静脉注射骨髓间质干细胞对脊髓损伤修复作用的实验研究

目的探讨静脉注射大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)对脊髓损伤后神经修复和功能恢复的影响。方法32只SD大鼠,体重约300g,雌雄不限。体外分离、培养、纯化MSCs,应用流式细胞技术检测MSCs表面细胞标志CD34、CD45、CD29、CD90。根据改良Allen法制备大鼠脊髓损伤模型。暴露T10段脊髓,将一直径为3mm的圆形薄铜垫片置于T10段脊髓表面,以重量为10g的砝码,从5cm高度自由坠落打击该垫片,造成T10段脊髓冲击伤,损伤组24只,假手术组8只。模型建立后24h,损伤组随机分为实验组14只,对照组10只。实验组及假手术组经尾静脉注射Brdu标记的MSCs,对照组经静脉注射PBS。损伤后24h、注射MSCs后1、3、5周评价各组大鼠的神经功能状况,并检测MSCs在体内迁移、存活以及分化情况。结果细胞CD34、CD45阴性表达,CD29、CD90阳性表达。实验组运动功能改善,BBB评分高于对照组(P<0.05)。注射的MSCs在宿主损伤脊髓中聚集并存活,注射MSCs3～5周后部分细胞表达微管相关蛋白2(MAP2)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)染色的Brdu阳性细胞。结论MSCs经静脉注射后可向脊髓损伤处聚集并存活,促进神经修复及神经功能的恢复。     

静脉普鲁卡因镇痛机制的探讨

目的：通过测定脑脊液和血浆普鲁卡因浓度，探讨静脉普鲁卡因镇痛的机制，方法：ＡＳＡＩ～Ⅱ级择期手术患者６例，无术前用药，静注芬太尼，维库溴铵和异丙酚行全麻诱导，气管内插管，普鲁卡因以１ｍｇ．ｋｇ＾－１．ｍｉｎ＾－１速率静滴，复合异氟醚维持全麻，控制呼吸，静滴普鲁卡因１０，２０，３０，６０分和停药５，１５，３０，６０分时，取脑管和动脉血测普鲁卡因浓度，结果：静脉普鲁卡因３０分钟血浆浓度达稳定峰值１４．     

七氟醚在脊髓对伤害性屈反射的影响

】     

强啡肽对脊髓反射抑制作用的受体机制研究

目的 研究鞘内注射强啡肽（Dyn)A(1-13)对脊髓反射抑制作用的受体机制。方法 通过大鼠蛛网膜下腔置管后鞘内注射30nmol DynA(1-13)导致热辐射刺激甩尾反射消失的模型,检测在应用Dyn(A1-13)之前之后鞘内分别注射5、30、150nmol MK-801(NMDA)受体非竞争性拮抗剂）对甩尾反射消失的影响。结果 MK－801在预先给药时对DynA(1-13）所致大鼠甩尾反射消失有剂量相关的保护作用,其中150nmolMK-801的保护率达90％。在迟后给药时则会产生时间相关的保护作用,30、150nmolMK－801的作用峰值分别在15、30min。结论 Dyn致大鼠甩尾反射消失作用至少部分是由NMDA受体介导的。     

脊髓损伤与自主高反射

自主高反射系脊髓损伤患者交感神经系统过度激活乃至失控所引起的一组临床综合征 ,常见于四肢瘫及高位截瘫 (损伤节段位于胸 6水平以上 )患者。尽管患者脊髓受损 ,其脊髓反射机制仍存在 ,可引起高血压、心动过缓、头痛等临床症状。对此综合征的及时有效救治至关重要 ,否则可能导致死亡等严重并发症。现就自主高反射的病理生理、临床特征、常见原因和治疗策略作一综述。     

高位脊髓损伤患者自主神经过反射的康复护理

高位脊髓损伤患者自主神经过反射的康复护理孙树梅１郑红云１夏艳萍１自主神经过反射（ａｕｔｏｎｏｍｉｃｈｙｐｅｒｅｆｅｌｘｉａ）是交感神经过度活动所引起的综合征。在Ｔ６以上的高位脊髓损伤患者中时有发生，其主要临床表现为血压升高、出汗、头痛及沉重感、面色潮...     

