纳米SiO2颗粒在HepG2细胞中的分布及其细胞毒性

目的:检测纳米SiO2颗粒作用于HepG2细胞后纳米颗粒的细胞摄取、分布情况及颗粒对细胞的毒性作用,初步探讨纳米颗粒的摄取、分布与细胞毒性的关系.方法:采用透射电镜(TEM)及动态光散射法检测纳米SiO2颗粒的表征;纳米SiO2颗粒作用HepG2细胞后,用荧光显微镜及TEM观察纳米SiO2颗粒的细胞摄取及细胞内分布情况...     

大鼠睾丸支持细胞、生精细胞及管周细胞的体外团聚研究

用5、10、15、20和25天龄大鼠睾丸曲细精管分离细胞制成悬液,在体外经固体琼脂培养和旋转培养,得到圆球状和索状细胞团聚体,其主要由支持细胞组成,管周细胞包绕在支持细胞外周。10天龄以前组,在团聚体中可见到部分生精细胞,15天龄以后组的生精细胞全部位于团聚体外.表明新生大鼠睾丸支持细胞、管周细胞及生精细胞间仍保留着部分胚胎期的识别和选择性粘附能力。     

巴马香猪无细胞真皮制备及其生物学特性

目的制备来源于巴马香猪皮肤的无细胞真皮，研究其生物学特性，为其异种无细胞真皮应用于烧伤及创伤修复临床形成积累基础研究资料。方法研究两种不同的酶（0．1％dispaseII和0．25％胰蛋白酶）处理去表皮，结合去污剂0．5％Triton X-100处理不同时间制作无细胞真皮的方法，随后对不同方法制作的无细胞真皮进行常规石蜡切片，显微镜下观察其结构，并进行微生物检测和细胞毒性检测。结果胰蛋白酶法去除表皮彻底，且基底膜保留完整，dispaseII也能完整地去除表皮，但对基底膜有破坏；0．5％Triton X-100室温下振荡处理24h能完全去除真皮中的细胞成分及皮肤附属器且对皮肤胶原结构没有破坏；在所用试剂中加入0．02％的NaN3能够起到完全抑菌的作用；制作的无细胞真皮无细胞毒性。结论无细胞真皮内已经完全没有细胞成分及皮肤附属器，抗原性显著降低，无细胞无毒性，可替代异体无细胞真皮基质作为创伤修复的真皮支架。     

脐血中Th1、Th2细胞检测及其意义

Ｔ细胞是胸腺中成熟的淋巴细胞 ,可分为辅助性Ｔ细胞、细胞毒性Ｔ细胞及其他Ｔ细胞亚群。辅助性Ｔ细胞是ＣＤ4 + 的Ｔ细胞 ,其作用是能够帮助Ｂ细胞分化成抗体产生细胞及细胞免疫应答 ,在调节体液免疫和细胞免疫中起关键作用。经多年研究 ,根据免疫效应阶段产生细胞因子和生物活性的差别 ,可将辅助性Ｔ细胞分为Ｔｈ0、Ｔｈ1、Ｔｈ2。Ｔｈ1细胞产生ＩＬ 2和ＩＦＮ ｒ,可以增强细胞免疫应答 ,促进Ｂ细胞合成ＩｇＭ和ＩｇＧ ,活化巨噬细胞。Ｔｈ2产生ＩＬ 4 ,ＩＬ 5、ＩＬ 6等 ,增强ＩｇＧ和ＩｇＥ的合成 ,增加局部和循环中嗜酸性粒细胞的数量…     

白血病细胞在无血清体系中增生能力的探讨

采用无血清甲基纤维素半固体培养方法,对白血病细胞系和原代白血病细胞进行一次集落培养,将形成的集落细胞重新悬浮,进行二次集落培养、计数。结果白血病细胞系的二次植入效率为３１．３０％,原代髓系白血病细胞的二次植入效率为２２．６６％。提示白血病细胞存在具有高增殖能力的干细胞性细胞群;原代白血病细胞的再增殖能力低于白血病细胞系。     

