HOXA10基因在子宫内膜组织中的表达及与不孕的关系

目的　探讨HOXA10基因在正常育龄妇女及不明原因不孕患者子宫内膜中的表达 ,在着床过程中的作用及与不孕的关系。方法　采用原位杂交和逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,检测 5 2例正常育龄妇女及 38例不明原因不孕患者子宫内膜组织中HOXA10基因mRNA的表达。其中 ,正常育龄妇女子宫内膜周期为 10例增殖早期、10例增殖晚期、9例分泌早期、16例分泌中期、7例分泌晚期 ,不明原因不孕患者子宫内膜周期为增殖早期 7例、增殖晚期 8例、分泌早期 6例、分泌中期 11例、分泌晚期 6例。结果　 (1)HOXA10基因mRNA在正常育龄妇女子宫内膜腺体及间质中均有表达。原位杂交法检测 (以显色区灰度阳性单位表示 )显示 ,分泌中期腺体为 5 6 9± 0 5 7、间质为 7 48± 0 6 7,分泌晚期腺体为 5 99± 0 40、间质为 7 98± 1 0 8,显著高于增殖早期 (腺体 3 0 4± 0 30 ,间质3 2 5± 0 31)、晚期 (腺体 3 35± 0 2 0 ,间质 3 2 0± 0 37)和分泌早期 (腺体 3 0 7± 0 2 6 ,间质 3 18± 0 2 7)(P <0 0 1) ;分泌中、晚期间质表达高于腺体 (P <0 0 1)。RT PCR法检测显示 ,HOXA10基因mRNA表达 ,分泌中期为 (5 7 0± 3 4) %、晚期为 (5 6 2± 2 9) % ,显著高于增殖早期的 (31 8± 2 6 ) %、晚期的(32 2± 2 3) %和     

HOXA-10、HOXA-11、Esr2、Pgr在控制性超排卵小鼠围着床期子宫内膜表达的研究

目的:检测同源框基因HOXA-10、HOXA-11以及雌激素受体Esr2、孕激素受体Pgr在控制性超排卵(COH)小鼠围着床期子宫内膜中的表达,探讨COH对子宫内膜容受性的影响。方法:将30只SPF级雌性昆明小鼠随机分为模型组(GnRH-a+HMG+HCG)和对照组(生理盐水),每组15只,造模成功后,计算子宫脏器指数,光学显微镜观察子宫内膜组织学变化;应用RT-PCR和Real-time PCR方法检测小鼠子宫内膜中HOXA-10、HOXA-11、Esr2、Pgr mRNA的表达。结果:模型组围着床期小鼠子宫脏器指数较对照组显著降低(P<0.05),子宫内膜发育延迟,子宫内膜成熟度及厚度降低;模型组小鼠HOXA-10、HOXA-11、Pgr mRNA表达较对照组显著下降(P<0.05),而Esr2 mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论:COH引起HOXA-10、HOXA-11、Pgr mRNA表达下降,Esr2mRNA表达升高,致使围着床期内膜准备不足,子宫内膜容受性下降。     

雌/孕激素受体和HOXA-9基因在输卵管和异位妊娠输卵管中的表达

目的:探讨雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和HOXA-9基因在人输卵管中的表达及与输卵管妊娠的关系。方法:采用免疫组化和原位杂交方法对34例正常输卵管和38例妊娠输卵管黏膜中ER、PR和HOXA-9基因表达进行研究。结果:ER、PR在正常增生期和分泌期输卵管黏膜上皮中的表达率较高;在妊娠输卵管黏膜上皮中的表达率明显下降(P<0.01)。HOXA-9基因在正常增生期输卵管中的表达率较高,分泌期输卵管中表达降低,而在妊娠输卵管中表达率又有所增高(高于分泌期输卵管的表达率,P<0.05)。结论:ER、PR在输卵管黏膜上皮中的表达下降和HOXA-9基因表达增强与输卵管妊娠密切相关;在正常分泌期输卵管黏膜上皮中,ER、PR表达水平上调和HOXA-9基因表达下调可能起着屏障作用,防止输卵管着床的发生。     

自身免疫与不孕的热点问题讨论

主要讨论内容1.自身免疫与不孕2 .抗子宫内膜抗体与不孕3.抗卵巢抗体与不孕4 .抗核杭体与不孕5 .抗磷脂抗体与不孕6 .抗精子抗体与不孕自身免疫与不孕　　林其德教授　根据流行病学研究,10 %～15 %的配偶患有不孕症(infertility) ,即12个月无避孕的性生活之后无法受孕。而约10 %患不孕症的配偶不能明确病因。对于这部分不明原因的不孕症,目前倾向认为其发生机制可能与免疫有关。近2 0年来,陆续报道不明原因的不孕患者自身免疫异常发生率上升,提示需要研究自身免疫对受孕能力的影响。所谓自身免疫是指机体免疫系统产生针对自身抗原的自身抗体…     

