血卟啉衍生物光动力作用对DNA分子的损伤

从ＤＮＡ结构损伤探讨了血卟啉衍生物光动力作用杀伤细胞的机理。ＤＮＡ经ＨＰＤ＋光处理后，立即进行了电泳未见断链发生，但经在碱性溶液中加热处理后出现降解。这是由于碱基基因发生变化所致。引物延伸反应表明ＤＮＡ分子发生聚合。序列测定也出现错误序列，４种碱基Ａ、Ｇ、Ｃ、Ｔ均出现改变。以小鼠艾氏腹水癌ＤＮＡ为材料，经ＨＰＤ＋光处理后再分别用Ｂｇ１Ⅱ与ＢａｍＨⅠ降解，得到的片段比对照组变长。上述结果均说明ＨＰＤ     

华蟾素对人胃癌MKN-28细胞增殖、凋亡的影响研究

目的：探究华蟾素对人胃癌细胞MKN-28细胞株的增殖、凋亡、细胞周期的影响,揭示华蟾素的抗癌机制。方法：选用人胃癌细胞MKN-28细胞株作为研究对象,采用不同浓度华蟾素处理细胞后,通过Cell Counting Kit-8实验(CCK8法)计算半抑制浓度(IC50),再以IC50值作为最佳药物使用浓度处理MKN-28细胞,同时以DMSO作为对照,比较两组细胞在增殖、凋亡、细胞周期等方面的差异。采用Western Blot检测两组细胞Bcl-2、BAX、Caspase-3等凋亡相关蛋白的表达情况。结果：CCK8实验结果显示,随华蟾素处理浓度的增加,胃癌细胞增殖能力逐渐下降。华蟾素对MKN-28细胞作用的IC50值为0.16μg/mL。在0.16μg/mL华蟾素作用下,对照组胃癌细胞凋亡比例为(7.87±0.50)%,而实验组凋亡比例为(16.62±1.21)%,差异具有统计学意义(P=0.002)。实验组G0/G1期细胞所占比例显著增加,而G2/M期细胞所占比例显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。经过华蟾素处理后,MKN-28细胞中,Bcl-2蛋白表达量显著上升(P=0....     

Let-7a在人宫颈癌HeLa细胞不同周期时相的表达

目的 探讨微小RNA let-7a在HeLa细胞不同周期时相的差异表达.方法 应用经典的双胸苷阻断法将HeLa细胞同步化于不同的周期时相,应用流式细胞术检测同步化的效率.应用实时荧光定量RT-PCR方法 检测不同周期时相的HeLa细胞中let-7a的表达水平.结果 HeLa细胞G1、S和G2/M期细胞同步化效率分别约为84.81%、83.65%和77.69%;let-7a在不同周期时相均有表达且存在差异,G1和S期表达水平较低,G2/M期表达水平较高.结论 细胞周期对let-7a的表达有较大的影响,这为理解细胞周期调控的具体机制提供了新的线索.     

大鼠视网膜光损伤与视细胞凋亡关系的研究

目的：研究细胞凋亡与视网膜光损伤的相互关系，以探讨视网膜光损伤的发生发展机制。方法：所有SD大鼠经循环光环境适应7天，实验前暗适应36小时，分别于光照3、6、9、12、15、18小时，灌流固定，摘除眼球。光镜标本在常规脱水、透明、石蜡包埋切片后，行HE、TUNEL法染色，光镜观察；电镜标本在树脂包埋、超薄切片、醋酸－柠檬酸铅双重染色后，透射电镜观察；应用CLAS－1000图像分析系统定量检测外核层面积和视细胞凋亡指数，所得数据作统计学分析。结果：视网膜只见视细胞出现光损伤和细胞凋亡，随着光照时间的延长，视网膜光损伤逐渐加重，视细胞凋亡逐渐增多。在外核层，透射电镜观察及核染色质浓集，而无炎性反应。外核层面积和视细胞凋亡指数作相关性分析有显著意义。结论：视细胞凋亡是视网膜光损伤的重要机制。光损伤启动了视细胞凋亡的发生，外核层细胞核的丢失是视细胞凋亡的结果：视网膜光损伤与视细胞凋亡有着密不可分的联系。     

血卟啉光敏剂加不同波段的光辐照对人癌细胞系杀伤作用的实验研究

本文应用国产的血卟啉光敏剂(PSD-007)加不同波段的光辐照,比较了不同波段的光敏反应对癌细胞的杀伤怍用。实验结果说明,光敏药物进入细胞后,经红光、绿光和紫光等不同波段的光辐照后,均能产生光敏反应而将癌细胞杀死。不同波段的光辐照对癌细胞杀伤效应的定量研究的结果为紫光的杀伤作用>绿光>红光。作者指出:由于紫光对组织的穿透性太差,所以在实际治疗中,红光仍为治疗表浅肿瘤的最佳波段。     

