瘦素及其受体系统在子宫内膜的表达

目的　研究瘦素 (Leptin)及其受体 (Obgenereceptor ,Ob -R)在子宫内膜的表达 ,探讨Leptin对女性生殖的影响。方法　分别用免疫组织化学和原位杂交技术检测Leptin、具信号传导功能的Leptin长受体 (Ob -Rb)在子宫内膜 (39例 ,增殖期 2 4例 ,分泌期 15例 )的表达。结果　 (1)Leptin、Ob -RbmRNA及其蛋白在人的子宫内膜的腺体及间质均呈阳性表达。 (2 )Ob -Rb蛋白在分泌期子宫内膜的表达明显高于增殖期 ,差异有极显著性P <0 0 1)。Leptin蛋白在不同期子宫内膜的表达差异无显著性。 结论　瘦素和瘦素受体系统在孕卵着床和种植过程中可能发挥重要作用。     

瘦素及其受体在子宫内膜异位症中的表达

目的测定瘦素(leptin)及其受体在子宫内膜异位症组织中的表达,探讨瘦素及其受体与子宫内膜异位症的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测21例手术后病理确诊的子宫内膜异位症患者的异位内膜及其诊刮的子宫内膜组织中瘦素受体mRNA表达,同时以17例因功能性子宫出血而行全子宫切除手术的子宫内膜组织中瘦素受体mRNA表达水平为对照。并采用放射免疫法(RIA)检测两组患者血清中瘦素水平。结果子宫内膜异位症患者与对照组血清瘦素水平比较差异无显著性(P>0.05)。异位子宫内膜组与自体子宫内膜及对照子宫内膜均有瘦素受体表达,而前者与后两者之间有显著性差异(P<0.05),后两者之间无显著性差异(P>0.05)。结论瘦素及其受体并非通过影响体内激素代谢而导致子宫内膜异位症的发生,可能参与腹腔内环境的改变而成为子宫内膜异位症发生的相关因素之一。     

胚泡着床过程中小鼠子宫内膜细胞表面糖基变化的研究

目的：探讨细胞表面糖基在胚泡着床中的作用,方法：用刀豆凝集素（ConA)、荆豆凝集素（UEA）、胚凝集素（WGA）、花生凝集素（PNA）和麦凝集素（WGA）为分子探针作亲合细胞化学染色,检测了与4种凝集素相对应的受体糖基在小鼠子宫内膜中的表达变化。结果：在胚泡植入期间,ConA受体一直为弱阳性,变化不明显;UEA受体主要分布于内膜表面上皮和腺上皮细胞表面,随妊娠天数增加含量逐渐减少直至消失;PNA受体出现于孕5d在着床处的蜕膜细胞膜上明显增多;着床前期;WGA受体主要分布于子宫内膜表面皮和腺上皮细胞膜上,胚胎植入后,WGA受体在着床处的蜕膜细胞膜上明显增多,结论：在着床期子宫内膜各种细胞的凝集素受体糖基呈现规律性变经,提示了宫内膜糖基的变人与胚泡着床密切相关。     

小鼠子宫内膜胚泡着床点及旁组织白血病抑制因子基因表达研究

目的:探讨白血病抑制因子(LIF)基因在小鼠胚泡着床窗口期了宫内膜表达的特定部位.方法:采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),对20只孕期第4天的小鼠子宫内膜着床点和旁组织的LIF mRNA进行检测.结果:20只孕期第4天的小鼠着床点LIF mRNA表达平均水平为0.5316,旁组织LIF mRNA表达平均水平为0.3711.统计处理t检验差异具有显著性(P＜0.05).结论:在胚泡着床窗口期,小鼠子宫内膜胚泡着床点和旁组织LIF基因表达存在差异.     