输卵管妊娠3种方式治疗后不孕患者输卵管状态分析

输卵管妊娠是最常见的异位妊娠,近年发病率逐年上升.输卵管妊娠后生育能力降低,是引起不孕的重要原因之一.研究输卵管妊娠后不孕患者的病变状况,对减少不孕症的发生,治疗输卵管性不孕具有重要意义.     

HOXA-10、PR在输卵管粘膜的表达与输卵管妊娠发生的关系

目的:探讨HOXA-10、PR在输卵管妊娠发生中的作用。方法:用免疫组化法分别检测20例输卵管妊娠患者异位着床部位粘膜组织,20例正常分泌期输卵管粘膜组织及20例正常宫内早孕期子宫蜕膜组织中HOXA-10基因、PR的蛋白表达水平。结果:(1)HOXA-10基因在输卵管妊娠患者异位着床部位的阳性表达明显高于正常分泌期输卵管粘膜的表达,两组差异有统计学意义(P<0.05);但接近正常早孕期子宫蜕膜组织中的表达,两组差异无统计学意义(P>0.05);(2)PR在输卵管妊娠患者异位着床部位上皮细胞中的阳性表达明显低于在正常分泌期输卵管的表达,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);但接近于在正常早孕期子宫蜕膜的表达,两组比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)PR在输卵管妊娠患者异位着床部位间质中的阳性表达明显高于正常分泌期输卵管的表达,两组差异有统计学意义(P<0.05);但接近正常早孕期子宫蜕膜的表达,两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:输卵管妊娠异位着床部位HOXA-10基因表达增强,上皮细胞PR表达下降或缺失和间质细胞表达增强,与输卵管妊娠发生密切相关。     

原位杂交检测同源框基因HoxA11在人月经周期子宫内膜的表达

了解 Hox A1 1基因在人月经周期子宫内膜的表达及变化 ,探索该基因对正常内膜周期的调节功能。应用地高辛标记的 RNA探针进行原位杂交。 Hox A1 1基因主要在内膜间质细胞中表达 ,增殖期与分泌期比较未见明显差异。腺上皮细胞中 Hox A1 1基因的表达量虽较间质细胞少 ,但有明显的周期性变化 ,以增生殖期腺上皮细胞表达量较高 ,分泌早期开始下降 ,到分泌中晚期表达量极低或不表达。Hox A1 1基因在月经周期人子宫内膜中的这种表达时空的变化与孕酮受体 (PR)非常相似 ,提示 Hox A1 1基因的表达与卵巢激素及其受体的调控有着密切的关系 ,Hox A1 1在分泌中期内膜腺上皮中表达下降是内膜分化的重要指标志。     

生殖道沙眼衣原体感染与输卵管性不孕关系的研究

应用单克隆抗体免疫光法，检测经腹腔镜检查的４８例不孕病人的生殖道沙眼衣原体（衣原体），其中输卵管性不孕３２例（观察组），其它原因不孕１６例（对照组）。结果：两组宫颈衣原体阳性率分别为３１．３％和１２．５％，差异无显著意义（Ｐ〉０．０５）。观察组生殖道至少有一部位的衣原体阳性率为３２．５％，明显高于对照组的１０．２％，差异有极显著意义（Ｐ〈０．０１）。观察组输卵管衣原体阳性率为６６．７％，高于组内其     

输卵管性不孕的危险因素分析及检测方法探讨

目的 :观察引起输卵管性不孕的危险因素并对其诊断方法进行评价 ,以研究和预防输卵管阻塞引起的不孕 ,探讨检查输卵管通畅度的方法价值。方法 :回顾性分析34 9例输卵管阻塞性不孕妇女的情况及危险因素 ,并对子宫输卵管碘油造影、腹腔镜检查结果与手术发现进行比较。结果 :盆腔炎病史、人工流产手术史、阑尾炎手术史、结核病史等均在输卵管性不孕的发生中起一定的作用 ,前两者更危险。HSG和腹腔镜检查的符合率为 66% ,但腹腔镜诊断输卵管的通畅度和其他盆腔病变更准确。结论 :盆腔炎和反复的人工流产是引起输卵管性不孕的主要危险因素 ,HSG和腹腔镜对输卵管通畅度的检查均有一定价值     

