宫颈癌及癌旁组织中人乳头瘤病毒DNA检测

目的：探讨人乳头瘤病毒（ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ,ＨＰＶ） 与宫颈癌及癌旁组织的关系。方法：应用原位ＰＣＲ技术（ＩＳＰＣＲ）对４４ 例宫颈癌、１８ 例癌旁组织及３０ 例慢性宫颈炎和１５ 例正常宫颈组织中的ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ进行检测。结果：４４ 例宫颈癌组织中ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性３５ 例（７９－５％ ）,ＨＰＶ１８ＤＮＡ 阳性５ 例（１１－３ ％） 。其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ均阳性４ 例;ＨＰＶ１８ＤＮＡ 阳性而ＨＰＶ１６ＤＮＡ阴性１ 例;ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性而ＨＰＶ１８ＤＮＡ 阴性３１ 例。１５ 例癌旁组织伴宫颈上皮内新生物（ｃｅｒｖｉｃａｌｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｎｅｏｐｌａｓｍ , ＣＩＮ） Ⅱ～Ⅲ级,ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性１２ 例（８０％ ）,其他３ 例癌旁组织中１ 例ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性;３０ 例慢性宫颈炎有４ 例ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性（１３－３％ ） ;１５ 例正常宫颈组织ＨＰＶＤＮＡ均阴性。结论：宫颈癌及癌旁伴ＣＩＮⅡⅢ与ＨＰＶ１６、１８ 感染有密切关系,以ＨＰＶ１６ 感染为主     

喉癌组织乳头状瘤病毒的检测

应用聚合酶链反应对成人型喉癌，喉癌旁组织及颈部淋巴结组织进行乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）检测，发现２０例喉癌组织中有１６例呈ＨＰＶ－６，１１例阳性，１例ＨＰＶ－１６，１８例阳性，２例癌旁１ｃｍ内组织有１例ＨＰＶ－６，１１阳性，２例癌旁２ｃｍ外组织均呈ＨＰＶ－６，１１，１６，１８阴性，３例淋巴结病是检查有癌转移，均主ＨＰＶ－６，１１型阳性。     

膀胱癌高危乳头瘤病毒定位研究及临床意义

目的：进一步探讨高危ＨＰＶ１６、１５与膀胱癌的病因学关系。方法：运用改良的原位杂交技术对５２例福尔马林固定石蜡包理膀胱乳头状移行细胞癌组织进行高危ＨＰＶＤＮＡ定位检测。结果：ＨＰＶ ＤＮＡ的阳性信号存在于肿瘤细胞核内,呈点状,也可为点片状,位于乳头癌全层,癌旁不典型增生上皮、癌旁正常的上皮组织及Ｂｒｕｎｎ氏巢可同时有高危ＨＰＶ的点片状表达。５２例膀光乳头状移行细胞癌中高危型ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ阳     

用聚合酶链反应检测喉鳞癌细胞内人乳头状瘤病毒DNA

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测喉鳞状细胞癌患者的经福尔马林固定、石蜡包埋的组织标本２８例。从石蜡包埋的癌组织提取的人乳头状瘤病毒ＤＮＡ（ＨＰＶＤＮＡｓ）用ＨＰＶ－１６，１８试剂盒进行ＰＣＲ扩增。其中５例（１８％）扩增阳性。声带癌ＨＰＶ－１６，１８的阳性率较其它部位的高（占阳性８０％）。结果提示：ＨＰＶ－１６，１８的感染在喉癌的发生中起到一定的作用。声门区的喉鳞癌与宫颈癌的发生类似，与ＨＰＶ－１６，１８的感染有密切的联系。     

用PCR技术检测皮肤表皮肿瘤组织HPV DNA

应用多对引物ＰＣＲ方法检测５８例皮肤人表皮肿瘤（Ｂｏｗｅｎ‘ｓ病１７例，Ｑｕｅｙｒａｔ增殖性红斑５例，鲍温样丘疹病１６例，皮肤鳞状细胞癌２０例）石蜡包埋组织中ＨＰＶ６，１１，１６及１８ＤＮＡ。Ｂｏｗｎｅ’ｓ病ＨＰＶ１ＤＮＡ２例（２／１７）阳性Ｑｕｅｙｒａｔ增殖性红斑ＨＰＶ１６ＤＮＡ１例（１／５）阳性，鲍温样丘疹病ＨＰＶ１６ＤＮＡ９例（９／１６）阳性，皮阳鳞状细胞癌ＨＰＶＤＮＡ２０例均阴性，提示鲍温     

