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鲟鱼硫酸软骨素提取工艺的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以鲟鱼软骨为原料,对鲟鱼硫酸软骨素的提取工艺进行了研究.其方法是先用稀碱提取硫酸软骨素,再用碱性蛋白酶分解去除杂蛋白,然后用乙醇沉淀,将沉淀在60℃下恒温干燥2.5h即得产品.正交试验的结果表明,最佳工艺条件下硫酸软骨素得率为35.70%,其中稀碱提取的最佳工艺为:NaOH为5%、提取温度为40℃、提取时间为4h、液料比为4mL/g;碱性蛋白酶去除杂蛋白的最佳工艺为:加酶量为2%、液固比为5 mL/g、酶解温度为45℃、最佳酶解时间为4.0h. 相似文献
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以鲟鱼软骨和鸡软骨为原料,采用碱提-酶解-醇沉的工艺流程提取硫酸软骨素后,利用Sephadex G-50凝胶色谱及Sephacryl S-300 HR凝胶色谱对硫酸软骨素进行纯化,并通过高效凝胶渗透色谱法进行分子质量测定与纯度鉴定。采用MTT法检测硫酸软骨素对口腔癌KB细胞增殖活性的影响,并采用流式细胞术检测口腔癌KB细胞凋亡情况。研究结果表明鲟鱼及鸡软骨硫酸软骨素粗制品得率分别为23.80%和25.23%。经高效液相凝胶渗透色谱分析可得纯化的鲟鱼及鸡软骨硫酸软骨素均为高纯度多糖,且鲟鱼软骨硫酸软骨素的平均分子量比鸡软骨硫酸软骨素的大。以体外抗肿瘤的方法研究硫酸软骨素粗提物和纯化样品对口腔癌KB细胞的抑制作用,结果所得鲟鱼软骨硫酸软骨素粗制品和纯化样品的IC50值分别为80.18μg/m L和58.78μg/m L;鸡软骨硫酸软骨素粗制品和纯化样品的IC50值分别为68.55μg/m L和53.71μg/m L。流式细胞术表明硫酸软骨素能够诱导KB细胞发生凋亡,细胞凋亡率与药物的浓度呈剂量依赖关系,且鸡软骨硫酸软骨素诱导KB细胞凋亡率高于鲟鱼软骨硫酸软骨素。 相似文献
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为探究超声辅助-碱-酶法提取鲟鱼硫酸软骨素(Chondroitin sulfate,CS)的最佳工艺条件,以鲟鱼软骨为原料,通过单因素试验和响应面设计进行工艺优化;测定鲟鱼CS体外自由基清除能力,并通过傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy, FTIR)、高效凝胶渗透色谱、高效液相色谱对其结构进行分析。优化得到鲟鱼CS的最佳提取工艺条件为:以碱性蛋白酶为提取用酶、料液比1:30(g/m L)、提取时间122 min、p H值为9.9、温度为45℃。在此条件下,鲟鱼CS的得率为17.06%,纯度90.16%,响应面模型拟合良好;所得鲟鱼CS对DPPH自由基有较高的清除率,IC50为15.04 mg/mL;鲟鱼CS FTIR的特征吸收峰符合CS主要特征,分子质量为37ku,单糖组成以氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸、氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖等为主,且同标准品单糖组成基本一致。结果表明:所获得的鲟鱼CS提取方法具有较高的得率和纯度,且能够很好地保持鲟鱼CS完整的天然结构。 相似文献
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硫酸软骨素(CS)为糖胺聚糖家族一员,具有广泛的应用。采用与CS生物合成前体具有相似结构的细菌荚膜多糖为底物,经化学或生物修饰可生产CS及其类似物,是一种较有希望的非动物源性CS生产方式。本文对相关研究作一综述。 相似文献
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硫酸软骨素(CS)为糖胺聚糖家族一员,具有广泛的应用。采用与CS生物合成前体具有相似结构的细菌荚膜多糖为底物,经化学或生物修饰可生产CS及其类似物,是一种较有希望的非动物源性CS生产方式。本文对相关研究作一综述。 相似文献
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以鲟鱼软骨为原料,采取碱提-酶解-醇沉的方式提取硫酸软骨素后,采用普通粉碎、超微粉碎联合辐照技术分别对硫酸软骨素样品进行降解后,再利用离子色谱法、紫外-可见光光谱扫描法、红外吸收光谱法、核磁共振波谱法研究硫酸软骨素的化学结构。单糖分析表明,粗样中的鼠李糖经超微粉碎加辐照共处理后含量从56.16%增加到59.31%,粗样中的葡萄糖醛酸经超微粉碎加辐照共处理后含量由33.69%降低到31.84%;而纯化样品中葡萄糖醛酸含88.77%。紫外光谱分析表明硫酸软骨素经超微粉碎与辐照的共处理方式使硫酸软骨素的分子结构发生断裂即糖苷键的分裂及产生C=O基团。红外光谱结果表明普通粉碎及经超微和辐照降解共处理的硫酸软骨素均呈现4-硫酸软骨素和6-硫酸软骨素的典型特征。核磁共振分析得出经超微粉碎和辐照的处理使硫酸软骨素上的乙酰半乳糖胺和葡萄糖质子信号增强,且推测鲟鱼硫酸软骨素包含GlcA (β1→3) GalNAc-4SO3和GlcA (β1→3) GalNAc-6SO3重复单元结构。 相似文献
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超声波辅助法提取硫酸软骨素的工艺研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以猪喉管为原料提取硫酸软骨素,使用超声波辅助手段进行碱处理,浸出液再用木瓜蛋白酶进一步去除蛋白质。结果表明:最佳工艺条件为超声波处理时间139min、超声功率491W、木瓜蛋白酶酶解pH6.8、酶加入量1.3:1000(mg/mL)、酶解温度45℃、酶解时间1h,该工艺制备得到硫酸软骨素为白色粉末得率达23.15%,澄清度0.038,蛋白质含量2.48%,氨基己糖含量30.52%,硫酸软骨素纯度86.06%,水分6.32%,pH6.7,各项指标完全符合国家相关标准要求。 相似文献