聚合酶链反应诊断病毒性心肌炎

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测３０例小儿病毒性心肌炎血清肠道病毒（ＥＶ）ＲＮＡ，６例阳性。检出率２０％，并对阳性病例作临床分析。用ＥＬＩＳＡ法混合反应对照检测柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＢＶ）ＩｇＭ、ＩｇＧ，阳性率分别为７７％和３０％。认为ＰＣＲ对ＥＶ感染早期检出率高，对病原学诊断有意义。     

小儿肠道病毒心肌炎的病原学诊断进展

肠道病毒是心肌炎的主要病原，对其病原学检测经历了病毒分离、中和试验、免疫技术等阶段。近年来，酶联免疫吸附试验、分子杂交及聚合酶链反应技术的应用大大提高了检测的灵敏性和特异性，为病毒性心肌炎的病原学诊断提供了有效手段。     

小儿肠道病毒心肌炎的病原学诊断进展

肠道病是心肌炎的主要病原，对其病原学检测经历了病毒分离、中和试验、免疫技术等阶段。近年来，酶联免疫吸附试验、分子杂交及聚合酶链反应技术的应用大大提高了检测的灵敏性和特异性，为病毒性心肌炎的病原学诊断提供了有效手段。     

应用聚合酶链反应技术检测广西儿童β地中海贫血基因突变类型

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术及特异性寡核苷酸探针斑点杂交方法，检测广西地区９５例临床诊断为β地中海贫血患儿的１９０条染色体ＤＮＡ。结果表明，有１０种β地中海贫血珠蛋白基因突变类型和２８种β珠蛋白突变基因的组合形式。其中有２例患儿分别为密码子（Ｃｏｄｏｎｓ）１４－１５（＋Ｇ）／－２９（Ａ→Ｇ）双重杂合子和密码子４１－４２（－ＴＴＣＴ）／ＩＶＳ－ＩＬ－５（Ｇ→Ｃ）双重杂合子，均属首次报道的β地中海贫血双重杂合子新类型。这一研究结果对该地区β地中海贫血的产前诊断有实用价值。     

应用逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒感染

为建立一种能检测出临床上绝大多数肠道病毒（ＥＶ）感染的快速、敏感、特异的逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，通过对ＥＶ基因组的序列分析，在其５′端非编码区设计一对引物，用该引物建立的ＲＴ－ＰＣＲ方法对３１种ＥＶ标准毒株和３４例无菌性脑膜炎及１１例无菌性脑炎患儿的脑脊液（ＣＳＦ）分别进行扩增，其产物做琼脂糖凝胶电泳及斑点杂交检测。研究表明，３１种ＥＶ标准毒株斑点杂交的敏感度达１０－２～１０－３５０％组织培养感染量（ＴＣＩＤ５０）。３４例无菌性脑膜炎中２１例阳性（６１．８％），１１例无菌性脑炎中８例阳性（７２．７％）；阳性患儿恢复期ＣＳＦ，２例无菌性脑膜炎和１例无菌性脑炎仍为阳性。提示用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＥＶ感染是值得推广的。     

逆转录聚合酶链反应检测心肌炎血清柯萨奇病毒

柯萨奇Ｂ组病毒 (ＣＢＶ)为肠道病毒的一种 ,属ＲＮＡ病毒 ,迄今已确定了 2 0个血清型 ,其中引起病毒性心肌炎的主要是ＣＢＶ 1～ 5型[1 ] 。 1997年 5月至 1998年 7月对我院心内科 41例确诊为病毒性心肌炎血清标本进行逆转录聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)扩增ＣＢＶ ＲＮＡ ,地高辛标记相应探针作斑点杂交 ,并测定其血清ＣＢＶ特异性的ＩｇＭ抗体 ,以探讨ＲＴ ＰＣＲ在心肌炎儿血清ＣＢＶ的临床意义。资料和方法一、对象　确诊为病毒性心肌炎 41例 ,诊断标准参考1994年小儿病毒性心肌炎诊断标准[2 ] 。男 16例 ,女 2 5例 ,年龄 2 .4～ 13.8ａ…     

