柯萨奇病毒-腺病毒受体在肺癌组织中的表达意义

目的：初步探讨柯萨奇病毒-腺病毒受体（Coxsackie and adenovirus receptor,CAR）与人肺鳞状细胞癌及腺癌发生、发展的关系,为设计腺病毒载体对肺癌进行基因治疗的方案提供理论依据。方法：采用免疫组织化学方法检测112例肺癌（包括鳞状细胞癌65例,腺癌47例）组织中CAR的表达情况,利用统计学方法（SPSS10.0软件）分析CAR的表达在鳞状细胞癌、腺癌以及癌旁正常肺组织中有否差异。结果：正常肺组织中仅有少量CAR的表达。两类型肺癌分别与癌旁组织CAR的表达差别有统计学意义（P〈0.01）,在鳞状细胞癌中CAR的表达较癌旁组织提高34.75%,在腺癌中CAR的表达较癌旁组织提高38.30%。其中,鳞状细胞癌的CAR阳性率为43.08%,腺癌的阳性率为70.21%,两类型肺癌间CAR表达的阳性率差别亦有统计学意义（P〈0.01）。但CAR的表达在肺鳞状细胞癌不同组织学分级中（Ⅰ～Ⅲ级）的差别未有统计学意义（P〉0.05）。此外,我们发现在肺腺癌中所包含的细支气管肺泡癌部分几乎都有CAR的表达。结论：肺癌组织（鳞状细胞癌和腺癌）CAR的表达普遍提高,提示CAR与肺癌的发生、发展有一定的联系,并且与肺腺癌的形成及发展的关系更为密切,因此为进一步实现用腺病毒载体对肺癌进行基因治疗提供了理论基础。     

小细胞肺癌组织中柯萨奇-腺病毒受体阳性表达的意义

目的：探讨柯萨奇 腺病毒受体（ＣＡＲ）在小细胞肺癌组织中阳性表达的意义。方法：应用免疫组化ＥｎＶｉｓｉｏｎ法检测病理诊断明确的３１例小细胞肺癌组织中ＣＡＲ的表达情况,用３例正常的肺组织做阴性对照。结果：３１例小细胞肺癌组织全部呈阳性表达,阳性率为１００％,３例非肿瘤性肺组织均呈阴性表达。结论：在小细胞肺癌组织中高表达ＣＡＲ可能提示腺病毒为载体的基因治疗将在小细胞肺癌的治疗领域起重要的作用。     

柯萨奇-腺病毒受体在肾癌组织中的表达及意义

目的:研究柯萨奇-腺病毒受体(CAR)在肾癌组织中的表达及意义.方法:应用免疫组化SP法检测12例癌旁正常肾组织和48例肾细胞癌组织中CAR的表达.结果:12例正常肾组织全部表达CAR,48例肾细胞癌组织中31例无CAR表达.不同分级CAR表达率分别为Ⅰ级54.5%(12/22)、Ⅱ级23.5%(4/17)、Ⅲ级11.1%(1/9);不同分期CAR表达率分别为Ⅰ期57.9%(11/19)、Ⅱ期30.8%(4/13)、Ⅲ期18.2%(2/11)、Ⅳ期0(0/5).结论:在多数肾细胞癌组织中CAR基因表达丧失;CAR表达变化与肾癌的分级、分期相关,可以作为肾癌分化、转移的重要生物学指标.     

肺癌患者柯萨奇病毒和腺病毒受体的表达及其临床意义

  目的   探索柯萨奇病毒和腺病毒受体（Coxsackie and adenovirus receptor,CAR）与肺癌的关系,为使用基于腺病毒载体的基因治疗方案提供依据。   方法   运用免疫组织化学法检测112例肺癌患者肿瘤组织、癌旁组织以及正常组织中CAR的表达;通过RT-PCR和Western blot法检测32例患者CAR mRNA及CAR蛋白的表达。   结果   在正常肺组织中未见CAR表达,癌旁组织中可见少量的CAR表达。鳞状细胞癌和腺癌中CAR阳性表达比率分别为43%和70%,均较癌旁组织明显升高。同时,腺癌中CAR的表达也显著高于鳞状细胞癌,RT-PCR和Western blot法进一步证实免疫组织化学法检测结果。   结论   肺癌中CAR过表达,在腺癌中尤为明显,提示CAR可能参与了肺癌的发生发展,这可能对基因治疗肺癌的研究提供了较好的理论基础。      

