二氧化硅诱导的肺纤维化大鼠肺组织及血浆中热休克蛋白70的变化

目的 探讨热休克蛋白70( heat shock protein 70,Hsp70)在二氧化硅诱导的大鼠肺纤维化过程中的变化.方法 48只Wistar大鼠随机分成对照组和染尘组,每组24只,分别观察7、14、21、28d.染尘组经气管内灌注二氧化硅(50mg/ml),对照组予等剂量的生理盐水.HE染色观察病理学变化,蛋白免疫印迹( Western bolt)法和免疫组织化学法检测肺组织中Hsp70的表达与定位,双抗夹心ELISA检测血浆中Hsp70含量的变化.结果 染尘组染尘后7d肺组织中Hsp70含量升高,14d达到高峰,随后降低,但仍高于正常对照.染尘组14、21、28 d时血浆中Hsp70含量明显高于生理盐水对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).染尘组血浆中Hsp70含量21d达到峰值[(0.216±0.027) μg/ml].结论 在染尘组大鼠肺组织和血浆中Hsp70含量均明显升高,并随肺纤维化进程出现先升高后降低的趋势,提示肺组织中Hsp70在二氧化硅诱导的肺纤维化过程中有重要的生物学作用.     

创伤性休克大鼠肝组织HSP70 mRNA表达变化及甘氨酸的干预影响

目的观察创伤性休克大鼠肝组织HSP70 mRNA表达变化及甘氨酸的干预影响。方法检测甘氨酸治疗组、休克组和对照组肝组织HSP70 mRNA表达；观察肝组织病理改变并测定血清ALT和AST水平。结果休克组和治疗组肝组织HSP70 mRNA表达分别于复苏后6、12h达高峰。血清ALT、AST随时间延长逐渐增高；光镜下病理改变也随时间延长而损害加重。与休克组比较，治疗组肝组织HSP70 mRNA表达明显增强、血清ALT和AST明显降低且肝组织光镜下病理损害明显改善（P均〈0．05）。结论甘氨酸可增强肝组织HSP70表达，减轻创伤性休克后继发的肝脏损害。     

热休克蛋白27及70在子宫内膜腺癌中的表达及意义

目的检测热休克蛋白（HSP）27、70在正常子宫内膜、增生过长子宫内膜、非典型增生和子宫内膜腺癌中的表达情况,探讨其临床病理学意义及其与子宫内膜腺癌发生发展的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测16例正常子宫内膜,8例增生过长子宫内膜,8例非典型增生子宫内膜,45例子宫内膜腺癌中HSP27和HSP70的分布及表达。结果HSP27在子宫内膜腺癌组织中的表达低于前三种状态子宫内膜,均有统计学意义（P〈0.05）;HSP70在子宫内膜腺癌组织中的表达高于前三者状态子宫内膜,与正常子宫内膜比较差异有统计学意义（P〈0.01）。两者在子宫内膜腺癌的不同病理学分级之间的表达差异有统计学意义（P〈0.05）;但在不同年龄组、手术-病理分期、肌层浸润之间的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论HSP27、HSP70在子宫内膜癌中的表达可能与子宫内膜腺癌的发生、发展有关。     

微波暴露对大鼠海马脑区热休克蛋白70表达的影响

目的 研究微波暴露对大鼠海马脑区热休克蛋白(HSP)70表达的变化,为阐明微波的生物效应与机制提供线索.方法 采用峰值功率密度为90、5 W/cm2的微波全身一次性辐照大鼠20min,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法观察微波辐照后不同时相点大鼠海马脑区hsp70 mRNA表达的变化;采用免疫印迹(Western-blot)法观察微波辐照后HSP70蛋白水平的变化.结果 90、5W/cm2微波辐照后,大鼠的肛温[分别为(40.40±0.19)、(38.22±0.68)℃]以及比吸收率(SAR)值[分别为(15.09±0.81)、(5.56±0.31)W/kg]明显升高.2个微波暴露组在20 min暴露后均可见hsp70 mRNA和蛋白水平表达上调.结论 微波辐照有明显的热效应,是hsp70合成极为敏感的诱因,并可能启动了脑的内源性保护机制.     

