人源降血脂乳酸菌的筛选及其功能性研究

从巴马长寿人群肠道中分离得到51株乳酸菌,通过体外试验筛选出16株降胆固醇及甘油三酯能力较强的菌株,降解率均分别大于30.00%和5.00%,其中Lr10的胆固醇及甘油三酯降解率显著高于其他菌株(P0.05),分别为61.90%和37.22%;通过模拟人工胃液及胆盐耐受试验发现,16株菌株中Lr10的耐酸耐胆盐能力较强,其在pH为3.0的人工胃液及胆盐浓度(w/v)为0.0%、0.1%、0.3%及0.5%的MRS培养基中存活率分别为71.43%、66.37%、64.55%及19.12%;经API试剂条及16S rDNA测序将Lr10鉴定为鼠李糖乳杆菌;将Lr10制成脱脂乳悬浮液及脱脂发酵乳进行体内降血脂试验,结果表明,鼠李糖乳杆菌Lr10及其脱脂发酵乳在体内具有明显的降血脂效果。     

传统发酵肉源乳酸菌介导NPC1L1、ABCG5/G8基因表达对胆固醇代谢的影响

过高的胆固醇摄入可能会导致机体心脑血管出现健康问题。通过乳酸菌可以调控小肠中胆固醇代谢相关基因的表达,调节机体内胆固醇的吸收代谢,从而影响体内胆固醇含量。对15株传统发酵肉制品中分离筛选的乳酸菌进行体外降胆固醇能力和耐酸耐胆盐能力筛选,将筛选到的乳酸菌用于动物实验。结果表明,15株乳酸菌中有4株乳酸菌(CM6、CM9、CM28、CM42)具有良好的体外降胆固醇能力,平均降解率为52.92%。对它们进行耐酸和耐胆盐试验,在pH 2和0.3%胆盐添加量的条件下菌株CM6活菌数达到106 CFU/mL,选择CM6进行后续动物实验。乳酸菌灌胃小鼠30 d后,乳酸菌组小鼠血清中总胆固醇含量和甘油三酯含量乳显著低于对照组(P＜0.05);乳酸菌组小鼠小肠中NPC1L1基因相对表达量显著低于对照组(P＜0.05),ABCG5/G8基因表达量显著高于对照组(P＜0.05)结论:乳酸菌CM6具有调控胆固醇代谢相关基因表达的能力,从而降低体内胆固醇含量。     

侗族传统酸肉与腌鱼中降胆固醇乳酸菌的筛选与鉴定

以侗族传统酸肉、腌鱼作为乳酸菌筛选源,分离出23株乳酸菌。采用邻苯二甲醛法筛选出2株体外降胆固醇能力较强的乳酸菌YRA7和YRB4。经形态学观察、理化指标鉴定及16S r DNA分子生物学鉴定,确定2株菌分别为植物乳杆菌(YRA7)和消化乳杆菌(YRB4)。两者均呈现出较好的耐酸、耐盐和耐胆盐特性,在p H3.0以及含6%Na Cl的培养基中可以生长,在含0.3%胆盐的MRS培养基中存活率分别为75.68%(YRA7)和61.37%(YRB4)。此外,两者均具有较好的生长性能与产酸性能,可以作为降胆固醇的潜在益生菌。     

具有胆固醇降解能力的人源乳酸菌筛选及其特性研究

研究旨在筛选出具有降胆固醇能力的人源乳酸菌,为开发良好的乳酸菌产品提供依据。对公司自建菌库中的28株人源乳酸菌中进行胆固醇降解率的初步测定,筛选出3株降解能力较高的乳酸菌进行耐酸耐胆盐的特性试验,最终确定一株具有胆固醇降解能力及特性良好的人源乳酸菌。结果表明,28株人源乳酸菌中讲解率较高的6株乳酸菌分别为来自婴儿粪便源的格氏乳杆菌F020、F024和来源于母乳源格氏乳杆菌B1-26、B1-29以及母乳源罗伊氏乳杆菌B1-27、B1-28。对这6株乳酸菌进行体外胆固醇降解试验得到F024对胆固醇的同化量最高达到25.92%,F020的沉淀量最高达到了10.49%;B1-28的胆盐水解酶活性最高。将格氏乳杆菌F020、F024以及罗伊氏乳杆菌B1-28进行耐酸耐胆盐试验,pH 1.5时,3株乳酸菌均不耐受,pH 2.0和pH 3.0 3 h时,格氏乳杆菌F020的存活率超过100%;在0.3%的胆盐培养基中,格氏乳杆菌F020 3 h存活率达到102.94%。本实验最终选出胆固醇降解率高并且特性良好的格氏乳杆菌F020,为进一步开发乳酸菌产品提供良好依据。     