血卟啉衍生物光动力对两株人鼻咽癌细胞杀伤实验的对比研究

目的 探讨血卟啉衍生物(HpD)光动力学效应(PDT)对体外培养人鼻咽癌细胞株CNE2和C666-1的生物作用.方法 向体外培养的CNE2和C666-1分别加入不同浓度的HpD(0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0μg/m)孵育4 h,予波长为630nm的半导体激光进行照射,照射的功率密度为20mW/cm2,照射能量密度分别为2、5、10、20 J/cm2,继续孵育24h,用四唑盐比色法测定细胞存活率.结果 HpD-PDT能有效地杀伤体外培养的人鼻咽癌CNE2和C666-1细胞,其杀伤作用大小与HpD的浓度和激光剂量成正相关(P＜0.01).激光能量为20 J/cm2,HpD的浓度为2.5μg/ml或2.0μg/ml时,其杀伤CNE2、C666-1细胞的作用最明显;HpD-PDT对CNE2和C666-1的半数杀伤度分别为0.7μg/ml、1.2μg/ml,两者存在显著性差异(P＜0.05).相同HpD浓度、激光剂量条件下,C666-1细胞存活率显著高于CNE2(P＜0.05).结论 HpD-PDT对CNE2和C666-1细胞均有杀伤作用,但C666-1细胞对HpD-PDT的敏感性低于CNE2.     

血卟啉衍生物结合高温对人肿瘤细胞的光动力效应

本文研究扬州血卟啉衍生物(Y-HpD)光敏结合高温对HeLa和Eca109细胞的作用。结果表明:①Y—HpD光敏前或后即刻加高温(42.5±0.5℃)对肿瘤细胞的损伤均高于两者分别单独作用;②细胞经光敏后1h再行高温处理,对细胞的损伤更为严重;③Y-HpD光敏即刻结合高温(43±0.5℃)处理HeLa和Eca109细胞,观察5天的存活曲线,第5天细胞存活数仅为对照组的10～20％。     

安博立酸对人胃癌细胞系SGC-7901增殖抑制作用研究

目的:观察安博立酸(Ambrolic acid,AmbA)对人胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响,初步探讨AmbA对胃癌的体外抗肿瘤活性.方法:将AmbA作用于SGC-7901细胞株,MTT法测定AmbA对SGC-7901细胞增殖的抑制率;光学显微镜观察AmbA作用引起的细胞形态变化;流式细胞仪检测AmbA作用后细胞凋亡情况及进行细胞周期分析.结果:MTT实验结果表明,AmbA对SGC-7901细胞增殖有抑制作用,其抑制效应具有时间及浓度依赖性;流式细胞仪检测分析表明.AmbA可使细胞阻滞于S期,其作用呈剂量依赖性.结论:AmbA对SGC-7901人胃癌细胞的生长具有明显的抑制作用,其作用的主要途径可能是使细胞阻滞于S期并诱导细胞凋亡.     

光动力作用对人肝癌细胞HepG2的影响及其机制探讨

目的 研究血卟啉衍生物光动力作用诱导人肝癌细胞HepG2凋亡及其机制.方法 应用流式细胞仪分析光动力作用后细胞凋亡及免疫组化染色检测凋亡相关蛋白bcl-2蛋白、bax蛋白表达水平.结果 血卟啉衍生物光动力组人肝癌细胞HepG2凋亡率达(25.28±1.52)%,与对照组相比,差异有极显著意义(P＜0.01);并且光动力作用后凋亡相关蛋白bcl-2表达显著高于对照组(P＜0.05).结论 血卟啉衍生物光动力作用具有诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的生物学效应,而凋亡调控蛋白bcl-2表达水平的降低可能是血卟啉衍生物光动力作用诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的一个重要机制.     

磁性纳米紫杉醇微球对人胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响

目的观察不同浓度磁性纳米紫杉醇微球在不同时间段对人胃癌细胞株SGC-7901生长和凋亡的影响。方法实验分为实验组和对照组。实验组:磁性纳米紫杉醇微球0.01、0.05、0.1、0.5、1 μ mol/L。对照组:紫杉醇0.01、0.05、0.1、0.5、1μmol/L;5-氟尿嘧啶1、5、10、50、100μmol/L及空白阴性对照。应用MTT法测定上述不同浓度的磁性纳米紫杉醇、紫杉醇、5-氟尿嘧啶对SGC-7901细胞分别在6、12、24、48、72小时的生长抑制率。流式细胞仪分析细胞周期的改变,细胞免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达。结果MTT法显示不同浓度的磁性纳米紫杉醇微球可抑制SGC-7901细胞增殖(1 μ mol/L作用72小时时的抑制率达72.6%),与浓度和时间均呈正相关;流式细胞仪细胞周期分析提示磁性纳米紫杉醇微球可将SGC-7901细胞阻滞于G2M期(0.5μmol/L作用48小时阻滞率达43.8%&#177;0.8%);免疫组化法显示凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达下调。结论磁性纳米紫杉醇微球可诱导人胃癌细胞SGC-7901发生凋亡且具有控释效应,可延长药物对胃癌细胞的有效作用时间;载药...     