瘦素及瘦素受体与子宫内膜异位症关系研究

目的探讨瘦素与瘦素受体在子宫内膜异位组织中的表达。方法选取32例子宫内膜异位症患者作为内异组,并选取同期行输卵管结扎术的32例妇女作为对照组,分别采取两组患者的血清、腹腔液（PF）和腹膜组织（PI）。内异组患者切除子宫内膜异位囊肿,切取囊肿组织（OE）,并吸取囊肿液（EF）。采用Westernblot法测定PI和OE瘦素及瘦素受体表达水平。采用ELISA法测定血清、PF及EF中的瘦素水平。结果两组PI中瘦素和瘦素受体表达水平比较,差异均无统计学意义（均P＞0.05）,而内异组OE中瘦素和瘦素受体表达水平均较PI中瘦素及瘦素受体表达水平明显增高（均P＜0.05）。两组血清及PF中瘦素水平比较,差异均无统计学意义（均P＞0.05）。但内异组EF中瘦素水平明显高于血清及PF中瘦素水平,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。内异组患者OE与EF、PI与PF、OE与PF的瘦素表达水平均呈正相关（均P＜0.05）。OE中瘦素与瘦素受体、EF瘦素与OE瘦素受体、PI中瘦素与瘦素受体、PF瘦素与PI瘦素受体均呈正相关（均P＜0.05）,而PF瘦素与OE瘦素受体表达水平无相关性（P＞0.05）。结论瘦素通过与瘦素受体之间的相互调节作用在子宫内膜异位囊肿的发病过程中扮演了非常重要的角色。     

TACE在着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞中的表达及其抗体对胚泡粘附的影响

目的:通过检测肿瘤坏死因子α转换酶(Tumor necrosis factor α convening enzyme,TACE)在小鼠子宫内膜上皮细胞中的表达及其在体外着床模型中对胚泡粘附的影响,初步探讨TACE在小鼠生殖中的作用以及其与胚胎着床的关系.方法:体外培养孕4d(d4)小鼠子宫内膜上皮细胞和胚泡,构建胚泡体外着床模型;通过细胞免疫组化鉴定小鼠子宫内膜上皮细胞;运用RT-PCR和细胞免疫组化分别检测小鼠子宫内膜上皮细胞中TACE mRNA和蛋白的表达;向体外着床模型中添加不同浓度的TACE抗体,观察对胚泡体外着床的影响,并用细胞免疫化学检测抗体干预后各培养体系中TACE蛋白质的表达情况.结果:原代培养小鼠子宫内膜上皮细胞生长旺盛,鉴定结果显示:上皮细胞对角蛋白抗体有棕黄色阳性表达,对波形蛋白抗体为阴性表达.PCR结果显示TACE mRNA在共培养体系中有高表达,免疫组化结果与RT-PCR结果相一致;小鼠胚泡体外共培养具有较高的粘附率,添加TACE抗体后胚泡帖附率均显著低于对照组帖附率(P<0.05),且随着抗体浓度的降低胚泡粘附率随之升高,免疫化学检测结果也显示随着抗体浓度的降低TACE的表达量随之升高.结论:TACE可能参与了胚泡着床过程,有利于小鼠胚胎粘附、扩展,为胚胎的着床做准备.     

瘦素及其受体在子宫内膜异位症中的表达

目的 探讨瘦素及其受体在子宫内膜异位症(endometriosis,EM)发病中的作用.方法 采用放射免疫法和免疫组织化学法检测30例EM患者和30例非EM妇女(对照组)体内瘦素及其受体的表达情况.结果 EM患者血清瘦素水平与对照组无明显差异.瘦素在EM患者在位和异位内膜组织中的表达均明显低于对照组(P1<0.01;P1<0.05),而在位、异位内膜间无明显差异;瘦素受体在EM患者在位内膜中的表达低于对照组(P=0.05),而EM患者异位内膜与对照组,以及EM患者在位、异位内膜间瘦素受体表达无明显差异.结论 EM患者在位内膜组织中瘦素及其受体表达的降低,可能促进了EM的发病.     