降胆固醇乳酸菌的益生特性及其作用机理

考察了具有降胆固醇乳酸菌(乳酸乳球菌L14-3、鼠李糖乳杆菌118-1、粪肠球菌M53-2、植物乳杆菌117-1、植物乳杆菌23-1)的益生特性,且初探乳酸菌降胆固醇的作用机理。通过模拟胃液、胰液进行乳酸菌的耐酸耐胆盐测定,并评价了乳酸菌对抗生素的抗性。通过胆固醇、胆盐的共沉淀作用和菌体细胞吸收两种方式去除发酵液中的胆固醇,利用邻苯二甲醛法测定胆固醇的含量,确定胆固醇的去除率。结果表明:通过共沉淀作用和菌体吸收,乳酸乳球菌L14-3和鼠李糖乳杆菌118-1分别去除胆固醇的比例最高。在pH=2.0的人工胃液中,粪肠球菌M53-2和乳酸乳球菌L14-3的活菌数显著高于其他3株菌(P0.05)。粪肠球菌M53-2对pH 3.0的人工胃液有较好的耐受性,存活率显著高于其他4株菌(P0.05)。在pH=8.0人工胰液中,鼠李糖乳杆菌118-1和植物乳杆菌117-1的存活率显著高于其他菌株(P0.05)。植物乳杆菌117-1耐药性最好。因此,研究具有降胆固醇的益生菌具有广阔应用前景。     

分离的巴马人群肠道乳酸菌数量及功能性分析

对采集的广西巴马地区长寿家族粪便样品进行菌株分离,通过平板计数,比浊法和平板扩散法对分离的乳酸菌菌群数量、耐受力和抑菌能力分析。结果表明:不同分离培养基之间的菌落总数有差异,并且杆菌选择性培养基菌落数(108 cfu/g~109 cfu/g)要多于球菌选择性培养基菌落数(107 cfu/g~108 cfu/g);不同性别之间分离的女性肠道乳酸菌总数(8.98±0.42)(lg cfu/g)略高于男性(8.87±0.46)(lg cfu/g),不同年龄组中青少年组的肠道乳酸菌数量最多;分离的乳酸菌耐受能力比较发现中年组(0.408 5±0.082 7)(lg cfu/g)与老年组(0.372 6±0.083 2)(lg cfu/g)的耐受胃液能力相当,且显著大于青少年组(0.339 5±0.072 5)(lg cfu/g)和长寿组(0.282 6±0.038 5)(lg cfu/g);不同年龄组的耐胆盐能力和耐受肠液能力相当;分离的乳酸菌抑菌能力比较发现分离的不同年龄组的乳酸菌抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌能力都是青少年组最强,同一年龄组的乳酸菌抑制大肠杆菌能力较强;分离的男性肠道内的乳酸菌抑制大肠杆菌能力要低于女性,但抑制金黄色葡萄球菌能力相当。     

来宾酒糟酸菜中降胆固醇乳酸菌的筛选鉴定及发酵工艺研究

该研究采用钙溶圈法及MRS-胆固醇培养基从来宾酒糟酸菜汁中分离筛选具有降胆固醇能力的乳酸菌,通过形态观察及分子生物学技术对其进行菌种鉴定,同时对其耐酸性、耐胆盐性能进行研究,并以胆固醇去除率为考察指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明,筛选得1株具有去除胆固醇能力的乳酸菌,编号为XL-02,经鉴定,菌株XL-02为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,其具有较好的耐酸能力和胆盐耐受性。在pH2.0的酸性环境下培养24 h,菌株存活率为3.14%;在胆盐含量为0.3%条件下培养24 h,菌株存活率为12.17%。菌株XL-02去除胆固醇的最优发酵条件为以MRS液体培养基为发酵培养基,初始pH值6.0,接种量4%,发酵温度39 ℃,发酵时间72 h。在此优化条件下,胆固醇去除率为（61.56±0.08）%。     