维吾尔族妇女子宫颈癌中 p53 基因的表达和 HPV DNA 检测研究

应用Ｅ６特异性引物ＰＣＲ检测新疆维吾尔族妇女子宫颈癌活检组织标本中的ＨＰＶ６，１６和１８ＤＮＡ。并应用免疫组化研究ｐ５３基因的表达。结果显示，６５例标本中７例不适应用于ＰＣＲ，其余５８例中ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性４５例（７７．６％），而ＨＰＶ６ＤＮＡ和１８ＤＮＡ为阴性。免疫组化显示，６５例中ｐ５３表达阳性４９例（７５．４％）。在４５例ＨＰＶＤＮＡ阳性标本中，ｐ５３表达阳性３４例（７５．６％）；１３例ＨＰＶＤＮＡ阴性标本中，ｐ５３表达阳性１１例（８４．６％）。提示，ＨＰＶ阳性或阴性与ｐ５３表达之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。     

外阴癌的HPV检测及预后的关系

目的研究人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染与外阴癌的发病和预后的关系。方法将外阴癌病理存档蜡块切片脱蜡，以ＰＣＲ方法扩增其中可能存在的ＨＰＶ－ＤＮＡ（６／１１型和１６／１８型），经琼脂糖凝胶电泳，置紫外光反射仪下观察结果。结果在４９例外阴癌原发灶中，ＨＰＶ－ＤＮＡ１６／１８型的检出率为２６．５％，６／１１型的检出率为２．０％；ＨＰＶ－ＤＮＡ１６／１８型阳性外阴癌的术后生存率好于ＨＰＶ－ＤＮＡ１６／１８型阴性外阴癌。结论一部分外阴癌的发病与ＨＰＶ感染有关，这一部分外阴癌的预后较好；另一部分外阴癌的发病与ＨＰＶ感染无关，但其预后较差。     

宫颈癌组织中HPV16 E6C基因变异的研究

为探讨ＨＰＶ１６ 肿瘤相关抗原Ｅ６ 羧基端基因片段（Ｅ６Ｃ）在宫颈癌组织中的变异性以及采用Ｅ６Ｃ做为肿瘤治疗性疫苗抗原基因的可行性,采用ＰＣＲ方法自１８ 例单纯ＨＰＶ１６ ＤＮＡ 阳性的宫颈癌组织中扩增ＨＰＶ１６ Ｅ６ＣＤＮＡ,经单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ）和ＤＮＡ序列测定法检测其基因变异性。ＳＳＣＰ分析结果显示,１８ 例宫颈癌组织中ＨＰＶ１６ Ｅ６ＣＤＮＡ 电泳条带与标准对照ＤＮＡ 条带一致,提示无基因变异现象存在,ＤＮＡ 序列测定也证实Ｅ６Ｃ编码区内无核苷酸突变。该研究证实采用ＨＰＶ１６ Ｅ６Ｃ端基因片段作为ＨＰＶ疫苗候选基因可行,为进一步研制ＨＰＶ１６ ＤＮＡ 疫苗奠定了基础     

宫颈癌组织中乳头瘤病毒感染及抑癌基因p53突变的检测

探讨人乳头瘤病毒１６，１８型感染及抑癌基因Ｐ５３突变与宫颈癌发生的关系。方法：应用ＰＣＲ及其单链构象多态性方法，对６０例宫颈癌组织ＤＮＡ进行检测，同时选择宫颈糜烂及正常宫颈各５０例作为对照。结果：宫颈癌组织中ＨＰＶ１６感染呈明显梯度关系，且鳞癌组织中ＨＰＶ１６的检出率远比腺癌高，并高于ＣＩＮ和正常宫颈组织；相反，腺癌中ＨＰＶ１８的检出率比鳞癌高。     

宫颈癌组织中HPV16 E6C基因变异的研究

为探讨ＨＰＶ１６肿瘤相关抗原Ｅ６羟基端基因片段（Ｅ６Ｃ）在宫颈癌组织中的变异性以及采用Ｅ６Ｃ做为肿瘤治疗性轩抗原基因的可行性，采用ＰＣＲ方法自１８例单纯ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性的宫颈癌组织中扩增ＨＰＶ１６５Ｅ６ＣＤＮＡ，经单链构象多态性分析（ＳＳＣＰ）和ＤＮＡ序列测定法检测其基因变异性。ＳＳＣＰ分析结果显示，１８例宫颈癌组织ＨＰＶ１６Ｅ６ＣＤＮＡ电泳条带与标准对照ＤＮＡ条带一致，提示无基因变异现象存在     

