软枣猕猴桃提取物对H_2O_2诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究软枣猕猴桃提取物对H_2O_2诱导血管内皮细胞损伤的保护作用。方法用过氧化氢(H_2O_2)诱导血管内皮细胞损伤,采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测软枣猕猴桃提取物对细胞增殖的影响,放射免疫法检测其对内皮素(ET-1)及前列环素(PGI_2)释放的影响。结果过氧化氢对血管内皮细胞具有损伤作用,软枣猕猴桃提取物能显著对抗过氧化氢引起的血管内皮细胞损伤,显著抑制乳酸脱氢酶(LDH)渗漏、显著增加PGI_2释放及显著减少ET-1释放。结论软枣猕猴桃提取物对过氧化氢诱导的血管内皮损伤具有显著保护作用。     

川芎嗪对H_2O_2诱导PC12细胞凋亡的保护作用研究

目的探讨盐酸川芎嗪对H2O2诱导PC12细胞损伤的保护作用。方法采用川芎嗪预处理PC12细胞后,制备H2O2细胞损伤模型,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性及细胞活性氧(ROS)水平来反映细胞损伤程度,流式细胞术和蛋白印迹法分析细胞凋亡发生机制。结果川芎嗪预处理后,PC12细胞的存活数提高,LDH释放及ROS水平显著降低(P<0.05),总凋亡率降低,caspase-3活性降低,Bax/Bcl-2比值降低。结论川芎嗪预处理后可以降低H2O2诱导的PC12细胞凋亡。     

AT2受体介导入内皮细胞凋亡

研究了AT2受体在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ)及2型血管紧张素Ⅱ受体（AT2）兴奋剂CGP42112A作用下能否诱导人内皮细胞凋亡及其与半胱氨酰蛋白酶（cystolic aspartatic proteases)之Caspase-3的关系。结果显示，AngⅡ或CGP42112A可以诱导人内皮细胞出现典型的细胞凋亡，凋亡细胞阳性率极显著高于阴性对照组，凋亡的相对强度与AngⅡ呈现典型的剂量依赖关系，Cas-pase-3酶活性在AngⅡ或CGP42112A作用后有极显著的增加，而在用Caspase-3抑制剂DEVD-fmk后凋亡不能诱导，提示AngⅡ或CGP42112A可以通过AT2受体诱导人内皮细胞凋亡，并且此凋亡是Caspase-3依赖性的。     

AT_2受体介导人内皮细胞凋亡

研究了 AT2 受体在血管紧张素 II (Ang II)及 2型血管紧张素 II受体 (AT2 )兴奋剂 CGP42 112 A作用下能否诱导人内皮细胞凋亡及其与半胱氨酰蛋白酶 (cystolic aspartatic proteases )之 Caspase-3的关系。结果显示 ,Ang II或 CGP42 112 A可以诱导人内皮细胞出现典型的细胞凋亡 ,凋亡细胞阳性率极显著高于阴性对照组 ,凋亡的相对强度与 Ang II呈现典型的剂量依赖关系。Caspase-3酶活性在 Ang II或 CGP42 112 A作用后有极显著的增加 ,而在用 Caspase-3抑制剂 DEVD-fmk后凋亡不能诱导。提示 AngII或 CGP42 112 A可以通过 AT2 受体诱导人内皮细胞凋亡 ,并且此凋亡是 Caspase-3依赖性的     

