NDRG1基因在前列腺癌中的表达及其与肿瘤分化和侵袭的关系

目的:分析NDRG1基因在人类前列腺癌组织中的表达情况。方法:收集65例患者的前列腺癌组织及12例正常前列腺组织,提取总RNA,应用实时定量PCR检测NDRG1mRNA的表达水平。结果:统计学分析显示,65例前列腺癌组织中的NDRG1mRNA表达量低于正常前列腺组织(P<0.05),随着前列腺癌分级的升高和分化程度的降低,NDRG1mRNA的表达量呈下降趋势(P<0.05)。结论:NDRG1在前列腺癌组织中呈低表达,而且其表达与前列腺癌的分级和分化密切相关,提示其可能对前列腺癌的发生或发展有重要的作用,这不仅为研究前列腺癌的发病机制提供进一步的线索,而且对前列腺癌的诊断治疗具有重要意义。     

国外期刊摘译

前列腺特异性抗原（PSA）速率阈值可用来预测年轻男性的前列腺癌；前列腺癌细胞N-myc下游基因1（NDRG1）及其与雄激素反应元件相互作用的蛋白质组学分析；肿瘤蛋白独立生长因子-1在抑制25-羟维生素D1α-羟化酶（CYP2781）中的作用：一项在前列腺癌和肾脏细胞的比较分析；前列腺衍生因子作为一种旁分泌和自分泌因子可促进雄激素受体阳性的人前列腺癌细胞增殖。     

抑癌候选基因NDRG2在结肠癌组织中的表达

目的分析抑癌候选基因NDRG2在人类结肠肿瘤组织中的表达情况。方法收集30例患者的结肠癌组织及其正常组织，提取总RNA，应用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测NDRG2 mRNA的表达水平。为进一步分析NDRG2蛋白质的表达水平，分别提取30例组织的总蛋白，应用蛋白质印迹和免疫组织化学（免疫组化）技术检测其NDRG2的蛋白表达水平。结果RT-PCR结果显示，30例结肠癌组织中，有12例的NDRG2 mRNA表达明显降低。蛋白印迹结果显示，30例结肠肿瘤组织中有12例NDRG2蛋白水平明显下降，与RT-PCR结果一致。免疫组化结果显示，正常组织及肿瘤组织中NDRG2阳性率分别为90．0％（27／30）和53．3％（16／30），组间阳性表达率差异有统计学意义（P〈0．05），NDRG2的表达与患者的年龄、性别、淋巴结转移、浸润深度、Dukes分期无明显相关关系（P〉0．05），而与肿瘤组织分化级别相关，高、中分化组NDRG2阳性表达率高于低分化组（P〈0．05）。结论NDRG2在某些结肠癌组织中呈低表达，而且其表达与结肠癌的分化程度有关，提示其可能对结肠癌的发生或发展有重要的作用。这为研究结肠癌的发病机制提供了进一步的线索。     

前列腺癌骨转移血清蛋白质组学研究

目的:应用蛋白质组学双向凝胶电泳和质谱技术筛选前列腺癌骨转移血清标志物。方法:收集前列腺癌伴骨转移、不伴骨转移各5例血清样本。血清样品用除白蛋白试剂盒除去血清中的白蛋白后进行双向凝胶电泳,ImageMaster 2D Platinum软件分析,有意义的差异蛋白质点行基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定。结果:双向凝胶电泳显示,前列腺癌骨转移组血清蛋白中有15个斑点与前列腺癌无骨转移组有显著差异,前列腺癌骨转移患者血清中10个蛋白质表达水平显著增加,5个蛋白质表达水平显著下降。5个差异蛋白点进行胶内原位酶解,肽质量指纹图谱分析成功得到了3个蛋白质肽质量指纹图谱,并查询数据库初步鉴定了该3个蛋白质分别为锌α2糖蛋白、结合珠蛋白和载脂蛋白CⅢ。结论:双向凝胶电泳结合质谱鉴定是血清差异蛋白质组学研究的可靠平台和有力工具。所鉴定出的蛋白质与前列腺癌骨转移的发生、发展有关,可能是前列腺癌骨转移潜在的血清标志物。     

