川芎嗪联用环孢素A抗皮肤移植排斥反应的作用机制研究

目的：探讨川芎嗪（TMPZ）联用亚剂量环孢素A（CsA）对同种异体小鼠皮肤移植的抗排斥反应作用。方法：将BALB/c小鼠作为供体,C57BL/6小鼠作为受体,行背-背皮肤移植术。随机分为模型组、TMPZ组（50 mg·kg^-1）、CsA组（10 mg·kg^-1）、TMPZ+亚剂量CsA组（TMPZ 50 mg·kg^-1+CsA 5 mg·kg^-1）、假手术组,腹腔注射给药10 d。观察受体鼠移植皮片的存活情况,酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆中白介素-2（IL-2）、IL-4、IL-10、γ-干扰素（IFN-γ）含量,流式细胞术分析脾脏CD4⁺、CD25⁺T淋巴细胞亚群的比例。结果：各给药组小鼠移植皮片的存活天数均有不同程度的延长,与模型组相比差异均有显著性（P<0.01）。TMPZ+CsA组的移植皮片存活天数比TMPZ组或CsA组均有显著延长（P<0.05或P<0.01）;与模型组相比,TMPZ+CsA组以及TMPZ单用组均可明显减少血浆Th1类细胞因子（IL-2、IFN-γ）的表达（P<0.01）,明显增高Th2类细胞因子（IL-4、IL-10）的表达（P<0.01）。与模型组相比,各给药组均可明显增高脾脏CD4⁺ CD25⁺T淋巴细胞的比例（P<0.05或P<0.01）。结论：TMPZ具有抑制同种异体小鼠皮肤移植排斥反应的效果,与CsA联合应用可能具有协同作用,其作用机制可能与影响Th1/Th2细胞因子、刺激CD4⁺、CD25⁺T淋巴细胞的表达等有关。     

CD23在小鼠小肠移植排斥反应中作用的研究

目的：进一步探讨小肠移植（ＳＢＴ）排斥反应的机理。方法：用分子生物学方法对小鼠ＳＢ秫后脾组织中ＣＤ２３ｍＲＮＡ的转录水平动态观察,同期对移植小肠行组织病理学检查,对不同的免疫抑制方案进行评估。结果：ＣＤ２３ｍＲＮＡ转录水平在同系移植组术后第１天明显升高,术后第５天开始下降,而异系移植组始终保持较高水平。雷人以藤多苷（Ｔ１１）联合小剂量ＣｓＡ抑制移植术后免疫排斥反应的效果明显优于小剂量ＣｓＡ,与全量     

Meta分析他克莫司与环孢素A治疗肺移植患者术后的排斥反应

目的 分析他克莫司(FK)与环孢素A(CSA)在治疗肺移植患者术后排斥反应的疗效和安全性.方法 计算机检索Medline、Embase、Sci、Cochrane图书馆及CBM数据库,纳入FK对比CSA治疗肺移植患者术后排斥反应的随机对照试验(RCT);对纳入文献进行方法学质量评价和Meta分析.结果 共纳入4个RCT(331例受试者),分析显示:两组急性排斥反应的发生率差异有统计学意义,FK组新发糖尿病患者多于CSA组,从CSA组转用其方式治疗的患者多于FK组;1年内总存活率及梗阻性支气管炎的发生率差异无统计学意义;肾功能两组相似.结论 基于当前证据,肺移植后的抗排斥反应治疗,FK与CSA比较能减少急性排斥反应的发生,但会导致更多新发糖尿病患者.     