尿中病毒感染细胞检测及其意义

目的　探讨尿中病毒感染细胞的检测及意义。方法　对 2 8例病毒感染患者的尿液进行细胞染色镜检 ,观察病毒感染细胞特征。并与对照组进行比较。结果　对照组 18例被检者尿中无病毒感染细胞出现 ,2 8例病毒感染者尿染色镜检有 2 5例发现病毒感染细胞 ,且 3种病毒感染细胞形态特征不同。结论　尿中病毒感染细胞的检测对辅助诊断各种病毒感染疾病有较高的实用价值。     

长期无血清传代培养瘤细胞的某些生物学特性观察

本文对长期在无血清培养基内传代培养的亲本瘤和杂交瘤细胞的某些生物学特性进行了监测。结果显示,长期(三个月以上)在DMI传代的瘤细胞,贴壁能力明显减弱,个别瘤系完全呈悬浮型生长,但重新置回含血清常规培养基培养,贴壁能力大部分可恢复到原来状态:诱发BALB/c小鼠腹水和皮下实体瘤的能力保持不变;在HAT选择培养基中培养,瘤细胞的死亡时间在DMI和RPS15对照两种培养基内基本一致;4个亲本瘤系8-氮鸟嘌呤筛选结果与含血清培养的瘤细胞相似;经DMI长期传代的杂交瘤系分泌抗体的能力基本保持不变。     

纳米SiO2对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的凋亡诱导作用及其机制

目的:探讨纳米二氧化硅(SiO₂)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡和周期的影响,阐明其作用机制。方法:选取不同浓度粒径为90 nm的SiO₂颗粒作用于SH-SY5Y细胞,分别为0、3.125、6.250、12.500、25.000、50.000 mg·L^-1 SiO₂组,其中0 mg·L^-1组为对照组。MTT法检测各组SH-SY5Y细胞存活率;采用AO/EB染色和 Annexin Ⅴ-FITC/PI法检测各组细胞凋亡率;流式细胞术(FCM)检测细胞周期百分比和细胞中活性氧(ROS)水平。结果:MTT检测,6.250、12.500、25.000和50.000 mg·L^-1 SiO₂组细胞存活率低于对照组 (P<0.05),12.500、25.000和50.000 mg·L^-1 SiO₂组细胞存活率低于3.125 mg·L^-1 SiO₂组 (P<0.05)。AO/EB染色和 Annexin V-FITC/PI法检测,6.250、12.500、25.000和50.000 mg·L^-1 SiO₂组细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),12.500、25.000和50.000 mg·L^-1 SiO₂组细胞凋亡率高于3.125 mg·L^-1 SiO₂组(P<0.05)。FCM检测,3.125、6.250、12.500、25.000和50.000 mg·L^-1 SiO₂组细胞中ROS水平高于对照组 (P<0.05)。25.000和50.000 mg·L^-1 SiO₂组G₀/G₁期细胞百分比低于3.125 mg·L^-1SiO₂组和对照组(P<0.05),50.000 mg·L^-1 SiO₂组G₂/M期细胞百分比高于对照组 (P<0.05)。结论:纳米SiO₂ 可降低SH-SY5Y细胞的活力,诱导细胞凋亡,增加细胞中ROS水平,可干扰细胞周期进程,对SH-SY5Y细胞的增殖具有抑制作用。     

SiO2介孔中空纳米球载体的体外细胞毒性

目的：探讨由不同表面活性剂所合成的SiO2介孔中空纳米球对于人体的安全性问题。方法：以人肝细胞株L02作为受试细胞,采用MTT法。结果：低浓度时SiO2介孔中空纳米球载体对细胞毒性较小,高浓度时毒性较大;在合成过程中引入pluronic F127后,SiO2介孔中空纳米球的细胞毒性增大。结论：剂量是决定SiO2介孔中空纳米球毒性大小的一个重要因素;合成过程中不同表面活性剂的引入可能导致其细胞毒性的增大。     

