重楼甾体总皂苷对血小板聚集的直接诱导作用及初步机制研究

目的:确定重楼甾体总皂苷(TSSP)体外直接诱导血小板聚集作用并对其可能的机制进行探索.方法:比浊法测定血小板聚集,透射电镜观察血小板形态学改变.结果:体内外血小板聚集模型研究表明,TSSP体内给药能够增强ADP诱导血小板聚集.体外能够直接诱导血小板聚集,并呈剂量效应关系.电镜观察TSSP能够直接激活血小板引起变形释放等反应.肾上腺素能够增强TSSP诱导的血小板聚集,该增强作用能被酚妥拉明所拮抗.蛋白酪氨酸磷酸酶抑制剂过钒酸钠能够增强TSSP诱导血小板聚集.结论:本研究表明,TSSP中含有参与止血作用的药理活性成分.     

白及不同提取部位对家兔血小板聚集的影响

目的探讨白及不同提取部位对家兔血小板聚集的影响.方法比浊法测定血小板聚集率.结果白及正丁醇提取部位和水溶性部位可显著升高腺苷二磷酸（ADP）诱导的血小板最大聚集率,而乙酸乙酯提取部位可显著抑制ADP诱导的血小板聚集,石油醚提取部位对ADP诱导的血小板聚集无显著影响.各提取部位对血小板数无显著影响.结论白及正丁醇提取部位和水溶性部位是白及止血作用的主要有效部位,其止血作用与其促进血小板聚集作用有关.     

两种前列腺素抑制二磷酸腺苷诱导血小板聚集强弱的体外对比

 目的 比较两种前列腺素依前列醇钠、前列地尔在体外抑制二磷酸腺苷(adenosine diphosphate, ADP)诱导的血小板聚集的强弱。方法 SD大鼠腹腔静脉取血,制得血小板数400×10⁹个/L的血小板混悬液。血小板混悬液中加入不同浓度的依前列醇钠和前列地尔(50、125、250、500、2500 ng/ml)在最佳ADP浓度和最佳孵育时间,分别测定5 min内最大聚集率,各浓度检测4次取平均值,从而得到依前列醇钠、前列地尔量效关系并进行对比。结果 ADP最佳诱导浓度为20 μM,最佳孵育时间为5 min,随着依前列醇钠、前列地尔浓度的增加,血小板聚集率依次降低。依前列醇钠5个浓度血小板抑制率依次为19.61%、48.13%、88.25%、93.71%和100.00%,前列地尔5个浓度血小板抑制率依次为5.20%、11.70%、23.16%、28.10%和65.09%。结论 依前列醇钠、前列地尔均具有血小板聚集抑制作用,并呈浓度依赖性,且依前列醇钠的血小板抑制作用远远强于前列地尔。     

PLA2/AA信号途径与重楼皂苷诱导大鼠子宫平滑肌收缩活动的关系研究

目的:探讨宫血宁活性成分--重楼总皂苷(TSSP)诱导大鼠离体子宫肌条收缩的机制,考察PLA2/AA信号途径与TSSP引起的大鼠离体子宫收缩的关系.方法:应用离体子宫张力测定法,观察不同PLA2/AA信号途径抑制剂对TSSP引起的大鼠离体子宫收缩作用的影响.结果:非特异性前列腺素合成酶抑制剂可明显抑制TSSP和米索前列醇引起的子宫收缩,提示二者可能存在相似机制.环氧酶1(COX-1)抑制剂SC560,环氧酶2(COX-2)抑制剂NS-398,EP受体抑制剂AH6809和脂氧酶(5-LO)抑制剂REV5901均可对TSSP缩宫作用产生明显抑制;磷脂酶A2(PLA2)抑制剂AACOCF3也可明显抑制TSSP的缩宫作用,提示PLA2/AA信号途径与TSSP的缩宫作用密切相关.结论:TSSP对大鼠子宫平滑肌收缩活动的调节与PLA2/AA信号途径的激活有关.     

