组织蛋白酶B在SAHA诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡过程中的调控作用

目的阐明组织蛋白酶B(cathepsin B,Cat B)在SAHA诱导的乳腺癌雌激素受体阳性细胞系MCF-7细胞凋亡中的调控作用。方法采用MTT法检测SAHA对乳腺癌MCF-7细胞生长状况的影响;应用ELISA方法测定SAHA作用于MCF-7细胞后相关蛋白表达变化的情况;通过Bio Station~(IM)活细胞工作站实时收集各种处理因素对乳腺癌MCF-7细胞增殖干预的形态学影响;并通过自动细胞分析仪Muse Cell Analyzer分析SAHA对MCF-7细胞活力和细胞凋亡的影响。结果 SAHA能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,其最佳作用浓度为10μmol·L~(- 1),最佳作用时间为24 h。ELISA结果表明,SAHA能诱导乳腺癌MCF-7细胞中Cat B的表达。实时活细胞工作站成像实验从形态学上证明,Cat B抑制剂Cystatin C和SAHA联合应用可有效阻止SAHA对MCF-7细胞生长的抑制作用。细胞学实验结果表明,SAHA能使MCF-7细胞活力下降,细胞凋亡发生率明显增高;然而经过Cystatin C处理后的MCF-7细胞活力增加,细胞凋亡发生率下降。结论 Cat B在SAHA诱导乳腺癌雌激素受体阳性细胞MCF-7凋亡过程中具有重要的调控作用。     

SAHA和TRAIL联合使用对乳腺癌雌激素受体阳性细胞MCF-7生长的影响

目的实时观测SAHA和TRAIL联合使用后对乳腺癌雌激素受体阳性细胞MCF-7生长的影响。方法实时无标记动态细胞分析系统(real time cell analysis,RTCA)动态监测各种处理因素对乳腺癌MCF-7细胞生长状况的影响并通过Biostation~(TM)活细胞工作站实时收集各种处理因素对乳腺癌MCF-7细胞增殖干预的形态学证据。结果xCELLigence RTCA实时无标记动态细胞分析系统显示,随着TRAIL的加入,SAHA对MCF-7细胞的抑制作用明显增强。SAHA和TRAIL的联合用药可能提高了SAHA对MCF-7细胞的敏感性。实时活细胞工作站成像实验进一步证明SAHA和TRAIL联合用药对MCF-7乳腺癌细胞的抑制作用强于SAHA或TRAIL单独用药。结论SAHA和TRAIL的联合使用对MCF-7细胞的生长具有协同抑制作用。     

姜黄素诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的 研究姜黄素对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖抑制和诱导凋亡作用.方法 MTT法检测姜黄素对MCF-7细胞的增殖抑制作用;流式细胞术(FCM)PI单染检测细胞周期;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 姜黄素对MCF-7细胞生长有明显抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;姜黄素能使MCF-7细胞阻滞在G1/S期,可以诱导细胞凋亡,Bax蛋白表达上调,而Bcl-2的表达减少.结论 姜黄素对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有显著的抑制作用并可诱导细胞凋亡.其分子作用机制可能与其上调Bax基因表达水平的同时下调Bcl-2基因表达水平,从而诱导细胞凋亡有关.     

线粒体通路在大戟大枣汤对乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制及凋亡诱导中的调控作用

目的探讨大戟大枣汤(DEFSJ)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用及其相关机制。方法 SPF级SD大鼠每天2次分别ig给予溶剂(生理盐水)、DEFSJ 2.5,5.0和10.0 g·kg^-1,共3 d。末次给药1 h后,腹主动脉采血,分离制备DEFSJ含药血清(DEFSJ-CS)。乳腺癌MCF-7细胞分别用对照血清、DEFSJ-CS 2.5,5.0和10.0 g·kg^-1及紫杉醇8 mg·L^-1处理48 h。用甲基纤维素克隆形成实验检测细胞克隆能力;JC-1染色后激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位;流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测Bcl-2,Bax和Bim mRNA表达水平;免疫荧光法检测Bcl-2,Bax和Bim蛋白表达水平。结果与含溶剂(生理盐水)血清对照组相比,DEFSJ-CS 2.5,5.0和10.0 g·kg^-1组及紫杉醇组人乳腺癌MCF-7细胞克隆形成率显著降低(P<0.05,P<0.01);MCF-7细胞线粒...     