小鼠胚泡着床前后子宫内膜细胞间粘附分子—1mRNA表达水平的 …

目的 研究小鼠胚泡着床前后子宫内膜细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）在转录水平的表达变化。方法 小鼠雌雄合笼后建立小鼠早孕模型,用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）,测定ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的表达。结果 小鼠正常动情期子宫内膜有一定ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ的表达,着床前后其表达显著升高,并在着床前一天即孕３ｄ达到高峰,着床后逐渐出现下降趋势。结论 ＩＣＡＭ－１在胚泡着床前后明显上调,和胚泡着床密切     

补肾安胎方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜HB-EGF及其受体EGFR表达的影响

目的 观察中药补肾安胎方对胚泡着床障碍模型小鼠胚泡着床情况及对类肝素结合样表皮生长因子(HB-EGF)及其受体(EGFR)表达的影响.方法 将妊娠雌鼠随机分为正常组、模型组、中药组,每组30只.分别于妊娠第5、6天(Pd5、6)用伊文思蓝尾静脉注射后取妊娠子宫.观察妊娠第5天(Pd5)各组对伊文思蓝的着色反应;运用RT-PCR方法检测HB-EGF mRNA的含量,采用免疫组织化学法测定HB-EGF及其受体EGFR的表达.结果 Pd5,模型组对伊文思蓝反应和平均反应点数显著低于正常组,中药组与模型组有显著差异.Pd5、6,模型组子宫内膜HB-EGF及其受体EGFR的表达在时间上明显滞后于正常组并且表达量减少,中药组与模型组有显著差异(P<0.05).结论 补肾安胎方改善胚泡着床障碍小鼠胚胎着床可能与提高着床位点的HBEGF及其受体EGFR的表达有关.     

维生素D受体在小鼠子宫内膜中的表达及功能研究

目的 研究维生素D受体(VDR)在小鼠子宫内膜中的表达及其对胚胎着床的影响。方法 免疫组化及Western Blot法检测孕1～6 d小鼠子宫内膜VDR表达;孕2 d小鼠一侧子宫角注入25μl 1 mM Calcifediol(VDR抑制剂)处理,另一侧子宫角注入等体积溶剂对照,孕4 d收获小鼠子宫组织,检测子宫内膜接受态标志分子白血病抑制因子(LIF)和整合素ανβ3的表达,或孕6 d观察胚胎着床情况。结果 VDR在孕1～5 d小鼠子宫内膜中的表达呈现动态变化,孕1～2 d主要在上皮表达,基质表达较弱,孕3～4 d开始基质表达逐渐增强,孕5 d达到高峰,孕6 d着床区VDR表达显著高于非着床区(P<0.01);与对照侧比较,VDR抑制剂Calcifediol处理组孕4 d小鼠子宫内膜LIF和整合素ανβ3蛋白的表达均显著下降(P<0.05),孕6 d胚胎着床数亦明显下降(P﹤0.05)。结论 VDR在孕1～6 d小鼠子宫内膜中呈动态表达,着床区VDR表达显著高于非着床区,而抑制子宫内膜VDR可降低子宫接受态使胚胎着床受损。     

子痫前期患者胎盘组织中瘦素及其受体的表达及意义

目的探讨瘦素(leptin,Lep)和瘦素受体(leptin receptor,LR)在子痫前期患者胎盘组织中的表达变化及意义。方法应用免疫组织化学染色及图像分析方法检测子痫前期38例(子痫前期组;其中轻度子痫前期16例,重度子痫前期22例)和正常妊娠妇女20例(对照组)胎盘组织中Lep和LR的表达及定量。结果①子痫前期组胎盘组织Lep表达灰度(46.506±3.332)较对照组(27.516±3.083)高,差异有统计学意义(t=21.153,P<0.01);轻、重度子痫前期组之间相比较,差异无统计学意义(P=0.246)。②LR在对照组、轻度和重度子痫前期组之间比较,差异均无统计学意义(F=1.100,P>0.05)。结论Lep通过其受体以自分泌和(或)旁分泌的作用参与了子痫前期的发病。     

