替米沙坦对电压依赖性的Kv1.3和Kv1.5通道电流阻断作用的实验研究

目的 通过观察替米沙坦对电压依赖性的Kv1.3和Kv1.5的阻断作用,探讨替米沙坦对此类通道的阻断可能具有的临床作用.方法 使用双电极电压钳技术记录表达于非洲爪蟾卵母细胞的Kv1.3和Kv1.5钾通道电流,不同浓度灌流观察其对电流影响.结果 (1)替米沙坦浓度依赖性的阻断Kv1.3通道,其阻断的IC50是2.05 μmol/L.替米沙坦对Kv1.3电流的阻断具有电压依赖性.(2)替米沙坦浓度依赖件的阻断Kv1.5通道,其阻断的IC50是2.37 μmol/L.替米沙坦对Kv1.5电流的阻断具有更显著的电压依赖性.结论 替米沙坦阻断开放状态的Kv1.3可能是其发挥免疫调节和抗动脉粥样硬化作用的机制之一.替米沙坦对开放状态的Kv1.5钾通道的阻断可能是其减少心房颤动发生率的作用机制之一.     

乌头碱对表达在卵母细胞上的hKv1.5通道的阻断作用

目的观察乌头碱对表达在卵母细胞上的hKv1.5电流的影响。方法 hKv1.5通道表达在非洲爪蟾卵母细胞上,利用双电极电压钳技术测量其电流。结果①hKv1.5通道可以稳定表达在卵母细胞上;②乌头碱以浓度和电压依赖性方式阻断表达在卵母细胞上的hKv1.5通道,阻断的IC50值是0.796±0.123μmol/L,其Hill系数为0.280±0.020;③乌头碱对hKv1.5电流的阻断呈时间和频率依赖性。结论乌头碱对hKv1.5电流呈浓度、电压和时间依赖性阻断,提示乌头碱可能是一种开放型钾通道阻断剂,它对开放状态和失活状态下的hKv1.5通道均具有阻断作用。     

Kv1.5钾通道与心房颤动

心房颤动是最为常见的心律失常之一。尽管目前有很多药物正应用于心房颤动的治疗,如多非利特、胺碘酮、索他洛尔、普罗帕酮、氟卡尼等,但是人们仍然希望得到一种更为安全有效的抗心律失常药物。理想的治疗心房颤动的药物应是具有高度的心房肌细胞选择性,可以终止或延缓心房颤动的发生,而没有延长Q-T间期或负性肌力的作用。电压门控钾离子通道Kv1.5被认为是实现心房高度选择性理想的药物作用靶点。临床及动物研究证实,Kv1.5钾通道是心房电重构的基础,其阻滞剂可以选择性延长心房有效不应期而终止心房颤动。本文旨在对Kv1.5钾通道的历史、结构、功能和最新的一些阻滞剂做一综述。     

电压依赖性Kv1.5通道的研究进展

电压依赖性钾离子通道Kv1.5是心房肌超快速激活的延迟整流K+电流的分子基础,具有特有的失活机制,Kv1.5通道的表达和功能受多种因素影响,其电流改变在房颤的发生和维持中起重要作用.特异性Kv1.5通道阻滞剂能通过不同的方式来抑制Kv1.5电流,可能会防止房颤的发生,而无室性心律失常的危险.     

厄贝沙坦联合倍他乐克对老年心房颤动患者的疗效

<正>心房颤动(简称房颤)是一种最常见的持续性心律失常,具有较高的发病及死亡率〔1〕。正常人群中,房颤的发病率大概是0.77%,且随着年龄的增长而升高。超过70岁的人群房颤的发病率超过6%〔2〕。这种高发率使得心血管并发症(如恶性心律失常、脑卒中及心衰等)的发生率也有所上升。阵发性房颤中应用厄贝沙坦能有效减少初发房颤及永久性房颤的发生率〔3〕。β受体阻滞剂如倍他乐克能够直接抑制交感活性,从而     

乌头碱阻断表达在卵母细胞上的HERG通道的电药理特性

目的观察乌头碱对表达在卵母细胞上的HERG电流的影响。方法HERG通道表达在非洲爪蟾卵母细胞上,利用双电极电压钳技术测量其电流。结果①HERG通道可以稳定表达在卵母细胞上;②乌头碱以浓度和电压依赖性方式阻断表达在卵母细胞上的野生型HERG通道,阻断的半数抑制浓度值是1.801±0.332μmol/L;③乌头碱对HERG电流的阻断呈时间依赖性;④峰电流幅值被1μmol/L乌头碱显著降低,而稳态失活的半数失活电压(-39.10±1.04 mV vs-41.61±2.66 mV,P>0.05,n=6)没有被乌头碱的阻断显著改变,而斜率k(32.37±1.04 mV vs 41.05±4.19 mV,P<0.05,n=6)出现正向移动。结论乌头碱对HERG电流呈浓度、电压和时间依赖性阻断,而其对失活状态下的HERG通道无明显阻断作用,HERG通道可能是乌头碱致心律失常的关键离子靶点之一。     

