两种测定血吸虫尾蚴方法的现场检测效果

1993年6月中旬,在南京市召开的血吸虫尾蚴监测方法研讨会上,与会的宁、镇、扬3市及其所属区、县的血防系统代表,应用南京医学院研究的C-6膜粘法和传统的尼龙绢条粘取沉淀法,在八卦洲通外江的外沙北埂河进行了血吸虫尾蚴检测.该河长80m,宽10m,平均活螺密度为2.0只/0.11m~2,钉螺阳性率为6.0%,感染性螺密度为0.0625只/0.11m~2.检测时正值潮退后初涨,水位较低,螺带暴露在水位线上.检测时间为上午9:00—10:00,水温30.5℃,晴,东南风,2级.     

水体日本血吸虫尾蚴检测技术的研究进展

血吸虫病是危害人类健康的人兽共患寄生虫病,是我国主要公共卫生问题之一。快速准确地检测水体日本血吸虫尾蚴,是血吸虫病疫情早期预警和精准防控的关键。本文主要对水体日本血吸虫尾蚴检测技术及其研究应用进展进行综述。     

日本血吸虫尾蚴细胞的传代培养及抗原性检测

目的 探索体外培养日本血吸虫尾蚴细胞的增殖与传代技术。 方法 无菌收集日本血吸虫活尾蚴5 000～10 000条,置于含有10％胎牛血清的RPMI 1640培养基中,用组织刀快速割切尾蚴使成组织碎裂物,加入250 U蟹胶原酶在26℃下孵育30 min,然后离心去酶,加入含有青霉素(100 U/ml)、链霉素(O.1 mg/ml)、两性霉素B(0.25μg/ml)和适量促细胞生长物的RPMI 1640改良培养基中作原代培养,当贴壁细胞增殖长满瓶底时,以1:2的接种率进行传代培养;获取第5代培养细胞作ELISA检测血吸虫病患者血清中抗体。 结果 在原代培养的第3天可见尾蚴组织的周围有呈单个存在或索状排列的发亮细胞,第10天可见单层细胞形成,第14天贴壁细胞长满瓶底并作传代培养;在传代培养中可见细胞呈均匀生长,每7～14 d传代一次;用第5代培养细胞作抗原,检测31例患者的阳性率为90.3％,检测30名正常人血清的假阳性率为6.7％。 结论 日本血吸虫尾蚴细胞体外传代培养至第5代,可用于免疫学研究。     

日本血吸虫尾蚴体表扫描电镜观察

目的观察日本血吸虫尾蚴体表结构.方法阳性钉螺逸出的尾蚴固定在4%戊二醛溶液中1～3 d.固定的标本按扫描电镜（SEM）要求,清洗、固定、脱水、干燥、镀金,用SX-40型SEM进行观察.结果尾蚴小棘几乎布满全身.尾体顶端的头器有两排隆起的围褶,中央为钻腺开口.围褶外围有无鞘的单纤毛乳突.腹吸盘位于体部的后1/3处,有尖刀状棘.尾干小棘比体部小棘长、少且不均匀.尾叉的棘较少,分布不均匀.尾叉的末端各有一个长约3.6 μm、直径3.2 μm的圆柱状尾突,中央均可见一个近似圆形、孔径约0.8 μm的排泄孔.结论观察到了小棘几乎布满全身的日本血吸虫尾蚴体表结构.观察并测量了尾叉末端尾突排泄孔.     

日本血吸虫尾蚴扫描电镜的初步观察

日本血吸虫尾蚴采自湖北沔阳县自然感染的阳性钉螺,于逸蚴2小时内,置4℃冰箱内固定于4％戊二醛2～4小时,经系列乙醇脱水后置临界点干燥器内干燥,转置旋转喷金仪喷金,最后送入JEM-25 S型扫描电镜观察。 结果 尾蚴长164.4μm,宽32.89μm;体部94.38×32.89μm,尾干长50.05μm,宽度按尾干基部、中部及尾端依次为17.16、12.87、10.01μm。尾叉为     

