内毒素介导的肾脏病变及其发生机理的实验研究

研究内毒素介导的大鼠肾功能和形态变化，并探讨其发生机理。结果发现：肾功能于注射内毒素（ＬＰＳ）后１ｈ明显减退，５ｈ达高峰，４８ｈ基本恢复。肾小球出现早期短暂的毛细血管收缩，随后扩张，肾小球内中性粒细胞和血小板聚集，内皮细胞和系膜细胞肿胀或增生，足细胞足突融合，基底膜局部增厚等形态学改变，并且有肾组织中ＴＸＢ＿２，６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）及丙二醛含量增高。作者推测，ＴＸＢ＿２、６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α）含量升高和两者间比例失衡可能是ＬＰＳ介导肾功能障碍的重要起始因素，氧自由基在ＬＰＳ介导的肾功能障碍发生、发展中起重要作用。     

枸杞子水提取物对白细胞介素6和肿瘤坏死因子产生的影响

研究了枸杞子水提取物（ＬＢｒ）对全血培养细胞白细胞介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）产生的影响。结果表明，ＬＢｒ单独不能诱导ＴＮＦ产生，ＬＢｒ０．５μｇ／ｍｌ可明显促进ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ产生，但ＬＢｒ１０μｇ／ｍｌ则对ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ产生无明显作用ｉＬＢｒ０．５μｙ／ｍｌ不仅可促进ＬＰＳ诱导的ＩＬ－６产生，单独亦可诱导ＩＬ－６产生，但ＬＢｒ１０μｇ／ｍｌ则对ＩＬ－６的产生无明显调节作用。     

α-黑素细胞刺激素体外对星形胶质细胞产生NO和前炎性细胞因子的影响

目的：研究α－黑素细胞刺激素（α－ＭＳＨ）对ＬＰＳ诱导星形胶质细胞产生ＮＯ和前炎性细胞因子的影响。探讨α－ＭＳＨ的抗炎作用机制。方法：分别用ＬＰＳ或α－ＭＳＨ＋ＬＰＳ处理体外培养的大鼠脑星形胶质细胞,用Ｇｒｉｅｓｓ试剂测定ＮＯ,以ＭＴＴ显色法检测ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦ－α,采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＩＦｍＲＮＡ表达。结果：体外培养的星形胶质细胞在ＬＰＳ刺激下产生ＮＯ、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α和表达ＭＩＦｍＲＮＡ表达。结果：体外的星形胶质细胞在ＬＰＳ刺激下产生ＮＯ、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α和表达ＭＩＦｍＲＮＡ显著增高;若同时给予ＬＰＳ和α－ＭＳＨ,可明显降低ＮＯ、ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦ－α的产生以及ＭＩＦｍＲＮＡ表达。结论：Ｒ昧α－ＭＳＨ抑制星形胶质细胞产生ＮＯ和前炎性细胞因子与其抑制中枢神     

白细胞介素10基因转移抑制肾小球系膜细胞诱生炎症细胞因子

目的：通过建立白细胞介素１０（ＩＬ－１０）的重组逆转录病毒载体基因转移系统,观察ＩＬ－１０对脂多糖（ＬＰＳ）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｍｅｓｅｎｇｉａｌｃｅｌ,ＧＭＣ）中细胞因子的产生及其基因表达的影响。方法：通过构建的重组逆转录病毒载体ｐＬＸ（ＩＬ－１０）ＳＮ将外源基因ＩＬ－１０转移至大鼠ＧＭＣ：（１）应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）,反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ检测ＩＬ－１０基因的整合和表达;（２）以ＲＴ－ＰＣＲ观察ＩＬ－１０基因转移对ＬＰＳ诱导的ＧＭＣ肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）的ｍＲＮＡ表达的影响,以ＥＬＩＳＡ测定白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）和ＴＮＦ－α的蛋白质表达。结果：外源性ＩＬ－１０基因已整合到靶细胞染色体ＤＮＡ并有效地表达,它能抑制ＬＰＳ诱生ＧＭＣ过度产生ＩＬ－１β,ＴＮＦ－α。结论：外源性ＩＬ－１０基因可以转移到ＧＭＣ并稳定表达,它能抑制ＧＭＣ炎症效应中细胞因子的产生及其基因表达。     

