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目的:为保障临床用药的安全性和有效性,建立僵蚕配方颗粒的鉴定方法。方法:采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分离不同加工方式的僵蚕样品蛋白,对提取方法、缓冲液pH、料液比、反应温度、反应时间、专属性、适应性进行考察。同时利用液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)分析寻找稳定且丰度较高的蛋白作为鉴定僵蚕配方颗粒的蛋白标志物。结果:SDS-PAGE最佳提取条件为取僵蚕样品适量,按料液比1∶10加入0.1 mol·L^(–1) NaAc缓冲液(pH=5),30℃振荡提取1.5 h。可分离出特征性条带约40~50 kDa,该条带主要为僵蚕基原动物家蚕Bombyx mori Linnaeus的丝氨酸蛋白酶抑制蛋白、抗糜蛋白和抗胰蛋白等,可作为僵蚕鉴别的蛋白标记。根据SDS-PAGE分析条带的相对分子质量大小、蛋白在僵蚕药材和提取物中的特异性和稳定性,确定Serpin类丝氨酸蛋白酶抑制剂为鉴定僵蚕配方颗粒的特异性蛋白。结论:基于差异蛋白建立了可用于僵蚕配方颗粒生成过程的质量控制、僵蚕配方颗粒的SDS-PAGE蛋白鉴定的指纹图谱方法。 相似文献
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目的:建立僵蚕的HPCE指纹图谱分析方法,并比较其生品、制品的区别。方法:未涂层石英毛细管柱(50cm×65μm,有效长度55cm),以30mmol/L硼砂-0.2mol/L硼酸(pH8.6)为缓冲液,分离电压18kV,柱温25℃,检测波长245nm,测定不同规格10批僵蚕商品药材的HPCE图谱2,0min内完全分离。结果:建立僵蚕的HPCE指纹图谱,共有8个共有峰,通过与共有模式比较,10批僵蚕药材的相似度在0.959~0.997;方法学考察达到标准。结论:10批僵蚕两种商品规格具有相似性,炮制品间的差异较生品间的稍大;该方法具有良好的精密度和分离效果,可作为僵蚕品种鉴定与质量控制方法。 相似文献
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目的 研究僵蚕的化学成分,并对从僵蚕中分离得到的一个新的香豆素苷类成分进行结构鉴定。方法 应用硅胶、Sephdex LH-20柱色谱和重结晶等方法进行分离,利用光谱方法对分离得到的单体成分进行结构鉴定。结果 分离并鉴定出8个化合物分别为:6-甲氧基-7-O—β—D-(4′-甲氧基)吡喃葡萄糖基香豆素[6-methoxy-7-O—β-D-(4′-methoxy)glucopyranosyl coumarin,Ⅰ]、麦角甾-6,22-二烯3β,5α,8α-三醇(ergost-6,22-dien-3β,5α,8α—triol,Ⅱ)、棕榈酸(palmidcacid,Ⅲ)、赤藓醇(meso—erythritol,Ⅳ)、甘露糖醇(D-mannitol,Ⅴ)、尿嘧啶(uracil,Ⅵ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅶ)、胡萝卜苷(daucosterol,Ⅷ)。结论 化合物Ⅰ为新香豆素苷化合物。 相似文献
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《西部中医药》2021,34(3)
目的:通过网络药理学方法探讨僵蚕的主要药效作用机制。方法:利用化学专业数据库及文献收集僵蚕的化学成分,借助中药系统药理学数据库和分析平台(TCMSP)以及Swiss Target Prediction数据库获得僵蚕化合物潜在作用靶点,结合TTD、DisGeNET等生物信息库及僵蚕现代药理作用将靶标映射在相关疾病上。运用Cytoscape构建药材-成分-靶点-疾病网络模型,并应用DAVID数据库基于KEGG通路分析僵蚕作用机制。结果:僵蚕39个化学成分共作用451个靶点,主要富集在糖尿病、哮喘、肿瘤、疼痛类疾病方面,其中27个化合物和20个靶点是网络中的关键节点。僵蚕以代谢通路、神经活性配体-受体相互作用、PI3KAkt信号通路、钙信号通路、cAMP信号通路、癌症通路等为主要作用通路。结论:僵蚕可通过多成分、多靶点、多通路治疗糖尿病、哮喘、肿瘤、疼痛类疾病。 相似文献
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短腺小米草水溶性化学成分的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 :研究短腺小米草水溶性部分的化学成分。方法 :大孔吸附树脂和硅胶柱色谱 ;IR和NMR等技术鉴定结构。结果 :分离鉴定了 2个特殊的、结构非常接近的苯丙素苷 ,acteoside和eukovoside。结论 :均为首次从该植物中分离得到。 相似文献
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黄喉拟水龟板中三种甾体化合物的分离和鉴定 总被引:6,自引:1,他引:5
目的 :对黄喉拟水龟板中甾体类成分进行研究。方法 :采用真空液相色谱、薄层色谱进行分离 ,理化、光谱、色谱方法鉴定化合物结构。结果 :分得 3个甾体化合物 ,分别为胆甾醇、十二烯酸胆甾醇酯、甾醇 4 烯 3 酮。结论 :首次从黄喉拟水龟板中分离、鉴定出 3种甾体。 相似文献
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