自然发酵肉制品中乳酸菌的体外降胆固醇特性

为筛选出具有高效降胆固醇作用的乳酸菌,以自然发酵肉制品中分离出的13株乳酸菌为实验对象,采用邻苯二甲醛法对其体外降胆固醇能力进行测定,并对其中2株菌（M12、M23）的作用机理进行初步探讨。结果表明,2株菌均通过同化吸收和共沉淀作用协同降低培养基中的胆固醇;添加0.3 g/100 mL胆盐可极显著增加菌体对胆固醇的去除作用（P＜0.01）,去除率分别为56.05%和58.49%;添加胆固醇和胆盐均可显著提高菌株经超声波处理后的存活率（P＜0.05）,存活率分别为32.09%和37.93%;2株菌的热灭活菌体和休眠菌体也具有一定的胆固醇去除能力,且休眠菌体的去除率高于热灭活菌体。经16S rRNA序列分析,菌株M12为弯曲乳杆菌（Lactobacillus curvatus）,菌株M23为戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）。     

乳酸菌的抗氧化活性和耐酸耐胆盐性能的研究

以清除DPPH自由基和还原能力为指标,对实验室保藏的25株乳酸菌的菌体和无细胞提取物进行体外抗氧化性研究;将抗氧化性强的10株乳酸菌,进行对模拟胃液酸度和肠道胆盐的耐受性研究,比较不同乳酸菌株的抗氧化和耐酸耐胆盐能力,为开发功能性乳酸菌食品提供理论依据。研究表明:不同属和同属的不同菌株的乳酸菌抗氧化能力和耐酸耐胆盐存在差异,且其抗氧化活性物质存在部位不同。比较发现干酪乳杆菌GL-2抗氧化性高且耐酸耐胆盐。干酪乳杆菌GL-2菌体浓度为109cfu/mL时,菌体和无细胞提取物DPPH自由基清除率分别为37.22%、42.78%,还原活性分别相当于104.84、107.10μmol/L L-半胱氨酸;pH=3.0的酸性缓冲溶液处理2h后存活率均达100%,在改良MRS培养基(胆盐为0.5%(W/V))处理4h存活率为0.35%。     

优良乳酸菌的筛选及其耐药性研究

从传统发酵食品分离的乳酸菌中筛选出发酵特性较好,耐酸耐胆盐能力较强的乳酸菌,并研究其耐药性。结果表明,60株乳酸菌中有28株乳酸菌的凝乳时间在10h-24h之间,p H在3.85-4.78,产酸速率中等;其中有10株乳酸菌在p H3.0和0.3%胆盐的环境中培养3h的OD值均分别大于0.61和0.42,并显著高于其他菌株(P0.05);对阿莫西林、头孢唑啉均为敏感,对阿米卡星、卡那霉素均为耐药。菌株A59、A14的凝乳特性较好,耐酸耐胆盐能力较强,对抗生素较为敏感。     

花生四烯酸、二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸 在炎症中的作用概述

心脑血管疾病、肿瘤、糖尿病、神经系统疾病、自身免疫等疾病严重危害着人类的生命和健康,并消耗着大量医疗资源。事实上,很多疾病发生和发展的背后都伴随着炎症反应,炎症是众多疾病的病理基础,甚至是导致这些疾病的诱因。炎症本身是机体的防御性反应,但过度的炎症反应和长期慢性炎症会损害机体的稳态。炎症的调节和控制由炎症介质介导,花生四烯酸(arachidonic acid,AA)、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)等长链多不饱和脂肪酸(10ng-chain polyunsaturated fatty acids,LC-PUFAs)的衍生物是一类重要的调控炎症的介质。炎性细胞间的交流和细胞内信号传递与LC-PUFAs有关。AA经环氧酶和脂氧合酶合成的类二十烷酸主要起促炎作用,但有的也有抗炎作用。DHA和EPA在体内起抗炎作用,由它们合成的消退素(resolvins,Rvs)和保护素(protectin,PD)是重要的抗炎活性物质。DHA和EPA还可以干扰炎性细胞内信号传导途径来抑制炎症反应。本文从炎症与疾病的关系、LC-PUFAs的衍生物及其促炎和抗炎机制等方面综述了AA、DHA和EPA在炎症中的作用。     

Anti-obesity effects of conjugated linoleic acid, docosahexaenoic acid, and eicosapentaenoic acid