铁蛋白对卵巢癌细胞生长和细胞周期动力学的影响

检测Ｈ铁蛋白及Ｌ铁蛋白对人上皮性卵巢癌细胞株ＡＯ及３ＡＯ的生长情况及细胞周期分布的影响。采用３Ｈ标记胸腺嘧啶校苷摄入细胞ＤＮＡ的放射测定法及流式细胞仪进行测定。结果：Ｈ及Ｌ铁蛋白均能抑制 ＡＯ及 ３ＡＯ细胞的生长，此作用在加入铁蛋白后的 ７２ ｈ较 ３６ ｈ显著，且随铁蛋白浓度的增加而增强０．０１＜Ｐ＜０．０５）。在７２时Ｈ铁蛋白的抑制作用较强，有显著差异（Ｐ＜０．０１）。同时发现，加入铁蛋白可使Ｇ１期细胞百分比增加，而Ｓ期细胞明显减少，也有显著差异（Ｐ＜０．０５）。结论：初步认为铁蛋白，特别是Ｈ铁蛋白可抑制卵巢癌细胞生长，并阻止其从 Ｇ０／ Ｇ１；期进入 Ｓ期。     

槲皮素对培养人视网膜色素上皮细胞细胞周期的影响

研究槲皮素对培养人视网膜色素上皮细胞增殖周期的影响。方法：用流式细胞仪测定细胞周期,观察不同浓度（２００、１００、５０、１μｍｏｌ／Ｌ）的ＱＵＥ作用于ＲＰＥ细胞４８小时;以及ＱＵＥ２００μｍｏｌ／Ｌ在不同作用时间,分别单独或与ＥＧＦ共同对ＲＰＥ细胞周期的影响;     

重组人生长激素对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞周期作用的实验研究

目的 :探讨重组人生长激素 (r- h GH )对人乳腺癌细胞株 MCF- 7(MCF- 7)增殖和分化的影响。方法 :以不同浓度 r- h GH分别加入处于对数生长期的 MCF- 7进行体外培养 ,4 8h后用流式细胞仪检测细胞周期的百分比构成变化 ,并与对照组进行比较。结果 :不同浓度的 r- h GH作用于 MCF- 7后 ,其细胞周期的 G0 ～ G1 期、S期、G2 ～ M期的细胞百分比变化 ,差异均无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :r- h GH对 MCF- 7的细胞周期无明显影响 ,既无促进 MCF- 7细胞增殖作用 ,也无抑制 MCF- 7细胞的作用。     

克癌7851对小鼠HepA肝癌细胞DNA及细胞周期影响的流式细胞光度分析

取灌喂克癌7851(160 mg/kg)20d的荷HepA肝癌小鼠的腹水癌细胞进行细胞生物学特性的研究,把经过一系列处理和荧光染色的癌细胞在FACS 420型流式细胞光度计上进行分析。结果表明:①克癌7851可使癌细胞的DNA含量明显下降(从1511.7±1.2降至133.5±4.4 AU或从157.0±1.7降至146.0±3.0 AU);②DAN指数(DI值)和增殖指数(PI值)亦明显下降(p<0.05和p<0.01);③可使癌细胞的G1期细胞数明显增加,从43.2±4.5％增加到78.3±5.5％,而S期和G 2M期的细胞数明显减少,而且DNA组方图的多倍体峰变得低平。提示克癌7851可以抑制癌细胞的DNA合成。     

小归芍超临界提取物抑制胃癌细胞系BGC-823增殖的实验研究

目的探讨小归芍超临界提取物抑制胃癌细胞系人类胃癌细胞823(in human gastric carcinoma 823cell,BGC-823)增殖的作用。方法将终浓度为50、100、200 mg/L小归芍超临界提取物作用于胃癌细胞BGC-823细胞48 h,观察细胞变化并用四甲基偶氮唑蓝法分析细胞生长抑制、膜联蛋白V碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染法检测细胞凋亡率的改变和PI法观察细胞周期的变化。结果①在一定浓度范围内,与对照组相比小归芍提取物能够明显抑制胃癌细胞BGC-823的生长,抑制率随剂量增加而增加,并能够增加细胞的凋亡率(P<0.05或P<0.01);②细胞增殖周期G1期比例明显升高(P<0.05或P<0.001)。结论小归芍超临界提取物可明显抑制胃癌细胞BGC-823的增殖,诱导凋亡以及对细胞周期G1期具有明显的阻滞作用。     

