应中,TPT组优于CPT-11组。