亲本瘤和杂交瘤细胞在无血清培养基内生长特性的动态观察

我们研制了一种适用于瘤细胞长期传代培养、冷冻复苏、克隆化生长和细胞融合的无血清培养基(DMI)。在此基础上,本文进一步报告了亲本瘤和杂交瘤细胞在DMI内的生长特性。6株瘤细胞中,2株生长曲线的迟缓期稍延长,5株对数生长期历时较长,提示DMI尚缺少有益于细胞生长的、存在于小牛血清中的某种或某些因子;6株瘤细胞稳定期显著延长,提示细胞密度达高峰的维持时间较长,有助于分泌较多的单克隆抗体。SP_2/0、P_3U_1、983和13F_3在DMI内的倍增时间长于在含15％小牛血清培养基内的倍增时间,653和32B_5在两种培养基中的倍增时间相近。     

TGF-β信号通路及细胞黏附分子在非小细胞肺癌的研究

目的观察TGF-β1、TβRⅡ、Smad2、E-cad、E-sel、integrin-β1、ICAM-1及CD44v6在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达特征,探讨其与非小细胞肺癌的组织学类型、TNM分期及淋巴结转移的关系。方法采用免疫组织化学SP和SABC法检测TGF-β1、TβRⅡ、Smad2、E-cad、E-sel、integrin-β1、ICAM-1及CD44v6的表达,并对其与NSCLC临床病理因素的关系进行分析。结果TGF-β1与integrin-β1在肺腺癌组织的阳性表达率显著高于肺鳞状细胞癌组织（P〈0.05）,E-cad在肺腺癌组织的阳性表达率显著低于肺鳞状细胞癌组织（P〈0.05）。TGF-β1及TβRⅡ在NSCLC TNM分期Ⅰ期组织的阳性表达率显著低于Ⅱ期和Ⅲ期组织（P〈0.01）。TGF-β1、TβRⅡ、Smad2及CD44v6在有淋巴结转移的NSCLC组织中阳性表达率显著高于无淋巴结转移的NSCLC组织（P〈0.05）,E-cad在有淋巴结转移的NSCLC组织中阳性表达率显著低于无淋巴结转移的NSCLC组织（P〈0.05）。结论TGF-β1、E-cad及integrin-β1与NSCLC的组织学类型有关,TGF-β1及TβRⅡ能促进NSCLC的病程进展;TGF-β1、TβRⅡ、Smad2、E-cad、及CD44v6的阳性表达与NSCLC的淋巴结转移密切相关,TGF-β1、TβRⅡ、Smad2、E-cad及CD44v6在NSCLC的淋巴结转移中起着重要的促进作用,可作为估计NSCLC可能有淋巴结转移的指标。     

壳聚糖微／纳米粒在定向给药系统中的应用研究

目的：介绍壳聚糖微／纳米粒在新型定向给药系统中的应用,为发展安全高效的壳聚糖微／纳米粒定向给药系统提供参考。方法：综合近年来出版的有关文献,对壳聚糖基本性质,定位给药于各组织部位进行了探讨。结果：壳聚糖微／纳米粒可应用于脑、眼、鼻、口、肺、胃、小肠、结肠等器官靶向给药。结论：壳聚糖微／纳米粒作为一种新型药用辅料,在定位给药系统中已经得到了开发和应用。     

磁场对家兔血清谷胱甘肽过氧化物酶及血液过氧化氢酶活性的影响

目的:探讨磁场对家兔谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响.方法:将20只家兔随机分为实验组与对照组.实验组每天进行一次磁处理,每次30 min.在家兔腹背贴磁片,每一磁片的磁感应强度0.2T.6周后测定两组家兔血清中GSH-Px 和血液中CAT的活性.结果:实验组GSH-Px活性为(1 438.50±157.89)活力单位/ml,CAT活性为(68.29±13.91)活力单位/L.对照组GSH-Px活性为(1187.73±272.55)活力单位/ml,CAT活性为(55.69±7.57)活力单位/L.实验组GSH-Px与CAT活性明显升高 (P＜0.05).结论:磁场能够增强GSH-Px和CAT的活性,提高机体处理自由基的能力,增加机体的抵抗能力,具有一定的抗衰老功能.     