高温作用后大鼠视网膜热休克蛋白70的表达

目的观察高温作用后大鼠视网膜热休克蛋白70(HSP 70)的表达和分布.方法SD大鼠在高温环境生存2 h,分别于4、18、24、48 h后摘除眼球,用免疫组织化学方法观察大鼠视网膜中HSP 70的表达和分布.结果高温后及正常对照组视网膜各层的均有HSP 70的表达,各层高温后18 h与对照组比较差异均有非常显著性(P＜0.01),随时间的延长而逐渐降低.结论高温可诱导视网膜各层组织HSP 70的表达增高.     

热休克蛋白70在心脏跳动中二尖瓣置换术心房肌细胞中的表达

目的 观察心脏跳动中二尖瓣置换术患者心房肌细胞热休克蛋白70(HSP70)的表达情况.方法 将同期30例行二尖瓣置换术的风湿性心脏病患者随机分为两组,试验组(浅低温心脏跳动中施术组,16例)与对照组(传统中低温心脏停跳中施术组,14例).分别于体外循环(CPB)前,拔除上腔静脉插管时留取右心房组织标本,采用Western blot法测定心房肌细胞HSP70的表达情况.结果 对照组CPB前与CPB后心房肌细胞HSP70的表达分别为(160.23±7.12)μg/ml,(165.25±6.29)μg/ml;试验组CPB前与CPB后分别为(163.59±6.35)μg/ml、(196.34±4.23)μg/ml.与CPB前比较,试验组CPB后心房肌细胞HSP70的表达明显升高(P<0.01);而对照组CPB前后,心房肌细胞HSP70虽有所表达,但差异无统计学意义(P>0.05);两组CPB后心房肌细胞HSP70的表达,试验组要比对照组高(JP<0.05).结论 在心脏跳动中施术能较好地诱发HSP70高表达从而具有较好的心肌保护效果,此术式对心肌细胞的缺血-再灌注损伤要比传统手术小.     

热休克蛋白70抑制大鼠脓毒症血清诱导的心肌细胞凋亡及其信号转导通路的研究

目的初步探讨热休克蛋白70（heat shock protein 70,HSP70）抑制脓毒症血清所致心肌细胞凋亡及其机制。方法将原代培养心肌细胞分组：正常对照组、正常大鼠血清组、脓毒症血清组、转空载体对照组和转HSP70基因组,转HSP70基因组以重组质粒pcDNA3．1-HSP70转染后36h后验证基因和蛋白表达;各组以相应血清混合培养2h;分别行Hoechst33258染色后计数以及DNA“梯状”条带检测心肌细胞凋亡,再应用Western—blot分析HSP70过表达对Caspase-3,8,9活化和Bid裂解的影响情况。结果处理后12、24、36h凋亡率,转HSP70基因组心肌细胞为（12．48±2．39）％、（23．96±3．12）％、（25．40±3．96）％,明显低于脓毒症血清组[（28．66±2．24）％、（55．76±5．69）％、（46．89±8．74）％,t=5．851、5．932、6．027,P〈0．01],亦明显低于转空载体组[（34．25±3．42）％、（50．71±6．38）％、（47．62±5．74）％,t=5．876、5．903、6．122,P〈0．01],但明显高于正常对照组和正常血清组（3．13％-6．75％,t=6．324、6．578、6．137、5．987、6．032、6．871,P〈0．01）;在Caspase-3、8、9活化表达中,P11、P20和P10条带比值,转HSP70基因组分别为（12．5276±2．1247、9．3481±4．5423、16．1349±6．0641）,低于脓毒症血清组（27．13244-2．1564、25．5643±4．3018、36．5647±6．7135,t=5．856、5．902、5．891,P〈0．01）,低于转空载体组（28．0314±2．0367、25．6413±4．1356、34．5648±5．9473,t=3．861、3．933、4．281,P〈0．05）,高于正常对照组（8．0324±1．5234、5．1246±1．3274、2．0314±0．6423,￡=3．286、3．867、4．031,P〈0．05）和正常血清组（8．5649±1．2136、6．0324±1．0214、3．2146±0．1325,t=5．898、5．969、6．879,P〈0．01）;tBid条带比值,转HSPT0基因组（12．0316±2．3641）低于脓毒症血清组（27．0536±5．3214,t=3．274,P〈0．05）和转空载体组（27．1034±3．6741,t=3．301,P〈0．05）,但高于正常对照组（6．0347±2．1304,t=5．924,P〈0．01）和正常血清组（7．3121±1．3021,t=5．871,P〈0．01）。结论HSPT0通过干预死亡受体通路和线粒体通路而抑制脓毒症血清所致的细胞凋亡。     

