肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因转染骨髓间充质干细胞后基因表达情况及其对C6胶质瘤细胞作用的体外研究

目的 探讨转染肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的骨髓间充质干细胞(BMSC)基因表达情况及其功能.方法 实验分三组,即转染TRAIL基因组、转染空载体组及空白对照组.用脂质体法将TRAIL转入绿色荧光蛋白(GFP)-BMSC中,反转录PCR法检测BMSC的TRAILmRNA水平,Western blot、免疫荧光法检测TRAIL蛋白的表达;将携带有TRAIL的GFP-BMSC同大鼠C6胶质瘤细胞共培养,通过四甲基偶氮唑蓝比色法检测其对肿瘤细胞的旁观者效应,Hochest-PI双染色法观察TRAIL转染的BMSC对C6细胞凋亡的影响.结果 免疫荧光检测显示,转染TRAIL 24、48 h的GFP-BMSC细胞质和细胞膜有TRAIL蛋白的表达,24h比48 h荧光强,空白对照组及空载体组细胞未见表达.反转录PCR、Western blot显示转染TRAIL基因组细胞TRAIL mRNA及蛋白高表达,空白对照组及空载体组未见表达.转染TRAIL的GFP-BMSC明显抑制C6细胞存活,抑制率为(62.7±0.1)％,高于空载体组的(16.7±0.1)％(P＜0.05),同时转染TRAIL基因的BMSC可促进C6细胞的凋亡.结论 转染TRAIL的BMSC能够稳定表达目的基因,且能促进大鼠C6胶质瘤细胞凋亡,具有明显的旁观者效应.     

间充质干细胞在肿瘤治疗中的研究进展

间充质干细胞 (mesenchymal stem cells,MSCs)是具有多向分化潜能的非造血干细胞,除了具有造血支持、免疫调节和多向分化(分化为骨、软骨和脂肪)的特性外, 还具有特异性地迁移到损伤部位和肿瘤组织的特性.MSCs与肿瘤微环境之间存在复杂的交互作用:一方面, MSCs可直接作用于肿瘤细胞,抑制其生长;另一方面,MSCs还可作为细胞载体,传递和表达多种抗肿瘤因子.因此,MSCs有望成为新的抗肿瘤治疗的策略.本文对近年来MSCs在肿瘤基因治疗领域中的研究进展作一综述.     

间充质干细胞与肿瘤关系的研究进展

间充质干细胞是一类具有高度自我更新能力和多向分化潜能的组织干细胞,已被视为一种＂种子细胞＂。近年来针对间充质干细胞对肿瘤生长发展的影响已进行了大量的研究,但其对肿瘤的确切作用还未完全清楚,本文就其对肿瘤生长的影响及其相关机制作一简要综述。     

间充质干细胞介导的肿瘤治疗

间充质干细胞（MSC）内在的肿瘤趋向性和固有的低免疫原性,使其可能成为肿瘤靶向治疗的理想载体。MSC 本身可通过释放细胞因子发挥一定的抗肿瘤作用,而通过溶瘤病毒、抗血管生成药物、肿瘤坏死因子诱导凋亡配体、IL、IFN 及前体药物修饰的 MSC 抗肿瘤效果进一步加强。另外,MSC 联合其他治疗也显示出一定的优势。     

间充质干细胞与肿瘤关系的研究进展

间充质干细胞是一类具有高度自我更新能力和多向分化潜能的组织干细胞,已被视为一种"种子细胞"。近年来针对间充质干细胞对肿瘤生长发展的影响已进行了大量的研究,但其对肿瘤的确切作用还未完全清楚,本文就其对肿瘤生长的影响及其相关机制作一简要综述。     

羊水间充质干细胞在肿瘤治疗中的研究进展

羊水间充质干细胞是多能的非造血祖细胞,具有自我修复及多向分化潜能,如成骨细胞、成软骨细胞及成脂肪细胞。尽管其具有高度增殖能力,但是其在体内并没有成瘤的报道,甚至多次传代后其核型也正常。 AF-MSCs对肿瘤的趋向性及其作为治疗多种肿瘤的细胞载体已经被很多研究证实。本文总结近期国内外的相关文献,就羊水间充质干细胞在肿瘤治疗中的研究进展进行综述。     

间充质干细胞在肿瘤基因治疗中的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有高度自我更新能力和多向分化潜能,还具有特异性地迁移到损伤部位和肿瘤组织的特性,且易于分离、体外扩增培养,因而可以作为一种携带抗肿瘤因子的运载工具用于肿瘤的基因治疗。本文对MSCs在肿瘤基因治疗领域中的研究进展做一综述。     

间充质干细胞作为肿瘤基因治疗载体的研究进展

肿瘤基因治疗采用的病毒载体缺乏对肿瘤细胞的特异性,是影响疗效、产生不良反应的重要原因.以间充质干细胞为载体,利用其对肿瘤细胞的定向趋化和追踪特性,在肿瘤局部获得稳定、高水平的抗癌基因表达,为高靶向性肿瘤基因治疗开辟了新途径.     