雄激素依赖及非依赖性前列腺癌细胞差异蛋白质组的初步研究

目的 初步探讨前列腺癌细胞株ALVA及DU-145总蛋白的差异蛋白质,试图在蛋白质组层面上为前列腺癌发生雄激素抵抗的机制提供有意义的线索.方法 利用双向凝胶电泳找出两细胞株间差异蛋白质,再进行质谱分析,对差异蛋白进行鉴定,比照数据库,分析其功能.结果 成功地对每一细胞株总蛋白进行了分离,并找出了差异蛋白质,平均差异蛋白质点176个,对蛋白质表达量相差20倍以上的6个蛋白质点进行质谱分析,得出了各自的蛋白质指纹图谱,通过数据库查询,鉴定出来4个蛋白质.结论 前列腺癌细胞株ALVA及DU-145总蛋白中确实存在差异蛋白质,差异蛋白质组技术为进一步研究雄激素抵抗的机制提供了新思路.     

NDRG1在胃癌组织中的表达及其与侵袭转移的关系

目的 探讨NDRG1蛋白在胃癌组织中表达情况以及与临床病理指标和预后的关系.方法 应用免疫组化法检测110例胃癌及相应癌旁组织中NDRG1蛋白的表达,并分析其与胃癌患者临床病理指标及预后的相关性.结果 本组胃癌组织中NDRG1蛋白表达阳性率为71.8%,癌旁组织中阳性率为100%,并且胃癌组织中NDRG1蛋白多为低表达,而癌旁组织多为高表达.NDRG1蛋白表达与胃癌浸润深度、TNM分期以及有无淋巴转移具有相关性,而与患者年龄、性别、分化程度、大体类型、远处转移无关.NDRG1蛋白低表达胃癌患者预后较差,1、3、5年总生存率和无病生存率分别为84.2%、53.9%、21.1%和60.5%、31.6%、19.7%.结论 NDRG1在胃癌组织中多呈低表达,与肿瘤的浸润、转移密切相关,可能是胃癌发病及肿瘤转移的一个候选抑癌基因,对胃癌发病及转移的早期诊断和预后判断有重要指导意义.     

下调NDRG1表达对胰腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨NDRG1在胰腺癌细胞中的表达及其与MMP-7的关系。方法:检测NDRG1与MMP-7蛋白与m RNA在4种胰腺癌细胞株(PANC-1、BXPC-3、CAPAN-2、SW1990)表达;构建靶向NDRG1的干扰质粒si NDRG1,转染PANC-1细胞,检测转染后PANC-1细胞NDRG1与MMP-7蛋白与m RNA的表达,以及增殖与调亡情况。结果:4种细胞株中均有NDRG1与MMP-7蛋白与m RNA的表达,且两者的表达水平随着细胞分化程度的降低而升高(均P<0.05);PANC-1细胞转染si NDRG1后,NDRG1与MMP-7的蛋白与m RNA表达均明显降低、细胞增殖明显抑制、凋亡率明显升高(均P<0.05)。结论:NDRG1的表达与胰腺癌细胞的分化程度密切相关,且可能通过上调MMP-7表达促进胰腺癌细胞的生长。     

丝氨酸-精氨酸蛋白激酶2与前列腺癌细胞周期的相关性

目的:探讨丝氨酸-精氨酸蛋白激酶2(SRPK2)与前列腺癌细胞周期的相关性。方法:通过皮尔森相关性分析探索癌症基因组图谱(TCGA)数据库中前列腺癌和SRPK2的相关基因集,并进一步将SRPK2相关基因集导入蛋白质相互作用关系检索工具(STRING)蛋白互作网络在线分析网站,通过Cytoscape软件进行可视化,提取与...     

N-myc下游调控基因2在中枢神经系统相关疾病中作用的研究进展

正N-myc下游调控基因(N-myc downstream regulated gene,NDRG)家族是近年来新发现的一个基因家族,家族成员包括NDRG1、NDRG2、NDRG3和NDRG4。Deng等[1]从正常成人大脑c DNA文库中通过消减杂交法识别得到了NDRG2。NDRG2与NDRG1和NDRG3有57%的相同氨基酸序列,与NDRG4有65%的相同氨基酸序列[2]。NDRG蛋白亚细胞定     

NDRG1的作用及其在肿瘤中的研究进展

目的 综合评述N-myc下游调节基因1(NDRG1)的作用以及该基因在肿瘤中的研究进展情况.方法 收集近年来有关NDRGl作用及其与肿瘤关系的文献并作综述.结果 NDRG1在机体对组织缺氧的反应、组织分化等方面发挥着重要作用,在肿瘤的形成以及侵袭和转移中的作用尤为突出.结论 NDRG1可能是肿瘤转移方面的一个候选相关基因,有望成为肿瘤的一个预后指标.     