知母皂苷AⅢ抗血栓作用研究

目的:确定知母皂苷AⅢ体内、外给药对大鼠血小板聚集和血栓形成的抑制作用。方法:比浊法测定血小板聚集,动-静脉旁路血栓模型测定大鼠在体血栓的形成。结果与结论:体外血小板聚集模型研究证明,知母皂苷AⅢ可以抑制由ADP、胶原和凝血酶诱导的大鼠血小板的聚集,并呈剂量效应。体内给药同样可以有效抑制血小板的聚集率,当给药剂量达到40 mg/kg.d-1时对血小板聚集的抑制率可以达到26.7%。动-静脉旁路血栓形成实验结果显示,知母皂苷AⅢ体内给药可减小血栓的湿重和干重,说明知母皂苷AⅢ体内给药具有抗血栓的作用。知母皂苷AⅢ体内给药不影响出凝血时间。推测其抗血栓形成的功效可能是通过抑制血小板的黏附、聚集和活化而实现的。     

知母皂苷抑制血小板聚集的活性成分筛选及构效关系分析

目的 筛选从知母中分离的甾体皂苷抑制血小板聚集的活性成分并对其进行构效关系分析.方法 雄性Wistar大鼠心脏取血,离心分离获得富血小板血浆,分别加入呋甾烷型或螺甾烷型甾体皂苷化合物孵育3min后,以二磷酸腺苷(ADP)诱导大鼠血小板聚集,采用比浊法检测血小板聚集情况,通过比较不同甾体皂苷化合物对ADP诱导血小板聚集的抑制作用分析化合物的构效关系.结果 8个呋甾烷型甾体皂苷均无抑制血小板聚集的活性;4个螺甾烷型甾体皂苷在不同程度上抑制了血小板聚集,其中知母皂苷AⅢ作用最强,随后依次是知母皂苷AⅠ、知母皂苷AⅢ异构体和知母皂苷Ⅲ,而萨尔萨皂苷元没有活性;在苷元结构C-3位连接不同类型糖基的甾体皂苷抑制血小板聚集的作用不同,其中C-3位糖基为葡萄糖(D-Glc)时能完全抑制血小板聚集,而连接其他糖基如半乳糖(D-Gal)、阿拉伯糖(D-Ara)、核糖(D-Rib)、鼠李糖(L-Rha)或甘露糖(D-Man)时,抑制活性有不同程度的减弱.结论 知母皂苷AⅢ是知母抑制血小板聚集的主要有效活性成分之一;甾体皂苷抑制血小板聚集的活性与其结构密切相关;第3、15、22位上的基团类型可影响甾体皂苷抑制血小板聚集的生物活性.     

重楼皂苷通过p53/SLC7A11信号轴促进三阴性乳腺癌细胞铁死亡的机制研究

目的 探讨重楼皂苷对三阴性乳腺癌细胞铁死亡的影响及其机制。方法 用0、10、20、30、40、50μmol/L重楼皂苷处理三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用CCK-8法检测细胞活性。取对数生长期MDA-MB-231细胞,随机分为对照组、重楼皂苷组(30μmol/L重楼皂苷处理12 h)、抑制剂组(2μmol/L Ferrostatin-1处理12 h)与重楼皂苷+抑制剂组(2μmol/L Ferrostatin-1处理12 h后,30μmol/L重楼皂苷处理12 h),采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,qRT-PCR和Western blotting检测二价金属离子转运体1(DMT1)、转铁蛋白受体1(TFR1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、p53、p53/溶质运载蛋白7家族成员11(SLC7A11)的表达情况。结果 CCK-8法检测结果显示,MDA-MB-231细胞存活率随重楼皂苷浓度的升高而降低,且呈剂量依赖性(P<0.05)。与对照组比较,重楼皂苷组细胞存活率以及CPX4、SLC7A11 mRNA和蛋白相对表达量降低,细胞凋亡率以及TFR...     

血小板膜受体拮抗剂抑制血栓形成的实验研究

血栓形成主要因血小板激活后聚集所致,能否有效地拮抗血小板聚集是防治血栓形成的关键所在。血小板膜受体拮抗剂是目前拮抗血小板聚集最理想的药物,在防治血栓形成中有较为理想的作用。本文研究了血小板膜受体拮抗剂对血栓形成的影响.报告如下。     

吡啶-2,6(1H,3H)二酮生物碱对血小板聚集及血栓素B_2和6-酮-前列腺素_(Iα)的影响

观测ＳＨ１对ＡＤＰ，ＡＡ，Ｃｏｌａｇｅｎ诱导的兔血小板聚集及ＴＸＢ２和６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα生成的影响。用比浊法测定了透骨草提取的单体生物碱结晶ＳＨ１体外对兔血小板聚集的影响，用放免法测定ＴＸＢ２和６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα的含量。结果：ＳＨ１０．８～３．０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内明显抑制ＡＡ，ＡＤＰ，Ｃｏｌａｇｅｎ诱导的兔血小板聚集。ＳＨ１对三种诱导剂的最大抑制率分别为６２．１６％，４５．２５％，５３．６７％。大剂量组明显加快ＡＤＰ诱导的血小板聚集后的解聚速度，ＳＨ１显著延长Ｃｏｌａｇｅｎ的诱导起聚时间。其抑制作用有明显的量效关系，对ＡＡ诱导的ＴＸＢ２产生明显抑制作用，可使６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα的含量略有增加，但６－ｋｅＴＯ－ＰＧＦＩα／ＴＸＢ２比值显著增大     