松果菊苷固体脂质纳米粒的表征及体外细胞摄取评价

[目的]对本实验室前期处方优化的松果菊苷固体脂质纳米粒(ECH-SLN)的物理性质和体外细胞摄取情况进行评价,为今后眼部制剂的改进奠定基础。[方法]根据本实验室前期优化的处方,采用乳化-固化法制备ECHSLN,运用差示扫描量热法(DSC)及X射线衍射法(XRD)表征其物理性质,并选取人角膜上皮HCEpiC细胞与人晶状体上皮SRA 01/04细胞,对罗丹明123固体脂质纳米粒(Rhodamine 123-SLN,Rh 123-SLN)进行体外细胞毒性评价及细胞摄取研究。[结果] DSC结果显示仅松果菊苷和物理混合物(空白SLN∶松果菊苷=5∶1)在150℃出现松果菊苷的熔化吸热特征峰,空白SLN、ECH-SLN和物理混合物在110℃和230℃均出现SLN的两个熔化吸热特征峰;XRD结果显示松果菊苷和物理混合物在20°时出现明显的松果菊苷特征峰,空白SLN,ECH-SLN和物理混合物在20°～25°范围均显示SLN的范围特征峰;结果均表明松果菊苷作为药物以分子分散状态被包裹在固体脂质纳米粒(SLN)中;细胞活力影响实验结果显示Rh 123-SLN浓度为5.13μg/mL和10.25μg/mL时对两种细胞均无明显毒性,与对照组相比无显著性差异;细胞摄取实验结果表明Rh 123溶液不能被细胞所摄取,而Rh 123-SLN的细胞摄取量与药物浓度和孵育时间呈正相关。[结论] ECH-SLN能够将松果菊苷递送到眼细胞,这可能为氧化性白内障的治疗提供一种有效的药物递送系统。     

卵巢恶性非性腺母细胞型生殖细胞-性索-间质肿瘤

探讨卵巢恶性非性腺母细胞型生殖细胞-性索-间质肿瘤的临床病理学特点.方法:对1例卵巢恶性非性腺母细胞型生殖细胞-性索-间质肿瘤进行光镜、组织化学和免疫组化染色.结果:(1)光镜观察:瘤细胞呈巢状或蜂窝状分布,个别区域有囊性滤泡状结构.瘤细胞主要向生殖细胞、间质细胞和粒层细胞分化,并以生殖细胞分化占优势.(2) 组织化学染色:向生殖细胞分化的部分细胞PAS染色阳性.(3)免疫组化染色:绒毛膜促性腺激素(hCG)、细胞角蛋白(CK)合体滋养细胞阳性;波形蛋白(vimentin)间质细胞、粒层细胞阳性;孕激素受体(PR)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)以及c-erbB-2、bcl-2 部分生殖细胞及间质细胞阳性;甲胎蛋白(AFP)少数生殖细胞阳性;白细胞共同抗原(LCA)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、雌激素受体(ER)、转移抑制因子(nm23)、癌胚抗原(CEA)、平滑肌肌动蛋白(SMA)均阴性.结论:非性腺母细胞型生殖细胞-性索-间质肿瘤,组织学起源尚未明了 ,组织学形态须与性腺母细胞瘤、两性母细胞瘤、无性细胞瘤、性索-间质肿瘤及非特殊类型类固醇细胞瘤相鉴别.     

中医寒凝血瘀证模型大鼠血清游离钙和细胞流变学变化*

[目的]研究具有中医寒凝血瘀证证候表现特点的大鼠模型细胞流变学变化以及血清游离钙的改变,通过客观化指标来深入阐释寒凝血瘀证的生物学基础。[方法]制作急性寒凝血瘀证大鼠模型,腹主动脉取血检测游离钙、血沉、红细胞聚集指数、红细胞变形指数、红细胞刚性指数及红细胞压积。[结果]与正常对照组比较:模型组血清游离钙、血沉、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数及红细胞压积明显升高,红细胞变形指数下降,具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。[结论]大鼠采用皮下注射盐酸肾上腺素结合冰水浸入法可以获得中医寒凝血瘀证的证候表现特征,其细胞流变学指标的相应改变准确反映出"寒凝血瘀证"的现代生物学基础。     

