中性蛋白酶酶解玉米肽及其醒酒活性研究

旨在提高玉米蛋白的附加值，用中性蛋白酶在pH6．7～7，温度45℃，改变酶底比、料液比和酶解时间的条件下，分别得到高、中、低不同水解度的肽，动物实验表明：喂食低水解度（DH=9．1％）的肽能极显著抑制酒精灌胃小鼠血清中乙醇浓度的升高。     

玉米醒酒肽的脱苦及其对活性的影响

为了制备具有高醒酒活性及风味良好的玉米肽功能食品,采用正交实验、体外乙醇脱氢酶活性试验,比较了活性炭吸附法,风味酶酶切法和β-环糊精掩盖法3种脱苦工艺对脱苦效果和醒酒活性的影响,以期获得醒酒活性高、风味口感好的产品。实验结果表明:活性炭吸附法虽实现了脱色和脱苦的同步进行,但造成了较大的玉米肽和醒酒活性的双重损失;风味酶法在保留玉米肽醒酒活性的同时能使苦味值下降2个单位,且无氮损失;β-环糊精掩盖法脱苦效果好。因此,生产高醒酒活性玉米肽功能食品不宜采用活性炭吸附法脱苦,可采用风味酶酶切法或β-环糊精掩盖法脱苦。     

富硒玉米醒酒肽的制备及活性研究

为了利用硒和玉米肽的双重活性,制备出活性优于普通玉米的醒酒肽,从而提高富硒玉米的附加值,以富硒玉米为原料,从中提取蛋白质,进而制备富硒玉米肽,以其对·OH抑制率、硒回收率和肽回收率等为指标,通过单因素实验以及正交实验对酶解条件进行了优化;通过动物实验比较了两种玉米肽的醒酒活性。结果显示最优酶解条件为:料液比1∶35(w/v),温度60℃,加酶量0.6%,此时硒回收率为81.78%,肽回收率为73.32%,水解度为10.50%,酶解物对·OH的半抑制率浓度(IC50)为3.57mg/mL;200mg/kg剂量的富硒玉米肽降低小鼠血清中乙醇浓度(blood alcohol concentration,BAC)的能力极显著优于同剂量的普通玉米肽(p<0.01),400mg/kg剂量的富硒玉米肽的血醇清除率可达50.99%。富硒玉米肽的醒酒活性显著优于普通玉米肽。      

双酶复合水解对玉米肽物化性质的影响

采用4种蛋白酶(Neutrase酶、Alcalase酶、Protamex酶、Flavourzyme酶)对高底物浓度(24%)玉米黄粉进行双酶复合水解,研究复合水解对玉米肽的溶解性、起泡性、乳化性和黏度等物化性质的影响.结果表明,Neutrase酶与Alcalase酶以及Protamex酶与Alcalase酶的复合效果最好,可有效提高玉米肽的物化性质;复合水解后玉米肽在pH值4.0～7.0范围内具有较好的溶解性,pH值大于7.0时溶解性呈下降趋势,其他物化性质的变化规律基本与溶解性呈正相关;双酶的酶解顺序对玉米肽的物化性质影响较大.     

玉米肽的醒酒活性体外试验及其醒酒机理研究

为研究玉米肽的醒酒机理,找到筛选高醒酒活性玉米肽的便捷的体外试验方法,考察了在体外试验中,玉米肽对乙醇脱氢酶(ADH)活力的影响及对羟基自由基(·OH)的清除作用,并与动物试验比较,结果显示三种方法基本吻合.玉米肽在体外试验中可激活ADH,具有良好地抑制·OH的能力,玉米肽中含有较高比例的丙氨酸、亮氨酸,尤其是亮氨酸.结论:可以通过测定玉米肽对ADH的激活率及对·OH的抑制率这两个体外试验,从不同蛋白酶酶解玉米肽及不同水解度的玉米肽中筛选出高醒酒活性肽.玉米肽的醒酒作用机制与其能激活ADH、清除·OH及其较高比例的丙氨酸、亮氨酸组成有关.     

中性蛋白酶及碱性蛋白酶制备玉米粗肽的醒酒活性比较

本文旨在使玉米蛋白增值,为工业化生产玉米醒酒肽提供依据.采用气相色谱、氨基酸自动分析仪等仪器,研究了玉米蛋白水解物--粗肽的醒酒活性.结果表明：中性蛋白酶的低水解度粗肽（2h、酶底比0.5%、料液比1：25）能使小鼠血醇浓度降低54.06%,但该粗肽的蛋白回收率太低.碱性蛋白酶的中水解度粗肽（4h、酶底比0.5%、料液比1：20）的醒酒活性高,并存在剂量效应关系,其剂量为800 mg/kg.bw时,小鼠血醇浓度降低了62.80%,且该粗肽的蛋白回收率高,具有开发价值.     