蛋白尿与胃癌生物学行为之间的关系

作者对197例胃癌尿样标本作了分析,并与136例胃良性溃疡病例的尿样标本作了比较研究。发现胃癌患者的蛋白尿阳性率及含量明显较良性胃溃疡为高(P<0.01);蛋白尿与胃癌患者的预后、淋巴结转移、CEA免疫组化标记阳性程度之间无显著相关性(P>0.05)。我们推测胃癌患者蛋白尿产生的原因可能是由多种因素引起。     

直肠癌与性激素受体关系的探讨

对20例直肠癌病例的性激素受体进行了检测,证实性激素受体(包括 ER,PR,AR)除存在于其靶器官组织细胞内以外,同样存在于非靶器官的癌组织中,并对它们之间的关系加以探讨,提出对直肠癌性激素受体阳性病例仍可辅以内分泌治疗的观点.     

儿童自身免疫甲状腺病细胞因子失衡与T细胞亚群失衡的关系

目的：探讨儿童免疫甲状腺病（ＡＩＴＤ）细胞因子失衡与Ｔ细胞亚群失衡的关系。方法：采用Ｅ花地和ＥＬＩＳＡ法同步分别检测初诊的ＡＩＴＤ患儿和正常儿童外周血ＴＸ业群和单个核细胞在丝裂原诱导下产生的ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值。结果：与正常组相比,ＣＬＴ和ＧＤ病儿ＩＦＮ－γ水平和ＩＦＮ－γ／ＩＬ－４比值明显升高,ＩＬ－４水平明显降低,ＣＤ３、ＣＤ８明显降低,ＣＤ４／ＣＤ８比值明显升高。且     

五味子乙素B对人胃癌细胞MGC－803增殖和迁移能力的影响

目的：观察五味子乙素B（ Schisandrin B , Sch B）对人胃癌细胞MGC－803增殖、迁移能力及基质金属蛋白酶－9（matrix metalloproteinase 9, MMP－9）mRNA表达的影响,并探讨其可能的分子机制。方法：采用CCK－8法检测50、100、200、400和800μmol／L Sch B对胃癌细胞增殖的抑制作用;光镜观察细胞生长状态变化,并计数细胞分裂指数;细胞划痕实验检测200μmol／L Sch B对细胞迁移能力的影响;定量PCR检测细胞MMP－9 mRNA的表达。结果：CCK－8结果显示,Sch B对胃癌细胞的增殖具有显著抑制作用,且呈剂量和时间依赖性;胃癌细胞经不同浓度Sch B处理24、48、72 h,光镜下可见大量细胞皱缩,胞膜界限模糊,核质浓缩及凋亡小体形成,细胞分裂指数随Sch B剂量增加和作用时间延长而降低;200μmol／L Sch B作用24、48、72 h,细胞迁移率分别为（39．57±9．14）％,（56．57±10．04）％和（68．21±11．43）％,明显低于对照组（P＜0．05）;PCR结果显示,胃癌细胞中MMP－9 mRNA表达显著低于对照组。结论：Sch B对胃癌细胞的增殖抑制呈剂量和浓度依赖性,并降低胃癌细胞迁移能力,可能与下调MMP－9基因的表达有关。     

组合单克隆抗体提高人胃癌细胞系反应性的研究

目的：将胃癌单克隆抗体（ ＭｃＡｂ） 组合提高ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性，为肿瘤定位诊断及导向治疗提供有效的ＭｃＡｂ 组合。方法：采用ＥＬＩＳＡ、ＦＣＭ 观察了单一胃癌ＭｃＡｂ 及组合ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性。结果：经ＥＬＩＳＡ、ＦＣＭ 分析单一的ＭｃＡｂ３Ｇ９ 、ＢＢ４．３ 与胃癌细胞结合的膜荧光阳性率分别为７４－２ ％ 和５４－９ ％ 。平均膜荧光强度分别为５３－６ 和６５－８。两者组合后，在相同抗体浓度下，膜荧光阳性率为９７－４ ％ （ Ｐ＜０－０１）；平均膜荧光强度为１２５－５（ Ｐ＜ ０－０１） 。结论：合理采用组合的ＭｃＡｂ 可提高ＭｃＡｂ 与人胃癌细胞系的反应性，降低抗原表达的异质性，从而提高ＭｃＡｂ 的载体效应。