中介素对大鼠肾小球内皮细胞缺氧损伤的保护作用

目的研究中介素(IMD)对大鼠肾小球内皮细胞(r RGEC)缺氧损伤的作用。方法 r RGEC传代培养后,随机分为正常组(N组),缺氧组(H组)及IMD组,根据培养液中IMD的终浓度将缺氧处理组分为10-8mol/L(IMD1)、10-7 mol/L(IMD2)、10-6 mol/L(IMD3)组。流式细胞仪分析细胞凋亡;检测内皮单层底顶室异硫氰酸荧光素(FITC)-BSA荧光强度,以底顶室荧光强度比值的变化来表示细胞通透性的变化;酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清液中4-羟壬烯醛(4-HNE)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)变化;实时荧光定量PCR(RTPCR)检测细胞细胞缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及血管内皮生长因子(VEGF)m RNA的表达;免疫细胞化学法检测HIF-1α及VEGF蛋白表达并进行半定量分析。结果与N组相比,IMD1、IMD2、IMD3组细胞凋亡率均降低(P<0.05);H、IMD1、IMD2、IMD3组细胞通透性均增加(P<0.05),H组上清中4-HNE、ROS升高,SOD降低(P<0.05);IMD2组HIF-1αm RNA相对表达量及蛋白含量增高(P<0.05),VEGFm RNA相对表达量及蛋白含量增高(P<0.05);与H组相比,IMD1、IMD2、IMD3组细胞凋亡率均降低(P<0.05),细胞通透性降低(P<0.05),4-HNE、ROS降低,SOD升高(P<0.05),IMD2组HIF-1αm RNA相对表达量及蛋白含量增高(P<0.05),VEGF m RNA相对表达量及蛋白含量增高(P<0.05)。相关分析发现HIF-1αm RNA、VEGF m RNA相对表达量与细胞凋亡率呈较强负相关(r=-0.919、-0.911,P<0.05)。结论 IMD可减轻肾小球内皮细胞缺氧损伤,保护肾小球内皮细胞,与其上调VEGF与HIF-1α生成有关。     

氧化应激在乙醇诱导内皮细胞凋亡中的作用

目的 观察乙醇诱导的内皮细胞凋亡及氧化应激所起的作用.方法 体外培养人内皮细胞株EA.hy926,实验分对照组、实验组（ 0.6% 乙醇）、N-乙酰半胱氨酸（NAC）组（0.6% 乙醇＋ 10 mmol&#8226;L^-1 NAC）,各组以相应药物孵育12 h,采用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞活性氧（ROS）和凋亡率,相应试剂盒测定超氧化物歧化酶（SOD）活力及丙二醛（MDA）水平.结果与对照组相比,实验组内皮细胞增殖受到明显抑制,SOD活力从(40.8±2.9 )U&#8226;mg^-1蛋白降至（29.2±4.0） U&#8226;mg^-1蛋白、MDA水平由（46.5±3.8） nmol&#8226;mg^-1蛋白升至（89.5±5.6） nmol&#8226;mg^-1蛋白、ROS荧光强度从（93.69±7.58）升高到（162.30±18.85）,凋亡率由（0.49± 0.16）% 增至（5.31±0.54）% (均P＜0.01);而NAC组凋亡率、ROS和MDA水平较实验组均降低（P＜0.01),SOD活力显著恢复.结论 乙醇引起的氧化应激在其诱导的内皮细胞凋亡中起重要作用.     

大黄酸对H_2O_2诱导HK-2细胞凋亡的保护作用及其机制研究

目的观察大黄酸对H2O2诱导HK-2细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 H2O2处理HK-2细胞建立氧化应激模型,实验过程中采用大黄酸进行预处理,MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,利用DHE荧光探针对细胞内ROS水平进行荧光染色强度的检测,通过Western blotting检测MAPK的磷酸化水平。结果 H2O2作用于HK-2细胞后,能够显著降低细胞活力,诱导HK-2细胞发生凋亡,增强HK-2细胞内ROS荧光强度,同时激活MAPK信号通路,增加p38和JNK的磷酸化。而加入大黄酸预处理后,可明显抑制H2O2对细胞活力及凋亡的影响,减少HK-2细胞内ROS的含量,抑制p38和JNK的磷酸化。结论大黄酸抑制H2O2诱导的HK-2细胞凋亡部分通过抑制JNK和p38 MAPK的磷酸化而发挥作用。     