HOXA10、HOXA11基因与子宫内膜异位症性不孕的研究进展

子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)是不孕症的常见病因,HOXA10、HOXA11这2种基因的正常表达与子宫内膜分泌中、晚期容受性的形成关系密切,而这2种基因在EMS患者的子宫内膜中与正常人相比表达下降,故EMS不孕的主要机制可能为低表达的HOXA10、HOXA11这2种基因,使子宫内膜的蜕膜化异常、容受性下降。此外,近期研究指出,导致EMS患者HOXA10、HOXA11基因表达下降的主要因素可能是基因异常甲基化。     

子宫内膜异位症生育指数与相关不孕患者腹腔镜术后妊娠的相关性

目的 评价子宫内膜异位症(内异症)生育指数与内异症不孕患者腹腔镜术后妊娠的相关性.方法 回顾性分析2005年1月至2010年1月350例行腹腔镜手术治疗的内异症相关不孕患者的病史及手术资料,电话随访其术后的妊娠情况.按照内异症生育指数的评分标准计算生育指数,利用Kaplan-Meier生存分析法计算不同分值患者的累积妊娠率,并进行比较.结果 内异症生育指数8、9、10分患者术后36个月的累积妊娠率分别为62.5％、69.8％、81.1％,3者间比较,差异无统计学意义(P=0.24);5、6、7分患者术后36个月累积妊娠率分别为49.8％、43.9％、41.6％,3者间比较,差异也无统计学意义(P=0.83).但8～10分患者术后36个月的总累积妊娠率为71.8％,5～7分患者为44.4％,两者比较,差异具有统计学意义(P=0.000).0～4分患者例数较少(共33例),其中15例妊娠.结论 内异症生育指数与内异症相关不孕患者腹腔镜术后的妊娠率相关.内异症生育指数对指导术后处理的选择且有重要的临床意义.     

The role of abnormal hypermethylation of the HOXA10 and HOXA11 promoters in implantation failures in IVF programs

Abstract

Objective: The objective of this study is to investigate the association between methylation levels of HOXA10 and HOXA11 promoters, clinical parameters, and implantation outcomes after in vitro fertilization-embryo transfer (IVT-ET) cycles in women with repeated implantation failures and tubal infertility.

Methods: Endometrium samples were collected from 34 women during implantation window before IVF-ET cycle to assess methylation status of HOXA10 and HOXA11 promoters using bisulfite sequencing. All participants had a tubal factor of infertility and at least two implantation failures in the anamnesis. A logistic regression model was used to predict the implantation outcome depending on methylation status and clinical parameters.

Results: The methylation of CpG-islands of HOXA10 and HOXA11 promoters was identified in 76.5 and 100% of participants, respectively. The median methylation levels did not differ significantly between the groups with different implantation outcomes, but a logistic regression model based on HOXA10 and HOXA11 methylation and clinical parameters allowed to classify the implantation outcomes with the total percentage of correct predictions of 85.19%.

Conclusions: Abnormal methylation levels of the HOXA10 and HOXA11 promoters were found in the endometrium of women with tubal infertility and repeated implantation failures. The findings suggest that methylation status could be an important factor of implantation failure during IVF-ET cycles.     

HOXA10基因与不孕症关系的研究进展

子宫内膜容受性(ER)的建立是妊娠的关键性前提。ER的降低是不孕症的主要因素之一。HOXA10基因近年来被认为在ER的建立过程中具有重要意义,子宫内膜HOXA10表达增加是内膜具有良好容受性的必要条件,与胚胎着床密切相关,目前已将HOXA10作为ER建立的标志物之一。本文旨在对于子宫内膜异位症(EMS)、多囊卵巢综合征(PCOS)、输卵管积水及控制性超促排卵(COH)治疗不孕症患者的HOXA10基因是否存在异常表达的相关研究进展进行综述,希望能为治疗相关不孕症提供新的思路。     