应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱蛋白质芯片技术筛选前列腺癌血清标志物的研究

目的 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)检测前列腺癌患者的血清蛋白质指纹图谱,筛选特异性诊断标志物.方法 以病理确诊的45例前列腺癌患者血清和45例BPH患者血清为研究对象.采用SELDI蛋白质芯片技术检测血清的蛋白表达图谱.用BiomarkerWizard软件分析差异蛋白,对所得蛋白进行初步诊断分析.结果 应用IMAC-CU固相金属亲和芯片在未经治疗的前列腺癌和BPH患者血清中检测到9个差异蛋白质峰,其蛋白质含量差异有统计学意义(P＜0.01),其中7个差异蛋白(3771.14,3968.26,4050.39,4279.20,4464.03,4481.59,8919.34)在前列腺癌患者血清中呈高表达,2个差异蛋白(5440.68,6102.82)呈低表达.联合相对分子质量为3771.14和4481.59的2个羞异蛋白诊断前列腺癌,其敏感性为86.7%(39/45),特异性为88.9%(40/45).经蛋白质数据库搜索,找到6种与差异蛋白相对分子质量最接近的蛋白质,分别为Pepeide YY、Apolipoprotin C-II、Glueagon like peptide(7-37)、uncharacterized protein C14orf128、Medin、Neuropeptide Y.结论 SELDI蛋白质芯片技术可筛选出前列腺癌中相对特异的潜在标志蛋白,具有较好的临床应用前景.     

PIM-1在前列腺癌组织中的表达及其与PSA的关系

目的:探讨PIM-1蛋白在前列腺癌组织中的表达及其与PSA复发之间的关系。方法:利用免疫组化SP检测68例前列腺癌和37例良性前列腺增生(BPH)组织中PIM-1蛋白的表达。结果:在前列腺癌组织中PIM-1蛋白表达的阳性率为67.65%(46/68);BPH组织中40.54%(15/37),两组表达的差异有显著意义(P<0.05)。PIM-1蛋白表达的阳性率在前列腺癌Gleason分级中6分33.33%(7/21),7分75%(21/28),8～10分94.74%(18/19),组间比较差异有显著性(P<0.05)。临床分期中在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期PIM-1蛋白表达率分别为47.62%、53.85%、73.33%、94.74%,36个月随访PSA复发状况采用Kaplan-Meier方法分析,PIM-1蛋白表达与有无复发分别是78.26%(36/46)和45.45%(10/22),差异有显著性(P<0.05)。结论:前列腺癌中PIM-1蛋白表达与前列腺癌的Gleason分级、临床分期以及PSA复发有密切关系,提示PIM-1基因在前列腺癌演化和进展中有重要作用,可能是前列腺癌的预后指标。     

原癌基因N-MYC下游调节基因-2对前列腺癌细胞株PC3的体外增殖抑制作用

目的 观察原癌基因N-MYC下游调节基因-2(NDRG2)在不同前列腺癌细胞株中的表达水平和对PC3细胞的体外增殖抑制作用.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测不同前列腺癌细胞株(PC3、LNCaP、DU145)的NDRG2表达水平,使用pAD_CMV腺病毒感染的方法 观察NDRG2对PC3细胞的作用,乳糖操纵子z(Lacz)为阳性对照,并设空白对照,噻唑蓝比色法(MTT法)绘制细胞生长曲线、流式细胞仪(FCM)检测感染48、72 h的细胞周期及凋亡.结果 3个前列腺癌细胞株的NDRG2表达水平相对较低,其中PC3细胞表达水平最低,细胞生长曲线显示NDRG2基因自感染36h开始能够抑制PC3细胞增殖(F≥12.43,P＜0.01),FCM检测发现,感染72 h时,包装有NDRG2基因腺病毒感染组同空白及阳性对照组比较,细胞G1期阻滞(3组分别为68.06%、50.33%和50.33%),细胞凋亡增加(3组分别为12.33%、3.21%和3.87%).结论 NDRG2基因可能参与了前列腺癌的发病,腺病毒介导的人NDRG2基因可明显抑制PC3细胞的增殖.     