聚合酶链反应对儿童结核性脑膜炎诊断价值探讨

采用Ｍａｎｊｕｎａｔｈ等［１］设计的仅对人型、牛型结核杆菌及卡介苗的ＤＮＡ起反应的一对引物，对４０例结核性脑膜炎患儿脑脊液中结核杆菌的ＤＮＡ进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测，并与涂片、培养比较，阳性率分别为６０％、０、１０％。对照组８例非结核性脑膜炎患儿的脑脊液经ＰＣＲ检测结果均阴性。为确定该引物的特异性，分别扩增１７种分支杆菌的ＤＮＡ，除人型、牛型结核杆菌及卡介苗的ＤＮＡ出现２４０ｂＰ扩增带外，其它分支杆菌均未出现该扩增带。本文结果表明，应用该引物检测结核性脑膜炎患儿脑脊液中结核杆菌，具有较高的特异性及敏感性，为儿童结核性脑膜炎提供了快速、敏感、特异的病原学诊断方法     

肠道病毒特异性抗体和RNA检测对心肌炎的诊断价值

用间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和抗体捕捉ＥＬＩＳＡ（ＭａｃＥＬＩＳＡ）分别检测６４例急性心肌炎、２０例疑似心肌炎、２０例非心肌炎和５２例正常儿血柯萨奇病毒Ｂ（ＣＶＢ）特异ＩｇＧ和ＩｇＭ。其中４９例心肌炎及２３例先天性心脏病同时用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测其血清中肠道病毒ＲＮＡ。结果：心肌炎组ＩｇＧ阳性３８例（５９．４％），ＩｓＭ阳性３３例（５１．６％），ＰＣＲ检测阳性２６例（５３．１％），均明显高于非心肌炎组及正常小儿组。病程早期（２周内）ＰＣＲ检测ＩｇＭ阳性率较高，二者下降较快，约６周后降至接近正常水平；ＩｇＧ则出现较晚，约２～６周达高峰，持续１０～２２周后降至接近正常水平。本研究表明：ＣＶＢ是引起心肌炎的主要病原；三种方法检测均敏感、特异；ＭａｃＥＬＩＳＡ检测特异ＩｇＭ比间接ＥＬＩＳＡ检测ＩｇＧ更有早期诊断价值。     

聚合酶链反应技术在医学研究中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction PCR)又称体外基因扩增方法,是八十年代中期Mullis发明的一种新分子生物学技术,它能在一根试管内,将所研究的某个目的基因或某一DNA片段在数小时内扩增百万乃至千万倍,若配合适当的限制性内切酶,毋需放射性同位素辅助就可直接分析基因的结构。只要一根毛发、一个精子、少许绒     

应用聚合酶链反应检测胃液诊断幽门螺杆菌感染

应用聚合酶链反应检测胃液诊断幽门螺杆菌感染徐晓华刘凤霖陈悦高文英我们采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测胃液中的幽门螺杆菌（Ｈｐ），以胃粘膜组织学检测为对照，探讨胃液检测在诊断儿童Ｈｐ感染的应用价值。对象：１９９５年８月～１９９６年３月因有消化道症状接受胃...     

应用聚合酶链反应技术检测肺炎支原体的研究

采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测肺炎支原体（ＭＰ）ＤＮＡ，结果表明该方法具有很高特异性和敏感性不存在交叉反应，能检测到１００ｐｇ的ＭＰ－ＤＮＡ反应周期短，该方法应用于临床咽拭子标本的检测，同时用ＥＬＩＳＡ法检测ＭＰ抗体进行对比试验，１５９例呼吸系统感染患儿ＰＣＲ法检测结果２７例阳性，与ＥＬＩＳＡ法比较，具有良好的符合率，又较后者敏感和特异，ＰＣＲ法操作简便，自动化，适用于常规临床检测。     