厄贝沙坦对高血压并阵发性房颤患者房颤复发的影响

目的:评价厄贝沙坦对高血压并发阵发性房颤(PAF)患者的抗心律失常效应.方法:选取99例高血压并发PAF患者,分成厄贝沙坦治疗组(A组)49例和氨氯地平治疗组(B组)50例,在口服胺碘酮的基础上分别加用厄贝沙坦、氨氯地平治疗12个月.比较2组治疗后第3、6、12个月房颤复发率和治疗后第6、12个月的左心房内径(LAD)...     

帕罗西汀对Nav1.5通道电流的作用

目的研究帕罗西汀(paroxetine,Par)对异源性表达的Nav1.5通道电流的作用。方法用瞬时转染的方法将Nav1.5质粒导入HEK293细胞内,利用膜片钳技术观察Par对Nav1.5通道电流的作用。结果 10.0μmol/L Par可以明显降低Nav1.5电流密度,在-30 mV电压下,使Nav1.5电流密度从(-214.3±10.2)pA/pF降至用药后(-113.4±9.8)pA/pF(n=10,P<0.01),此作用成浓度依赖性,其半数抑制浓度(IC_(50))为9.4μmol/L,Hill系数为0.93。门控动力学研究显示,Par使通道稳态失活曲线向超极化方向移动,且使Nav1.5电流关闭态失活的时间常数明显缩短,延长失活后恢复时间常数,而对通道稳态激活、中间态失活过程影响较小,提示此抑制效应与Par增加通道稳态失活和中间态失活、减少失活后恢复有关。结论 Par可降低Nav1.5通道的电流密度。     

厄贝沙坦对早期糖尿病肾病的血压非依赖性降尿蛋白作用

46例早期糖尿病肾病患者随机分为对照组与厄贝沙坦治疗组各23例，在将血压及血糖控制稳定的情况下，进行治疗前后对比性分析。结果：两组病人经过治疗12周后，通过观察指标分析厄贝沙坦组的24h尿蛋白排泄率、血清hs-CRP水平均明显降低（P〈0．05）。结论：厄贝沙坦确有血压非依赖性降尿蛋白效应，此效应与其阻断AII作用外，还与其具有阻止血管重塑和血管内皮炎症细胞的粘附作用有关。提示厄贝沙坦在治疗早期糖尿病肾病中可延缓患者病情及肾脏损害。     

厄贝沙坦对早期糖尿病肾病的血压非依赖性降尿蛋白作用

46例早期糖尿病肾病患者随机分为对照组与厄贝沙坦治疗组各23例,在将血压及血糖控制稳定的情况下,进行治疗前后对比性分析.结果两组病人经过治疗12周后,通过观察指标分析厄贝沙坦组的24h尿蛋白排泄率、血清hs-CRP水平均明显降低(P＜0.05).结论厄贝沙坦确有血压非依赖性降尿蛋白效应,此效应与其阻断AⅡ作用外,还与其具有阻止血管重塑和血管内皮炎症细胞的粘附作用有关.提示厄贝沙坦在治疗早期糖尿病肾病中可延缓患者病情及肾脏损害.     