组蛋白去乙酰化酶抑制剂调控p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平影响乳腺癌MCF-7细胞周期

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)调控p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平,调节乳腺癌MCF-7细胞周期的分子机制。方法采用实时定量PCR、Western blot和DNA-Ch IP方法测定SAHA对乳腺癌MCF-7细胞周期调控系统的影响;应用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)技术探究SAHA调控p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平的情况。结果 SAHA明显影响乳腺癌细胞周期相关调控因子的表达;在针对p21~(WAF1/CIP1)基因功能的筛查中发现,SAHA可明显诱导p21~(WAF1/CIP1)mRNA和蛋白的表达,并且可调节p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平。结论 SAHA通过影响p21~(WAF1/CIP1)启动子乙酰化程度调节乳腺癌MCF-7细胞周期的进程。     

雷公藤甲素对ERα蛋白介导的人乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制的影响

目的：研究雷公藤甲素对激素依赖性人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用及可能的机制。方法：MTT法检测雷公藤甲素对MCF-7细胞增殖的抑制作用,Hoechst染色法检测其对细胞凋亡的影响,Western blotting法观察雷公藤甲素对雌激素受体（ER）α蛋白表达的影响。结果：雷公藤甲素对MCF-7细胞增殖有显著的抑制作用,并且呈现良好的时效和量效关系,雷公藤甲素能有效诱导MCF-7细胞凋亡,并且对ERα具有明显的下调作用。结论：雷公藤甲素能抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖并且诱导其凋亡,其诱导MCF-7细胞凋亡的作用机制可能与其下调ERα的表达有关。     

槐米中槲皮素提纯、鉴定以及诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡作用

目的:研究从槐米中槲皮素(Quercetin,Que)提取、鉴定和对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制以及诱导凋亡作用.方法:采用碱溶解酸沉淀法提纯槐米中槲皮素,并进行红外光谱分析;采用体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,用不同浓度槲皮素处理;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长抑制率;采用细胞凋亡DNA Lad　der和FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞仪检测,槲皮素作用后MCF-7细胞凋亡情况.结果:不同浓度槲皮素对人乳腺癌MCF 7细胞有生长抑制作用,并呈浓度和时间依赖性(P＜0.05);10.0 mmol/L槲皮素作用MCF-7细胞2d,DNA电泳出现特征性的凋亡条带;10.0 mmol/L槲皮素处理MCF-7细胞1d、2d和3d,细胞凋亡率分别为(9.2±1.5)％、(30.0±11.8)％和(60.8±10.6)％.结论:用碱溶解酸沉淀法可从槐米中提纯槲皮素,提取的槲皮素对人乳腺癌MCF-7细胞有生长抑制和诱导凋亡作用.     

SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长

目的研究SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞生长的作用和机制。方法以人乳腺癌MCF-7细胞为研究目标,Muse细胞分析仪检测SAHA对细胞活力的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA对CTSV的mRNA及蛋白表达的影响,同时检测利用siRNA干扰技术敲除CTSV后的细胞CTSV表达水平;细胞免疫荧光法检测SAHA对LC3II分子的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA诱导自噬过程中相关ATG分子和LC3的mRNA和蛋白的变化;Bafilomycin A1抑制自噬,随后利用Western blot和Muse细胞分析仪分别检测p62蛋白水平和SAHA作用后的细胞活力。结果SAHA可以抑制MCF-7细胞的增殖,并促进CTSV的表达。CTSV-siRNA转染细胞后,CTSV的mRNA和蛋白水平均显著性降低。SAHA增加了LC3免疫荧光点的分布,与CTSV-siRNA共同作用可恢复由CTSV-siRNA敲减引起的细胞自噬减弱。SAHA在增强ATG4C和Beclin1表达的同时,LC3B也随之升高而mTOR则下降。抑制CTSV表达后也同时逆转了SAHA的效应。Bafilomycin A1阻断自噬后,被SAHA抑制的p62蛋白的表达和细胞活力显著增强。结论SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长。     