静脉注射普鲁卡因及芬太尼对外侧网状核神经元伤害性反应的影响

目的　观察静脉注射普鲁卡因及芬太尼对外侧网状核神经元伤害性反应的影响，以探讨其镇痛作用是否有脑的高级中枢的参与。方法　应用细胞外微电极记录的方法，在Ｗｉｓｔａｒ大鼠观察静脉注射普鲁卡因（１０ｍ ｇ／ｋｇ）及芬太尼（１、２、５ 和１０μｇ／ｋｇ）对Ｃ强度刺激腓肠神经诱发的外侧网状核神经元伤害性反应的影响。结果　静脉注射普鲁卡因对测试的７ 个单位的神经元伤害性反应均呈抑制作用，平均最大抑制为３６６％ （Ｐ＜ ００１），芬太尼对所有被观察的２４ 个神经元产生了抑制作用，平均抑制分别为２９０％ 、７５６％ 、６３９％ 和７１８％ ，均具有显著性差异，此效应并被静脉注射纳络酮（０５ｍ ｇ／ｋｇ）完全逆转。在２ 个芬太尼产生抑制的单位，静脉注射普鲁卡因也产生了抑制效应。结论　外侧网状核神经元与痛觉的传导及调制有关，脑的高级中枢也参与了静脉注射普鲁卡因及芬太尼产生的镇痛作用     

静脉注射异丙酚对内毒素血症大鼠心功能的影响

目的 评价静脉注射异丙酚对内毒素血症大鼠心功能的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠32只,体重250～300g,随机分为4组(n=8):对照组(C组)、内毒素组(L组)、内毒素+异丙酚组(L+P组)及异丙酚组(P组).L组、L+P组静脉注射内毒素10g/kg,C组和P组注射等量生理盐水,注射后60min,L+P组和P组静脉注射异丙酚10mg/kg,C组和L组给予等量生理盐水,30min后下腔静脉取血并处死大鼠.于注射内毒素前、注射内毒素后30、60、61、62、63、65、70、80及90min时记录心率(HR)、左室收缩压(LVSP)及左室内压力变化最大速率(±dp/dtmax);并计算L+P组和P组心功能指标变化幅度,测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度.结果 与注射内毒素前比较,L组注射内毒素后心功能指标均降低,L+P组注射异丙酚后HR、LVSP、±dp/dtmax降低,P组注射异丙酚后HR、LVSP、±dp/dtmax降低(P＜0.05);与注射内毒素后60min时比较,L+P组注射异丙酚后HR、LVSP、-dp/dtmax降低,+dp/dtmax升高(P＜0.05).与L组比较,L+P组注射异丙酚后HR、LVSP、-dp/dtmax降低(P＜0.05).与P组比较,L+P组注射异丙酚后HR、LVSP、±dp/dtmax变化幅度减小(P＜0.05).与C组比较,L组、L+P组TNF-α浓度升高(P＜0.05);L+P组低于L组(P＜0.05).结论 静脉注射异丙酚不加重内毒血症大鼠心功能的抑制.     

脊髓损伤与自主高反射

自主高反射系脊髓损伤患者交感神经系统过度激活乃至失控所引起的一组临床综合征，常见于四肢瘫及高位截瘫(损伤节段位于胸6水平以上)患者。尽管患者脊髓受损，其脊髓反射机制仍存在，可引起高血压、心动过缓、头痛等临床症状。对此综合征的及时有效救治至关重要，否则可能导致死亡等严重并发症。现就自主高反射的病理生理、临床特征、常见原因和治疗策略作一综述。     

利用腹壁反射重建膀胱反射弧的远期功能性研究

目的：利用截瘫平面以上的腹壁反射通路建立SD大鼠的人工膀胱反射弧,以恢复脊髓损伤（SCI）后可控制性膀胱排尿功能。它包含了一个皮肤反射弧（下腹壁反射弧）,并将皮肤反射的运动冲动传入膀胱,引起膀胱的自主性收缩。方法：将SD大鼠右侧T13前根近端与右侧S2前根远端通过一段自体移植神经在硬膜囊内行显微缝合,保持T13后根完整,经一段时间轴突再生后,建立“腹壁反射－脊髓中枢－膀胱”这一新的人工膀胱反射弧。通过刺激右侧下腹壁反射激发截瘫动物排尿。神经缝合术后8个月,在破坏L5－S4脊髓节段前后,分别进行神经电生理、膀胱测压和神经药理学实验等远期功能观察。结果：在破坏L5－S4脊髓节段造成截瘫前后,单相方波（3mA,0.3ms）刺激实验测T13后根,12只SD大鼠的实验侧膀胱神经丛可记录到动作电位,其形态和波幅与对照组相似;串刺激（3mA,20Hz,5s）实验侧T13后根,经新建的膀胱人工反射弧引出膀胱平均内压达对照侧的76％,膀胱平滑肌复合肌肉运作电位平均最大波幅达对照侧81％,波形与对照组相似。在膀胱平滑肌内注射阿托品（0．05mg/kg）或三甲噻酚（5mg/kg）可抑制通过该人工反射弧激发的膀胱平滑肌收缩功能,而膀胱平滑肌肉注射维库溴铵（4mg/kg）对膀胱平滑肌收缩功能无影响。结论：体神经的运动传出支经自体神经移植,其轴突能够再生长入自主神经的副交感神经纤维,并具有良好的传导运动兴奋的功能,新的神经传导通路含有N1和M型受体,冲动传递的神经递质为乙酰胆碱;利用截瘫平面以上的体反射,通过硬膜囊内神经根自体神经移植缝合的方法,可建立新的人工膀胱反射弧,实现截瘫患者可控制性排尿。     