应用流式细胞术研究剪切力诱导的血小板聚集

目的　建立流式细胞术方法检测剪切力诱导的血小板聚集 (SIPA) ,研究不同剪切力作用后血小板聚集率的变化规律 ,并初步探讨SIPA测定的临床意义。方法　用锥板黏度计对全血标本施加剪切力作用 ,使血小板产生聚集反应 ,再以荧光抗体CD6 1PerCP标记血小板 ,然后进行流式细胞术分析 ,测定血小板聚集率的大小 ;同时在显微镜下直接观察血小板聚集体形态。结果　不同的剪切力作用后 ,血小板产生聚集反应程度不同。在 10 0S-1剪切作用下 ,只有少量的血小板聚集 ;5 0 0S-1时 ,血小板聚集增加 ;在高于 2 0 0 0S-1的剪切作用下 ,30s即可发生明显的血小板聚集 ,30 0 0S-1剪切作用 3min时血小板聚集率为 (5 8 4± 5 3) % ,已接近最大值 ,明显高于 10 0S-1的(9 4± 1 3) %和 5 0 0S-1的 (2 6 4±3 2 ) %。随着剪切力的增大和作用时间的延长 ,血小板聚集体逐渐增大 ,结构由松散到致密。AMI、脑梗死、TIA、糖尿病等动脉血栓相关性疾病患者的高剪切力诱导的血小板聚集明显高于正常。结论　直接的剪切力作用能够诱导血小板发生聚集反应 ,聚集程度与剪切力的大小和作用时间成正相关 ;高剪切力诱导的血小板聚集的测定对于动脉血栓相关性疾病的临床辅助诊断有一定的意义     

Pharmacological studies on the mechanism of pressure inhibition of human platelet aggregation

Platelet shape change and aggregation in response to adenosine diphosphate (ADP), epinephrine, collagen, thrombin, ristocetin, and phorbol myristate acetate (PMA) were studied photometrically at 1 ATA air and 35 ATA helium (He). Pressure inhibited aggregation in response to all agents except PMA. Dose response curves were constructed for ADP and epinephrine at 1 ATA and 35 ATA in the presence of acetylsalicyclic acid (ASA) 2.5 . 10(-4) M, which prevents aggregation due to released ADP and other granular constituents thus allowing study of the effect of the added stimulus alone. Pressure inhibited aggregation and yielded a shallower dose response curve. Pharmacologically, this would be interpreted as non-competitive blockade or reduced availability of receptors. All of the agonist agents inhibited by pressure are dependent upon extracellular Ca2+ for their function. All unmask other receptors (integrins) for adhesive proteins, principally fibrinogen. These integrins incorporate Ca2+ to become active. In contrast, PMA-induced aggregation, and shape change, are independent of extracellular Ca2+ and were unaffected by pressure. It is proposed that pressure may distort Ca2(+)-dependent surface glycoprotein receptors in a manner that reduces ligand affinity and hence inhibits platelet aggregation. The possibility that other calcium-mediated cell processes are affected by pressure cannot be discounted.     

低温与体外循环对血小板活化作用机制研究

目的探讨低温和体外循环对血小板活化作用的机制。方法取成年健康巴马香猪10只,建立体外循环,分别在体外循环前(T_1),体外循环20 min后维持正常体温(T_2),在T_2基础上将温度降到32℃后20 min(T_3)留取4管静脉血,待检测。然后,在T_1、T_2、T_3中的3管静脉血中分别加入甲醇提取残渣(MER)、甲酯磺酸盐(MES)、MER+MES各100μmol,另1管静脉血为对照组,共分为4组,测量4管血中的P-选择蛋白的含量。结果在对照组中,T_2与T_1比较,P-选择蛋白明显升高(P<0.05),T_3与T_1比较,P-选择蛋白进一步升高(P<0.05)。在T_1中,加入MER、MES、MER+MES后的P-选择蛋白无明显变化(P>0.05)。在T_2中,MER、MES组与对照组比较,P-选择蛋白明显下降(P<0.05);但MER组与MES组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);MER+MES组的P-选择蛋白下降的更加显著(P<0.05)。在T_3中,MER、MES组与对照组比较,P-选择蛋白也明显下降(P<0.05);但MER组与MES组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);MER+MES组的P-选择蛋白较之前下降地明显(P<0.05)。结论低温和体外循环中血小板的活化是通过ADP诱导的。     