上皮间充质转化与肿瘤干细胞的研究进展

上皮细胞间充质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT) 在胚胎发育和肿瘤发生中具有重要作用, EMT可使上皮性肿瘤细胞获得间充质细胞表型, 在增强肿瘤细胞的侵袭和转移能力的同时, 也使得肿瘤细胞具有自我更新能力等干细胞样特性。多种转录因子、信号转导通路、microRNAs及细胞微环境等因素共同调控此过程。EMT与肿瘤干细胞之间有密不可分的联系, EMT可以促进肿瘤细胞获得干细胞特征, 具有干细胞特征的肿瘤细胞高表达EMT标记分子, microRNA可同时调控EMT和细胞干性。阐明EMT与肿瘤干细胞的相互关系及其调控机制, 有望为肿瘤转移与复发的靶向治疗开辟新思路。      

间充质干细胞与肿瘤耐药关系的研究进展

间充质于细胞（MSC）具有高度自我更新能力和多向分化潜能,且易于分离、体外扩增培养,是细胞移植治疗各种器官、组织及细胞功能衰竭的理想工具.MSC应用于肿瘤治疗的研究也日益走向临床.然而,随着MSC在临床应用的日益广泛,其安全性问题凸显,最近大量研究表明MSC能够诱导肿瘤耐药.文章对MSC引起肿瘤耐药的原因和内在机制的研究进展作一综述.     

干扰素与TRAIL在诱导肿瘤细胞凋亡中的相互作用

干扰素（IFN）和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）均可诱导肿瘤细胞凋亡，但两者作用机制不同，而且并不是所有肿瘤细胞都对它们诱导的凋亡作用敏感。已有研究发现二者共同作用具有协同诱导细胞凋亡的作用，并可使原先对单一物质抵抗的肿瘤细胞变得敏感，从而达到治疗的目的。     

肿瘤细胞对TRAIL敏感性与其表面DR5表达水平的相关性研究

目的　探讨肿瘤细胞表面DR5表达水平与其对肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)敏感性之间的关系。方法　利用抗DR5特异性单克隆抗体 ,采用流式细胞仪技术直接检测不同肿瘤细胞系表面DR5的表达水平 ,并采用TRAIL凋亡检测试剂盒检测肿瘤细胞对TRAIL诱导凋亡的敏感性 ,研究两者之间的关系。结果　不同肿瘤细胞表面DR5的表达水平分别为 :U937细胞97.9%、Jurkat细胞 95 .1%、SW4 80细胞 93.8%、HCT116细胞 86 .2 %、HL 6 0细胞 6 4 .2 %、HeLa细胞4 6 .6 %、K5 6 2细胞 13.1% ;TRAIL诱导的细胞凋亡率分别为 :U937细胞 72 .6 %、Jurkat细胞 85 .2 %、SW4 80细胞 78.6 %、HCT116细胞 70 .2 %、HL 6 0细胞 6 0 .1%、HeLa细胞 4 5 .4 %、K5 6 2细胞 12 .3%。经统计学分析 ,两者之间呈现非常明显的正相关 (r=0 .997,P <0 .0 0 1)。结论　肿瘤细胞对TRAIL的敏感性与其表面DR5表达水平有关 ,表明DR5的表达水平在TRAIL诱导细胞凋亡方面起着十分重要的作用     

重组人TRAIL蛋白联合顺铂对人卵巢癌细胞生长及凋亡的影响

背景与目的：研究发现肿瘤坏死因子的相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)可以增强化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用。本研究旨在探讨TRAIL与顺铂联合应用对体外培养的卵巢癌细胞SKOV3和OVCAR3生长凋亡的影响及可能的诱导机制。方法：利用MTT法和流式细胞仪检测在顺铂和重组人TRAIL蛋白共同作用下,SKOV3和OVCAR3细胞的增殖抑制效应及细胞凋亡程度;并应用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测药物处理后TRAIL死亡受体DR4、DR5的mRNA表达水平;同时用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测DR4、DR5的蛋白表达水平。结果：SKOV3和OVCAR3细胞均对TRAIL蛋白敏感,随着TRAIL蛋白浓度的升高,细胞的生长抑制率可达64%;而TRAIL与顺铂联合用药对两种细胞的抑制率均达到92%以上,对细胞的增殖抑制呈现高效协同作用,与单独用药组比较差异有统计学意义(P<0.05);TRAIL和顺铂联合组两种细胞凋亡率分别为(31.50±0.79)%和(36.60±1.31)%,显著高于单独用药组;RTFQ-PCR和Western blot检测结果显示,SKOV3和OVCAR3细胞在TRAIL与顺铂联合用药后,死亡受体DR4、DR5表达水平均显著上调。结论：在体外,TRAIL与化疗药物顺铂联用能明显抑制卵巢癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡。TRAIL能明显增强顺铂对卵巢癌细胞的敏感性,其诱导机制可能与死亡受体DR4、DR5表达水平上调有关。     

间充质干细胞对肿瘤细胞的分子作用机制

间充质干细胞(MSC)不但对肿瘤细胞具有良好的靶向性,而且可以直接抑制肿瘤生长或作为新兴的基因治疗载体在肿瘤局部持续高效地表达外源基因,抑制肿瘤的生长和转移.同时,MSC也可通过促进肿瘤间质重构和肿瘤血管形成、抑制肿瘤局部机体免疫以及改变肿瘤表型而促进肿瘤生长.相反的作用机制可能与MSC的来源、异质性、肿瘤细胞微环境或...     