Obesity has become a prevailing epidemic throughout the globe. Effective therapies for obesity become attracting. Food components with beneficial effects on "weight loss" have caught increasing attentions. Conjugated linoleic acid (CLA), docosahexaenoic acid (DHA), and eicosapentaenoic acid (EPA) belong to different families of polyunsaturated fatty acids (PUFA). However, they have similar effects on alleviating obesity and/or preventing from obesity. They influence the balance between energy intake and expenditure; and reduce body weight and/or fat deposition in animal models, but show little effect in healthy human subjects. They inhibit key enzymes responsible for lipid synthesis, such as fatty acid synthase and stearoyl-CoA desaturase-1, enhance lipid oxidation and thermogenesis, and prevent free fatty acids from entering adipocytes for lipogenesis. PUFA also exert suppressive effects on several key factors involved in adipocyte differentiation and fat storage. Despite their similar effects and shared mechanisms, they display differences in the regulation of lipid metabolism. Moreover, DHA and EPA exhibit "anti-obesity" effect as well as improving insulin sensitivity, while CLA induces insulin resistance and fatty liver in most cases. A deeper and more detailed investigation into the complex network of anti-obesity regulatory pathways by different PUFA will improve our understanding of the mechanisms of body weight control and reduce the prevalence of obesity.     

气相色谱法同时快速测定食品中丙酸、山梨酸、苯甲酸及脱氢乙酸

通过液液萃取净化样品研究,建立了食品中丙酸、山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸及其盐含量气相色谱同时快速测定方法,适用于固体非酯(脂)类食品的检测。结果表明:丙酸的回收率在85.1%~91.3%之间,其余3种防腐剂的回收率均在95.2%~99.4%之间;实验室内变异系数(CV,n=6)最大值≤4.7%,4种防腐剂检出限均在0.002 g/kg以下。4种目标物在有杂质干扰时,可用不同的极性毛细管柱做进一步的确认。本方法具有适用范围广、检测效率高、重现性好、准确度高、检出限低的特点,推广应用对我国食品安全的监督检验具有重要的意义。     

生活饮用水中乙二胺四乙酸和次氮基三乙酸含量测定

目的：建立一种生活饮用水中乙二胺四乙酸（EDTA）和次氮基三乙酸（NTA）的高效液相色谱测定方法。方法：样品与三氯化铁络合后,以甲醇和0.2 mmol/L四丁基溴化铵—磷酸缓冲溶液（pH 2.5）为流动相,梯度洗脱后经Thermo-C₁₈（4.6 mm×250 mm）色谱柱分离,DAD检测器检测,外标法定量。结果：EDTA和NTA在0.1～2.0 mg/L质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数分别为0.999 5,0.999 2;两者的检出限为0.05 mg/L,定量限为0.1 mg/L,平均加标回收率为93.5%～111.4%,相对标准偏差（RSD）为3.63%～7.39%。结论：该方法操作简便,重复性好,灵敏度高,具有较好的实用性。     

高效液相色谱法检测贝类中的乳酸和琥珀酸

研究探讨利用高效液相色谱测定贝类中乳酸和琥珀酸的样品处理方法和测定方法,结果显示:与乙醇沉淀法、国标法相比,流动相提取法更适合作为样品的提取方法,在检测条件中,流动相为pH2.5的2.0%NH4H2PO4,流速在1.0mL/min,波长为205nm为最优条件。此方法具有较好的线性、较高的准确度和精密度,加标实验回收率为94.0%～99.9%,相对标准偏差为0.09%～0.14%。也测定了两种贝类中乳酸和琥珀酸的含量。     

Short communication: Eicosatrienoic acid and docosatrienoic acid do not promote vaccenic acid accumulation in mixed ruminal cultures

Previous research found that docosahexaenoic acid (C22:6n-3) was a component of fish oil that promotes trans-C18:1 accumulation in ruminal cultures when incubated with linoleic acid. The objective of this study was to determine if eicosatrienoic acid (C20:3n-3) and docosatrienoic acid (C22:3n-3), n-3 fatty acids in fish oil, promote accumulation of trans-C18:1, vaccenic acid (VA) in particular, using cultures of mixed ruminal microorganisms. Treatments consisted of control, control plus 5 mg of C20:3n-3 (ETA), control plus 5 mg of C22:3n-3 (DTA), control plus 15 mg of linoleic acid (LA), control plus 5 mg of C20:3n-3 and 15 mg of linoleic acid (ETALA), and control plus 5 mg of C22:3n-3 and 15 mg of linoleic acid (DTALA). Treatments were incubated in triplicate in 125-mL flasks, and 5 mL of culture contents was taken at 0 and 24 h for fatty acid analysis by gas-liquid chromatography. After 24 h of incubation, the concentrations of trans-C18:1 (0.87, 0.88, and 0.99 mg/culture), and VA (0.52, 0.56, and 0.62 mg/culture) were similar for the control, ETA, and DTA cultures, respectively. The concentrations of trans-C18:1 (5.51, 5.41, and 5.36 mg/culture), and VA (4.78, 4.62, and 4.59 mg/culture) were also similar between LA, ETALA, and DTALA cultures, respectively. These data suggest that C20:3n-3 and C22:3n-3 are not the active components in fish oil that promote VA accumulation when incubated with linoleic acid.     