诱导分化联合热休克处理对K562细胞JWA和热休克蛋白70表达的影响

目的　研究不同诱导分化剂单独或与热休克联合作用下 ,K562细胞JWA蛋白表达的特点和规律 ,探讨JWA与热休克蛋白 70 (Hsp70 )表达的关系以及可能涉及的信号调节机制。方法　建立诱导K562细胞定向分化以及和热休克联合作用的实验模型 ,用Westernblot方法检测JWA、Hsp70、热休克转录因子 1(HSF1)、HSF2等蛋白表达。结果　 (1)佛波酯 (TPA ,10 0、2 0 0ng/ml)或阿霉素 (adri amycin ,4× 10 - 8mol/L)处理细胞 48h后 ,再热休克 (42℃ )处理 2h ,JWA和Hsp70蛋白表达均增加 ;而氯化高铁血红素 (hemin ,3× 10 - 5 mol/L ,48h)、阿糖胞苷 (Ara C ,80ng/ml,48h)和三氧化二砷 (As2 O3,1× 10 - 6 mol/L ,48h)处理后再热休克处理细胞 2h ,则JWA和Hsp70蛋白表达均下调 ;全反式维A酸(ATRA ,1× 10 - 6 mol/L ,48h)处理细胞后 ,再热休克处理 ,则JWA和Hsp70蛋白表达无明显变化。 (2 )不同诱导分化剂处理K562细胞后再热休克处理 ,HSF1和HSF2表达变化均不明显。结论　JWA不但参与K562细胞的诱导分化调节 ,也参与细胞对热应激的调节 ,JWA可能是多种化学诱导分化剂和热休克的共同靶基因。诱导K562细胞分化过程中 ,Hsp70的表达不需要热休克转录因子介导 ,JWA可能是一种与Hsp70信号通路平行的新的信号分子。我们的实验结果首     

热休克蛋白70-2（HSP70-2）基因多态性与冠心病的相关性研究

目的 探讨热休克蛋白70-2（HSP70-2）基因＋1267A/G多态性在中国汉族人群中的分布及与冠心病的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,对汉族185例冠心病患者及149名正常人群HSP70-2基因＋1267A/G多态性,基因型及等位基因分布进行研究.结果 研究人群中存在HSP70-2基因＋1267A/G多态性,基因型符合Hardy-Weinberg平衡,冠心病患者G等位基因频率显著高于对照组（61.89%vs51.68%,P＜0.01）.Logistic回归分析得出：HSP70-2基因＋1267A/G多态性（AG＋GG）基因型是冠心病的独立危险因素,（AG＋GG）基因型比AA基因型的OR=2.031,95%CI=1.024～4.026.结论 HSP70-2基因＋1267A/G多态性与冠心病有关,G等位基因可能是汉族人群冠心病的遗传危险因素.     

谷氨酰胺对创伤性脑损伤后肠黏膜屏障的影响

目的探讨谷氨酰胺对大鼠创伤性脑损伤后肠黏膜屏障的影响。方法54只雄性Wistar成年大鼠分为对照组（N组，6只）、脑损伤组（T组，24只）及脑损伤后谷氨酰胺治疗组（G组，24只），T和G组按脑损伤后检测时间分为1、3、5．7d组，6只／组，应用组织病理和电镜观察肠黏膜结构的变化，并测定血浆内毒素水平，来评价肠黏膜屏障功能。结果谷氨酰胺能减轻创伤性脑损伤后肠黏膜的病理损害，使血浆内毒素水平降低。结论谷氨酰胺对创伤性脑损伤后肠黏膜屏障损害有一定的保护作用。     

热休克蛋白70对急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤保护作用的实验研究

目的探讨热休克蛋白70(Hsp70)对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肺损伤的保护作用。方法温生理盐水(42~43℃)持续灌洗大鼠腹腔30 m in诱导胰腺组织高表达Hsp70,10 h后诱导大鼠急性胰腺炎(AP),术后6、12 h检测血清和肺组织TNF-α水平,肺湿重系数,肺泡灌洗液中蛋白含量和细胞数,肺组织常规病理评分及Hsp70免疫组化病理改变。结果与ANP组相比,42℃生理盐水腹腔持续灌洗预处理能明显降低SNP术后6 h和12 h的血清和肺组织TNF-α水平(P<0.05),并降低肺湿重系数、肺泡灌洗液中蛋白含量和细胞数水平以及肺组织常规病理评分(P<0.05)。结论Hsp70对SNP肺损伤有明显的保护作用,其机制可能是下调肺组织内TNF-α的表达。     

