HL-60细胞诱分化及细胞膜恶性标志逆转的实验研究

本文采用荧光偏振技术和受体荧光定量测定法,动态观察DMSO(二甲亚砜)体外诱导人急性早幼粒白血病细胞系(HL-60细胞)沿粒系统成熟分化过程中细胞膜流动性及膜ConA受体结合量的改变,还测定Molt4和Raji淋巴瘤细胞膜的相应变化.结果表明,随分化细胞百分率增加膜流动性和ConA受体结合量降低,呈现有意义的逆转改变(P<0.01).二株淋巴瘤细胞膜的流动性和ConA受体结合量均明显高于正常淋巴细胞。实验结果证实了膜流动性增高及ConA受体结合量增加是HL-60细胞的膜表型特征,并能随恶性细胞的诱导分化而逆转。     

HL—60和抗分化HL—60细胞的基本生物学和细胞遗传学特征比较

对本实验室克隆的人急性早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０及其抗维甲酸分化亚系ＨＬ－６０／ＲＡ进行细胞增殖、细胞周期、分裂中期细胞染色体分布和Ｇ－显带核型分析。发现两者在倍增时间和细胞形态上基本一致。     

人早幼粒白血病细胞系HL—60体外诱导分化研究

用体外短期液体培养技术，观察ＲＡ和不同来源的造血调控因子对ＨＬ－６０细胞增殖与分化的影响。以生长曲线和倍增时间作为观察各种试剂对ＨＬ－６０细胞增殖作用的指标；以ＮＢＴ还原反应和细胞形态变化作为分化成熟的指标。结果是ＲＡ、ＰＨＡ－ＬＣＭ单用时对ＨＬ－６０细胞均有抑制增殖和诱导分化作用，ＰＷＭ－ＳＣＭ、ＬＰ３－ＣＭ仅部分抑制增值、而ＦＧＦ、Ｈｕ－ＣＳＦ和ＥＰＯ等无效。各种造血生长因子分别与ＲＡ合用时，     

亚硒酸钠对HL—60细胞的分化诱导作用

目的观察亚硒酸钠对人急性髓系白血病ＨＬ－６０细胞系的诱导分化作用。方法ＨＬ－６０细胞在含８×１０－６ｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠的ＲＰＭＩ１６４０培养液中置３７℃、５％ＣＯ２、９５％空气、饱和湿度培养５天，于第５天查细胞形态学及硝基四氮唑蓝（ＮＢＴ）试验。结果硒在上述条件下可使ＨＬ－６０细胞形态学分类中较成熟细胞的比例增高（Ｐ＜０．０５），ＮＢＴ试验阳性率增高（Ｐ＜０．０１）。结论硒在一定条件下可能有潜在的诱导分化作用     

反义寡核苷酸对HL60细胞c—myc基因表达的抑制和诱导分化作用

研究ｃ－ｍｙｃ反义寡核苷酸对ＨＬ６０细胞中ｃ－ｍｙｃ基因的表达及ＨＬ６０细胞分化的影响。方法 采用针对原癌基因ｃ－ｍｙｃ的ｍＲＮＡ５’非翻译区的一个１８ｂｐ的反义寡核苷酸５‘ｄ（ＣＴＴ ＣＴＣ ＧＡＧ ＧＣＡ ＧＧＡ ＧＧＧ）３「与人早幼粒白血病细胞系ＨＬ６０细胞共培养５ｄ，检测ｃ－ｍｙｃ ｍＲＮＡ量的变化及其对ＨＬ６０细胞分化的影响。     

联苯双酯对HL—60白血病细胞的诱导分化作用

为探讨抗肝炎药物联苯双酯对人早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０的影响。应用细胞生物学的方法进行ＨＬ－６０细胞生长曲线，ＮＢＴ还原能力，细胞吞噬活力，酸性磷酸酶活力测定。ＤＤＢ能抑制ＨＬ－６０细胞增殖。ＨＬ－６细胞用ＤＤＢ处理６天后，近５０％的细胞可获得硝基蓝四氮唑还原能力，同样浓度的ＤＤＢ处理４天后，其ＨＬ－６０细胞的吞噬能力也明显增强；细胞形态学观察发现ＤＤＢ处理的ＨＬ－６０细胞分化趋向于成熟的中笥粒     

三七皂甙R1对HL—60细胞系体外诱导分化作用的初步研究

Our experiments have proved that human promyelocytic leukemia cells (HL-60) could be induced to differentiate in vitro by notoginsenoside R1 into mature neutrophils. The morphological results showed that 68% of HL-60 cells were differentiated in 80 microgram/ml inducer for 5 days, in which metamyelocytes were 32%, banded neutrophils 30% and segmented neutrophils 6% 3H-TdR and 3H-UR incorporate assay showed that notoginsenoside R1 effected synthesis of DNA and RNA while it induced differentiation of HL-60 cell. At 48 h, percent of incorporate inhibition was 26.32% with 3H-TdR and 18.57% with 3H-UR; at 72 h, 17.46% and 21.76%, respectively.     