人工膀胱反射弧的实验与临床研究

目的 建立人工膀胱反射弧,以恢复脊髓损伤后的膀胱功能,它将体反射运动是化的运动同支传入膀胱,引起膀胱的自主性收缩。方法 将犬右Ｌ５前根近端与右Ｓ２前根远端在硬膜内吻合,经轴突再生后,建立膝腱－脊髓中枢－膀胱人工反射通路。进行神经电生理、膀胱测压、膀胱逼尿肌 图等早期和无期功能观察。临床１例Ｔ２、３完全性截竣患者,硬膜内行双侧Ｌ５与Ｓ２前根的吻合。结果 单相方波（１１５ｍＶ,１．０ｍｓ）刺激右Ｌ５后     

人工膀胱反射弧重建治疗脊髓损伤后弛缓性膀胱

目的：探索利用截瘫平面以上正常的体反射重建膀胱反射弧,恢复脊髓损伤后弛缓性膀胱排尿功能的可行性。方法：将Beagle犬L6前根近端与S2前根远端在硬膜内显微吻合,经一段时间的轴突再生后,建立＂膝腱-脊髓中枢-膀胱＂人工反射弧,术后8个月,在破坏S1～S4脊髓节段前后分别进行神经电生理、膀胱肌电图及尿流动力学和辣根过氧化物酶（HRP）逆行示踪等检查：对1例L1压缩性骨折伴截瘫患者行右侧T11与S2前根经腓肠神经移植硬膜内吻合术。结果：2只犬在术后8个月时电刺激截瘫前和截瘫后左侧L6后根、神经吻合口近端均可在吻合口远端记录到运动诱发电位,其波形和波幅相似;尿流动力学检查,当刺激开始时逼尿肌压力和膀胱内压均迅速上升,而腹内压增加幅度较小,刺激中止后膀胱内压迅速下降;膀胱注射HRP后48h实验侧L6脊髓节段前角中发现HRP标记的大神经元细胞。临床1例患者术后55个月时随访,膀胱充盈后可产生自控性排尿,尿流动力学显示排尿完全是由膀胱逼尿肌的收缩引发。结论：利用截瘫平面以上正常的体反射建立人工反射弧通路是成功和有效的,可恢复脊髓损伤后弛缓性膀胱自控性排尿。     

根动脉注射氯胺酮对犬脊髓的影响

目的 评价根动脉注射氯胺酮对犬脊髓的影响.方法 健康成年犬20只,雌雄不拘,体重12～18 kg-随机分为2组(n=10):对照组(C组)和氯胺酮组(K组).经肋间后动脉,向根动脉方向置管至根动脉分支处,C组注射生理盐水2 ml,K组注射氯胺酮200 mg(用生理盐水稀释至2 ml).药物注射完毕后3 h,取根动脉相对应的脊髓节段,切片,分别行HE染色和尼氏染色,光镜下观察脊髓组织病理学结果,计数阴性神经元(不含有尼氏小体的神经元);采用免疫组化法测定神经元特异性烯醇化酶、S100β蛋白和Tau蛋白的表达水平.结果 两组脊髓神经元形态正常,尼氏小体丰富,均未见阴性神经元.两组脊髓神经元特异性烯醇化酶、S100β蛋白和Tau蛋白的表达比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论根动脉注射氯胺酮不会导致犬脊髓损伤.     