酮色林对表达在卵母细胞上的Kv1.3通道的抑制作用

目的:研究酮色林(KT)对表达在卵母细胞上的Kv1.3通道的作用,探讨其作为心血管药物的潜在免疫效应。方法:在非洲爪蟾卵母细胞表达Kv1.3cRNA通道基因,使用双电极电压钳技术记录通道电流,并用药物干预。结果:KT对Kv1.3通道产生浓度依赖性和可逆性抑制效应,其抑制钾通道50%时的浓度(IC50)为(14.3±1.4)μmol/L。在10μmol/L浓度下,KT降低Kv1.3电流幅值达(43.1±3.2)%;在20μmol/L时降低达(54.1±3.2)%。KT的主要效应是降低电流幅度,对激活曲线和失活曲线无显著影响。对稳态激活曲线,在对照条件下,50%最大激活时的膜电位(V1/2)和曲线斜率(k)分别是(-23.8±0.4)mV和(7.2±0.3);应用10μmol/LKT后,V1/2和k分别是(-22.6±0.5)mV和(8.0±0.4);应用20μmol/LKT后,V1/2和k分别是(-22.3±0.5)mV和(8.1±0.5)。对失活曲线,在对照条件下,V1/2和k分别是(-46.7±0.7)mV和(9.0±0.6);应用10μmol/LKT后,V1/2和k分别是(-48.4±0.7)mV和(8.9±0.7);应用20μmol/LKT后,V1/2和k分别是(-49.2±0.6)mV和(8.8±0.5)。结论:KT在临床相关浓度内,对表达在卵母细胞上的Kv1.3通道有显著的抑制作用。其可能通过抑制淋巴细胞Kv1.3通道,从而抑制淋巴细胞的激活,而在心血管疾病的治疗中有潜在的免疫调节作用。     

心房颤动患者Kv1.5 mRNA表达的研究

目的 :通过对慢性心房颤动患者超速延迟振流性钾通道 (Kv 1.5 )mRNA表达的研究探讨其表达与AERP的关系。方法 :心脏标本取自慢性心房颤动患者和窦性心律患者的右心耳组织 ,用RT PCR法分析Kv 1.5的mRNA的表达变化。结果 :慢性心房颤动患者的Kv 1.5mRNA表达相对于窦性心律患者显著减少 (P <0 .0 1)。结论 :钾离子通道Kv 1.5mRNA的减少可能是对抗AERP的缩短而产生的结果。     

环孢素A对心房颤动犬心房钾通道蛋白Kv1．5的影响

目的：研究环孢素A（CsA）作用下心房颤动犬心房钾离子通道蛋白Kv1．5表达变化。方法：实验犬分为环孢素A干预组（CsA组）、心房纤颤（AF组）及假手术组（Sham组）三个处理组，应用Western免疫印迹技术比较各组间钾离子通道蛋白Kv1．5表达的差异。结果：AF组较Sham组钾通道蛋白Kv1．5表达明显降低（P〈0．01）；CsA组较AF组钾通道蛋白Kv1．5升高（P〈0．01），CsA组与Sham组之间差异不明显（P〉0．05）。结论：CsA逆转了心房颤动犬心房钾离子通道蛋白Kv1．5表达变化，可能会在心房纤颤的治疗中发挥积极的意义。     

持续性心房颤动患者心房肌内向整流钾电流的研究

目的研究不同病程持续性心房颤动(房颤)患者心房肌内向整流钾电流(IK1)的变化,探讨其与房颤自我发展的可能关系。方法采用急性酶消化法分离单个心房肌细胞。以窦性心律(窦律)的风湿性心脏病患者为对照,应用膜片钳全细胞技术记录房颤≤6个月和>6个月的风湿性心脏病患者心房肌IK1。结果与窦律组相比,在-50~-100mV之间,房颤≤6个月组心房肌IK1密度无明显改变,房颤>6个月组心房肌IK1密度绝对值明显增大(P<0.05)。与房颤≤6个月组相比,房颤>6个月组心房肌IK1密度绝对值也明显增大(P<0.05)。在-100mV,IK1密度绝对值在窦律组为(4.05±0.96)pA/pF(n=18),房颤≤6个月组为(4.35±0.49)pA/pF(n=18),房颤>6个月组为(8.94±0.15)pA/pF(n=18)。结论心房肌IK1在持续性房颤自我发展过程的表现不同,IK1的这种表现可能有利于房颤的自我发展。     

银杏叶提取物对超极化激活的环核苷酸门控基因编码的起搏通道电生理特性的影响

目的研究银杏叶提取物对异源表达在卵母细胞上的超极化激活的环核苷酸门控通道（HCN）2、4阻断的电药理学特性及分子机制。方法将人HCN2、4的mRNA显微注射到非洲爪蟾卵母细胞后,利用双电极电压钳技术记录通道电流。结果银杏叶提取物呈浓度依赖性阻滞表达在爪蟾卵母细胞上HCN2、4通道,药物半量抑制浓度IC50值分别为0.12±0.05 mg/ml和0.25±0.01 mg/ml。银杏叶提取物对HCN2、4通道阻断的阻断作用是不可逆的,经过15-20 min药物洗脱,阻滞的HCN电流部分并没有完全恢复到对照水平,只能恢复大约55%-75%。在-110 mV时银杏叶提取物对激活时间常数的值明显增大,对HCN2通道从504.6±39.8 ms（n=8）增为588.4±21.7 ms（0.03 mg/ml,n=8,P〈0.05）,1176.4±57.3 ms（0.3 mg/ml,n=8,P〈0.05）;对HCN4通道从1330.5±59.8 ms（n=8）增为1973.1±83.6 ms（0.03 mg/ml,n=8,P〈0.05）,而银杏叶提取物对HCN电流的去激活时间常数并未明显改变。结论银杏叶提取物以浓度依赖性方式不可逆的作用于HCN2、4通道,且对HCN4通道的抑制作用强于HCN2通道,减慢了通道的激活动力学,而对通道的去激活动力学无明显影响。     