肿瘤细胞表面柯萨奇病毒 腺病毒受体与5型腺病毒感染效率的关系

目的〖HT5"SS〗: 探讨不同肿瘤细胞系柯萨奇病毒腺病毒受体（CAR）和整合素的表达水平与5型腺病毒感染效率的关系,为腺病毒基因治疗研究奠定基础。〖HT5W〗方法〖HT5"SS〗: 利用瞬时转染CAR的真核表达质粒提高肿瘤细胞表面CAR的表达,应用抗体封闭细胞表面的CAR和整合素后,通过流式细胞仪和荧光素酶分析法测定腺病毒Ad5CMVEGFP和Ad5CMVLuc对肿瘤细胞的感染效率和基因表达水平的变化。〖HT5W〗结果〖HT5"SS〗： 不同肿瘤细胞表面CAR和整合素的表达水平是不同的,其中SMMC7721和A549细胞CAR的表达量最高,而K562细胞CAR的表达水平最低;荧光显微镜和流式细胞仪检测Ad5CMVEGFP对肿瘤细胞的感染效率,结果显示5型腺病毒对于SMMC7721和A549细胞的感染效率最高,而对于K562细胞则很低;瞬时转染表达CAR的真核质粒可提高多种肿瘤细胞表面CAR的表达,较大幅度提高了5型腺病毒的感染效率。而抗体封闭肿瘤细胞表面的CAR或整合素后,腺病毒感染效率显著下降。〖HT5W〗结论〖HT5"SS〗:肿瘤细胞表面CAR和整合素的表达水平决定了腺病毒对肿瘤细胞的感染效率。     

柯萨奇-腺病毒受体在小细胞肺癌组织中阳性表达的意义

Objective  

We explored the expression of coxsackie and adenovirus receptor (CAR) in small cell lung cancer (SCLC) tissue.     

柯萨奇-腺病毒受体在肿瘤发生发展机制中的研究进展

柯萨奇-腺病毒受体（Coxsackie and adenovirus receptor,CAR）最早作为2型和5型腺病毒的受体而被人们发现和认识。大量研究发现CAR可以影响肿瘤细胞的生长、细胞骨架的变化、细胞间的粘附等,从而在肿瘤侵袭转移过程中起非常重要的作用。而且,CAR的表达与肿瘤的预后和腺病毒介导的减瘤效应也有密切的关系。基于CAR的重要作用,CAR已逐渐成为肿瘤发生发展机制及治疗领域研究中新的“热点”,本文结合CAR的基本结构及功能对以上研究的进展作一综述。     

柯萨奇病毒腺病毒受体在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的 研究柯萨奇病毒腺病毒受体(CAR)的mRNA和蛋白在正常肺组织、癌旁组织及肺癌组织中的表达情况,分析其与肺癌发生发展的相关性及在不同临床病理参数间的表达差异.方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法和Western blot检测正常肺组织、癌旁组织和肺癌组织中CAR mRNA和CAR蛋白的表达情况.结果 CAR mRNA和蛋白在正常肺组织、癌旁组织和肺癌组织中的表达最分别为1.000±0.012、1.048±0.035、1.282±0.072和0.902±0.038、0.944±0.042、1.08±0.052,其差异均有统计学意义(P<0.05).CAR mRNA和CAR蛋白在肺癌中的表达呈正相关(r=0.448,P=0.026).在不同的临床病理参数之间,CAR mRNA和蛋白的表达在患者性别、年龄、吸烟与否、肿瘤大小、有无淋巴结转移及TNM分期中差异无统计学意义(P>0.05);CAR的表达在不同的病理类型中差异具有统计学意义(P=0.012),在7例细支气管肺泡痛(BAC)中均高表达(P=0.029).结论 肺癌组织中CAR的表达水平显著高于正常肺组织和癌旁组织,且在不同病理类型的表达上存在差异,提示CAR在肺癌的发生发展过程中起到了重要作用,并可能成为潜在的肿瘤标记及预后指标.     