骨髓间充质干细胞在血液系统疾病中的研究进展

 骨髓间充质干细胞（MSC）是骨髓组织中具有多向分化潜能的一类非造血性干细胞,并可通过多种机制参与骨髓造血微环境调控及免疫功能调节,在组织工程、基因治疗、干细胞移植后移植物抗宿主病（GVHD）中应用前景广泛,是医学研究的热点。现就MSC在造血干细胞移植（HSCT）、再生障碍性贫血（CA）、多发性骨髓瘤（MM）中的研究现况及其潜在应用价值作一简要综述。     

Correlation between the Sensitivity to TRAIL and the Expression Level of DR5 on the Surface of Tumor Cells

OBJECTIVE To investigate the correlation between the sensitivity to the tumor necrosis factor- related apoptosis inducing ligand (TRAIL) and the level of expression of the death receptor 5 (DR5) on the surface of tumor cells.METHODS Anti-DR5 mAbs were used to directly detect the level of expression of DR5 on the surface of tumor cells. Using a TRAIL apoptosis kit and flow cytometry, the sensitivity of the tumor cells to TRAIL-induced apoptosis was determined and the correlation between DR5 expression and sensitivity to TRAIL analyzed.RESULTS The expression level of DR5 on the surface of different tumor cells was as follows: 97.9% in U937 cells, 95.1% in Jurkat cells, 93.8% in SW480 cells, 86.2% in HCT116 cells, 64.2% in HL-60 cells, 46.6% in Hela cells and 13.1% in K562 cells. The TRAIL-induced apoptotic rate was 72.6% in U937 cells, 85.2% in Jurkat cells, 78.6% in SW480 cells, 70.2% in HCT116 cells,60.1% in HL-60 cells, 45.4% in Hela cells and 12.3% in K562 cells. Statistical analysis showed there was a significant positive correlation (r=0.997, P<0.001) between DR5 expression and sensitivity to TRAIL.CONCLUSION The sensitivity of tumor cells to TRAIL is related to the level of expression of DR5 on the surface of tumor cells. These results confirm the importance of DR5 expression for induction of apoptosis by TRAIL.     

转染TRAIL的内皮祖细胞对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的抑制作用

背景与目的:肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,TRAIL)有广谱的抗瘤作用,且对正常组织细胞无毒性,因此有望应用于肿瘤基因治疗。内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)在体内能定向归巢于肿瘤,参与肿瘤新生血管的建立。本研究以EPC为载体,观察TRAIL转染EPCs对人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法:用磁珠分离法从脐血中分离EPCs,并进行体外培养扩增。用脂质体将带有GFP-TRAIL基因的质粒转入EPCs(TRAIL-EPCs)。将转染后的EPC经尾静脉注入3AO卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型。流式细胞仪检测各组中绿色荧光蛋白(Green-Fluoroprotein,GFP)表达情况,观察各组移植瘤体积的变化,计算抑瘤率。结果:静脉注射转染TRAIL后的EPC,对卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤生长具有明显抑制作用,对照组裸鼠的瘤重(0.226±0.209)g,而TRAIL细胞因子治疗组、GFP-TRAIL转染组裸小鼠的瘤重分别为(0.118±0.164)g、(0.075±0.084)g;TRAIL细胞因子组的抑瘤率为48.1%,TRAIL转染组抑瘤率为66.9%。肿瘤组织石蜡切片HE染色检查显示TRAIL细胞因子组,TRAIL转染组转对照组有更多的出血坏死区。TRAIL细胞因子组,TRAIL转染组均无明显毒副作用的表现。结论:TRAIL细胞因子和TRAIL-EPCs对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤均有明显的抑制作用,EPC在裸鼠皮下移植瘤模型体内有一定的导向作用,有希望成为基因治疗的载体。     

间充质干细胞基因治疗肿瘤新进展

骨髓间充质干细胞(MSC)是骨髓内除造血干细胞和多功能前祖细胞外另一种成体干细胞,具有很强的自我更新能力、多向分化潜能.该细胞具有明显的趋向肿瘤移动并与肿瘤组织楔合的生长特性.虽然骨髓间充质干细胞有向肿瘤干细胞转化的风险,但其作为一种克隆载体可以转导治疗基因在体内获得长期稳定表达,对肿瘤的靶向治疗有着广阔的前景.