溶菌酶对头孢他啶诱导的细菌内毒素释放的抑制作用

目的研究溶菌酶对头孢他啶诱导的细菌内毒素（ＬＰＳ）释放抑制作用。方法头孢他啶作用于对数生长期的Ｅ．ｃｏｌｉＯ１１１∶Ｂ４,ＳａｌｍｏｎｅｌａｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍＬＴ２或Ｅ．ｃｏｌｉＪ５,培养液中含或不含溶菌酶。抗菌素作用３小时后,收集培养上清,测定释放到上清液中的内毒素浓度;将培养上清加入到巨噬细胞中,测定ＴＮＦ－α和ＩＬ－６诱生能力。结果头孢他啶５０μｇ／ｍｌ可引起３种细菌迅速溶解,并导致较高浓度的内毒素释放到培养上清液中,该上清液在体外培养的巨噬细胞上和小鼠体内诱导大量的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）和白细胞介素６（ＩＬ－６）产生;溶菌酶可阻止头孢他啶引起的细菌溶解,但不影响其杀菌效力,同时明显降低培养上清中的内毒素浓度;并降低对巨噬细胞炎性因子的诱导能力。结论溶菌酶能抑制头孢他啶诱导的细菌内毒素释放     

细菌内毒素及其诱导的细胞因子在革兰氏阴性菌败血症休克中的作用

细菌内毒素（ＬＰＳ）是引起革兰氏阴性菌（ＧＮＢ）败血症休克的重要始动因素，ＬＰＳ通过与宿主体内相应受体结合，诱导效应细胞释放多种炎性细胞因子，如ＴＮＦ－α、ＩＬ－１和ＩＬ－６等。动物模型和临床研究表明，ＬＰＳ攻击动物或ＧＮＢ感染患者的血循环中炎性细胞因子均可明显增加，且与预后的关系密切。因此，针对ＬＰＳ致病过程特点以及细胞因子在ＧＮＢ败血症休克中的作用，寻找有效降低败血症休克病死率的方法已成为当今抗感染免疫研究领域的重点。     

全反式维甲酸可增强大鼠系膜细胞基质金属蛋白酶-2表达

一、材料与方法１．大鼠系膜细胞（ＭｓＣ）的培养与鉴定：１５０～２００ｇＳＤ大鼠购自本校动物部，取肾皮质，分离肾小球，培养与鉴定ＭｓＣ按本实验室常规方法进行［１］。实验用细胞为１０～１５代。２．Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ法检测基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）ｍＲＮＡ：当ＭｓＣ长至亚融合状态后，分别在完全培养液中加入全反式维甲酸（ＡＴＲＡ，Ｓｉｇｍａ公司）１０－６、１０－７、１０－８、１０－９、０ｍｏｌ／Ｌ处理２４小时；另在亚融合状态ＭｓＣ加１０－６ｍｏｌ／Ｌ全反式维甲酸分别处理０、６、１２、２４、４…     

LPS刺激人单核细胞、肾小球系膜细胞和内皮细胞合成血小板活化因子是受L

ＬＰＳ刺激人单核细胞、肾小球系膜细胞和内皮细胞合成血小板活化因子是受ＬＰＳ结合蛋白和ＣＤ１４调控的［英］／ＣａｍｕｓｓｉＧ…∥ＪＩｍｍｕｎｏｌ．－１９９５．１５５．－３１６～３２４在革兰氏阴性菌引起的败血症中出现血小板活化因于（ＰＡＦ）合成增多，这是...     

细胞因子对肾小球系膜细胞合成PAF的影响

本文首先建立了血小板活化因子（ＰＡＦ）的生物活性检测法，并通过体外细胞培养技术，测定了肾小球系膜细胞在经ＬＰＳ、ＩＬ-１β、ＩＬ-６和ＴＮＦα的短暂刺激后，其培养上清中ＰＡＦ的活性。结果发现，它们均能诱导系膜细胞合成和分泌ＰＡＦ，ＩＬ-１β、ＩＬ-６和ＴＮＦα的诱生作用并呈一定的剂量依赖关系。实验提示上述因子在肾小球免疫病理损伤中，除直接作用外，也可通过诱生ＰＡＦ而间接发挥作用。应用ＰＡＦ拮抗剂来阻断这一途径，可能具有一定的临床应用价值。     