心房颤动患者乙酰胆碱依赖性钾通道和快速延迟整流钾通道基因表达的研究

目的研究心房颤动(AF)患者心房组织中乙酰胆碱依赖性钾通道(Kach)和快速延迟整流钾通道(Kr)的基因表达。探讨AF时心房组织Kach和Kr的mRNA表达改变及其意义。方法自20例因风湿性心脏病或先天性心脏病接受外科手术的患者,于术中采取的右心耳标本分为2组,窦性心律(SR)组14例,慢性AF组6例,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,检测心房组织Kach和Kr基因表达。结果心房组织中Kir34(Kach的一种成分)和KrmRNA的表达,与SR组051±005相比AF组029±005下调43%,差异有显著性(P<0001),而KrmRNA水平在SR组056±003和AF组057±003之间无明显改变,差异无显著性(P>005)。结论房颤患者KachmRNA表达下调,可能是心房肌细胞IKach密度减弱的分子基础。Kr转录水平无明显改变。     

急性冠状动脉综合征患者的CD4+CD28null T淋巴细胞电压门控性Kv1.3钾通道数量增加

目的 运用膜片钳技术检测急性冠状动脉综合征(ACS)患者的CD4+CD28nullT淋巴细胞Kv1.3钾通道的数量是否增加,探讨CD4+CD28nullT淋巴细胞上Kv1.3钾通道的表达.方法 选择17例ACS患者,11例年龄、性别匹配的正常体检者作为对照.运用荧光染色标记及膜片钳技术检测单个T淋巴细胞(CD4+CD28nullT淋巴细胞和CD4+CD28+T淋巴细胞)上Kv1.3钾通道的数量,比较Kv1.3通道在两种细胞上的差别.结果 ACS患者的CD4+CD28nullT淋巴细胞比例为(6.97±2.05)%,明显高于对照组的(1.38±0.84)%(P<0.05).ACS患者的CD4+CD28nullT淋巴细胞数量与hsCRP浓度呈正相关(r=0.52,P<0.05).ACS患者CD4+CD28nullT淋巴细胞Kv1.3通道的电导、密度、数量明显高于对照组CD4+CD28+T淋巴细胞(P<0.01).而两组CD4+CD28+T淋巴细胞间Kv1.3通道的电导、密度、数量差异无统计学意义(P>0.05).结论 ACS患者CD4+CD28nullT淋巴细胞明显增多.ACS患者CD4+CD28nullT淋巴细胞上Kv1.3钾通道数量比自身和对照的CD4+CD28+T淋巴细胞明显增多,CD4+CD28nullT淋巴细胞的功能可能与Kv1.3钾通道增多相关.     

持续性心房颤动患者心房肌细胞L型钙通道电流变化的研究

目的比较窦性心律(窦律)患者和持续性心房颤动(房颤)患者心房肌细胞L-型钙通道电流密度及通道电压依赖的激活和失活特性变化。方法应用两步酶解法获得单个人体心房肌细胞,采用常规全细胞膜片钳技术记录L-型钙通道电流,观察18例窦律患者和12例持续房颤患者右心房肌L-型钙通道电流密度及动力学特性变化。结果(1)持续房颤组与窦律组相比,L-型钙通道电流密度降低,测试脉冲从-40~0mV时的L-型钙通道电流密度分别为(-4.58±0.39)pA/pF(n=21)和(-1.32±0.19)pA/pF(n=12),两组比较P<0.01。(2)动力学特性:窦律组与持续房颤组比较,通道激活曲线参数半数最大激活电压(V1/2)、斜率因子(K)以及失活曲线参数半数最大失活电压(V1/2)、斜率因子(K)差异均无统计学意义。结论持续房颤患者心房肌细胞L-型钙通道电流密度明显降低,其通道动力学特性变化差异无统计学意义。L-型钙通道电流密度的变化是房颤时“心房电生理重构”离子机制之一。