人工反射弧重建脊髓损伤后弛缓性膀胱排尿功能的临床初步报告

目的 探索建立人工反射弧恢复脊髓圆锥损伤后所致弛缓性膀胱排尿功能的治疗方法。方法 对临床1例圆锥脊髓损伤（SCI）所致弛缓性膀胱的患者行单侧T11与S2／S3神经前根经移植吻合，经一定时间轴突再生后，通过尿流动力学、尿检及排尿情况检测膀胱功能。结果 随访55个月，患者膀胱充盈后可引起自控性排尿，尿流动力学显示排尿完全是由膀胱逼尿肌的收缩引发。结论 建立新的人工反射弧能恢复SCI患者排尿功能，实现自控性排尿。     

Reconstruction of atonic bladder innervation after spinal cord injury: A bladder reflex arc with afferent and efferent pathways

Abstract

Background

Establishing bladder reflex arcs only with the efferent pathway to induce micturition after spinal cord injury (SCI) has been successful. However, the absence of sensory function and micturition desires can lead to serious complications.

Objectives

To reconstruct a bladder reflex arc with both afferent and efferent pathways to achieve atonic bladder innervation after SCI.

Methods

A reflex arc was established by microanastomosis of the S2 dorsal root to the peripheral process of the L5 dorsal ganglion and the L5 ventral root to the S2 ventral root. The functions of the reflex arc were evaluated using electrophysiology, wheat germ agglutinin–horseradish peroxidase (WGA–HRP) tracing, and calcitonin gene-related peptide (CGRP) immunocytochemistry analysis. Hind-paw motion was evaluated by CatWalk gait.

Results

Compound action potentials and compound muscle action potentials were recorded at the right L5 dorsal root following electrical stimulation of right S2 dorsal root. Similar to the control side, these were not significantly different before or after the spinal cord destruction between L6 and S4. WGA–HRP tracing and CGRP immunocytochemistry showed that construction of the afferent and efferent pathways of the bladder reflex arc encouraged axonal regeneration of motor and sensory nerves, which then made contact with the anterior and posterior horns of the spinal cord, ultimately reestablishing axoplasmic transportation. Gait analysis showed that at 3 months following the operation, only the regularity index was significantly different as compared with 1 day before the operation, other parameters showing no difference.

Conclusion

Bladder reflex arc with the afferent and efferent pathways reconstructs the micturition function without great influence on the motion of leg.     

Spinal-cord concussion in frogs a study of reflex changes

A reliable experimental model of the spinal frog, employing the flexor withdrawal reflex to a noxious stimulus, has been used to study the response to single and repeated concussing blows over the spinal column. It is evident that caudally placed blows depress the reflex response, whereas more cephalad blows facilitate the response. The results of studies using repeated concussing blows support the concept that neuronal units may completely lose their function without suffering permanent structural damage.     

建立人工膀胱反射弧治疗脊髓损伤后神经原性膀胱的临床研究

【摘要】目的：观察利用脊髓正常反射通路重建人工膀胱反射弧恢复脊髓损伤后神经原性膀胱功能的临床疗效。方法：对36例完全性脊髓损伤（ASIA分级A级）患者行人工膀胱反射弧重建,其中28例脊髓圆锥上脊髓损伤患者（痉挛性膀胱）,切断并显微吻合单侧S1前根与支配膀胱最强的神经根（一般为S2或S3）前根;8例脊髓圆锥损伤患者（弛缓性膀胱）采用腓肠神经移植并显微吻合T10/T11神经根前根及支配膀胱最强的神经根前根。通过对34例（2例痉挛性膀胱患者死亡）患者术前、术后6、12、18个月随访并行尿流动力学检查（无菌生理盐水灌注速度25ml/s）,评估痉挛性和弛缓性膀胱功能恢复情况。两种不同类型的神经原性膀胱患者均选其具有代表意义的尿流动力学检查指标,整理数据后进行统计学分析。结果：26例痉挛性膀胱患者,最大膀胱测压容积术后3个时间点间比较差异无显著性（P＞0.05）,但与术前比较均有显著性差异（P＜0.05）;残尿量、膀胱顺应性不同时间点间比较两两均有显著性差异（P＜0.05）。8例弛缓性膀胱患者,最大膀胱测压容积术后与术前比较差异无显著性（P＞0.05）;残尿量由术前的495.1±56.6ml降至术后18个月时的264.4±30.8ml,且术后不同时间点与术前比较均有统计学意义（P＜0.05）;最大逼尿肌压力由术前的6.3±3.9cmH2O升高到术后18个月时的82.9±4.3cmH2O,且术后3个时间点与术前比较差异均有显著性（P＜0.05）。未发现一例通过搔抓下腹部皮肤引起排尿。结论：利用脊髓正常反射通路重建神经原性膀胱人工反射弧改善膀胱功能是可行而有效的方法。