抗细菌核心糖脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放TNF－α和IL－6及其mRNA表达的影响

用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６及其ｍＲＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＴＮＦ－α和ＩＬ－６的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能分别降低细胞ＴＮＦ－α和ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可能通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ，从而降低或阻碍了效应细胞炎性细胞因子ｍＲＮＡ的表达，达到降低相应细胞因子的作用。     

大鼠失血性休克对内毒素诱导TNFα产生的影响及其分子机制

笔者观察了大鼠失血性休克（ＨＳ）对内毒素诱导肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）产生的影响及其细胞来源，并结合休克后组织内脂多糖结合蛋白（ＬＢＰ）ｍＲＮＡ的表达变化，对其分子机制进行了初步分析。研究结果显示，静脉注射ＬＰＳ后９０ｍｉｎ，ＨＳ＋ＬＰＳ组血浆ＴＮＦα水平分别较ＨＳ组高２０倍（Ｐ＜０．０１），ＬＰＳ组高２．７倍（Ｐ＜０．０５）；休克和复苏后，外周血白细胞产生ＴＮＦα的能力明显受抑，而肝Ｋｕｐｆｅｒ＇ｓ细胞产生ＴＮＦα的能力却明显增强；休克后不仅肝组织内ＬＢＰｍＲＮＡ表达增多，肺、肾组织内ＬＢＰｍＲＮＡ也相继表达增加。研究结果提示，失血性休克能显著增敏内毒素诱导ＴＮＦα的产生作用，其机制可能与休克后组织内ＬＢＰ表达上调有关，组织巨噬细胞群（如Ｋｕｐｆｅｒ细胞）可能是休克后细胞因子产生的主要来源。     

氧化氮对内毒素诱导的人中性粒细胞产生TNF－α的调节

氧化氮对内毒素诱导的人中性粒细胞产生ＴＮＦ－α的调节［英］／ＡｌａｎＬ…／／ＪＩｍｍｕｎｏｌ．－１９９４，１５２（８）．－４１０２～４１０７文章研究氧化氮对脂多糖（ＬＰＳ）诱生人中性粒细胞产生ＴＮＦ－α的影响。人中性粒细胞接触ＬＰＳ或ＩＦＮ－γ并不显...     

重组白细胞介素1对系膜细胞产生与表达白细胞介素6的影响

采用ＩＬ－６依赖型细胞株ＫＤ８与Ｎｏｒｔｈｅｍｂｌｏｔ方法观察了重组ＩＬ－１对人胎肾小球系膜细胞产生与表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ的影响，结果表明，重组ＩＬ－１加入系膜细胞培养体系中，ＩＬ－６活性与ｍＲＮＡ表达均明显高于对照组，提示重组ＩＬ－１可促进系膜细胞产生与表达ＩＬ－６。     

肾及尿路疾患病人尿IL－6的检测及其临床意义

肾及尿路疾患病人尿ＩＬ－６的检测及其临床意义［英］／ＯｈｔａＫ…／／ＣｌｉｎＮｅｐｈｒｏｌ．－１９９２，３８（４）．－１８５～１８９ＩＬ－６在宿主炎症及免疫反应中担负着重要作用。据报道肾小球系膜细胞可产生ＩＬ－６，因而推测ＩＬ－６可能与系膜增生性肾小...     

细胞因子,地塞米松对肾小球系膜细胞表达细胞间粘附分子—1的影响

探讨细胞因子和地塞米松对肾小球系膜细胞表面表达细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的影响。通过体外系膜细胞培养的方法，分别加入不同的细胞因子，观察其浓度及作用时间产生的影响；并用ＥＬＩＳＡ法检测不同浓度的地塞米松对系膜细胞表达ＩＣＡＭ－１的影响。结果显示系膜细胞表达ＩＣＡＭ－１的强弱与细胞因子的作用呈剂量、时间依赖关系；随着地塞米松浓度的增加，ＩＣＡＭ－１表达逐渐减弱，与未加地塞米松组相比相关均非常     

LPS导致小鼠多脏器损伤的形态学研究

ＬＰＳ导致小鼠多脏器损伤的形态学研究戴书静牛建昭魏育林＊（北京中医药大学组胚教研室）（＊中日友好医院临床研究所）ＬＰＳ（脂多糖）为内毒素的主要成分，可导致多脏器损伤，在内毒素休克中起重要作用。近年来，ＬＰＳ在凋亡诱导中的作用也多有报导。本实验观察了小...     