牛磺酸对高糖诱导的大鼠血管内皮细胞氧化应激与凋亡的保护作用

目的观察牛磺酸对高糖培养诱导大鼠血管内皮细胞氧化应激与凋亡的影响。方法组织块法原代培养大鼠胸主动脉内皮细胞,取对数生长期的第4代内皮细胞进行试验。培养体系中的葡萄糖浓度保持30 mmol/L,加入终浓度为0,2.5,5,10,20 mmol/L的牛磺酸共培养24 h,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平及细胞凋亡率,比色法测定细胞培养基中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与0 mmol/L比较,2.5~20 mmol/L组细胞内ROS水平依次降低,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);5和10 mmol/L牛磺酸抑制细胞凋亡作用明显。5~20 mmol/L组MDA含量逐渐降低,而SOD活性逐渐增强。结论牛磺酸能削弱高糖诱导大鼠血管内皮细胞的氧化应激,抑制细胞凋亡。     

出血性蛇毒诱导血管内皮细胞凋亡的研究进展

出血性蛇毒中含有多种能专一性诱导血管内皮细胞凋亡的组分,如金属蛋白酶/解离素蛋白家族和L-氨基酸氧化酶。本文介绍了诱导血管内皮细胞凋亡的出血性蛇毒组分以及相关的分子机制。     

红车轴草总黄酮对H_2O_2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法利用体外培养的人脐静脉血管内皮细胞ECV-304,采用H2O2诱导细胞损伤模型,观察红车轴草总黄酮对H2O2所致的血管内皮细胞损伤的保护作用。MTT法检测细胞存活率、试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及细胞中丙二醛(MDA)的含量、乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量;荧光法检测Caspase-3的活性;Hoechst33342及PI荧光染色法观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导血管内皮细胞凋亡的影响;JC-1染色法检测红车轴草总黄酮对H2O2损伤血管内皮细胞线粒体膜电位的影响,检测各组细胞内ROS的表达水平。结果与空白对照组相比,H2O2损伤组细胞存活率降低、细胞内LDH,漏出量增加(P<0.001);抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px活性降低、MDA含量升高(P<0.01);Caspase-3活性升高(P<0.001)、ROS含量升高、线粒体膜电位降低;与模型组相比,红车轴草总黄酮各剂量组(12.5、25、50mg.L-1)及槲皮素组(30 mg.L-1)细胞存活率明显增加(P<0.01,P<0.05),红车轴草总黄酮各剂量组(12.5、25、50 mg.L-1)及槲皮素组(30 mg.L-1)均能明显降低LDH漏出量(P<0.01,P<0.05)、明显增强SOD、CAT及GSH-Px活力(P<0.01,P<0.05)、降低MDA、ROS含量及Caspase-3活性(P<0.05,P<0.01)、升高线粒体膜电位(P<0.01)。结论红车轴草总黄酮对H2O2诱导的内皮细胞损伤有明显的保护作用,其初步作用机制可能与抗自由基,减轻脂质过氧化、降低Caspase-3活性及稳定线粒体膜电位有关。     

神经妥乐平对H2O2致PC12细胞损伤的保护作用

目的 探索神经妥乐平对H2O2诱导的PC12细胞氧化应激损伤的影响及其潜在机制.方法 用CCK-8法检测细胞存活率,以流式细胞术检测细胞氧化损伤的发生、细胞内活性氧的生成及线粒体膜电位的变化,荧光显微镜观察细胞内活性氧的产生,qRT-PCR测定Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA的表达.结果 PC12细胞存活率随H2O2浓度的增加而逐渐下降.其中,450μM H2O2处理细胞24 h后细胞存活率、凋亡率、坏死率明显降低;细胞内活性氧水平表达明显升高;线粒体膜电位JC-1红/绿荧光比值下降;Bax和Caspase-3的mRNA表达升高,而Bcl-2的mRNA表达下降,以上指标与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).而预先给予0.01UN/ml的NTP处理细胞12h可明显提高细胞存活率,降低细胞凋亡率和坏死率,减少细胞内活性氧生成并提高线粒体膜电位,抑制Bax和Caspase-3的mRNA表达,促进Bcl-2 mRNA的表达,以上指标与H2O2组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 NTP能抑制H2O2诱导的PC12细胞损伤,其神经细胞保护作用可能与其降低细胞内活性氧水平、维持线粒体膜电位的高能状态和抑制促凋亡基因表达、促进抗凋亡基因表达有关.     