替普瑞酮诱导阿尔茨海默病模型大鼠海马热休克蛋白70表达及对其学习记忆能力的影响

目的双侧海马注射Aβ1-42建立阿尔茨海默病大鼠模型，观察替普瑞酮诱导大鼠海马热休克蛋白70表达及对其行为学的影响。方法72只SD大鼠随机分为替普瑞酮组、模型组与对照组，双侧海马注射Aβ1-42建立阿尔茨海默病大鼠模型，对照组海马注射等量生理盐水。替普瑞酮组予替普瑞酮800mg／kg／d灌胃，余两组予等量生理盐水灌胃。术后1、7、14和21d并于Y迷宫行为学测试后处死大鼠。采用RT—PCR和western—blot方法，观察各组大鼠海马HSP70表达的变化。结果术后14和21d模型组学习记忆能力较对照组明显减退（P〈0．01），而替普瑞酮组大鼠较模型组有所改善（P〈0．01）。术后7、14和21d模型组大鼠海马HSP70表达较对照组逐渐减少（P〈0．05），替普瑞酮组HSP70表达明显增加（P〈0.05）。结论替普瑞酮能够诱导AD模型大鼠海马HSP70表达，从而减轻神经元损害，改善大鼠的学习记忆能力。     

中暑病人血浆中热应激蛋白(HSP70)及其抗体水平的意义

目的　探讨中暑病人热应激蛋白 (HSP70 )及其抗体水平变化和其在中暑发生中的可能作用。方法　应用Westernblot法 ,测定血浆HSP70水平 ;应用酶联免疫反应技术测定血浆HSP70抗体滴度。结果　HSP70在高温中暑组为 42 11.2± 12 86 .2 (积分光密度 )、重症中暑组为 4137.8±12 0 7.5 ,与对照组 (6 0 43.5± 135 4.8)比较 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。中暑病人HSP70抗体水平在 1∶10、1∶2 0、1∶40阳性率分别为 5 4.1%、48.9%、2 1.6 % ,显著高于对照组 (2 6 .7%、13.8%、0 % ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　HSP70水平的下降和HSP70抗体的出现在中暑发生过程中具有一定的作用。     

儿童哮喘患者热休克蛋白60、70抗体表达及危险因素的条件Logistic回归分析

目的 观察小儿哮喘热休克蛋白60、70的表达及其在小儿哮喘中的作用,并探讨小儿哮喘发病的危险因素.方法 对本院120例小儿哮喘患儿进行热休克蛋白60、70检测,采用Logistic回归分析小儿哮喘（完整病例资料,并有门诊长期随访）的相关因素.结果 小儿哮喘17个可能的危险因素分析,上呼吸道感染史、剧烈运动、天气变化诱发感冒、绒毛玩具、卧室地毯、被动吸烟、过敏性疾病家族史、居住闹市区、容易情绪变化、经常接触刺激性气味及Hsp60、70抗体与小儿哮喘有关（P〈0.05）,多因素条件Logistic回归分析结果显示,哮喘可能存在的危险因素有：上呼吸道感染史,天气变化,个人过敏性疾病史,过敏性疾病家族史,Hsp60、70抗体.而剧烈运动、饮食因素、被动吸烟等因素未能增加哮喘发病危险度.结论 上呼吸道感染等多种因素可增加哮喘发病的危险度,加强对本病的宣教力度,提倡持续、规范化用药治疗,对防治哮喘具有指导意义.     

双歧杆菌对严重烧伤大鼠肠黏膜细胞增殖的影响

目的观察严重烫伤后补充外源性双歧杆菌对肠黏膜细胞增殖的影响。方法70只wistar大鼠随机分为烫伤并应用双歧杆菌组（A组），烫伤不应用双歧杆菌组（B组）和正常对照组（C组）。采用免疫组化SABC法，检测PCNA表达情况，反映肠黏膜细胞增殖情况。结果烫伤后A组和B组肠腺细胞PCNA表达减少；在烫伤后48h、72h、120h，A组PCNA表达较B组明显增多（P〈0．05）结论双歧杆菌可能促进严重烫伤大鼠肠腺细胞增殖，有利于损伤的肠黏膜修复。