化学沉淀法制备纳米HAP-sol及其血液相容性研究

目的:研究改性后的纳米HAP粒子的血液相容性.方法:采用化学沉淀法制备纳米羟基磷灰石溶胶(HAP-sol),以聚丙烯酸纳(PAA-Na)为稳定剂.通过体外溶血试验和血淋巴细胞毒性试验(MTT法)来评价HAP-sol的血液相容性.结果:红细胞溶血率在0～3%之间,细胞毒性分级为0级或1级,纳米HAP-sol对血红细胞无溶血作用,也没有明显的细胞毒性效应.结论:以PAA-Na为稳定剂,纳米HAP-sol有良好的血液相容性,纳米HAP-sol用于静脉注射药物有一定的安全性.     

氟对大鼠骨ROS和RNA含量的影响

目的 :探讨饮用氟水大鼠骨RNA和ROS的含量变化在氟骨症早期发病机理中的作用。方法 :Wistar大鼠80只 ,雌、雄各半 ,平均体重为 90 g± 5 g。随机分成 4组 ,用试剂盒测定血清中丙二醛 (MDA)及骨组织中的RNA的含量。用ESR检测骨ROS的含量。结果 :低、中、高氟组骨ROS及血清中MDA含量变化含量均有所升高 (F =3.98,P <0 .0 1) ,骨中RNA含量随氟剂量的增加而逐渐减少。结论 :提示饮用水中的氟含量会影响体内脂质过氧化物水平升高降低 ,从而影响骨合成RNA的能力     

吴茱萸碱新型纳米乳在大鼠体内的药代动力学及生物等效性

目的 建立HPLC法测定吴茱萸碱新型纳米乳(evodiamine novel nano emulsion,ENNE)中吴茱萸碱(evodiamine,EVO)在大鼠体内的血药浓度,研究ENNE在大鼠体内的药代动力学行为,比较ENNE与EVO的生物等效性.方法 12只SD大鼠平均分为两组,分别灌胃给予ENNE(相当于EVO 100 mg/kg)与EVO(100mg/kg),采用HPLC法测定5 min、10 min、15 min、30 min、45min、1h、2h、5h、8h、12 h、24 h、48 h、72 h大鼠体内EVO的血药浓度.HPLC法色谱条件:流动相为甲醇-0.1％甲酸水溶液(66∶34,体积比),流速为1.0mL/rmin,进样体积为100 μL,检测波长为225nm.绘制血药浓度-时间曲线,用DAS 2.1.1软件计算主要药代动力学参数与生物等效性.结果 建立的HPLC法线性关系良好,准确度与精密度符合分析方法学要求.ENNE与EVO的AJC0-∞分别为(8 248.88±69.92)μg·h·L-1、(884.82±83.52) μg·h·L-1,半衰期分别为(1.70±0.60)h、(1.05±0.45)h.ENNE的相对生物利用度约为EVO的9倍,半衰期约为EVO的1.62倍,ENNE与EVO不具有生物等效性.结论 ENNE较EVO更能促进药物的吸收,提高生物利用度;ENNE与EVO不具生物等效性.     

纳米氧化镁灭菌效果与抑菌能力研究

目的：研究纳米氧化镁(MgO)灭菌效果与抑菌能力。方法：将不同量的MaO粉体分散于染菌菌片载体上放置不同时间，计算其杀灭率以评价MaO粉体的灭菌能力；将不同量的MaO粉体混合菌液放置在摇床中振荡不同时间，计算其抑菌率以评价MgO粉体的抑菌能力。结果：①纳米氧化镁能有效杀灭大肠杆菌，对枯草杆菌黑色变种芽孢也有显著的杀灭效果；②纳米氧化镁对金黄色葡萄球菌和枯草杆菌黑色变种芽孢有很好的抑菌作用；③纳米氧化物的磨蚀性、碱性、氧化性以及对微生物的静电吸附使它具有抑菌和杀菌作用。结论：纳米氧化镁粉体有较强的杀菌效果和抑菌能力。