氧化苦参碱诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的实验研究

目的　研究氧化苦参碱对MCF 7细胞的诱导凋亡作用机制。方法　用光学显微镜、电子显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和DNA凝胶电泳等技术观察细胞凋亡。结果　实验显示氧化苦参碱作用于体外培养的MCF 7细胞可诱导发生凋亡 ,凋亡细胞表现为细胞固缩 ,核染色质聚集或碎裂、胞质空泡化等 ;DNA电泳可见DNA梯形条带 ;激光共聚焦显微镜示DNA含量下降 ,流式细胞仪检测sub G1峰在G1期前出现 ,S期细胞比例增高。结论　氧化苦参碱对体外培养MCF 7细胞生长有抑制作用 ,机制与通过阻止细胞周期的进程 ,启动细胞自身调控程序 ,诱导肿瘤细胞凋亡有关     

绞股蓝次级皂苷H诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用研究

目的 探讨绞股蓝次级皂苷H （Gypensapogenin H,GH）对人乳腺癌MCF-7细胞的诱导凋亡作用。方法 采用5、10、20、40、60、80 μmol/L的GH处理人乳腺癌MCF-7细胞48 h后,MTT法测定GH对细胞增殖的影响;20 μmol/L的GH作用细胞24 h后,相差显微镜下观察细胞的形态学变化,DAPI染色,荧光显微镜下观察凋亡小体的形成;GH作用细胞6、12、24 h后,流式细胞仪测定细胞凋亡率;免疫印迹法检测GH对Bcl-2、Bax、Cytochrome C、Caspase 3等蛋白表达的影响。结果 GH抑制细胞增殖作用呈明显的浓度相关性,半数抑制浓度（IC₅₀）为（8.67±1.22）μmol/L;GH组细胞形态与对照组比较发生显著变化,主要表现为细胞皱缩、染色质浓缩、细胞核变形;细胞经DAPI染色后在荧光显微镜下可观察到有凋亡小体形成;随GH作用时间延长,细胞凋亡率明显上升,与对照组比较,GH作用12、24 h细胞早期凋亡率显著升高（P<0.05、0.01）;蛋白免疫印迹显示,与对照组比较,GH作用6、24 h Bax,6、12、24 h Cleaved Caspase 3和Cytochrome C蛋白水平显著增加（P<0.05、0.01）;6、12、24 h Bcl-2和12、24 h Caspase 3蛋白表达量显著减少（P<0.05、0.01）。结论 GH通过线粒体通路诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡。     

香豆雌酚对乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响

<正>乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,它的发病与体内激素水平有关。植物雌激素是从植物中获取的结构与雌激素相似,并具有雌激素效能的天然化合物[1],它可以与雌激素受体(estrogen receptor,ER)结合,不同种类和不同浓度的植物雌激素与ER结合显示出不同的作用效能。香豆雌酚     

铜绿假单胞茵注射液对人乳腺癌细胞的体外杀伤及促凋亡作用研究

目的研究铜绿假单胞菌（pseudo—monas aeruginosa,PA-MSHA）注射液在体外实验中对人乳腺癌细胞（MCF-7）凋亡和增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法应用MTT比色法检测铜绿假单胞菌注射液对体外培养的MCF-7细胞增殖抑制作用,应用流式细胞术检测铜绿假单胞菌注射液诱导乳腺癌细胞凋亡,检测其对细胞周期的影响。用Hoechst33258染色法染色,荧光显微镜检测铜绿假单胞菌注射液诱导体外培养的MCF-7肿瘤细胞凋亡的形态学改变。结果铜绿假单胞菌注射液抑制MCK7细胞增殖,呈剂量和时间依赖性;与对照组相比,铜绿假单胞菌注射液组MCF7细胞的凋亡率明显增高（P〈0．01）、G0／G1期细胞比例明显增高、S期细胞所占百分比明显降低（P〈0．05）,染色荧光显微镜检测发现PAMSHA能诱导体外培养的肿瘤细胞呈现明显的凋亡图像。结论铜绿假单胞菌注射液可能通过对细胞周期中G0／G1期阻滞,诱导MCF-7细胞凋亡,从而抑制MCF-7细胞的增殖。     