结直肠癌中缺氧诱导因子-1α与NDRG1表达的关系

目的探讨结肠癌LS174T细胞及结直肠腺癌组织中缺氧诱导因子-1d（HIF-1d）的表达及与NDRG1的相关性。方法构建靶向HIF—1d的质粒pSi1ence-2．1-U6-siRNA并鉴定，采用阳离子脂质体转染法将其转染LS174T细胞，低氧培养24h，运用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HIF-1α、NDRG1mRNA表达。Western blots检测NDRG1蛋白表达。采用原位杂交技术检测人结直肠腺瘤和腺癌组织中HIF-1dmRNA，应用免疫组织化学方法检测NDRG1蛋白的表达。结果siRNA从转录水平抑制了HIF-1d基因表达。同时，NDRG1mRNA、蛋白表达也显著受抑制。结直肠腺癌组织中HIF-1dmRNA阳性表达率为67．7％（42／62），腺瘤为44．4％（8／18）。从DukesA期到DukesC＋D期演变过程中HIF-1dmRNA表达阳性率不断增加（P〈0．05）。腺癌组NDRG1阳性表达率显著高于腺瘤组。结直肠腺癌中NDRG1阳性表达与Dukes分期显著相关。HIF-1d与NDRG1均呈正相关（P〈0．05）。结论HIF-1d可能通过上调NDRG1表达参与了结直肠腺的进展．     

基于基因芯片的前列腺癌转移高表达基因SPP1的生物信息学分析

目的:利用生物信息学方法分析前列腺癌转移高表达基因SPP1以及蛋白的结构,为进一步研究其功能和参与的调控机制提供一定的理论依据。方法:在公共基因芯片数据库(GEO)中下载前列腺癌转移相关基因芯片数据,利用BRB-Array Tools软件、protparam、Motif Scan、Signal P4.0、TMHMM、Net Phos2.0、Predict Protein、GO、KEGG、STRING等生物信息学工具进行数据挖掘及生物信息学分析。结果:共筛选出前列腺癌转移共同差异基因73个,表达上调21个,表达下调52个(P0.01),其中对前列腺癌转移高表达基因SPP1进行生物信息学分析发现,SPP1蛋白由314个氨基酸组成,该蛋白含有2个N-连接糖基化位点、8个酪蛋白激酶II磷酸化位点、3个PKC磷酸化位点,主要参与细胞外基质结合、骨化、成骨细胞分化、细胞黏附、PI3K-Akt信号通路、黏着斑、ECM受体相互作用、Toll样受体信号通路等分子功能和信号通路。结论:利用生物信息学的方法能有效分析基因芯片数据并获取生物内在信息,SPP1可能在前列腺癌转移中发挥重要作用,有望成为前列腺癌转移的早期诊断标志物和治疗的新靶点。     

EphA1基因在前列腺癌中的表达及临床意义

目的 检测EphA1基因在前列腺癌的表达,探讨其异常表达机制及其临床意义.方法 利用RT-PCR检测印EphA1在前列腺癌细胞系中的表达,并用重亚硫酸钠修饰的DNA直接测序法检测并分析其甲基化状态.免疫组织化学分析EphA1蛋白、p53蛋白、EGFR蛋白在前列腺癌组织中的表达及其相关性在临床中的意义.结果 EphA1蛋白表达在前列腺癌和良性增生组织中差异有统计学意义(P=0.013),并且发现在前列腺癌细胞存在EphA1基因甲基化现象.EphA1蛋白表达上调与前列腺癌有较高的Gleason评分患者有相关性(P=0.017),并与EGFR阳性有相关性(P=0.056),EphA1蛋白下调与p53阳性有相关性(P=0.007).结论 EphA1甲基化可能是导致该基因下调的机制之一,在前列腺癌的发生、发展中可能具有重要作用.     