大蒜油杀灭日本血吸虫尾蚴作用研究

目的探讨不同浓度的大蒜油对日本血吸虫尾蚴活性的影响。方法采用蒸馏法提取大蒜油,并配制成不同浓度,观察杀灭日本血吸虫尾蚴的时间;用经大蒜油处理3min的日本血吸虫尾蚴感染小鼠,45d后处死,计数检获成虫数,计算感染率和减虫率,试验设去氯离子自来水为对照。结果大蒜油原液1s内可迅速杀死日本血吸虫尾蚴,稀释度为10-2、10-3、10-4、10-5、10-6的大蒜油杀死日本血吸虫尾蚴的平均时间分别为(2.4±0.54)s、(28.4±4.24)s、(60.6±3.43)s、(387.0±19.05)s和(820.4±22.34)s;用以上稀释度大蒜油处理后的血吸虫尾蚴感染小鼠,感染率分别为0、0、0、0、60.00%、80.00%,对照组感染率为100%。结论大蒜油有较强的杀灭日本血吸虫尾蚴作用。     

长江洪水中日本血吸虫尾蚴分布及其对人群血吸虫感染的影响

目的阐明长江洪水中日本血吸虫尾蚴分布及其对人群血吸虫感染的影响。方法采用哨鼠测定法,观察洪水中血吸虫尾蚴分布及其漂移扩散范围。通过对距阳性螺地带不同距离人群血吸虫感染情况,分析水体尾蚴分布对人群血吸虫感染的影响。结果长江洪水中血吸虫尾蚴主要分布在距阳性螺点2000m以内的区域,人群血吸虫感染率与距阳性螺点的距离呈负相关关系(rs=-0.976,P<0.01),居住在距阳性螺1000m以内者人群血吸虫感染率显著高于1000m以外人群(χ2=6.145,P=0.013)。结论长江洪水中尾蚴分布及人群血吸虫率与距阳性螺点的距离呈负相关关系。     

血水草生物碱杀灭日本血吸虫尾蚴实验

目的 探讨血水草生物碱杀灭日本血吸虫尾蚴的效果。方法 配制不同浓度的血水草生物碱水溶液，分别吸取各种浓度的药液100μl于载玻片上，观察不同时间尾蚴存活情况及小鼠感染情况。结果 药物浓度为2．5，5mg/L，接触药物60min，血吸虫尾蚴死亡率分别为97．71％和100％，药物浓度10，20mg/L，接触药物30min，血吸虫尾蚴无感染性。结论 血水草生物碱确有一定的杀灭血吸虫尾蚴的效果。     

体外培养日本血吸虫发育期尾蚴的观察

体外培养观察日本血吸虫尾蚴发育期中第Ⅱ期(胚裂期)和第Ⅲ期(胚尾期)在不同培养液中生长发育的情况。结果显示:在1/2RPMI1640培养液和加入钉螺头足部组织浸出的培养液中,尾蚴胚胎体长增加,证明头足部组织浸出液对其生长有促进作用,胚胎增长达50%以上。而加入钉螺肝组织浸出液,尾蚴胚胎未见增长,表现加速退行性改变。初步对上述促进和抑制尾蚴胚胎在体外培养的因素进行了分析。     

紫外线对日本血吸虫尾蚴作用的观察

<正> 紫外线对细菌及病毒的作用已有许多报道。但在对寄生虫的作用方面研究不多。在研究中作者观察了紫外线对日本血吸虫尾蚴在不同照射距离及时间的条件下,尾蚴被杀灭及被抑制感染等问题。结果报道如下。     

日本血吸虫尾蚴平均期望寿命的初步实验观察

本文报道了在室内两种水状态下尾蚴期望寿命的实验观察。结果在25℃恒温条件下，日本血吸虫尾蚴在静水中的平均期望寿命为27．52h，最长存活时间为46h；在动水中的平均期望寿命为25．04h，最长可存活50h。     

日本血吸虫尾蚴的组织化学及扫描电镜观察

血吸虫尾蚴侵入人体皮肤是依靠其体内腺细胞分泌物的酶作用及虫体自身的机械作用协同完成的。本文应用组织学、组织化学、膜消化测定及扫描电镜等方法观察大陆品系日本血吸虫尾蚴的腺体系统以及与钻穿皮肤有关的体表构造细节。     

水温对日本血吸虫尾蚴的逸出及其感染力的影响

目的实验观察水温对日本血吸虫尾蚴的逸出及其感染力的影响.方法将一定量感染性钉螺分别置于1、5、10、15、20、25、30、35℃和40℃水中逸蚴4 h,观察各水温组钉螺逸蚴率和逸蚴量;将一定量尾蚴分别移入1、10、20、30℃和40℃水中,后采用接触法感染小鼠30 min,观察各水温组鼠感染率和虫负荷.结果在温度为1～40℃的水体中,云南和江苏感染性钉螺均能逸出尾蚴,其中云南螺逸蚴的最适水温为20～35℃,江苏钉螺则为15～35℃.在温度为1～40℃水中,江苏虫株尾蚴对各水温组鼠的感染率均为100.0%,云南虫株尾蚴对各水温组鼠的感染率均＞83.3%.结论在温度为1～40℃的水体中,日本血吸虫尾蚴均能从感染性钉螺中逸出并能感染终宿主;提示冬季人畜接触有感染性钉螺存在的滩块附近的水体仍有被血吸虫感染的危险.     