三氧化二砷诱导乳腺癌细胞株MCF-7凋亡对端粒酶活性的影响

<正>乳腺癌是严重威胁妇女健康的恶性肿瘤之一,近年发病率逐年上升,且发病年龄也趋于年轻化。近年来研究发现As2O3不仅对APL细胞,而且对其他血液肿瘤细胞和许多实体瘤细胞均具有诱导凋亡作用。Wang等研究表明端粒酶与恶性肿瘤发生有着紧密的关联,p21特异性核苷     

阿霉素诱导小鼠MCF-7乳腺癌细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究

目的:探讨阿霉素对荷瘤鼠MCF7乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响。方法:建立小鼠MCF7乳腺癌细胞模型,用TUNEL法和免疫组化法检测阿霉素作用下MCF7乳腺癌细胞的凋亡和PCNA表达的变化。结果:1.25mg·kg-1阿霉素的抑瘤率为43%。MCF7乳腺癌细胞的凋亡指数为1.93%,较荷瘤对照组的1.11%明显升高(P<0.05)。增殖指数为35.75%,较荷瘤对照组的56.38%明显下降(P<0.01)。结论:阿霉素有诱导小鼠MCF7乳腺癌细胞凋亡和抑制其增殖的作用。     

白藜芦醇抑制耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADM增殖的研究

目的观察白藜芦醇对耐阿霉素人乳腺癌细胞系MCF-7/ADM增殖和细胞周期的影响及探讨其靶点蛋白质。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、光学显微镜观察观察白藜芦醇对MCF-7/ADM细胞增殖的影响,流式细胞仪检测观察白藜芦醇对细胞周期的影响,Western blot法、亲和甄别磁珠法鉴定白藜芦醇的靶点蛋白质。结果白藜芦醇作用MCF-7/ADM 72 h之后,细胞增殖大量下降并且呈剂量依赖关系,而对正常肝细胞毒性很小。白藜芦醇可导致MCF-7/ADM细胞阻滞于G0/G1期。Cdk2、myosin和actin蛋白可能是白藜芦醇的靶点蛋白质之一。结论白藜芦醇可能是1种新发现的Cdk2的抑制剂,同时通过作用于细胞的骨架结构蛋白质来干扰细胞的有丝分裂过程,使细胞周期延长从而导致MCF-7/ADM的增殖受到抑制。提示白藜芦醇是1种活性强、低毒的抗癌化学前体分子。     

翡翠贻贝多糖抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的实验研究

目的观察翡翠贻贝多糖（PVPS）对体外培养人乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用。方法体外培养的乳腺癌MCF-7细胞经不同浓度翡翠贻贝多糖处理48h后,经CCK-8试剂盒检测分析细胞存活率、用流式细胞术分析各组细胞凋亡率;光镜下观察40mg/L翡翠贻贝多糖处理细胞不同时间后的细胞形态变化。结果翡翠贻贝多糖40mg/L组和80mg/L组的乳腺癌细胞存活率明显低于对照组,而细胞凋亡率则明显高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）。光镜下可见肿瘤细胞脱落随作用时间延长而明显。结论翡翠贻贝多糖可抑制体外培养乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡。     

盐酸青藤碱对乳腺癌MCF-7细胞增殖影响的初探

目的 研究盐酸青藤碱对体外培养乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用.方法 体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定盐酸青藤碱(SIN)、5-氟尿苷(5-FUR)、SIN+5-FUR对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响.结果 SIN对人乳腺癌MCF-7细胞有增殖抑制作用,且呈浓度依赖性.SIN、5-FUR、SIN+5-FUR对MCF-7细胞的抑制强弱为:SIN＞SIN+5-FUR＞5-FUR.结论 SIN具有抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用,且抑制效果强于5-FUR及SIN+5-FUR.