咽喉鳞状细胞癌组织中HPV的检测

用免疫组化及ＤＮＡ斑点杂交技术检测人咽喉部鳞状细胞癌组织中ＨＰＶ壳蛋白抗原及ＨＰＶ６、１１、１６、１８型ＤＮＡ序列。４５例鳞状细胞癌组织ＨＰＶ抗原阳性率为２２．２％，ＨＰＶＤＮＡ阳性率为３１．１％，５例正常粘膜ＨＰＶ抗原及ＨＰＶＤＮＡ均阳性。结果提示咽喉部鳞状细胞癌的发生和发展与ＨＰＶ感染有关系。     

人乳头瘤病毒DNA6B／11,16,18在喉鳞癌组织中的表达

为了证实人乳头瘤病毒亚型的感染与喉鳞癌的关系，采用原位杂交技术，荧光素标记ＨＰＶ ６Ｂ／１１，１６，１８ＤＮＡ为探针，分别为３２例福尔马林固定，石蜡包埋的喉鳞癌进行ＨＰＢ ６Ｂ／１１，１６，１８型检测。结果显示：ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性，ＨＰＶ１８型阳性９例，ＨＰＶ６Ｂ／１１阴性。提示：喉鳞癌的发生与ＨＰＶ１６，１８型感染有关。     

人乳头瘤病毒DNA 6B/11、16、18在喉鳞癌组织中的表达

为了证实人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）亚型的感染与喉鳞癌的关系，采用原位杂交技术，荧光素标记ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８ＤＮＡ为探针，分别对３２例福尔马林固定、石蜡包埋的喉鳞癌进行ＨＰＶ６Ｂ／１１、１６、１８型检测。结果显示：ＨＰＶ１６型ＤＮＡ阳性１４例（４６％），ＨＰＶ１８型阳性９例（２８％），ＨＰＶ６Ｂ／１１阴性。提示：喉鳞癌的发生与ＨＰＶ１６、１８型感染有关。     

DIG—DNA探针检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒6,11,16,18型DNA

用地高辛配基分别标记，制备ＨＰＶ－６、ＨＰＶ－１１、ＨＰＶ－１６及ＨＰＶ－１８的ＤＮＡ探针，应用核酸杂交技术，对３７例宫颈癌活检组织ＤＮＡ作了检测，各型ＨＰＶＤＮＡ的检出率为：ＨＰＶ－６０％、ＨＰＶ－１１２．７、ＨＰＶ－１６６７．５％、ＨＰＶ－１８１３．５％，联合应用ＨＰＶ－１６和ＨＰＶ－１８探针共同检测结果为８１％。结果显示：我国宫颈癌的发生与ＨＰＶ感染密切相关，联合应用高危型ＨＰＶ探针可提高检     

宫颈癌DNA倍体,人乳头瘤病毒16／18,ras p21和p53蛋白表达综合研究

应用人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）核酸分子斑点杂交法、流式细胞技术和细胞免疫荧光法，检测宫颈癌ＤＮＡ倍体、ＨＰＶ、ｒａｓ ｐ２１和ｐ５３蛋白表达，并对其进行综合研究。结果显示，宫颈癌组ＤＮＡ指数平均值明显高于正常组，且与肿瘤细胞分化有关；癌变组ＤＮＡ异倍体率与肿瘤分化程度关系密切；在１７例ＨＰＶ１６／１８型阳性病例中，均有ｒａｓ ｐ２１和或ｐ５３蛋白阳性表达。说明宫颈癌变是多因素综合作用的结果，ＨＰＶ１６     

