乳铁蛋白及乳铁素对嗜酸乳杆菌生长影响的研究

本实验主要针对乳铁蛋白和乳铁素对嗜酸乳杆菌的生长影响进行研究。结果表明,在37℃恒温培养下,添加一定浓度的乳铁蛋白或乳铁素,可促进嗜酸乳杆菌生长繁殖。乳铁蛋白的最适添加浓度为2.5mg/ml,乳铁素的最适添加浓度为0.15mg/ml,培养26h后活菌数分别达到6.7×108CFU/ml和8.0×108CFU/ml。     

不同来源乳铁蛋白及乳铁蛋白素对小鼠脾淋巴细胞增殖影响的比较

以牛乳清乳铁蛋白（bovine whey lactoferrin,LFW）、牛初乳乳铁蛋白（bovine colostrum lactoferrin, LFC）、人乳铁蛋白（human lactoferrin,LFH）、牛乳铁蛋白素（bovine lactoferricin,LfcinB）和人乳铁蛋白 素（human lactoferricin,LfcinH）为研究对象,研究其对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响并比较不同来源乳铁蛋白 （lactoferrin,LF）及乳铁蛋白素（lactoferricin,Lfcin）作用效果的差异性。采用CCK-8法检测不同来源的LF与 Lfcin作用小鼠脾淋巴细胞24、48、72 h后,及其与丝裂原共同作用对小鼠T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果显 示：LF与Lfcin均在48 h时对小鼠脾淋巴细胞增殖的促进效果最好,且在一定质量浓度范围内促进效果随质量浓度升 高而加强;LF与Lfcin均在一定质量浓度范围内提高刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞的增殖和脂多糖诱导的B淋巴细胞 的增殖。结果表明：两种牛乳铁蛋白（bovine lactoferrin,LFB）及LfcinB可替代LFH应用于婴幼儿配方产品中以提 高婴幼儿免疫能力,LFB推荐添加质量浓度为0.50～2.00 mg/mL,Lfcin推荐添加质量浓度为75～125 μg/mL。     

乳铁蛋白和乳铁素的抗菌活性比较

牛乳铁蛋白是从牛乳中提取出来的一种铁结合性糖蛋白，牛乳铁素是从牛乳铁蛋白N-端水解下来的25个氨摹酸残荩。它们具有多种乍物学功能，其中的广谱抗菌性尤为引人注目。本实验以牛初乳中提取的乳铁蛋白及其水解产物乳铁素为研究对象，选取大肠杆菌为实验菌株，进行铁饱和乳铁蛋白和缺铁性乳铁蛋白、乳铁素对大肠杆菌生长抑制的比较研究。研究结果表明：铁饱和乳铁蛋白、缺铁性乳铁蛋白和乳铁索的最小抑菌浓度分别为6mg／ml、3mg／ml和15μg／ml，乳铁素的最小杀菌浓度为30μg／ml。乳铁蛋白水解后，经纯化获得的乳铁素，其抗菌能力较缺铁性乳铁蛋白增加200倍，较铁饱和乳铁蛋白增加400倍。     

乳铁蛋白及其多肽对淋巴细胞增殖活性的影响

乳铁蛋白及其多肽具有很多生物活性,但不同来源的乳铁蛋白及其多肽在很多活性方面表现很大的差异。实验比较研究了4种乳铁蛋白及其胃蛋白酶水解产物对小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响,为乳铁蛋白及其多肽的开发应用提供科学依据。实验结果表明:4种乳铁蛋白对Con A诱导的脾淋巴细胞增殖均有抑制作用,其中驼乳铁蛋白抑制作用最强;而4种乳铁蛋白多肽对Con A诱导的脾淋巴细胞增殖在一定浓度范围内具有促进作用,而超出这个浓度范围,就起到抑制作用,但4种乳铁蛋白多肽对Con A诱导的脾淋巴细胞增殖的影响组间比较没有显著差异。     

牛乳铁蛋白及乳铁素的生产与应用现状

牛奶中的乳铁蛋白和其水解产物乳铁素具有多种生物活性功能。综述了国外的乳铁蛋白和乳铁素生产、分离和纯化的方法,并介绍了乳铁蛋白和乳铁素作为食品保存剂、抗氧化剂、营养强化剂、免疫强化剂、免疫调节剂等应用的现状。展望了我国乳铁蛋白和乳铁素生产的前景。     