瘦素及其受体系统在女性生殖器官的表达

目的　研究瘦素 (leptin)及其受体 (Ob R)、瘦素信号传导相关蛋白质在女性生殖器官的表达 ,探讨瘦素对女性生殖系统的影响。方法　分别用免疫组织化学和原位杂交技术检测瘦素、具有信号传导功能的瘦素长受体 (Ob Rb)、磷酸化的细胞因子信号传导转录活化因子STAT3(p STAT3)、细胞因子信号传导抑制剂 3(SOCS3)、活化的STAT3蛋白质抑制剂 (PIAS3)在正常妇女子宫内膜 ( 39例 ,增殖期 2 4例 ,分泌期 15例 )、子宫颈和阴道及输卵管 ( 3例 )的表达。结果　 ( 1)瘦素、Ob RbmRNA及其蛋白质在子宫内膜的腺体及间质均呈阳性表达。 ( 2 )Ob Rb蛋白质在分泌期子宫内膜的表达 3例弱阳性 ,3例阳性 ,9例强阳性 ;在增殖期子宫内膜的表达为 2例阴性 ,19例弱阳性 ,3例阳性 ,两者比较差异有显著意义 (P <0 .0 1)。瘦素蛋白质在不同期子宫内膜的表达差异无显著意义。 ( 3)瘦素及受体蛋白质在子宫颈、阴道、输卵管的上皮 (包括腺体 )均有表达。 ( 4)信号传导相关蛋白质SOCS3、PIAS3在子宫内膜和子宫颈的腺上皮、输卵管的纤毛上皮呈阳性表达 ,p STAT3表达极弱或不表达。结论　瘦素可能通过受体系统 ,与生殖器官间有广泛联系 ,影响女性的生殖功能。     

血清瘦素、癌组织瘦素受体在结直肠癌患者中的表达及其意义探讨

目的：研究结直肠癌患者血清瘦素和癌组织中受体与临床特征的关系。方法采取50例结直肠癌患者和42例健康对照者新鲜血清,应用酶联免疫吸附试验测定瘦素的浓度,并且收集结直肠癌患者癌组织及癌旁正常组织样本,运用免疫组化的方法检测瘦素受体的表达,并分析其间是否存在差异。结果共有直肠（16例）、左半结肠（12例）、右半结肠（22例）,按肿瘤TNM分期,Ⅰ/Ⅱ期组（22例）,Ⅲ/Ⅳ期组（28例）。肿瘤组患者的血清瘦素水平明显高于对照组;不同位置肿瘤患者血清瘦素表达有明显差异;晚期肿瘤组瘦素水平高于早期组;有远处转移组的血清瘦素水平明显高于未转移组;超重组血清瘦素水平高于正常体重组;瘦素水平与患者性别,肿瘤分化没有明显相关。瘦素受体在结直肠癌组织和正常结直肠组织中均有表达,癌组织的表达阳性率和表达强度均高于正常结直肠组织;晚期癌组织瘦素受体表达阳性率和表达强度高于早期癌组织;但瘦素受体与结直肠癌组织分化,位置,体重指数无明显相关。结论瘦素可能有促进结直肠癌的侵袭和远处转移的作用,另外瘦素在肥胖与结直肠癌的关系中可能起了重要作用。     

GnRH受体在人类子宫内膜的表达及意义

促性腺激素释放激素(GnRH)在体内的生理调节功能是由促性腺激素释放激素受体(GnRH-R)介导的,GnRH与受体的结合具有高度特异性。研究发现,GnRH和GnRH-R除位于下丘脑垂体系统外,在机体的其他组织,尤其是生殖器官也有分布。近年来有许多对人类不同类型子宫内膜表达GnRH-R的研究报道,推测子宫内膜GnRH和GnRH-R系统在调节子宫内膜的自分泌或旁分泌中起重要作用,并参与子宫内膜的增殖调节。     

降钙素受体在小鼠早期胚胎及围植入期子宫内膜的表达

目的：检测降钙素受体（calcitonin receptor,CTR）在不同发育阶段小鼠胚胎和植入期子宫内膜表达的变化。方法：取小鼠早期胚胎、未孕、真孕及假孕3～7d小鼠子宫．利用免疫组织化学染色结合图像分析法,检测CTR在不同发育阶段早胚及植入期子宫内膜中的表达。结果：①CTR在小鼠植入前胚胎表面呈阳性表达．随着妊娠进展,其表达逐渐加强;②真孕组孕3d,小鼠子宫内膜CTR呈弱阳性表达,孕4～5d表达达到高峰．此后腔上皮CTR表达水平下降;假孕组,小鼠子宫内膜CTR呈弱阳性表达;未孕组小鼠子宫内膜CTR呈阴性表达。结论：①CTR参与了早期胚胎发育分化的调节以及子宫内膜容受性的形成;②启动子宫内膜容受性形成的信号不仅来自母体及交配刺激,还来自胚胎。     