肿瘤细胞CAR表达水平与5型腺病毒转导效率的关系

目的: 通过体外、体内实验探讨肿瘤细胞柯萨奇腺病毒受体(coxsackie adenovirus receptor, CAR)表达水平与腺病毒转导效率的关系,为腺病毒相关的生物制剂在临床个体化应用提供实验依据.方法: 将载有绿色荧光蛋白的Ad5 型腺病毒(Ad-GFP) 以100 MOI、200 MOI分别感染人食管癌细胞系KYSE510、KYSE150、EC9706、人宫颈癌细胞系HeLa、人卵巢癌细胞系SKOV3、人肝癌细胞系HepG2和人肺癌细胞系A549,感染后48 h通过流式细胞术检测Ad-GFP对不同细胞系的转导效率.采用Western blotting方法检测这些细胞中CAR的表达水平.将HeLa、A549、SKOV3、EC9706细胞分别接种于裸鼠腋下,接种细胞数分别为3×106、3×106、3×106、2×106,建立裸鼠移植瘤模型.待肿瘤长径达5～7 mm时,在裸鼠移植瘤内注射Ad-GFP,每次1×109PFU,间隔48 h注射第2次.第2次注射后48 h处死裸鼠,剖取瘤组织,荧光显微镜观察冰冻切片中GFP的表达情况以判定腺病毒在瘤体内的转导效率,同时用免疫组化法检测瘤组织内的CAR表达水平.结果: 200 MOI Ad-GFP感染A549、HeLa、HepG2、KYSE150细胞48 h后分别有92.67%、89.31%、84.98%、74.59%的细胞表达GFP;而SKOV3、KYSE510、EC9706细胞中腺病毒的转导效率明显降低,GFP阳性率分别为30.06%、27.40%、18.93%;各种细胞的CAR蛋白表达水平与腺病毒的转导效率呈正相关.注射Ad-GFP的裸鼠移植瘤组织中可见HeLa、A549瘤组织内有明显的点状绿色荧光,而SKOV3、EC9706瘤组织内表达GFP的细胞数明显少于前两种瘤组织;HeLa、A549裸鼠移植瘤组织内大多数瘤细胞高表达CAR ( ),SKOV3、EC9706移植瘤组织内CAR表达水平较低( 或-),表明瘤体内CAR表达水平与Ad-GFP的转导效率也呈正相关.结论: 体内外实验均显示肿瘤细胞的CAR表达水平与5型腺病毒转导效率密切相关.肿瘤患者治疗前检测组织中CAR表达水平有助于规范腺病毒载体的基因治疗药物的个体化使用.     

CAR在具有细支气管肺泡癌特征肺癌中的表达及意义

  目的  探讨柯萨奇病毒-腺病毒受体（CAR）在肺腺癌部分亚型中的表达及其与临床病理和患者预后的关系。  方法  采用EnVision免疫组化二步法检测CAR在137例具有细支气管肺泡癌特征的肺癌（PWBF）组织中的表达,分析其与临床因素的相关性;并收集患者的生存资料,采用Kaplan-Meier曲线描述生存率,行Log-rank检验。  结果  CAR在PWBF、其他类型肺癌及正常组织中的阳性率分别为71.5%、50.0%、13.3%,其差异具有统计学意义;CAR蛋白的表达与病理分型和组织学分级相关,与性别、年龄、临床分期等无关。CAR阳性表达患者的生存时间较阴性者长,但无统计学差异。  结论  CAR的表达与肺癌的发生发展相关,并同肺腺癌部分亚型（PWBF）的关系密切。CAR在PWBF中的较高表达为以腺病毒（Ad）载体的基因治疗开辟了更为广阔的空间;同时CAR的高度可调节性也为肺癌其他类型的基因治疗提供了可靠的依据和美好的前景。      