缺氧条件下冻伤对大鼠血小板数和聚集率的影响

采用健康雄性Ｗｉｓｔｒ大鼠，随机分为平原冻伤组、急性缺氧冻伤组和缺氧习服和缺氧冻伤组。实验观察了大鼠右后腿冻伤后其血小板数和血小板聚集率的发迹结果表明，急性缺氧冻事血小板计数增加；冻冻损伤后，ＦＮ和ＦＡＨ组血小板聚集率明显增加，导致冻伤组织血循环障碍，而ＦＨＡＣ组血小板聚集率明显降低。     

The effects of graded resistance exercise on platelet aggregation and activation

PURPOSE: The purpose of this study was to examine the effects of resistance exercise with varying intensity but with similar volume on platelet aggregation and activation. METHODS: Thirteen healthy male subjects randomly completed three resistance exercise test trials at an intensity corresponding to 40%, 60%, and 80% of one repetition maximum (1-RM) in which the subjects performed six exercises including upper- and lower-body parts. Venous blood samples were obtained before and immediately after each exercise trial and analyzed for platelet count (PLT), plateletcrit (PCT), mean platelet volume (MPV), platelet aggregation, and beta-thromboglobulin (B-TG). Plasma volume changes were estimated from hemoglobin and hematocrit readings before and after each exercise trial. RESULTS: Although all exercise trials were followed by a significant (P < 0.05) increase in PLT (thrombocytosis), PCT, and MPV, this rise was not related to the exercise intensity (P > 0.05). Exercise was also followed by a significant increase (P < 0.05) in platelet aggregation, but this only occurred with the high but not with the low concentrations of adenosine diphosphate (ADP). Although ANOVA showed a significant overall increase (P < 0.05) in the concentration of B-TG after exercise, this rise only reached the assigned level of significance (P < 0.05) after 80% exercise trial. CONCLUSION: It was concluded therefore that resistance exercise is followed by an increase in PLT, PCT, and MPV, and this occurred in parallel with an in vivo activation of platelet as manifested by an increase in platelet aggregation and a rise in B-TG.     

飞行后血小板聚集功能的变化

为观察飞行后血小板聚集功能的变化，在飞行前后即刻，对92名歼-6男性飞行员采耳血进行血小板（PC）与聚集堆（PAGC）计数，同时对其中18名飞行员进行了动态观察（飞行后即刻、10、20、30、60min采耳血，测定血小板与聚集堆个数）。结果表明，飞行后PC与PAGC分别明显减少（P＜0．01）和增加（P＜0．001），二者呈负相关，这种变化多数人自飞行后20min开始恢复，60min时接近飞行前水平，为可逆过程。飞行后PAGC中的PC明显多于飞行前。上述变化与年龄和飞行时间有关。提示飞行应激是影响血小板聚集功能变化的一个因素。     

血小板第4因子对小鼠急性放射损伤的防护作用与机理

目的 探讨血小板第４因子（ＰＦ４）对小鼠７．５Ｇｙβ射线全身照射所致急性放射损伤的防护作用及机理。方法 小鼠照射前２０ｈ于腹腔内注射ＰＦ４两次,间隔６ｈ,每次剂量２０～６０ｕｇ／ｋｇ。观察动物的３０ｄ存活情况及几种造血指标。结果 ３０ｄ存活率对照组和防护组分别为０％和５０％～６０％（Ｐ〈０．０１）;防护组的ＣＦＵ－ＧＭ集落形成数、骨髓细胞ＤＮＡ含量、骨髓有核细胞数、脾结节形成数、脾体比、胸体比等均较照射对照组增加,经统计学处理差异有显著性（Ｐ〈０．０５）或有非常显著性（Ｐ〈０．０１）。结论 ＰＦ４对小鼠急性放射损伤有防护作用。其机理可能同它保护和促进造血功能恢复有关。     

Inhibition of platelet aggregation by contrast media.

The effect of 30% Urografin on platelet aggregation induced by adenosine diphosphate (ADP), epinephrine, and arachidonic acid was examined. In vivo and in vitro experiments in 10 nondiabetic subjects and in vitro experiments in 7 diabetic-uremic patients showed a statistically significant decrease in platelet aggregation 20 minutes after in vitro incubation or in vivo infusion with Urografin. Urografin concentration was about 2.4-2.5%. The possibility of bleeding induced by contrast media and the connection with acute renal failure in diabetic-uremic patients are discussed.