乳杆菌对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响

目的：体外评估7 种乳杆菌的免疫作用,探讨小鼠离体脾脏淋巴细胞在筛选免疫活性乳酸菌中应用的可行性。方法：用MTT 法观察不同种属、不同剂量的活性和热致死乳杆菌对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力的影响。结果：活性和热致死乳杆菌单独作用都能促进体外淋巴细胞增殖且均表现出剂量依赖关系,当活性和热致死乳杆菌剂量为107CFU/mL 时(即细菌与细胞的比例为10:1)的效果最为明显(P＜ 0.05),且活菌制剂的免疫调节作用优于热致死菌体 (P ＜ 0.05),其中活性罗伊氏乳杆菌、约氏乳杆菌和发酵乳杆菌刺激淋巴细胞的增殖指数(PI 值)明显较ConA诱导组高(P ＜ 0.05)。结论：正常离体小鼠脾脏淋巴细胞可用于体外初步筛选具有潜在免疫活性的乳杆菌,从而缩小用于动物实验的目标菌株的范围。     

酶解牛乳铁蛋白制备乳铁素 B的酶解条件研究

乳铁素B是牛乳铁蛋白经胃蛋白酶酶解后所得到的最重要的抗菌肽，乳铁蛋白酶解生成乳铁素后抗菌活性大大增强。通过正交试验确立了牛乳铁蛋白酶解制备乳铁素B的最佳条件，指出在底物质量浓度为50g／L，酶与底物质量浓度比为1：30(质量比)，酶解时间为60min时所得的乳铁素质量浓度及活性较好。     

铁饱和度对乳铁蛋白缓解溃疡性结肠炎作用的影响

目的:评价不同铁饱和度的乳铁蛋白对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎的作用。方法:动物试验全程21 d,雄性BALB/c小鼠随机分成4组,即:正常组、模型组、低铁乳铁蛋白(Apo-LF)组和高铁乳铁蛋白(Holo-LF)组。14~21 d时,模型组、Apo-LF组和Holo-LF组小鼠饮用含2.5%DSS的饮用水7 d,诱导小鼠形成溃疡性结肠炎模型。在第21天时处死小鼠。通过炎症相关指标评价各组小鼠的反应,结果:Apo-LF组与模型组和Holo-LF相比,疾病活动指数(DAI)、结肠缩短量、组织病理学评分显著降低。结肠组织中促炎因子表达量、肠道中脂多糖(LPS)浓度、革兰氏阴性菌菌落数显著降低。而Holo-LF组与模型组相比各项指标均无显著性差异。结论:不同铁饱和度的乳铁蛋白对DSS诱导的溃疡性结肠炎的治疗效果不同。Apo-LF能显著缓解溃疡性结肠炎症状,而Holo-LF无明显效果。这与不同铁饱和度的LF对促症因子,LPS,革兰氏阴性菌的影响不同有关。     

乳铁蛋白铁吸收效果的研究

对乳铁蛋白和硫酸亚铁中铁的吸收进行了研究。结果表明,乳铁蛋白比硫酸亚铁更容易吸收。     

乳铁蛋白铁饱和度检测方法的对比

乳铁蛋白铁饱和度与其的生物活性有密切关系,对比了目前常用的三种乳铁蛋白铁饱和度的检测方法的差异,旨在为其他研究者选择乳铁蛋白检测方法提供一定参考。结果显示方法一(原子吸收法)虽然精准度高,但得到的结果偏低,同时方法一和方法三均假设了乳铁蛋白处于理想状态下,可能与测试样品实际情况不符,综合考虑实验原理及测试精准度,方法二为最佳方法。     

乳铁蛋白及其生理功能

乳铁蛋白是一种天然糖蛋白,主要存在于哺乳动物各种外分泌物中。因乳铁蛋白在抑菌、抗病毒、免疫调节、促进铁吸收等方面具有独特生理功能,从而对乳铁蛋白开发和应用具有广阔前景。     