追赶生长大鼠肝组织瘦素受体的变化及其相关因素研究

目的探讨追赶生长过程中大鼠肝组织瘦素受体的变化及其对葡萄糖代谢的影响。方法 5周龄雄性Wistar大鼠适应性喂养一周后随机分为对照组和追赶生长组。追赶生长组给予对照组半量饲料喂养4周后开放饮食8周;对照组则持续开放饮食喂养。于实验的0周、4周、6周、8周、12周采集血液及肝脏。用ELISA法测定血清瘦素水平;采用免疫组化法检测肝细胞表面瘦素受体表达,全自动生化检测仪检测血糖,放射免疫法测定胰岛素水平。结果实验第4周（半量喂养期）,追赶生长组大鼠的血清瘦素水平明显低于对照组,随着开放饮食时间的延长,瘦素水平逐渐增加。在实验终点（第12周）,追赶生长组肝组织表面瘦素受体水平低于对照组,而瘦素水平、血糖水平、胰岛素抵抗指数IRI明显高于对照组,差异均具有统计学意义（P均〈0.05）;肝组织表面瘦素受体水平与血清瘦素及HOMA-IR呈显著负相关（P均〈0.05）。结论追赶生长可导致肝细胞表面瘦素受体水平降低,肝细胞表面瘦素瘦素受体下降与追赶组大鼠葡萄糖代谢异常有关。     

降钙素在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的:探讨降钙素在胚泡植入过程中的生物学作用。方法:取未孕动情期、真孕及假孕3～8d的小鼠子宫作切片,用免疫组织化学方法和图像分析方法对降钙素在围植入期子宫内膜中的表达进行定性和定量分析。结果:降钙素仅分布于子宫内膜腺上皮。在真孕及假孕组小鼠,受精后第3～4d(植入前),子宫内膜腺上皮中降钙素的含量均明显高于未孕组(P<0.01);受精后第6～7d(植入后),真孕小鼠子宫内膜中降钙素的含量进一步增多,明显高于假孕及植入前各时间组(P<0.01)。结论:①降钙素参与胚泡植入过程,还可能间接参与植入后胚泡的滋养层扩展、分化及子宫内膜蜕膜化反应;②降钙素在子宫内膜中的表达不仅受母体因素调控,还与胚泡的刺激有关。     

瘦素受体在肾上腺皮髓质及其肿瘤中的表达及与血浆瘦素的关系

目的 观察长型瘦素受体(Ob-Rb)在正常肾上腺皮、髓质及其肿瘤中的mRNA和蛋白表达;并观察原发性醛固酮增多症(PA)、皮质醇分泌瘤(CS)和嗜铬细胞瘤(PHEO)患者的血浆瘦素水平.方法 提取6名健康者肾上腺皮质和髓质和10例CS、14例醛固酮分泌瘤(APA)、20例PHEO患者的组织总RNA和蛋白,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹法检测不同组织中Ob-Rb mRNA和蛋白表达.ELISA方法测定29例PA、11例CS、15例PHEO患者和20名年龄匹配的血压健康者血浆瘦素水平.结果 在肾上腺皮、髓质及其肿瘤中存在Ob-Rb的mRNA和蛋白表达.在正常肾上腺皮质中,Ob-Rb mRNA(0.32±0.12)和蛋白(1.31±0.26)表达明显均高于其余各组(均P＜0.05).Ob-Rb mRNA在APA(0.15±0.10)中的表达明显高于CS(0.05±0.02,P＜0.05).APA中Ob-Rb mRNA表达与立位血浆醛固酮水平正相关(r=0.670,P=0.024),而CS患者瘤内Ob-RbmRNA水平与其24 h尿UFC水平正相关(r=0.870,P=0.005).CS患者血浆瘦素水平明显高于非皮质醇瘤患者(P=0.001).结论 肾上腺皮髓质及其肿瘤广泛表达长型瘦素受体,且其表达之间存在差异,瘦素与肾上腺间的关系还需进一步研究.