产碱性蛋白酶海洋细菌的筛选及其发酵条件优化

从大连海域的海参肠道中筛选得到一株产碱性蛋白酶较高的海洋细菌HS-A156,经形态学和16SrDNA序列分析初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)(GenBank检索号KC166863)。对菌株HS-A156的酶学性质进行初步研究,结果表明该菌株所产蛋白酶最适作用pH为9.0,在pH 8.0~11.0性能稳定;最适作用温度为40℃,在25~45℃具有良好的热稳定性。同时对该菌株产酶发酵培养基和发酵条件进行优化,确定了最适产酶培养基组成为葡萄糖1.5%、牛肉膏1.0%、酵母粉2.0%、CaCl20.05%;最佳发酵条件培养基初始pH 8.0、发酵温度30℃、接种量3%。经过优化后菌株HS-A156产碱性蛋白酶的酶活力达到538U/mL,比优化前的产酶量提高了3.7倍。     

产碱性蛋白酶的海洋适冷细菌CHS的初步研究

从连云港海域、港口、远洋捕捞船及鱼市等地采集的海水和各类海鱼、贝类等样品中分离得到一株产碱性蛋白酶的海洋适冷细菌CHS。研究表明，CHS最适生长温度和产酶温度均在15℃左右。0℃下仍可生长；具有一定的耐盐性和嗜盐性，无盐条件下不能生长，在质量分数为5％的NaCl中生长最好；最适生长pH为8．0，最适产酶pH为9.0。     

低温碱性蛋白酶高产菌株的选育与发酵条件研究

利用实验室保藏的枯草芽孢杆菌为出发菌株,采用紫外诱变进行选育,得到1株低温碱性蛋白酶的高产菌株,编号为B.Sub3.采用摇瓶液体发酵方式,考察碳源、氮源等营养条件及温度、发酵时间等发酵条件对发酵的影响,结果表明以上因素对低温碱性蛋白酶的生产均有影响.在单因素基础上设计4因素3水平的正交实验,确定B.Sub3的最佳发酵条件为：葡萄糖5 g/L,蛋白胨5 g/L,酵母粉3 g/L,pH=8.0,接种比例为5%,50 mL三角瓶装液量为20 mL,32℃发酵28 h,发酵液的低温蛋白酶活力为2 231 U/mL     

产高温碱性蛋白酶菌株筛选及酶学性质研究

从高温堆肥土样中筛选到一株高产蛋白酶的菌株,经鉴定为Bacillus subtilis,命名为I15.对最适产酶发酵条件进行了优化,并研究了发酵产蛋白酶的酶学性质.结果表明,玉米淀粉和豆饼粉是该菌发酵产蛋白酶的最适经济碳氮源;该蛋白酶属高温碱性蛋白酶,具有很强的热稳定性和酸碱稳定性.另外,突出的性质是该蛋白酶对表面活性剂和温和型去垢剂具有超强的耐受性,将具有广阔的市场前景.     

响应面优化产碱性蛋白酶菌株的产酶条件

利用Minitab15数据处理软件用响应面法优化了产碱性蛋白酶菌株I13的产酶条件.运用Plackett-Burman设计筛选出3个对酶活力影响极显著因素,即接种量、酵母粉和培养温度,用最陡爬坡试验逼近最大产酶区域,应用中心组合设计和响应面分析确定产酶的最优组合为:酵母粉10.2 g/L,温度14.68 ℃,接种量5....     

土壤中产碱性蛋白酶细菌的筛选及产酶条件优化

为筛选碱性蛋白酶的高产菌株，利用酪蛋白水解圈作为筛选模型，从沈阳化工学院附近农田土壤中筛选得到了产碱性蛋白酶能力较高的细菌B1．对其产酶条件进行优化，最终得到培养基中最佳碳源为质量浓度60g／L葡萄糖，最佳氮源为质量浓度40g／L NaNO3，最适初始pH值为9．0，最适溶氧量为50mL摇瓶装20mL培养基，最适接种量为质量浓度200g／L，且培养基中添加质量浓度为0．5g／L的K^＋有利于菌株B1产碱性蛋白酶．该方法简便、直观，很适合大量、快速筛选．     

低温碱性脂肪酶产生菌的筛选及产酶培养基的优化

以橄榄油为唯一碳源,从渤海湾盐碱地被油污染的土样中分离筛选出1株产低温碱性脂肪酶菌株34-5,初步酶学性质研究表明,该菌所产脂肪酶的最适温度为25℃,最适pH为9．6,该菌的16S rDNA基因序列与伯克霍尔德氏菌（Burkholderia）的同源性为99％摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g／L）;淀粉10,黄豆饼粉20,玉米浆20,K2HPO4 1,聚乙烯醇大豆油乳化液20．其最高酶活为6．87U／mL。     

产低温碱性脂肪酶菌株Acinetobacter johnsonii LP28的鉴定及发酵条件优化

从实验室保藏的49株碱性脂肪酶产生菌中筛选出产低温碱性脂肪酶菌株LP28,初步酶学性质研究表明,该脂肪酶的最适作用温度为30℃,最适作用pH为9．0,粗酶液在室温条件下处理48h仍具有93．78％的残余酶活．该菌经16SrDNA鉴定为约氏不动杆菌（Acinetobacter johnsonii）,同源性为99％．摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基为（g/L）：淀粉10,牛肉膏20,K2HPO41,PvA-大豆油20．最高酶活为3．06U／mL．     

具有脱毛性能的蛋白酶产生菌的筛选

从富含蛋白质的泥土样中筛选到耐盐和耐碱蛋白酶产生菌各一株。研究表明：两株菌（其中耐盐菌的ＮａＣｌ耐受高浓度为１０％）均可在饱和石灰水中生长,并且产生的蛋白酶在ｐＨ７～１１范围内稳定,且具较好脱毛性能。     

碱性脂肪酶生产菌假单孢菌4631菌株的筛选

从３２个土样中分离获得碱性脂肪酶产生菌１６６株，其中４６３１号菌株产酶能力最高，达到９．１ＩＵ／ｍｌ。初步鉴定为假单孢菌属。对研究结果统计分析表明，Ｄ／ｄ值与ＬＡ呈线性相关关系。     

两种曲霉产蛋白酶特性

研究了本课题组多年选育的两种曲霉ＡＯＩ－６及８５１－６Ｂ的特性，并对影响该曲霉产３种蛋白酶活力的各种因素进行了探讨，本研究为进一步开发和广泛应用ＡＯＩ－６和８５１－６Ｂ这两种优良曲霉提供了理论依据。     

海洋微生物碱性脂肪酶生产菌的分离选育

从海水,海泥,海洋生物的消化道,碱厂土样等43个样品中分离获得碱性脂肪酶产生菌286株,其中Q53菌株产酶能力最高,达11．4IU/mL,初步鉴定为假单孢菌落属,对研究结果进行统计分析表明,D／d值与LA有线性相关关系,对Q53脂肪酶合成影响因素的研究表明,由尿素和玉米浆组成 的有机氮源为产酶培养基的最佳氮源,橄榄油和豆油有利于脂肪酶的合成,而可溶性淀粉不利于酶的合成,产酶最适条件,起始PH9．5,温度31度,摇瓶转速150r/min,发酵周期48h。