玉米胚芽蛋白酶解物对小鼠免疫功能的影响

用胰蛋白酶水解玉米胚芽蛋白,研究了玉米胚芽蛋白酶解物对小鼠体内的免疫调节作用。研究结果表明,玉米胚芽蛋白酶解物能显著提高正常小鼠的免疫脏器指数、腹腔巨噬细胞的吞噬百分率、吞噬指数和淋巴细胞的转化功能活性,促进溶血素的形成。结果提示:玉米胚芽蛋白酶解物能提高机体的免疫功能,是一种很好的非特异性免疫激活剂。     

具有免疫调节作用的酪蛋白水解产物制备条件的确定

以酪蛋白为原料,利用酶解法制备具有免疫调节作用的水解产物。用MTT 法测定不同水解条件下胰蛋白酶水解酪蛋白的水解产物对小鼠脾脏细胞免疫刺激指数,并以免疫刺激指数作为指标,确定出最佳的水解条件。结果表明,酪蛋白在不同水解条件下的水解产物,用1640 培养液配成浓度为10μg/ml,采用MTT 法测定小鼠脾脏淋巴细胞免疫刺激指数最大值为2.77,其水解条件为底物浓度4%、酶与底物比为1:90。     

大豆蛋白水解物促酸奶乳酸菌增殖及生长动力学

由于乳酸菌缺乏一些生物代谢途径,不能合成生长必需的氨基酸、维生素等物质,营养要求十分苛刻,必需依赖生长环境提供必需氨基酸、维生素等生长因子才能获得高密度生长。应用化学限定培养基进行大豆蛋白水解物、全价氨基酸和生长基本氨基酸3种氮源条件下乳酸菌的生长动力学研究,结果表明:保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在分子量小于5 ku的大豆蛋白水解物培养基中的最大生长速率μmax分别为0.215/h和0.262/h,约为全价氨基酸的2倍,细胞密度增加到5倍。20种全价氨基酸氮源培养基对两种乳酸菌的生长效能很低,保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌的最大生长速率分别为0.10/h和0.12/h,pH值只达到pH4.5～5.0。基本氨基酸氮源只能满足乳酸菌生长的最低要求。分子量小于5 ku的大豆蛋白水解物比全价氨基酸对乳酸菌生长具有显著的促进作用,表明乳酸菌生长的最佳氮源是寡肽而不是氨基酸,大豆蛋白水解物可以用作乳酸菌高密度培养添加物。     

不同巴氏杀菌条件下的牛源乳铁蛋白对IEC-6细胞增殖的影响

本研究以大鼠小肠隐窝上皮细胞（IEC-6）为对象,通过体外实验,采用3 种不同的巴氏杀菌方式（63 ℃、30 min,72 ℃、15 s和85 ℃、15 s）处理牛源乳铁蛋白,模拟婴儿胃肠道消化环境,利用所得的牛源乳铁蛋白水解液刺激IEC-6细胞,研究乳铁蛋白在巴氏杀菌后的免疫活性。结果表明：巴氏杀菌后的乳铁蛋白水解物仍具有促进肠细胞增殖的免疫学活性,且呈剂量依赖性。流式细胞实验结果证实巴氏杀菌后的牛源乳铁蛋白水解液可提高IEC-6细胞在G2/M期和S期的比例,并降低细胞凋亡率。反转录实时荧光定量聚合酶链式反应检测结果表明,牛源乳铁蛋白水解液提高cyclin B1、CDK1和cyclin E1的表达水平,降低p21的表达水平。综上可知,巴氏杀菌不能完全使乳铁蛋白免疫基团失活。两种巴氏杀菌方法（72 ℃、15 s和85 ℃、15 s）,尤其是85 ℃、15 s处理,在保证食品安全的同时可最大限度地保留乳铁蛋白的免疫活性。3 种巴氏杀菌后的乳铁蛋白水解液促进肠道免疫的最佳质量浓度为0.1 mg/mL。     

乳铁蛋白免疫调节功能初探

目的：研究乳铁蛋白的免疫调节作用。方法：采用MTT法检测乳铁蛋白对小鼠外周血单个核细胞以及脾淋巴细胞增殖的影响；利用角叉菜胶所致大鼠足趾肿胀模型研究其抗炎症活性。结论：乳铁蛋白对小鼠外周血单个核细胞的增殖具有显著抑制作用，且抑制程度与浓度有关。在浓度达100μg/ml以上时，抑制效果非常显著（p〈0.001），浓度达1000μg/ml时，抑制作用最为明显。此外，乳铁蛋白具有抗炎症作用。