聚合酶链反应在儿童金葡菌感染诊断中临床应用的探讨

根据已知的金葡菌核酸酶（ＮＵＣ）基因序列设计的一对引物,采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术,检测临床标本１２７例,并与常规的分离培养,涂片鉴定进行了相关性研究,结果表明,此方法对金葡菌具有高度特异性,而与其它葡萄球菌株,６株临床普通分离菌株无交叉反应,检测灵敏度可达０．８６ｐｇ（相当于２５ＣＦＵ）ＰＣＲ检测的阳性率明显高于血培养,涂片的阳性率,故ＰＣＲ技术可作为检测儿童金葡菌感染的一种快速诊断方法,值     

用聚合酶链反应诊断巨细胞病毒感染

本文采用聚合酶链反应技束对224例可疑HCMV感染的患儿测定尿中HCMV-DNA,用于确诊巨细胞病毒感染,阳性率为44.2%。并与血清免疫学方法所测结果相比较,该方法具有高度特异性、敏感性,取材方便,操作简便,反应周期短等优点,是目前检测HCMV的最敏感的实验方法,适于临床推广应用。     

聚合酶链反应技术在临床应用中需注意的问题

聚合酶链反应技术在临床应用中需注意的问题申昆玲照日格图聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）是美国ＰＥ－Ｃｅｔｕｓ公司人类遗传研究室Ｍｕｌｉｓ等开发的一项专利技术，是８０年代分子生物学领域的一项革命性突破，被誉为分子生...     

聚合酶链反应诊断肺炎支原体感染

本文采用聚合酶链反应对９２例可疑肺炎支原体感染的患儿测定咽分泌物中ＭＰ－ＤＮＡ，用于确诊肺炎支原体感染，阳性率为４３．３％该方法具有高度特异性，敏感性，与血清冷凝集试验结果比较，该法具有取材方便，操作简便、反应周短等优点，适用于临床推广使用。     

聚合酶链反应诊断结核性腹膜炎二例

聚合酶链反应诊断结核性腹膜炎二例李明珠乐景浩聚合酶链反应（ＰＣＲ）已较多应用于结核病的诊断，如在痰、胸水或脑脊液中可检出结核菌ＤＮＡ。现就２例诊断为肠梗阻的患儿，应用ＰＣＲ技术诊断为结核性腹膜炎者报告如下。例１女，３岁半，因腹痛呕吐急诊入院。６天来持...     

培养与聚合酶链反应联合进行住院患儿肺炎细菌病原学检测

目的 探讨细菌培养与病原特异性DNA联合检测住院患儿肺炎细菌病原的应用价值.方法对187例肺炎患儿的深部呼吸道吸引物进行肺炎链球菌、流感嗜血杆菌选择性培养和普通培养,并且对同一标本采用靶序列富集多重PCR(Tem-PCB)扩增结合Luminex液态芯片检测平台进行定量测定,检测肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠杆菌、嗜肺军团菌、绿脓杆菌、鲍曼不动杆菌等14种病原菌的特异性DNA.结果细菌培养的总检出率为40.1%(75/187,含3例检出2种病原菌),病原菌依次为流感嗜血杆菌17.1%、大肠杆菌8.6%、肺炎克雷伯杆菌6.4%、金黄色葡萄球菌4.8%、肺炎链球菌3.7%、绿脓杆菌1.6%、鲍曼不动杆菌1.1%和阴沟肠杆菌1.1%.以细菌培养或Tem-PCR任一阳性为标准,联合检测的总检出率为78.6%(147/187),病原菌依次为流感嗜血杆菌28.9%、肺炎链球菌19.3%、大肠杆菌8.6%、肺炎克雷伯杆菌6.4%、金黄色葡萄球菌5.9%、鲍曼不动杆菌5.9%、绿脓杆菌2.7%和阴沟肠杆菌1.1%.结论 Tem-PCR能提高流感嗜血杆菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和鲍曼不动杆菌的检出例数.细菌培养与病原特异性DNA联合检测应用能显著提高肺炎病原的检出率,可能更真实地反映肺炎的细菌病原学情况.