金樱子提取液对H2O2诱导HaCaT细胞氧化损伤保护作用研究

目的探讨金樱子提取液对H2O2诱导后人角质形成细胞(HaCaT cell)氧化损伤的保护作用。方法体外培养人角质形成细胞,用不同浓度的H2O2诱导细胞构建氧化应激损伤模型。CCK-8法检测不同浓度金樱子提取液对细胞增殖作用的影响;Hochest染色法检测不同浓度金樱子提取液对细胞凋亡作用的影响。结果100μmol·L-1 H2O2为构建氧化应激损伤模型的最适浓度。CCK-8法检测结果表明金樱子提取液能显著提高细胞的增殖,且随浓度的升高而增大。Hochest染色结果表明金樱子提取液能有效抑制由H2O2氧化损伤引起的细胞凋亡。结论金樱子提取液对H2O2诱导后的人角质形成细胞具有一定的氧化损伤保护作用。     

人参皂苷Rb1对H_2O_2诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的保护作用

目的观察人参皂苷Rb1对H2O2诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法在培养的新生大鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型,观察不同剂量组人参皂苷Rb1(20、40、80mg·L-1)对心肌细胞凋亡率、丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及细胞内钙离子变化的影响。结果不同剂量组人参皂苷Rb1可以减少心肌细胞凋亡率、降低MDA含量、增加SOD活性、减少细胞内钙超载。结论人参皂苷Rb1可以抑制H2O2引起的新生大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与其抗脂质氧化和减少细胞内钙超载有关。     

橙皮甙在H2O2诱导的大鼠心肌细胞凋亡中的作用

目的研究橙皮甙对H2O2诱导的大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法体外培养SD乳鼠心肌细胞,用H2O2诱导培养的大鼠心肌细胞凋亡,制造心肌细胞凋亡模型。设立对照组、模型组、溶媒组、橙皮甙低剂量组（终末浓度10^-5mmol／L）、中剂量组（终末浓度10^-5mmol／L）、高剂量组（终末浓度10^-5mmol／L）,于药物作用4、8、12h后用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果橙皮甙组与模型纽比较有抑制SD乳鼠心肌细胞凋亡的作用,且效应随橙皮甙浓度的增加和时间的延长而增强（P〈0．01）。结论橙皮甙对H2O2诱导的心肌细胞凋亡有抗凋亡保护心肌细胞的作用。     

Pramipexole protects against H2O2-induced PC12 cell death

Pramipexole, a novel non-ergot dopamine (DA) agonist, has been successfully applied to the treatment of Parkinson’s disease (PD). Although the specific cause of PD remains unknown, recent studies have provided evidence that oxidative stress plays a role in the parthenogenesis of the disease. In the present study, we examined the effect of pramipexole on hydrogen peroxide (H₂O₂, 100 μM)-induced PC12 cell death, and the intracellular mechanism of this effect. The 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium (MTT) assay revealed that pretreatment of PC12 cells with pramipexole (1–100 μM) resulted in significant protection against H₂O₂-induced cell death in a concentration-dependent manner. The protective effect of pramipexole was not affected by pretreatment with the DA receptor antagonists sulpiride, spiperone or domperidone, suggesting that the effect of pramipexole is not mediated by DA receptors. In PC12 cells, pramipexole inhibited H₂O₂-induced lactate dehydrogenase (LDH) leakage, as well as H₂O₂-induced cytochrome c release and caspase-3 activation with the resultant apoptosis. It was also observed in PC12 cells that H₂O₂ stimulated phosphorylation of mitogen-activated protein (MAP) kinases, i.e., extracellular signal-regulated kinase1/2 (ERK1/2), c-Jun NH₂-terminal kinase (JNK) and p38 MAP kinase. Pramipexole inhibited H₂O₂-induced JNK and p38 MAP kinase, but not ERK1/2 phosphorylation. Furthermore, in these cells experiments with a fluorescent probe, 2-[6-(4'-amino)phenoxy-3H-xanthen-3-on-9-yl]benzoic acid, revealed that pramipexole, the JNK inhibitor SP600125 and the p38 MAP kinase inhibitor SB203580 inhibited the generation of H₂O₂-induced reactive oxygen species. Caspase inhibitors Z-DEVD-FMK and Z-IETD-FMK, as well as SP600125 and SB203580, inhibited H₂O₂-induced PC12 cell death to a similar extent as pramipexole. These results suggest that pramipexole exerts a protective effect against oxidative stress-induced PC12 cell death in part through an inhibition of JNK and p38 MAP kinase.     