Expression of Coxsackie and Adenovirurus Receptor and its Significance in Human Lung Cancer

OBJECTIVE To study the relationship between the coxsackie and adenovirus receptor (CAR) and the development of human lung cancer. To optimize adenovirus vector-based gene therapy. METHODS The expression of CAR in 112 cases of lung cancer was examined using immunohistochemistry. At the same time, the relationship between CAR expression and clinicopathologic characteristics was analyzed. RESULTS There is a little expression of CAR in normal lung tissue. Compared with paraneoplastic epithelial tissue of the lung, the expression of CAR is generally up-regulated in tumor tissues showing a significant dif- ference (P<0.01). The positive rate of CAR expression in squamous cell carcinoma was 43.1%, and in adenocarcinoma 70.2%, with the difference between the two rates being statistically significant (P<0.01). Compared to the paraneoplastic tissues, the difference in CAR positive expression was 35.4% for squamous cell carcinoma and 38.3% for adenocarcinoma. But the difference in different stages of squamous cell carcinoma had no statistical significance (P>0.05). However, the expression of CAR was at a high level in the bronchioalveolar carcinomas as 80.4% were CAR positive. This research showed that there was a specially high expression of CAR in adenocarcino- mas. CONCLUSION CAR is expressed in human lungs at a low level and up-regulated in the tumor tissues, suggesting that there is a relationship between adenocarcinoma and CAR. This research provides a basis for plan- ning a regimen of gene therapy using an adenovirus vector.     

Expression of Coxsackievirus and Adenovirus Receptor in Human Lung Cancer: Possible Clinical Significance

OBJECTIVE To explore the relationship between CAR and the development of human lung cancer, as well as to provide the basis for the clinical treatment of lung cancer using an adenovirus vector-based gene therapy.METHODS CAR expression was assessed immunohisto-chemically in tumoral, paraneoplastic and normal samples from 112 lung cancer patients. At the same time, the mRNA and protein expression of CAR in 32 cases were determined by RT-PCR and Western blot. The relationship between CAR expression and clinicopathologic parameters was statistically analyzed.RESULTS There was no expression of CAR in normal lung tissue but a little in paraneoplastic tissue. The positive rate was 43% in squamous cell carcinoma, and 70% in adenocarcinoma.Both were much significantly higher than that in paraneoplastic tissue. The CAR expression level in adenocarcinoma was higher than that in squamous cell cancer, mRNA expression by RT-PCR and protein expression by Western blot were consistent with immunohistochemistry results.CONCLUSION CAR is overexpressed in human lung cancer,especially in adenocarcinoma. This data offer the reliable basis for adenovirus-mediated gene therapy of lung cancer; more important, CAR may take part in the formation or development of lung cancer; this may be exploitable for the development of antibody-directed therapy in human lung cancer.     

Expression of Coxsackie and Adenovirums and its Significance in Human Lung Cancer

OBJECTIVE To study the relationship between the coxsackie and adenovirus receptor （CAR） and the development of human lung cancer. To optimize adenovirus vector-based gene therapy. METHODS The expression of CAR in 112 cases of lung cancer was examined using immunohistochemistry. At the same time, the relationship between CAR expression and clinicopathologic characteristics was analyzed, RESULTS ：lhere is a little expression of CAR in normal lung tissue. Compared with paraneoplastic epithelial tissue of the lung, the expression of CAR is generally up-regulated in tumor tissues showing a significant dif- ference （P〈0.01）. The positive rate of CAR expression in squamous cell carcinoma was 43.1%, and in adenocarcinoma 70.2%, with the difference between the two rates being statistically significant （P〈0.01）. Compared to the paraneoplastic tissues, the difference in CAR positive expression was 35.4% for squamous cell carcinoma and 38.3% for adenocarcinoma. But the difference in different stages of squamous cell carcinoma had no statistical significance （P〉0.05）. However, the expression of CAR was at a high level in the bronchioalveolar carcinomas as 80.4% were CAR positive. This research showed that there was a specially high expression of CAR in adenocarcinomas. CONCLUSION CAR is expressed in human lungs at a low level and up-regulated in the tumor tissues, suggesting that there is a relationship between adenocarcinoma and CAR. This research provides a basis for planning a regimen of gene therapy using an adenovirus vector,     