环孢素A滴眼液防治兔角膜移植术后的免疫排斥反应

目的:观察环孢素A(CsA)滴眼液对兔角膜移植术后免疫排斥反应的影响。方法:20只日本大耳白兔随机分成CsA联合妥布霉素组和妥布霉素对照组,每组10只。建立左眼角膜碱烧伤型动物模型,15 d后实施同种异体角膜移植术,术后治疗组给予1%CsA滴眼液联合0．3%妥布霉素滴眼液各1～2滴,对照组给予0．3%妥布霉素滴眼液1～2滴;每日滴3次,共30 d。观察移植术后角膜水肿情况及植片透明情况等,计算排斥反应指数(RI),并测定用药30 d后兔的肝、肾功能生化指标。结果:对照组角膜植片先后出现不同程度水肿混浊,角膜新生血管增加,RI为6．96±2．12;治疗组角膜植片基本透明,RI为5．28±1．69,显著低于对照组(P＜0．05)。两组肝肾功能均无明显变化。结论:1%CsA滴眼液能够有效地抑制兔角膜移植术后免疫排斥反应的发生。     

实验性小肠移植排斥反应标志物的研究

目的：进一步探讨小肠移植（ＳＢＴ）排斥反应机理。方法：用分子生物学方法对小鼠ＳＢＴ术后脾组织中白细胞介素－４（ＩＬ－４）的基因转录水平进行动态观察，对移植小肠行同期组织病理学检查，对不同的免疫抑制方案进行评估。结果：同系移植组术后１周内几乎无ＩＬ－４基因转录，异系移植组术后第３天ＩＬ－４基因转录水平开始升高，术后第５、７天达高峰，而组织病理于术后第７天才开始出现排斥反应。雷公藤多甙联合小剂量ＣｓＡ     

小鼠异种皮肤移植模型的建立及对免疫抑制药物的药效评价

目的建立小鼠异种皮肤移植模型,以期为免疫抑制药物提供研究模型。方法将C57BL/6小鼠耳部皮肤移植到BALB/c小鼠背部,同时设立同种移植对照(BALB/c小鼠耳部皮肤移植到BALB/c小鼠背部)。选用环孢素A作为抑制异种移植引起的免疫排斥反应的免疫抑制剂,利用该模型评价环孢素A免疫抑制效果。在移植和给药后,对移植排斥评分和移植皮肤的存活率进行统计。移植手术4 d和9 d后,ELISA法对血清中IL-4、IL-12和IFN-γ的水平进行测定。12 d后,计算胸腺和脾脏系数,对脾脏T细胞中CD4~+和CD8~+的比例进行分析,同时将移植皮肤进行病理观察。结果皮肤移植后,排斥评分逐渐增加,移植皮肤的存活率逐渐下降,有明显的水肿、炎症细胞浸润等炎症反应。环孢素A可明显降低移植排斥评分,提高移植皮肤的存活率,使小鼠胸腺和脾脏系数明显降低,高剂量可明显降低脾脏T细胞中CD4~+和CD8~+细胞的比例。同时,环孢素A处理可明显降低移植皮肤的炎症反应。结论小鼠经异种皮肤移植后会出现急性移植排斥反应,环孢素A可有效抑制移植排斥反应,并呈现出明显的剂量依赖性。     

合用黄连素对服用环孢素肾移植受者电解质的影响

目的:研究黄连素在与环孢素合用时是否影响肾移植受者血清电解质.方法:回顾性调查分析36名接受同种异体肾移植术后长期服用CsA的患者,同时检测全血CsA浓度、血清电解质和血糖.结果:合用组与单用组相比,血清电解质和血糖除血清Ca以外均无显著差异.两组血清钙经t检验差异具有统计学意义,但两组数据的均值都在正常范围内.结论:合用黄连素不会对肾移植受者的血清电解质产生比单用CsA更大的影响.     