氯苄四氢小檗碱对抗H2O2引起无血清培养的血管内皮细胞凋亡及坏死

目的：研究氯苄四氢小檗碱对过氧化氢（H2O2）引起无血清培养的小牛主动脉血管内皮细胞的凋亡、增殖、坏死的影响。方法：通过体外细胞培养，以噻唑兰（MTT）法测定细胞存活率；用流式细胞术检测细胞DNA含量及凋亡细胞百分率、增殖率；DNA琼脂糖凝胶电泳法观察细胞凋亡过程中DNA断裂程度。结果：H2O2诱导无血清培养的内皮细胞凋亡，氯苄四氢小檗碱可显降低内皮肌细胞中凋亡细胞百分率，并抑制其增殖，也减少凋亡细胞DNA断裂，同时也减少其引起的平滑肌细胞坏死。结论：氯苄四氢小檗碱可对抗H2O2引起的无血清培养的血管平滑肌细胞凋亡、增殖及坏死。     

去甲二氢愈创木酸类似物对过氧化氢诱导细胞损伤的保护作用

目的 探讨去甲二氢愈创木酸(NDGA)类似物3g对过氧化氢(H2O2)诱导细胞氧化应激损伤的作用.方法 人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y分为DMSO组(A组)、NDGA类似物3g 5μmol/L组(B组)、NDGA 5μmol/L组(C组)、H2 O2组(D组)、NDGA类似物3g 5μmol/L+H2 O2组(E组).采用MTT法检测细胞生存率,4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色检测细胞凋亡情况,流式细胞术检测活性氧(ROS)水平,试剂盒检测丙二醛(MDA)水平,免疫荧光观察核因子E2相关因子2(Nrf2)入核情况,Western blot法检测Bax、Bcl-2、血红素氧化酶1(HO-1)和谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)的蛋白表达.结果 B组和C组细胞生存率较A组增加(P<0.05).与A组相比,D组细胞发生凋亡现象,细胞生存率降低,MDA和ROS水平升高(P<0.05);而E组加入NDGA类似物3g后能逆转上述变化过程(P<0.05).与A组相比,D组和E组Bax蛋白表达增加,Bcl-2蛋白表达减少(P<0.05),D组变化更加明显(P<0.05).B组经NDGA类似物3g处理后能够诱导Nrf2进入细胞核.B组HO-1和GCLC蛋白表达较A组增加(P<0.05).结论 NDGA类似物3g通过降低ROS和MDA水平及细胞凋亡,并激活Nrf2通路,从而起到细胞保护作用.     

高糖增强过氧化氢诱导牛主动脉内皮细胞凋亡(英文)

目的:研究高糖对过氧化氢(H_2O_2)诱导牛主动脉内皮细胞(BAEC)凋亡作用。方法:BAEC培养并传代于正常葡萄糖(5.5 mmol·L~(-1))和高糖(25mmol·L~(-1))中,经H_2O_2处理24 h后,Hoechst 33258染色,荧光显微镜观察形态学变化及凋亡细胞计数;琼脂糖凝胶电泳分析DNA降解,Western blot法检测磷酸化p38 CCDPK表达。结果:H_2O_2诱导BAEC产生典型的凋亡细胞形态学变化(核浓染,核碎裂)。在100-300 μmol·L~(-1)范围内,正常糖和高糖BAEC经H_2O_2处理后,浓度依赖性诱导细胞凋亡和磷酸化p38 CCDPK表达。高糖条件下诱导BAEC DNA降解浓度低于正常糖BAEC,细胞凋亡率和磷酸化p38 CCDPK表达均显著高于正常糖组(p<0.05)。结论:高糖促进H_2O_2诱导BAEC凋亡,可能与其增强磷酸化p38 CCDPK的表达相关。