双向电泳分析二烯丙基二硫诱导HL60细胞分化的蛋白表达差异

目的 以二烯丙基二硫(DADS)诱导人急性早幼粒细胞性白血病HL60细胞分化为模型，利用双向凝胶电泳(2-DE)技术分析比较DADS诱导HL60细胞分化的蛋白表达差异。方法 细胞形态学观察与NBT还原反应结合验证HL60细胞的分化；用双向电泳技术分析蛋白表达差异。结果 分化后细胞形态发生明显变化，细胞核变小；NBT还原能力明显增强。双向电泳技术分析筛选了32个差异点。结论 双向电泳技术可直接反映细胞蛋白表达的变化，DADS诱导HL60细胞分化后导致部分蛋白的表达增加和降低。     

汉防己甲素对HL—60细胞凋亡作用的实验研究

目的：探讨汉防己甲素（ＴＴＤ）作为中药耐药逆转剂是否会引起肿瘤细胞凋亡的作用机制。方法：用琼脂糖凝胶电泳法观察ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ的梯状条带。结果：ＴＴＤ组无梯状条带出现，而柔红霉素组则出现明显的梯状条带。结论：ＴＴＤ在耐药逆转的浓度内，不会引起ＨＬ－６０细胞凋亡的发生。     

人类肿瘤细胞诱导分化模型的建立

①目的　建立肿瘤细胞诱导分化的模型。②方法　应用 1× 10 -6、1× 10 -5mol/L全反式维甲酸(ATRA)和体积分数 0 .0 0 5、0 .0 10二甲基亚砜 (DMSO)分别与人急性早幼粒白血病细胞株 (HL 6 0 ) (2× 10 8～5× 10 8/L)共同培养 5d ,对照组加入与诱导剂等体积的无水乙醇 ,监测HL 6 0细胞形态学、四氮唑蓝 (NBT)还原反应、细胞周期动力学变化。③结果　HL 6 0细胞经ATRA作用后出现分化现象 ,第 3天NBT阳性细胞增加 ,第 4天达高峰 ,第 3～ 5天无明显差异。 1× 10 -6与 1× 10 -5mol/LATRA诱导分化作用无明显差别。以体积分数 0 .0 10的DMSO诱导HL 6 0细胞分化作用最好 ,而且随时间的延长其效应逐渐增强 ,第 5天达高峰。细胞周期分析显示 ,HL 6 0细胞经ATRA诱导分化后 ,G0 +G1期细胞增加 ,S期细胞减少 ,G2 期细胞稍有减少。④结论　采用ATRA和DMSO诱导HL 6 0细胞株可建立良好的诱导分化模型     

DMSO诱导下蛋白激酶C与HL—60细胞分化的关系

HL-60细胞在DMSO诱导下沿粒细胞方向分化,120h NBT~ 细胞达84％。细胞经诱导24h蛋白激酶C活性增加,72h为未诱导细胞的2.7倍。酶活性的增加,主要是由于细胞浆部分而不是细胞膜部分可溶性酶活性改变的结果。分化诱导剂DMSO本身不能直接激活蛋白激酶C,提示DMSO对酶活性的影响是间接的。     

墓头回对HL—60细胞杀伤作用的实验研究

目的 探讨应用细胞培养技术观察墓头回水提物对白血病现—60细胞系的杀伤及凋亡作用。方法 将不同浓度的墓头回水提物与HL-6O细胞进半固体培养，观察对其集落形成的影响，同时进行加药前后HL-60形态学及DNA电泳观察。结果 墓头回水提物在较大浓度时对肿瘤细胞的形成具有明显的抑制作用，未观察到对HL-60细胞有促凋亡的作用。结论 墓头回水提物对HL-60细胞有明显的抑制作用，但其作用机制有待进一步证实。     

γ—射线诱导HL—60细胞凋亡相关基因的分离和鉴定

为明确参与γ－射线诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的ｃａｓｐａｓｅ家族成员，根据已知ｃａｓｐａｓｅ家族成员保守肽序列设计简并引物，经ＲＴ－ＰＣＲ从凋亡ＨＬ－６０细胞ｍＲＮＡ扩增出一条带，通过基因克隆及序列测定进行鉴定。结果克隆出ｃａｓｐａｓｅ－３ｃＤＮＡ的一段序列。说明ｃａｓｐａｓｅ－３参与了γ－射线诱导的ＨＬ－６０细胞凋亡，可能是该凋亡途径的枢枢元件。     

GM_3对HL－60细胞的诱导分化作用及细胞膜流动性的影响

作者将纯化得到的神经节音脂ＧＭ３加到人早幼粒白血病细胞系（ＨＬ－６０）ＤＭＥ／Ｆ１２培养液中，终浓度为５０μＭ，细胞的增殖明显受到抑制，并按单核－巨噬细胞途径定向分化成熟，表现为细胞吞噬功能显著增强，非特异性酯酶活性升高等。细胞的形态也呈现与这种分化相一致的变化。在此基础上，作者探讨了以ＤＰＨ为探针测定ＨＬ－６０细胞膜流动性的实验条件，研究了促分化剂神经节耷脂ＧＭ３、二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）和佛波酯（ＴＰＡ）对ＨＬ－６０细胞膜流动性的影响，结果表明：ＧＭ３、ＤＭＳＯ和ＴＰＡ均可降低ＨＬ－６０细胞膜流动性。