肿瘤蛋白独立生长因子-1在抑制25-羟维生素D1α-羟化酶(CYP27B1)中的作用:一项在前列腺癌和肾脏细胞的比较分析

1,25-二羟维生素D(1,25D)抑制前列腺癌细胞的生长,且对前列腺癌患者具有保护作用。然而,细胞内合成1,25D起重要作用的25-羟维生素D1α-羟化酶(CYP27B1)在前列腺癌细胞中却是被抑制的。研究者发现一种转录因子,即独立生长因子1(GFI1)在人前列腺癌细胞株中可抑制CYP27B1的作用。现在认为GFI1可与辅助阻遏子形成巨蛋白复合体,以增加组蛋白去乙酰基酶的含量。研究者提出了一个CYP27B1基因表达的分子抑制模型。在前列腺癌细胞CYP27B1基因的抑制功能域中,这种抑制性复合体的形成可灭活邻近增强子或启动子的活性,导致基因表达沉默,最终…     

不同来源前列腺基质细胞对前列腺癌细胞IGF-1和p-AKT表达的影响

目的 探讨胰岛素样生长因子在前列腺癌肿瘤-基质交互作用中的地位及其作用机制.方法 将前列腺癌旁基质细胞和良性前列腺基质细胞分别与前列腺癌细胞系PC-3细胞分隔共培养(并设空白对照),之后检测前列腺癌细胞中IGF-1 mRNA(半定量RT-PCR)和p-AKT蛋白表达(Western blot).结果 与空白对照组相比较,癌旁基质细胞共培养组IGF-1 mRNA表达有所上调、p-AKT蛋白表达有所上调,但无统计学意义(P＞0.05);良性基质细胞共培养组IGF-1 mRNA和p-AKT蛋白表达显著下调(P＜0.05).相关性分析显示各组前列腺癌细胞IGF-1 mRNA与p-AKT蛋白表达呈正相关.结论 良性前列腺基质细胞通过水溶性因子抑制前列腺癌细胞中IGF-1及其下游因子表达,前列腺癌旁基质细胞则丧失了该抑制作用.     

前列腺癌组织中酪氨酸硫酸化转移酶1(TPST1)的表达水平及临床意义

目的分析酪氨酸硫酸化转移酶1(TPST1)在前列腺癌(PCa)组织中的表达情况,并探讨其与前列腺癌患者临床病理特征和预后的关系。方法在肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库收集499例前列腺癌患者,分析TPST1 mRNA与PCa患者临床病理特征及预后的关系;采用免疫组织化学SP法检测前列腺组织芯片(TMA)中TPST1蛋白的表达,并分析其与PCa患者临床病理特征的关系。结果 TCGA数据库结果显示TPST1表达量与年龄具有显著相关性(P<0.05),与血清PSA、Gleason评分、临床T分期、淋巴结转移和远处转移相关性没有统计学意义(P>0.05);免疫组化结果显示,PCa癌组织中TPST1蛋白的高表达率为78.0%(39/50),明显高于非前列腺癌组织的46.67%(14/30),差异有统计学意义(P<0.05);TPST1的TMA分析结果显示,TPST1蛋白表达量与年龄、肿瘤分级、Gleason评分、临床T分期、淋巴结转移以及远处转移相关性没有统计学意义(P>0.05);TCGA数据库样本的Kaplan-Meier生存分析结果显示TPST1 mRNA高表达组的无生化复发生存情况和无病生存情况差于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05);COX单因素和多因素分析结果显示,TPST1不是影响PCa患者生存预后的独立危险因素。结论 TPST1在PCa癌组织中呈高表达,TPST1高表达提示预后差,但其与PCa患者临床分期、淋巴结转移无明显相关性,不是影响PCa患者生存预后的独立危险因素。     

蛋白质酵母双杂交系统的建立及其在大肠癌肝转移研究中的意义

目的 建立酵母双杂交系统,筛选与FasL相互作用的蛋白,探讨FasL与大肠癌肝转移的关系。方法 以FasL基因构建诱饵蛋白质粒,筛选人胎肝cDNA文库,鉴定与FasL相互作用的蛋白,通过生物信息学分析FasL及其相互作用蛋白在大肠癌肝转移中的作用。结果 筛选出10个与FasL特异性相互作用的蛋白,包括金属硫蛋白1K、1G、2A,组织蛋白酶B,脂肪酸合成酶,干扰素α诱导蛋白27,磷脂清除酶,丝氨酸／苏氨酸样激酶,锚着黏附蛋白以及纤维微丝蛋白-5等。结论 成功建立了筛选FasL相互作用蛋白的酵母双杂交系统,并初步证明FasL与组织蛋白酶、金属硫蛋白、锚着黏附蛋白等之间的相互作用与大肠癌肝转移密切相关。