细胞因子对肾小球系膜细胞增殖的影响

应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和ＭＴＴ比色法，观察了人重组ＩＬ－１β，ＩＬ－６和ＴＮＦα对体外培养的成人肾小球系膜细胞增殖的影响，结果表明，在无血清培养条件下，ＨｒＩＬ－１β，ＨｒＩｌ－６和ＨｒＴＮＦα在一个较大的浓度范围内，均不能刺激系膜细胞的增殖；而有少量胎牛血清存在时，ＨｒＩＬ－６和ＨｒＴＮＦα可以促进系膜细胞增殖，但ＨｒＩＬ－１β无此作用另外，在实验中还发现，雷公藤多甙（ＴⅡ）对系膜细胞生长具有     

双歧杆菌表面分子对LPS在小鼠体内调节胸腺细胞凋亡的观察

目的研究双歧杆菌表面分子细胞壁肽聚糖（ＷＰＧ）、脂磷壁酸（ＬＴＡ）对ＬＰＳ体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡的调节。方法用ＤＮＡ凝胶电泳、ＴＵＮＥＬ法检测ＷＰＧ、ＬＴＡ对ＬＰＳ体内诱导小鼠胸腺细胞凋亡的影响,并分别用生物活性法和Ｇｒｉｅｓｓ反应测定ＷＰＧ、ＬＴＡ、ＬＰＳ体外诱生ＴＮＦ－α、ＮＯ２－的含量。结果ＷＰＧ、ＬＴＡ可显著抑制ＬＰＳ体内诱导的小鼠胸腺细胞的凋亡。ＷＰＧ、ＬＴＡ单独刺激巨噬细胞时所诱生的ＴＮＦ－α、ＮＯ的量显著低于ＬＰＳ刺激时所产生的这两种活性介质的量,而ＷＰＧ、ＬＴＡ与ＬＰＳ共同应用时可显著降低ＬＰＳ诱导巨噬细胞产生的ＴＮＦ－α、ＮＯ的量;诱生型一氧化氮合成酶抑制剂Ｓ－甲基异硫脲硫酸盐体外可抑制巨噬细胞产生的ＮＯ的量,在体内可部分抑制ＬＰＳ诱导的小鼠胸腺细胞的凋亡。结论ＷＰＧ、ＬＴＡ与ＬＰＳ共同应用时,可抑制ＬＰＳ诱导的巨噬细胞产生的ＴＮＦ－α、ＮＯ的量,从而下调ＬＰＳ体内诱导小鼠胸腺细胞的凋亡     

内皮素与肾小球系膜细胞的关系

为了解内皮素及其受体与肾小球系膜细胞的关系，应用了细胞培养、逆转录－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交、ＤＮＡ定量分析及免疫组化ＡＢＣ法进行研究。结果显示，系膜细胞既有内皮素ｍＲＮＡ表达，又有两种亚型内皮素受体（Ａ和Ｂ）的ｍＲＮＡ表达；进而可翻译合成内皮素；而内皮素可使系膜细胞收缩及分裂增殖。结果表明：系膜细胞可以产生内皮素，并接受内皮素的作用；内皮素通过致系膜细胞收缩作用，影响肾小球毛细血管的滤过面积，参与肾小球滤过率的调控；内皮素刺激系膜细胞增生，进而系膜基质增多，形成肾小球的病变。     

炎症因子对肾小球系膜细胞分泌IL—8的影响

目的：观察炎症因子ＩＬ－１及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）对人肾小球系膜细胞（ＨＭＣ）分泌ＩＬ－８的影响。方法：体外细胞培养技术及ＥＬＩＳＡ夹心法。结果：ＩＬ－１、ＴＮＦ均可诱导ＨＭＣ分泌ＩＬ－８，并呈剂量依赖性。结论：在一些炎症因子刺激下，ＨＭＣ可能通过分泌趋化因子ＩＬ－８参与肾脏炎症反应的启动和维持