结肠癌组织中ERCC1表达及其临床意义

目的探讨结肠癌组织中ERCC1表达及其临床意义。方法应用采用免疫组化（即用型二步法）检测其ERCC1表达水平,术后均以奥沙利铂为主的方案化疗,所有入组患者随访3年以上。结果结肠癌组织中ERCC1表达阳性率为51%。ERCC1表达与患者性别、年龄、病理类型无明显相关性;与肿瘤局部浸润有关,但与淋巴结转移及TNM分期无明显相关性;ERCC1阴性患者,术后经奥沙利铂为主的方案化疗后2、3、4和5年生存率均高于阳性患者,经Logrank检验,两者有显著性差异;Cox回归分析显示ERCC1表达为结肠癌患者独立预后因素。结论ERCC1蛋白表达阴性患者应用以奥沙利铂为主的方案化疗可能获得生存受益;ERCC1表达水平可作为结肠癌患者术后辅助化疗方案的选择及预后判断的指标之一。     

E—cad在结肠癌的表达及意义

目的:研究E-cad在结肠癌的表达及意义。方法:应用免疫组化S-P法检测E-cad在32例结肠黏膜、30例结肠腺瘤、96例结肠腺癌组织中的表达。结果:E-cad在32例结肠黏膜中的异常表达为2例(6.25％),在30例结肠腺癌中的异常表达为8例(26.67％),在96例结肠腺癌病例中的异常表达为52例(54.17％),三者间的E-cad异常表达率具有非常显著差异(x~2=25.28,P<0.001)。E-cad在低分化腺癌中的异常表达率显著高于高、中分化腺癌(x~2=13.28,P<0.001)。结肠癌浸润全层病例的E-cad异常表达率显著高于浸润肌层者(x~2=6.21,P<0.05)。结肠癌伴有淋巴结转移者的E-cad异常表达率显著高于无淋巴结转移者(x~2=5.99,P<0.05)。E-cad异常表达率与结肠癌Dukes分期相关(x~2=9.41,P<0.01)。结肠癌呈E-cad异常表达病例的5年生存率远低于E-cad正常表达者(x~2=9.16,P<0.01)。结论:E-cad的异常表达与结肠癌的发生发展有关,检测E-cad的表达可作为判断结肠癌的生物学行为和预后的重要指标之一。     

生存素siRNA对结肠癌细胞凋亡增殖和侵袭性的影响

目的:研究siRNA表达质粒沉默Survivin基因的效率及其对大肠癌细胞株SW480凋亡、增殖和侵袭性的影响。方法:构建Survivin基因的siRNA表达质粒(pRNAT/sur-siRNA),用Westeron-blot和半定量RT-PCR研究该表达质粒转染SW480后Survivin蛋白和mRNA表达的变化,流式细胞仪检测Survivin基因沉默后SW480细胞凋亡的变化,MTT法检测SW480细胞体外增值的变化;细胞侵袭性实验研究SW480细胞的侵袭性变化。结果:针对Survivin的siRNA的表达质粒下调大肠癌SW480细胞株Survivin蛋白和mRNA的表达水平,分别为85.0%,80.0%;pRNAT/sur-siRNA转染SW480后,SW480细胞凋亡率为16.9%;细胞增殖抑制率为37.4%,与对照组相比有显著差异(P<0.01);细胞侵袭实验示pRNAT/sur-siRNA/SW480细胞、pRNAT/SW480、SW480细胞的细胞穿透数分别为153±66、505±65、578±98个,(P<0.01)。结论:针对Survivin的siRNA可以显著降低Survivin的表达,从而抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭,促进肿瘤细胞的凋亡。