人乳头瘤病毒感染、p53 基因突变与子宫颈癌的相关性研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）、单链构像多态性（ＳＳＣＰ）分析银染色法检测了６１例子宫颈癌、５例子宫颈间变、１４例慢性子宫颈炎组织中１６、１８型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ１６、１８）感染及ｐ５３基因５、６、７、８外显子的变异。结果显示，子宫颈癌、子宫颈间变及慢性子宫颈炎组织中ＨＰＶ１６、１８阳性率分别为８２％、４０％及１４．３％（Ｐ＜０．０５），子宫颈癌组织中ｐ５３基因突变阳性率为２０％，而子宫颈间变及慢性子宫颈炎组织中未见有突变，其中１２例突变阳性的癌组织中９例呈ＨＰＶ阴性，３例呈ＨＰＶ阳性。提示ＨＰＶ１６、１８感染在子宫颈癌发生中起重要的病因学作用；ｐ５３基因变异可能是部分子宫颈癌变的一个重要原因；高危ＨＰＶ除了通过Ｅ６／ｐ５３蛋白复合物形成使ｐ５３蛋白失活的致癌途径外，可能还存在通过ｐ５３基因突变的致癌途径。     

人喉癌中p53基因表达和人乳头状瘤病毒感染的初步研究

应用免疫组织化学和多聚酶链反应技术检测４２例喉和喉咽鳞癌，２５例癌旁组织ｐ５３蛋白的表达和１３例癌组织人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６／１８型ＤＮＡ。结果显示：５４．８％的癌组织和２０％的癌旁组织中ｐ５３蛋白呈阳性表达，２３．１％的高分化声带癌中检测到编码ＨＰＶ１６型Ｅ６蛋白的ＤＮＡ，表明ｐ５３蛋白的过度表达和人乳头状瘤病毒感染与喉癌的发生有关，二者起协同作用。     

人喉癌中p53基因表达和人乳头状瘤病毒感染的初步研究

应用免疫组织化学和多聚酶链反应技术检测４２例喉和喉咽鳞癌，２５例癌旁组织ｐ５３蛋白的表达和１３例癌组织人类乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）１６／１８型ＤＮＡ，结果显示：５４．８％的癌组织和２０％的癌旁组织中ｐ５３蛋白呈阳性表达，２３．１％的高分化声带癌中检测的编码ＨＰＶ１６型Ｅ６蛋白的ＤＮＡ，表明ｐ５３蛋白的过度表达和人乳头状瘤病毒感染与喉癌的发生有关，二者起协同作用。     

人喉癌组织中人乳头瘤病毒DNA的检测

目的：为探讨喉癌与人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染的关系和ＨＰＶ在喉癌中基因组型的分布与表达。方法：应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）制备非放射性探针标记物－地高辛标记ＨＰＶ共有引物探针，对１４６例喉不同病变的新鲜组织标本（喉癌６８例，喉其他病变４８例，正常喉组织３０例），进行ＨＰＶ６，１１，１６，１８，３１，３３，３５，４２，５８共９型ＨＰＶＤＮＡ感染的检测；阳性者用多重引物ＰＣＲ方法分型。结果：喉癌ＨＰＶ感染阳性率４５．６％（３１／６８），喉癌颈转移淋巴结组织阳性率２０．０％（３／１５），喉癌前病变阳性率１１．８％（２／１７），声带息肉阳性率６．３％（１／１６），１５例癌旁及１５例癌周正常喉组织均为ＨＰＶＤＮＡ阴性。ＨＰＶＤＮＡ型别分布在喉癌中以ＨＰＶ１６，１８型为主，喉良性病变中以ＨＰＶ６，１１型为主。结论：喉癌发生与ＨＰＶ感染有关。     

用PCR技术对妊娠期HPV16和18型母婴垂直传播的研究

目的：研究人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）在妊娠晚期和分娩期母婴间的垂直传播。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法,随机对５０例妊娠晚期妇女宫颈阴道脱落细胞、外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）、新生儿脐血、羊水、生后１２～４８小时的新生儿咽部分泌物及母亲的乳汁进行ＨＰＶ１６、１８型检测。结果：检出ＨＰＶ１６ＤＮＡ１８例,ＨＰＶ１８ＤＮＡ１７例。新生儿脐血分别是孕妇ＰＢＭＣ中检出ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ者。新生儿咽部分泌物阳性的ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ也分别是孕妇ＰＢＭＣ中检出者。在ＨＰＶ阳性的宫颈分泌物中,其中８例ＨＰＶ１６ＤＮＡ和９例ＨＰＶ１８ＤＮＡ的其它标本中均未检出ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ。结论：妊娠期ＨＰＶ可以在母婴之间垂直传播,而且新生儿感染ＨＰＶ主要来自产前的胎盘血流,也与新生儿吞咽母血有关。说明孕妇ＰＢＭＣ中的ＨＰＶ状态与这种传播有潜在的联系,剖宫产不能完全阻止母婴垂直传播。