胰腺移植和排斥反应

1966年12月7日Kelly和Lillehei等在美国明尼苏达学校首先为一位Ⅰ型糖尿病继发肾功能衰竭的患者进行了胰肾联合移植，术后患者生存2个月，死于排斥反应和败血症。此后经过30多年的免疫基础研究，外科手术技术及术后重症监护水平的提高，新的保存液的应用，免疫抑制剂的发展，胰腺移植手术的成功率不断上升。截至2001年底，全球共进行了17000余例临床胰腺移植，其中11000余例在美国实施。自1995年以来，每年国际胰腺移植登记处登记的例数都超过     

雷帕霉素联合环孢素预防肾移植急性排斥反应的随机对照前瞻性研究

目的:评价雷帕霉素(RPM)口服液联合环孢素(CsA)预防肾移植术后早期急性排斥反应的疗效。方法:首次肾移植患者20例,随机分成RPM试验组和硫唑嘌呤(Aza)对照组,每组各10例,分别接受以CsA和类固醇激素为基础的免疫抑制治疗方案6mo,比较2组人/肾存活率、急性排斥反应发生、不良事件发生等指标的差异。结果:17例完成治疗者人/肾均存活;仅Aza组1例发生2次急性排斥反应;2组各发生2例严重不良事件。结论:RPM联合CsA可有效预防移植肾急性排斥反应,并维持肾功能于良好水平,但是也可能增强CsA的肝毒性。     

沙利度胺对小鼠皮肤移植的影响

目的观察沙利度胺对小鼠皮肤移植物存活及生长情况的影响,探讨沙利度胺在抗同种异体排斥反应中的作用。方法建立Balb/c小鼠到C57BL/6小鼠的皮肤移植模型,将模型小鼠随机分为3组,每组12只,对照组腹腔注射吐温-80溶液+0.9%氯化钠注射液(1∶999),200 mL.kg-1.d-1;环孢素A组腹腔注射环孢素A,10 mg.kg-1.d-1;沙利度胺组腹腔注射沙利度胺,200 mg.kg-1.d-1。分别于实验第7,9,11天取小鼠皮肤移植物进行病理检测,观察各组移植物平均存活时间。结果对照组小鼠移植物平均存活时间为8.2 d,环孢素A组平均为13.5 d,沙利度胺组平均为13.2 d,环孢素A组与沙利度胺组均明显高于对照组(P<0.05),环孢素A组与沙利度胺组之间差异无显著性(均P>0.05)。第7,9,11天各组移植皮片病理检测结果显示,随着时间的延长,各组均可见移植皮下淋巴细胞浸润,腺体及毛细血管破坏逐渐加重;其中对照组皮下组织破坏严重,沙利度胺组皮下组织破坏明显减轻,环孢素A组皮下组织破坏最轻。结论沙利度胺能延长Balb/c小鼠到C57BL/6小鼠皮肤移植物的存活时间,具有一定的临床应用前景。     

黄连痱子散中盐酸小檗碱含量的测定方法研究

目的建立测定黄连痱子散中盐酸小檗碱含量的紫外分光光度法。方法以甲醇为提取溶剂，采用超声法直接提取制剂中的盐酸小檗碱．在350nm波长处测定盐酸小檗碱的含量。结果盐酸小檗碱质量浓度在5～25μg／mL范围内与吸收度呈线性关系，回归方程为A=0.0622C＋0．0182，r=0.9998，平均回收率为100.2％，方法的日间精密度为1.08％，日内精密度为0．73％。结论该方法简便准确、重现性好，可用于黄连痱子散的质量控制。     

凹凸棒对盐酸小檗碱吸附作用考察

目的：考察凹凸棒对中药水煎提取液中盐酸小檗碱的吸附影响和对无效成分的吸附清除作用，并与自然静置沉淀法进行对比研究。方法：以水煎提取液中总固体物量和盐酸小檗碱含量作为评价指标，分别用不同量的普通凹凸棒和酸化凹凸棒处理黄连、一清颗粒水煎提取液，评价其吸附沉淀效果，平行与自然静置沉淀法进行比较。结果：凹凸棒对无效成分具有明显的吸附清除作用，对盐酸小檗碱也有一定的吸附影响，酸化凹凸棒沉淀去除无效成分的效果优于普通凹凸棒。结论：酸化凹凸棒作为中药水煎提取液中盐酸小檗碱精制提取的吸附沉淀剂，尚需进一步进行表面结构修饰研究。     