乙酰肝素酶基因在子宫内膜异位症患者在位与异位子宫内膜组织中的表达

目的　研究乙酰肝素酶基因在子宫内膜异位症发病中的作用。方法　应用原位杂交技术 ,检测腹腔镜手术中证实为子宫内膜异位症患者 (EM组 ,2 3例 )的在位和异位子宫内膜组织乙酰肝素酶mRNA的表达 ,并与正常妇女 (对照组 ,2 5例 )子宫内膜组织比较。结果　 ( 1)EM组在位与异位子宫内膜乙酰肝素酶mRNA阳性表达率一致 ,但异位子宫内膜组织中 ,阳性细胞着色较深。在位子宫内膜腺上皮细胞较间质细胞胞浆染色深 ,异位子宫内膜腺上皮细胞与间质细胞胞浆着色基本一致 ;EM组增生期与分泌期子宫内膜均有乙酰肝素酶mRNA的表达 ,增生期阳性表达率为 83 3%( 10 / 12 ) ;分泌期为 72 7% ( 8/ 11) ,两者比较 ,差异也无显著性 (P >0 0 5 ) ;( 2 )对照组增生期子宫内膜乙酰肝素酶mRNA的阳性表达率为 4 1 7% ( 5 / 12 ) ,分泌期子宫内膜阳性表达率为 7 7% ( 1/ 13) ,两者比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。 ( 3)EM组子宫内膜乙酰肝素酶mRNA阳性表达率为 78 3% ( 18/2 3) ;对照组为 2 4 0 % ( 6 / 2 5 ) ,两者比较 ,差异也有显著性 (P <0 0 5 )。结论　乙酰肝素酶基因的表达与子宫内膜异位症的发病相关 ,其可能成为子宫内膜异位症治疗的一个有价值的靶点。     

Study of single nucleotide polymorphism (rs28368082) in SPO11 gene and its association with male infertility

Purpose

The present study is a case–control analysis of a SNP (rs28368082) in exon 7 of the SPO11 gene and its possible association with male infertility in three provinces of Iran. We also searched for genetic differences among populations.

Methods

Using Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) analysis, we genotyped 113 infertile men and 50 fertile controls. Then, samples consisting SNP, as determined by PCR-RFLP, were genotyped by sequencing. The differences in genotype distributions between cases and fertile controls were examined using Chi-squared analysis. The genetic difference between individuals with mutated nucleotide was investigated by phylogenetic trees. Genetic difference among populations (provinces) was analyzed through ANOVA test, and homogeneity was investigated using STRUCTURE and K-means clustering analysis.

Results

According to the statistical analysis, the SNP was significantly associated with male infertility in all populations except oligozoospermic cases of the Center region. The phylogenetic trees showed partial genetic variation among the individuals, although ANOVA test showed no significant genetic difference between populations (provinces) for both azoospermic, and oligozoospermic cases. Eventually, we affirmed that individuals in the inclusive populations had genetic difference, but it was not statistically significant for dividing underlying populations to separate groups, so each population was homogenous.

Conclusion

Our study indicates that the mentioned polymorphism in SPO11 gene may be linked to the susceptibility of azoospermia and oligozoospermia male infertility in three provinces of Iran. Further studies are required to support obtained results. It finally should be noted that the possible association between a particular SNP and a specific disease completely depends on the underlying population.     

子宫腺肌病与不孕的相关性研究

子宫腺肌病（adenomyosis）好发于生育年龄女性,其引起的月经异常、痛经和不孕严重影响患者身体健康,尤其是子宫腺肌病引起的不孕症状严重影响患者的家庭生活,对于有保留生育要求的患者,其治疗是妇科和生殖科医生面临的一大难题。子宫腺肌病引起不孕的机制尚不清楚,其发生原因可能与宫腔形态改变、子宫结合带（uterine junctional zone）异常、子宫内膜改变、炎性介质和氧化应激,以及免疫功能失调等因素有关。综述子宫腺肌病与不孕的相关性研究。     

Association between a PD-1 gene polymorphism and antisperm antibody-related infertility in Iranian men

ObjectiveProgrammed cell death-1 (PD-1, Pdcd1), an immunoreceptor belonging to the CD28/CTLA-4 family negatively regulates antigen receptor signalling by recruiting protein tyrosine phosphatase, SHP-2 upon interacting with either of two ligands, PD-L1 or PD-L2. This study investigates PD-1 gene polymorphism in patients with antisperm antibody-related infertilityMethodsGenotyping was performed by polymerase chain reaction and restriction enzyme digestion (PCR-RFLP), this polymorphism was genotyped in 145 Iranian subjects (61 patients with antisperm antibody-related infertility and 84 healthy controls).ResultsPatients frequencies of the G/A genotype in comparison with healthy controls (38.2 % vs. 32.7 %, OR =1.21, P = 0.35) were not significantly different. However, G/G and A/A genotype frequencies between patients and healthy controls were significantly different (P = 0.042, P = 0.00001, respectively). Also, allele frequencies of this polymorphism were significantly different (P = 0.0012) in patients compared to healthy controls.ConclusionAccording to these results, there is a correlation between PD-1 gene polymorphism and susceptibility to antisperm antibody-related infertility in our study group.