纳滤技术浓缩纯化玉米肽及对其醒酒活性的影响

探讨纳滤技术浓缩纯化玉米肽的过程中肽的醒酒活性的变化。本研究选用截留分子质量160D和360D的两种纳滤膜,对pH8.0玉米肽液(Mw<5kD)进行浓缩纯化,比较两种膜对其中主要成分的传质效果,并进一步探讨透析过滤过程对玉米肽醒酒活性的影响。结果表明,玉米肽液浓缩过程中,相对于360D纳滤膜,160D纳滤膜对肽类、氨基酸和Na+均具有较低的传质效率,但其对玉米肽的截留率却在88.80%以上,脱盐效果与360D膜相当,经3次透析后,脱盐率达94.6%,且160D纳滤膜在透析过程中很好地保持玉米肽对乙醇脱氢酶(ADH)的激活作用。结论:宜选用160D纳滤膜对玉米肽液进行浓缩纯化,透析过滤3次。     

玉米醒酒肽的脱苦工艺研究及表征分析

蛋白质水解后其热稳定性、溶解性以及功能特性得到了改善,同时形成了大量的苦味肽。采用活性炭吸附法对玉米醒酒肽脱苦工艺条件进行研究。通过响应曲面分析方法优化其水解工艺,结果表明,脱苦温度为29.7℃,固液比为1∶12(m/v),pH为3.5,时间2h。所测得的玉米肽液中OD220/OD280为37.90。采用高效液相色谱法对玉米醒酒肽进行测定分子量的实验,结果表明:玉米醒酒肽的分子量主要分布在1356.594 Da³207.308 Da之间。氨基酸分析结果显示:玉米醒酒肽中亮氨酸含量最高,丙氨酸其次。     

玉米醒酒肽构效关系及机理研究进展

玉米醒酒肽是玉米黄粉蛋白水解后得到的一种低聚寡肽。在大量的体外、动物和人体试验中,玉米醒酒肽可以有效调节参与酒精代谢的相关酶活性以及改善机体摄入酒精后的各类生理反应,发挥显著的醒酒活性。具有醒酒活性的玉米肽在一级结构上体现明显的共性,具有相似的氨基酸组成序列,其醒酒机理也已经被广泛研究和证实。本文对玉米醒酒肽的活性验证试验、结构特征及醒酒机理进行综述,旨在为进一步开展玉米及其他来源醒酒肽的研究提供借鉴。     

玉米低聚肽和姜黄素对小鼠的醒酒功能研究

评价玉米低聚肽和姜黄素单独使用及联合应用时对醉酒小鼠的醒酒活性,探讨其作用机理。将清洁级雄性KM种小鼠随机分为4组,即模型对照组和低、中、高剂量组。各剂量组灌胃相应受试物,玉米低聚肽模型对照组灌胃等量双蒸水,姜黄素模型对照组灌胃含5.6%乙醇的双蒸水。0.5h后每组分别灌胃白酒(56°)。灌胃结束后立即测定行为学指标(翻正反射消失时间、醉酒持续时间、攀附时间),30 min后测定血液中乙醇、乙醛浓度,并测定肝组织乙醇脱氢酶(ADH)、乙醛脱氢酶(ALDH)、细胞色素P450(CYP450)、过氧化氢酶(CAT)、黄嘌呤氧化酶(XOD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。与模型对照组相比,玉米低聚肽能延长小鼠攀附时间和翻正反射消失时间,缩短醉酒时间,降低血液中乙醇和乙醛含量。高剂量姜黄素可明显改善小鼠醉酒后的行为学指标,一定程度上降低血中乙醇和乙醛浓度。玉米低聚肽和姜黄素均可增强小鼠肝组织ADH和ALDH活性,提高CYP450、CAT和SOD含量,降低XOD活性。玉米低聚肽和姜黄素联合应用时对醉酒小鼠的活性强于单独使用姜黄素,但与单独使用玉米低聚肽组无显著差异。在该实验条件下,玉米低聚肽和高剂量姜黄素对醉酒小鼠具有明显的醒酒活性。     

双酶水解牛肉的研究

用复合蛋白酶和复合风味蛋白酶同步水解牛肉,最佳酶解条件为:底物浓度为16%、复合蛋白酶和风味蛋白酶的添加量均为1.0%、水解温度50℃,起始pH值6.5,酶水解时间8h,水解度为21.0%,酶水解产物中的小肽含量较为理想.     