酸水解去除谷氨酸母液中的焦谷氨酸

焦谷氨酸没有鲜味,是谷氨酸产品中的无效成分,其安全性尚无定论.控制谷氨酸浓度为16g/100mL、焦谷氨酸的浓度为3.2g/100mL,试验研究了水解温度、硫酸加入量、水解时间等因素对降低谷氨酸母液中焦谷氨酸含量的影响.在保证谷氨酸回收率的基础上,确定出使焦谷氨酸含量达到1.07％及以下的最优水解组合:水解温度(95±5)℃、浓硫酸加入量30％ (v/v)、水解时间2h.在上述试验中,焦谷氨酸的初始含量均为20％.通过改变初始焦谷氨酸氨酸含量20%～35％,最优水解组合下水解后焦谷氨酸含量为0.96％～1.04％,仍可达到1.07％以下.     

气相色谱法测定鱼油中的二十碳五烯酸、 二十二碳六烯酸和二十二碳五烯酸

目的通过优化鱼油中二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)和二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid,DPA)的测定条件,建立鱼油中EPA、DHA和DPA气相色谱定量检测分析方法。方法采用正己烷处理样品,经色谱柱(Agilent,Elite-WAX,30 m×0.25 mm,0.25μm)分离鱼油中的EPA、DHA、DPA甲酯标准品,并进行定量检测。结果 EPA浓度在0.36~3.6 mg/m L、DHA浓度在0.37~3.7 mg/m L、DPA浓度在0.16~1.62 mg/m L的范围内与峰面积的线性良好,相关系数r0.999。在80%、100%、120%添加水平下,EPA、DHA和DPA的检出限分别为0.01%、0.03%、0.009%,EPA、DHA和DPA的回收率分别为96.2%、96.4%、95.7%。结论气相色谱法灵敏度高、准确、重现性好,适用于鱼油中EPA、DHA和DPA的含量测定。     

Absorption of folic acid and ascorbic acid from nutrient comparable beverages

One hundred percent fruit juices can help consumers increase the nutrient content of the diet since these beverages can be naturally rich in micronutrients. Micronutrient-fortified low-calorie beverages are an important alternative to those wishing to minimize their calorie intakes. However, little is known about the bioavailability of nutrients from fortified beverages relative to 100% fruit juices. The present study examined the bioavailability of ascorbic acid (AA) and folic acid (FA) in 100% orange juice (OJ) and a low-calorie beverage fortified with these nutrients. In a within-subjects, cross-over design, 12 adult men consumed a 591 mL serving of OJ, a low-calorie beverage fortified with AA and FA, and 1% low fat milk. Participants were aged 20 to 35 y, with body mass indexes between 20 and 30 kg/m(2). Blood plasma concentrations of AA and serum concentrations of FA were assayed by serial blood draws, made at 30 min intervals for 4.5 h. Blood plasma concentration of AA was significantly greater after ingestion of the fortified beverage compared to after OJ ingestion. However, the bioavailability of AA did not significantly differ from that of OJ. Analyses of FA indicated no significant difference between fortified beverage and OJ. Consumption of both vitamin containing beverages led to higher concentrations of AA and FA than the milk control. This study showed that similar levels of AA and FA bioavailability can be attained through ingestion of 100% OJ and a fortified beverage.     

阿魏酸与咖啡酸对丙烯酰胺形成及消减的影响

探讨阿魏酸与咖啡酸在美拉德模拟体系中对丙烯酰胺形成和消减的影响。结果表明:在天冬酰胺/葡萄糖模拟反应体系中,阿魏酸与咖啡酸的添加量为250 mmol/L和25mmol/L时可抑制丙烯酰胺的形成,而二者浓度低于2.5mmol/L时则促进丙烯酰胺的形成。将阿魏酸与咖啡酸分别与丙烯酰胺单独高温处理,发现2种酚酸对丙烯酰胺都具有消减效果,但效果不明显,因此判定阿魏酸与咖啡酸对美拉德模拟体系中丙烯酰胺含量的影响主要作用于丙烯酰胺的形成阶段。另外,酸性条件下,醌型酚酸比酚型酚酸对丙烯酰胺的消减作用更大,而在中性条件下,酚型酚酸的消减作用更强。