紫外线照射后日本血吸虫尾蚴的扫描电镜观察

从超微结构水平观察紫外线照射对尾蚴的影响 ,尚未见报道。本实验使用扫描电镜旨在探讨日本血吸虫尾蚴经紫外线照射后发生的形态变化 ,进一步探讨减毒尾蚴活疫苗的免疫机制。1　材料与方法紫外灯源由第一军医大学防原教研室提供 ,紫外线强度测定仪为中国建材设计院辐射研究所产品 ,LRH 2 5 0 G光照培养箱为广东省医疗器械厂产品。取阳性钉螺 (江苏省血吸虫病防治研究所实验室人工感染 ) 5 0只 ,置新鲜配制的去氯水 (每千克自来水中加入硫代硫酸钠 7～ 10mg)中 ,2 8℃光照 ,按常规方法逸放尾蚴 2～ 4h ,收集于盖玻片上 ,置波长为 2 5 4nm…     

五氯酚钠缓释杀灭水体血吸虫尾蚴现场试验简报

目前,湖沼地区易感地带仍然是血吸虫病急性感染的主要场所,为了在紧急情况下,对易感地带灭蚴,控制急感,我站于1990年6月进行了现场灭蚴试验。     

环介导等温扩增技术检测日本血吸虫尾蚴的实验研究

目的建立一种检测日本血吸虫尾蚴的方法。方法采用环介导等温扩增技术（LAMP）：使用基因释放剂快速提取尾蚴基因组DNA,设计4条扩增尾蚴钙结合蛋白基因的LAMP引物,进行LAMP反应,以华支睾吸虫为阴性对照,LAMP产物经显色、电泳鉴定。用细吸管在解剖镜下分别吸取20、10、5、1条尾蚴进行LAMP反应,检测其敏感性。结果尾蚴检测管经显色后呈绿色（阳性）,对照组呈棕色（阴性）。尾蚴LAMP产物电泳后呈LAMP特征性梯状条带,对照组无扩增产物。LAMP可检测到尾蚴的最低数量为1条。结论LAMP方法敏感、特异、简便,可用于检测日本血吸虫尾蚴。     

照射致弱尾蚴免疫兔血清筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库

目的从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中获得日本血吸虫新的蛋白编码基因,为防治血吸虫病提供候选疫苗和治疗药物靶点.方法制备致弱尾蚴免疫兔血清作为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,挑取阳性克隆,测序并进行生物信息学分析.结果共筛选出8个阳性克隆,长度分布于0.6～3.0kb.随机选取4个阳性克隆进行PCR扩增及测序,获得2个日本血吸虫新基因:整合酶相似蛋白编码基因和蛋白磷酸酶1催化亚单位编码基因.前者长度为636 bp,含一个462 bp完整开放阅读框(ORF);后者1 879 bp,含一个984 bp完整ORF.两者GenBank的登录号分别为:AY855919、AY879341.结论致弱尾蚴免疫兔血清可作为筛选日本血吸虫新基因的有效探针;发现了2个日本血吸虫新基因.     

日本血吸虫和曼氏血吸虫减毒尾蚴免疫小鼠淋巴…

宿主经照射减毒血吸虫尾蚴免疫后获得显著的抗攻击感染的抵抗力。本文探讨紫外线减毒尾蚴免疫小鼠淋巴细胞表型的动态变化。方法：小鼠分别感染减毒日本血吸虫和曼氏血吸虫尾蚴（５００条／只），对照组分别感染两种正常尾蚴（２００条／只），免疫后第３、５、７、１０、１４和２１ｄ各组剖杀６－７只，摘取两侧腋窝淋巴结和脾脏分离细胞，采用双染色免疫荧光标记的单抗及ＦＡＣＳｃａｎ流式细胞仪进行细胞表型分析。结果：免疫小鼠