双酶水解虾粉的研究

为了提高虾加工下脚料的利用价值,用Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme复合风味蛋白酶同步水解虾粉,分析了水解温度、水解时间、起始pH值、酶用量（E/S）和底物浓度等对水解度的影响,确定的最佳酶解条件为：底物浓度为9.0%、Alcalase碱性蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶的添加量均为1.0%、水解温度为55℃、起始pH值为6.5和酶水解时间为8h,水解度为22.1%。     

菜籽清蛋白双酶分步酶解的工艺研究

以菜籽清蛋白为原料,利用碱性蛋白酶和未瓜蛋白酶对其进行双酶分步水解.在单因素实验的基础上,采用正交实验对水解条件进行优化.结果表明:在最适底物浓度3.5%条件下,先用4000U/g碱性蛋白酶于pH8.0、55%下水解3h后.再用3000U/g木瓜蛋白酶于pH5.5、50%下水解3h,菜籽清蛋白的水解度达到加.17%,氮溶解指数为90.89%.     

中性蛋白酶水解条件对玉米蛋白酶水解产物抗氧化活性影响研究

采用中性蛋白酶水解玉米蛋白粉,对不同条件下制备的玉米蛋白酶解液的还原力进行了研究,并在此基础上用响应面分析法优化酶水解条件,得到最佳酶解工艺条件为:底物体积分数6.05%,酶解温度55.3℃,加酶量3.88%,p H 7.6。在此条件下,玉米蛋白粉酶解产物的还原力为0.41。试验结果表明,该条件下的酶解产物具有较强的抗氧化能力,在食品工业上有一定的应用价值。     

米渣肽双酶两步水解法制备过程中物化特性与结构变化

探究双酶法制备米渣蛋白肽过程肽的组成结构变化。基于前期研究基础,采用双酶法以胰蛋白酶+风味蛋白酶,中性蛋白酶+风味蛋白酶4 h内分别连续制备两类米渣肽RDPH-1和RDPH-2。随着反应的进行,发现前者较后者水解更快速且程度更深,4 h时水解度分别为29.09与16.47;米肽产物平均粒度大多<1 000 nm,同时粒度与分子结构随着米肽的酶解与聚集发生动态变化;表面疏水性都呈先下降后上升的趋势,且前者较后者整体大10倍多;RDPH-1较RDPH-2二级结构更稳定,两者的氨基酸组成不同,但主要成分相似,营养价值相当。该法制备米渣肽的过程研究表明,胰蛋白酶和风味蛋白酶更适合酶解米渣得到小分子肽,且具有规律性,对肽的高效制备具有指导意义。     

酶技术在酶解玉米粉制备过程中的工艺研究

为优化玉米酶解的工艺,在单因素试验基础上,采用响应面法建立了玉米酶解方法的二次多项数学模型,并验证了该模型的有效性;探讨了酶解温度、酶解时间、酶添加量3个因子的交互作用及其最佳水平。研究结果表明:酶解时间显著影响玉米酶解程度,优化的条件为:酶解温度为60.5℃,酶解时间53min,酶添加量0.29%。     

双酶水解鸡骨泥的工艺优化

对鸡骨泥进行酶水解,经筛选确定中性蛋白酶和Flavourzyme复合风味酶的组合能有效酶解鸡骨泥。经正交试验分析,确定酶解的最佳工艺为:酶解温度50℃、pH值8.5、中性蛋白酶和Flavourzyme复合风味酶的添加量分别为0.75%和1.50%、底物浓度5%、水解时间2.5h。在该条件下酶解效率最高,水解度和氮收率分别为37.11%和92.50%,酶解产物澄清无苦味及腥味,且游离氨基酸含量显著增加。     

微波双酶水解鸡肉的研究

微波加热条件下,利用双酶法水解鸡肉的最佳酶解条件为：底物质量分数为15.0%、Flavourzyme复合风味蛋白酶和Protamex复合蛋白酶的质量分数均为0.6%、水解pH值6.5,水解温度55℃,酶水解时间70min,此条件下水解度为28.1%。     

酶解挤压玉米粉糖化条件分析

考察了在葡萄糖淀粉酶作用挤压玉米粉的过程中,反应温度、pH、加酶量、底物浓度对酶解速率的影响规律,初步确定了糖化酶解条件.结果表明:在底物浓度0.33mg/mL、温度58～62℃、pH4.4～4.6、加酶量40u/mL左右时,可通过对酶解时间的控制,得到理想DE值的淀粉糖.