高效液相色谱法测定复方儿茶搽剂中盐酸小檗碱的含量

目的建立测定复方儿茶搽剂中盐酸小檗碱的测定方法.方法采用高效液相色普法,用Lichrospher C18色谱柱(200mm×4.6mm,5 μ m,流动相:以乙腈-0.1%磷酸溶液(每100ml加十二烷基磺酸钠0.1g),检测波长265nm,流速为1.0ml.结果盐酸小檗碱的线性范围为0.089～0.801 μ m.平均加样回收率为99.1%,RSD为0.34%(n=6).结论本方法操作简便,结果准确,分离效果好,可用于复方儿茶搽剂的质量控制.     

薄层扫描法测定肤阴洁中盐酸小檗碱的含量

目的：建立薄层扫描法测定肤阴洁中盐酸小檗碱含量的方法。方法：4批样品经提取后点样，以正丁醇－冰醋酸－水（7：1：2）为展开剂，检测波长为λs=430nm,λR=600nm。结果：平均回收率为100．8％，RSD＝2．3％，稳定性试验：RSD＝1．3％。结论：本方法简便，准确，可用于该制剂质量的控制。     

荧光薄层扫描法测定卫胃颗粒中盐酸小檗碱的含量

目的:建立卫胃颗粒中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法:样品经提取、薄层展开后,采用荧光扫描法对卫胃颗粒中盐酸小檗碱进行含量测定,展开剂为苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-水(6:3:1.5:1.5:0.3),激发波长λ=366nm。结果:盐酸小檗碱在0.03104～0.1552μg范围内呈良好的线性关系,回收率为100.8％,RSD=1.9％。结论:测定方法简单、灵敏,结果准确、重现性好,可用于本品的质量控制。     

HPLC法测定羚黄宝儿丸中盐酸小檗碱含量

目的建立HPLC法测定羚黄宝儿丸中盐酸小檗碱的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamond C18（250nm×4．6nm,5μm）,流动相为乙腈-0．03mol／L磷酸二氢钾溶液（35：65）,流速为1．0ml／min,检测波长为345nm,柱温为室温。结果盐酸小檗碱线性范围为32．896-164．480μg／ml,平均回收率为99．81％,RSD为0．95％。结论本方法定量准确,重复性好,可以作为羚黄宝儿丸的质量控制方法。     

HPLC测定抗感灵片中盐酸小檗碱的含量

目的 建立抗感灵片中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法 采用HPLC法，VP—ODS C18色谱柱；乙腈-0．05mol／L磷酸二氢钠（磷酸调PH至3．0）-0．025mol／L十二烷基硫酸钠（70：15：15）为流动相；检测波长为346nm；流速：1．0ml／min．结果 盐酸小檗碱在0．0484～0．4356μg范围内具有良好的线性关系，平均加样回收率为99.17％．RSD为1．20％。结论 本方法简便、快速、准确。重现性好。可用於抗感灵片中盐酸小檗碱的含量测定．     

加味左金丸中盐酸小檗碱的提取与含量测定

目的建立加味左金丸中盐酸小檗碱的提取和测定方法。方法以50%甲醇-盐酸(100∶1)为溶剂,超声提取30min作为盐酸小檗碱的提取方法。色谱柱CAPCELL PAK C18;流动相:乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钠溶液(含0.2%的三乙胺,用磷酸调pH值为3.0)(25∶75);检测波长263nm。结果盐酸小檗碱在进样量0.06672~1.3344mg范围内线性良好r=1,平均回收率为99.27%,RSD=0.71%,(n=6)。结论该方法操作简便,准确可靠,可用于提取和测定加味左金丸中盐酸小檗碱的含量。